【高中生物】微生物的培养技术与应用课件 2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

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1、选择性必修3 生物技术与工程2023-05-26 2023-05-26第1章 发酵工程从社会中来向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌。在经过发酵就可以制成菌。在经过发酵就可以制成酸奶酸奶，由于制作工艺并不复，由于制作工艺并不复杂，一些人会在家里自制酸奶。自制酸奶虽然方便，但杂，一些人会在家里自制酸奶。自制酸奶虽然方便，但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事例屡见不鲜，主要原是食用自制酸奶导致肠胃不适的事例屡见不鲜，主要原因是在制作过程中有杂菌混入。那么，因是在制作过程中有杂菌混入。那么，怎样才能保证无怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？处

2、不在的杂菌不混入发酵物中呢？防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。在实验室在实验室培养微生物，一方面要为人们需要的微生物提供合适的培养微生物，一方面要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件；另一方面，要确保其他微生物无法混营养和环境条件；另一方面，要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。入，并将需要的微生物分离出来。培养基的配制 无菌技术 微生物的分离与纯培养微生物的基本培养技术新课讲解 微生物的基本培养技术1.1.培养基的概念 培养基的概念：培

3、养基是 培养基是 为 为 人工培养 人工培养 微生物而制备的，适合微生物 微生物而制备的，适合微生物 生长 生长、繁殖 繁殖 或积累 或积累代谢产物 代谢产物 的营养基质。的营养基质。2.2.培养基作用：培养基作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。一、培养基的配制一、培养基的配制3.3.培养基的 培养基的类型：类型：液体培养基：液体培养基：扩大培养、工业生产。扩大培养、工业生产。固体培养基：固体培养基：纯化（分离）、鉴定、纯化（分离）、鉴定、活菌计数、保藏菌种等。活菌计数、保藏菌种等。(1)(1)物理状态分类 物理状态分类：固体培养基 固体培养基液体培养基 液体培养基有 有无

4、无 凝固剂琼脂 凝固剂琼脂配制培养基常用的 配制培养基常用的 凝固剂 凝固剂：琼脂 琼脂。微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的 微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的 菌落 菌落。新课讲解合成培养基：合成培养基：合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种 这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微 培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏 生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Cza

5、pek)(Czapek)培 培养基等。养基等。天然培养基：天然培养基：由天然物质制成，由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于 如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确 培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。半合成培养基：半合成培养基：在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养

6、霉菌用的马铃薯葡萄 如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。(2)(2)按组成成分分类：按组成成分分类：加富培养基：加富培养基：是在培养基中加入血、血清、动植物组织提取液，用 是在培养基中加入血、血清、动植物组织提取液，用以培养要求比较苛刻的某些微生物。以培养要求比较苛刻的某些微生物。(3)(3)按功能 按功能(用途 用途)分类：分类：选择性培养基：选择性培养基：是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一 是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。

7、利用这种培养基可以将所需要的微 些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。生物从混杂的微生物中分离出来。鉴别培养基：鉴别培养基：是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后 是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。新课讲解4.4.培养基的成分：培养基的成分：(一一)基本成分：基本成分：水、碳源、氮源、无机盐水、碳源、氮源、无机盐(1)(1)碳源碳源概念：概念：凡能为微生物代谢提供碳元素的物质 凡能为微生物代谢提供碳元素的物质来源：来源：无机碳源：无机碳源：C

8、O CO2 2、CO CO3 32-2-、HCO HCO3 3-，为自养生物提供碳源。，为自养生物提供碳源。有机碳源：牛肉膏、蛋白胨等，为异养生物提供碳源。有机碳源：牛肉膏、蛋白胨等，为异养生物提供碳源。作用：作用：参与合成有机物 参与合成有机物；异养微生物的能源物质 异养微生物的能源物质(2)(2)氮源氮源概念：概念：凡能为微生物代谢提供氮元素的物质 凡能为微生物代谢提供氮元素的物质来源：来源：无机氮源：无机氮源：NH NH4 4、NO NO3 3-(为硝化细菌提供氮源和能源 为硝化细菌提供氮源和能源)、N N2 2(为固氮菌 为固氮菌提供氮源 提供氮源)有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿

9、素、氨基酸等 有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素、氨基酸等 作用：作用：主要用于合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物。主要用于合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物。注意：注意：对异养微生物来说，含 对异养微生物来说，含C C、H H、O O、N N 的化合物既是碳源，又是氮源。的化合物既是碳源，又是氮源。(3)(3)水：水：是生命活动所必需的，生物体内含量最多的化合物。是生命活动所必需的，生物体内含量最多的化合物。(4)(4)无机盐：无机盐：为微生物提供除碳、氮以外的元素。为微生物提供除碳、氮以外的元素。各种培养基的配方不同，但一般都含有 各种培养基的配方不同，但一般都含有 水、水、碳源 碳源、氮

10、源 氮源 和 和 无机盐 无机盐 等最基本的物质。等最基本的物质。新课讲解组分 组分 含量 含量 提供的主要营养 提供的主要营养牛肉膏 牛肉膏 5g 5g碳源、磷酸盐和维生素等 碳源、磷酸盐和维生素等蛋白胨 蛋白胨 10g 10g氮源和维生素等 氮源和维生素等NaCl NaCl 5g 5g无机盐 无机盐H H2 2O O 定容至 定容至1000ml 1000ml水 水(二二)培养基还需满足微生物生长对培养基还需满足微生物生长对pHpH、特殊营养物质特殊营养物质以及以及OO22的需求。的需求。在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素。在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素。在培养霉菌时，需

11、要将培养基调至酸性。在培养霉菌时，需要将培养基调至酸性。在培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性。在培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性。在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。表：表：1000mL 1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成提醒：提醒：对异养微生物来说，含对异养微生物来说，含CC、NN的化合物既是碳源，也是氮源。即有的化合物既是碳源，也是氮源。即有些化合物作为营养要素成分时并非单一方面的作用。些化合物作为营养要素成分时并非单一方面的作用。并非所有微生物都需添加特殊营养物质。并非所有微生物都需添加特殊营养

12、物质。新课讲解【拓展拓展】培养基的配制原则：培养基的配制原则：(1)(1)目的要明确：目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。微生物的种类不同，配制的培养基应有所不同。微生物的种类不同，配制的培养基应有所不同。培养的目的不同，培养基也应培养的目的不同，培养基也应有所不同。有所不同。(2)(2)营养要协调：营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。注意各种营养物质的浓度和比例。浓度要适当。浓度要适当。比例要适中，特别是碳源与氮源的比例。比例要适中，特别是碳源与氮源的比例。(3)(3)pHpH要适宜：要适宜：培

13、养不同微生物所需培养不同微生物所需pHpH不同，细菌为不同，细菌为66.5577.55，放线菌为，放线菌为77.5588.5,5,真菌为真菌为55.0066.00。新课讲解二、无菌技术二、无菌技术获得纯净的微生物培养物的关键是获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染防止杂菌污染。无菌技术应围绕如何避免杂。无菌技术应围绕如何避免杂菌的污染展开，主要包括菌的污染展开，主要包括消毒消毒和和灭菌灭菌。无菌技术是在微生物研究、医疗操作、食品生产中采取的防止其他微生物污染无菌技术是在微生物研究、医疗操作、食品生产中采取的防止其他微生物污染的技术。的技术。(一一)方法：方法：1.1.消毒：消毒：(1)(1

14、)概念：概念：使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。微生物。(2)(2)常用的消毒方法：常用的消毒方法：煮沸消毒、巴氏消毒、酒精消毒、氯气消毒等。煮沸消毒、巴氏消毒、酒精消毒、氯气消毒等。2.2.灭菌：灭菌：(1)(1)概念：概念：是指使用较为强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢是指使用较为强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。和孢子。(2)(2)常用的灭菌方法：常用的灭菌方法：湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。【知识拓展知识拓展】(3)(3)生

15、物消毒法生物消毒法的概念及应用：生物消毒法是指利用生物或其的概念及应用：生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。代谢物除去环境中的部分微生物的方法。例如，有的微生物能够寄生于多种细菌体内，使细菌裂解，因此可以用它们例如，有的微生物能够寄生于多种细菌体内，使细菌裂解，因此可以用它们来净化污水、污泥。来净化污水、污泥。知识整合(二二)无菌技术的主要范围无菌技术的主要范围(内容内容)：对操作的空间、操作者的衣着和手进行对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁清洁和和消毒消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌灭菌；注意

16、：注意：为避免周围环境中微生物的污染，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。实验操作应在酒精灯火焰附近进行。实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。消毒和灭菌的比较消毒和灭菌的比较项目 项目 条件 条件 结果 结果 常用方法 常用方法 应用范围 应用范围消毒 消毒较为温和的 较为温和的物理、化学 物理、化学或生物等方 或生物等方法 法仅杀死物体 仅杀死物体表面或内部 表面或内部一部分微生 一部分微生物 物煮沸消毒法 煮沸消毒法 日常用品 日常用品巴氏消毒法 巴氏消毒法 不耐高温的液体 不耐高温的

17、液体化学药剂消毒法 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源 用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源灭菌 灭菌强烈的理化 强烈的理化方法 方法杀死物体内 杀死物体内外所有的微 外所有的微生物 生物灼烧灭菌法 灼烧灭菌法 常用于接种工具 常用于接种工具(接种环、涂布器、接种针 接种环、涂布器、接种针)干热灭菌法 干热灭菌法 玻璃器皿、金属用具 玻璃器皿、金属用具湿热灭菌法 湿热灭菌法 培养基及容器 培养基及容器思考讨论1.1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？2.2.请你判断以下材料或用具是

18、否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。(1)(1)培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿(2)(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管(3)(3)实验操作者的双手实验操作者的双手无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。(1)(1)、(2)(2)需要灭菌；需要灭菌；(3)(3)需要消毒。需要消毒。新课讲解三、微生物的纯培养三、微生物的纯培养(一一)基本概念：基本概念：1.1.培养物：培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种

19、在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。类微生物的群体称为培养物。2.2.纯培养物：纯培养物：由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物纯培养物。3.3.纯培养：纯培养：获得纯培养物的过程就是获得纯培养物的过程就是纯培养。纯培养。(二二)纯培养的基本步骤：纯培养的基本步骤：主要包括：配制培养、灭菌、倒平板、接种和分离、培养等。主要包括：配制培养、灭菌、倒平板、接种和分离、培养等。配制培配制培养基养基灭菌灭菌倒平板倒平板接种和分离接种和分离培养等培养等探究实践(三三)探究实践：酵母菌的纯培养：探究实践：酵母菌的纯培

20、养：1.1.实验原理：实验原理：(1)(1)菌落：菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。菌落。(2)(2)纯培养纯培养(微生物的分离微生物的分离)：采用采用平板划线法平板划线法和和稀释涂布平板稀释涂布平板法法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。微生物群体微生物群体分散分散或或稀

21、释稀释单个细胞单个细胞 单个菌落单个菌落繁殖繁殖探究实践2.2.材料用具材料用具酵母菌培养液、马酵母菌培养液、马铃薯、葡萄糖、琼脂、铃薯、葡萄糖、琼脂、蒸馏水、天平、小刀、蒸馏水、天平、小刀、纱布、烧杯、锥形瓶、纱布、烧杯、锥形瓶、棉塞、牛皮纸、皮筋、棉塞、牛皮纸、皮筋、培养皿、接种环、酒培养皿、接种环、酒精灯、超净工作台、精灯、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、干高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱、恒温培养热灭菌箱、恒温培养箱。箱。探究实践3.3.方法方法步骤步骤(1)(1)制备培养基：制备培养基：1)1)配制培养基：配制培养基：计算计算称量称量溶化溶化调调pHpH：称取去皮马铃薯称取去皮马铃薯200g2

22、00g，切成小块，加水，切成小块，加水1000ml1000ml，加热煮沸至马铃，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g20g葡萄糖、葡萄糖、15-20g15-20g琼脂，用蒸馏水定容至琼脂，用蒸馏水定容至1000ml1000ml。2)2)灭菌：灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅中，在压力为中，在压力为100kPa100kPa、温度、温度为为121121的条件下，灭菌的条件下，灭菌15-30min.15-30

23、min.将将5-85-8套培养皿包成一包，用几套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱干热灭菌箱内，在内，在160-170160-170灭菌灭菌2h2h。包器材包器材探究实践倒平板的具体操作：倒平板的具体操作：3)3)倒平板：倒平板：待培养基冷却至待培养基冷却至5050左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入一个培养皿中，灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入一个培养皿中，倒后立即置于水平位置上，轻轻晃动，使培养基铺满平倒后立即置于水平位置上，轻轻晃动，使培养基铺满平皿底部，待凝，使之皿底部，待凝，使之形成平面；培养

24、基冷却凝固后，将形成平面；培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。培养皿倒过来放置。倒平板注意事项：倒平板注意事项：温度：温度：5050左右左右操作：操作：在酒精灯火焰附近在酒精灯火焰附近冷凝后平板冷凝后平板倒置倒置问题讨论1.1.培养基灭菌后，需要冷却到培养基灭菌后，需要冷却到5050左右时，才能用来倒平板。你用左右时，才能用来倒平板。你用什么办法什么办法来估计来估计培养基的温度？培养基的温度？可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。2.2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在在倒平板的过程中，如果不小心将

25、培养基溅在皿盖与皿底之间皿盖与皿底之间的部位，这个的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？平板还能用来培养微生物吗？为什么？最好不要用这个平板培养微生物。最好不要用这个平板培养微生物。防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。将所倒平板放入将所倒平板放入3737的的恒温箱恒温箱中培养中培养12h12h24h24h，观察，观察是否有菌落是否有菌落存在以存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。确定是否被污染或灭菌是否彻底。4.4.怎么确定所倒平板怎么确定所倒平板未被杂菌污染未被杂菌污染？3.3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板

26、冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。落入培养基，造成污染。问题讨论：问题讨论：探究实践(2)(2)接种和分离酵母菌：接种和分离酵母菌：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。分散

27、到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。4)4)原理：原理：单个细胞单个细胞微生物群体微生物群体 单个菌落单个菌落连续划线连续划线分散分散或或稀释稀释生长繁殖1)1)接种：接种：指在指在无菌无菌条件下条件下将微生物将微生物或含菌材料转移到合适其生长繁殖的或含菌材料转移到合适其生长繁殖的培培养基中养基中的过程。的过程。2)2)不同接种工具的使用不同接种工具的使用：接种针接种针用于用于穿刺接种穿刺接种 接种环接种环用于用于斜面接种或平板划线接种斜面接种或平板划线接种 玻璃涂布器玻璃涂布器用于用于涂布平板接种涂布平板接种 3)3)接种的方法：接种的方法：涂布平板法、穿刺接种法、斜面接种法

28、、涂布平板法、穿刺接种法、斜面接种法、平板划线法。平板划线法。连续划线法连续划线法分区划线法分区划线法平板划线的两种平板划线的两种划线方法：划线方法：探究实践接种接种(分离分离)的方法：的方法：涂布平板法、穿刺接种法、斜面接种法、平板划线法涂布平板法、穿刺接种法、斜面接种法、平板划线法 平板划线 平板划线法 法 平板划线法的含义：用带有微生物 平板划线法的含义：用带有微生物 的接种环 的接种环在平板培养基表面通过 在平板培养基表面通过 分区划线 分区划线 而达到纯化分 而达到纯化分离微生物的方法。离微生物的方法。注意事项：接种和划线操作时需要在 注意事项：接种和划线操作时需要在 酒精灯 酒精灯

29、火焰 火焰 附近进行。附近进行。培养结果：可以得到由单个 培养结果：可以得到由单个 微生物 微生物 增殖而形 增殖而形成的 成的 菌落 菌落。常 常见 见的 的几 几种 种划 划法 法方 方法 法探究实践平板划线的实验操作平板划线的实验操作1.1.将接种环放在火焰上灼 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环 烧，直到接种环烧红。烧红。2.2.在 在火焰 火焰旁冷却接种环，并拔 旁冷却接种环，并拔出装有酵母菌的棉塞 出装有酵母菌的棉塞 3.3.将试管口通过火焰 将试管口通过火焰 4.4.将已 将已冷却 冷却的接种环伸入 的接种环伸入菌液中，蘸取一环菌液 菌液中，蘸取一环菌液 5.5.将试管通过火焰，

30、并 将试管通过火焰，并塞上棉塞 塞上棉塞 6.6.左手将皿盖打开一条缝隙，右手将 左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划 沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五 三至五条平行线，盖上皿盖。条平行线，盖上皿盖。注意不要 注意不要划破培养基。划破培养基。7 7、灼烧接种环，待其冷却后，、灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的 从第一区域划线的末端 末端开始 开始往第二区域内划线。重复以 往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域 上操作，在三、四、五区域内划线。内划线。注意不要将最后一 注意不要将最后一区的划线与第一区相连。区的划线与第一区相连。8.8.将平板

31、将平板倒置 倒置放入培 放入培养箱中培养。养箱中培养。划 划3 3个平板 个平板（重复实验）（重复实验）1 1个不划线 个不划线（空白对照）（空白对照）1 1）一旦划破，）一旦划破，会造成划线不均匀，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；难以达到分离单菌落的目的；2 2）存留在划破处的）存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划 菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。破处生长，会形成一个条状的菌落。探究实践第第11区划线区划线接种环灭菌接种环灭菌第第22区划线区划线接种环灭菌接种环灭菌第第33区划线区划线接种环灭菌接种环灭菌接种环灭菌接种环灭

32、菌分区划线法分区划线法12345接种环接种环只蘸一次菌液只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置，但要在培养基不同位置连连续划线多次。续划线多次。划线划线首尾不能相接。首尾不能相接。每次划线前每次划线前接种环进行灭菌。接种环进行灭菌。划线后，培养皿划线后，培养皿倒置培养。倒置培养。平板划线法平板划线法注意事项：注意事项：灼烧时期灼烧时期目的目的取菌种前取菌种前每次划线前每次划线前接种结束后接种结束后思考讨论问题：问题：为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？作结束时，仍然需要灼烧接

33、种环吗？为什么？杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者感染操作者杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减使每次划线时菌种数目逐渐减少少，直至得到单个细胞，直至得到单个细胞杀死接种环上原有微生物杀死接种环上原有微生物探究实践(3)(3)培养酵母菌培养酵母菌 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入倒置，放入282

34、8左右左右的的恒温培养箱恒温培养箱中培养中培养24-28h24-28h。4.4.结果分析与评价结果分析与评价(1)(1)未接种的培养基表面是否有菌落生长，如果有，说明了什么？未接种的培养基表面是否有菌落生长，如果有，说明了什么？(2)(2)在接种酵母菌的培养基上，你是否观察到了菌落？这些菌落的颜色、形状、大小在接种酵母菌的培养基上，你是否观察到了菌落？这些菌落的颜色、形状、大小是否一致，如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析可能是哪些原因引起的吗？是否一致，如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析可能是哪些原因引起的吗？(3)(3)你是如何记录实验结果的？请与其他同学交流、互评。你是如何记录实验

35、结果的？请与其他同学交流、互评。提示：提示：未接种的培养基表面若有菌落生长，则说明培养基被污染或灭菌不未接种的培养基表面若有菌落生长，则说明培养基被污染或灭菌不彻底；若无，则说明培养基未被污染且已彻底灭菌，培养基可以使用彻底；若无，则说明培养基未被污染且已彻底灭菌，培养基可以使用。提示：提示：在接种酵母菌的培养基上可观察到单菌落。如果培养基上生长的菌落的在接种酵母菌的培养基上可观察到单菌落。如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合酵母菌菌落的特点，颜色、形状、大小基本一致，并符合酵母菌菌落的特点，则说明纯化酵母菌的操则说明纯化酵母菌的操作成功；如果培养基上出现了其他形态的菌落，

36、则说明在纯化过程中，无菌操作作成功；如果培养基上出现了其他形态的菌落，则说明在纯化过程中，无菌操作还未达到要求，可能所用菌液不纯，或者在实验操作过程中被杂菌污染还未达到要求，可能所用菌液不纯，或者在实验操作过程中被杂菌污染提示：提示：可以在培养可以在培养12h12h和和24h24h后，观察菌落的大小、形状、颜色。培养后，观察菌落的大小、形状、颜色。培养24h24h后，菌后，菌落的大小、形状是否发生变化，菌落颜色是否加深，光泽度是否增加，等等。落的大小、形状是否发生变化，菌落颜色是否加深，光泽度是否增加，等等。判断对错（1）同一种物质不可能既作碳源又作氮源。（）（2）凡是碳源都能提供能量。（）（

37、3）除水以外的无机物仅提供无机盐。（）（4）无机氮源有时也能提供能量。（）1.判断对错：思考讨论编号编号成分成分含量含量粉状硫粉状硫 10g10g（NHNH44）22SOSO440.4g0.4gKK22HPOHPO444.0g4.0gMgSOMgSO449.25g9.25gFeSOFeSO440.5g0.5gCaClCaCl220.5g0.5gHH22OO100ml100ml(1)(1)上表培养基可培养的微生物类型上表培养基可培养的微生物类型_。(2)(2)若不慎将过量若不慎将过量NaClNaCl加入培养基中。如不想浪费此培养基，可再加入加入培养基中。如不想浪费此培养基，可再加入_。自养型微生

38、物自养型微生物 含碳有机物含碳有机物 2.2.下表是某微生物培养基成分，请据此回答：下表是某微生物培养基成分，请据此回答：(3)(3)若除去成分若除去成分，加入糖类，加入糖类(葡萄糖葡萄糖)，该培养基可用于培养，该培养基可用于培养 _。固氮微生物固氮微生物 课堂训练3.3.下表是某同学培养微生物时配制的培养基，关于此培养基的说法中，错误下表是某同学培养微生物时配制的培养基，关于此培养基的说法中，错误的是的是（）A.A.此培养基可用来培养自养型微生物此培养基可用来培养自养型微生物B.B.此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源C.C.表中各成分的含

39、量按照所培养的微生物的营养需要来确定表中各成分的含量按照所培养的微生物的营养需要来确定D.D.若除去若除去，此培养基可用于培养大肠杆菌，此培养基可用于培养大肠杆菌编号 编号 成分 成分(NH(NH4 4)2 2SO SO4 4KH KH2 2PO PO4 4FeSO FeSO4 4CaCl CaCl2 2H H2 2O O含量 含量 0.4 g 0.4 g 4.0 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 0.5 g 0.5 g 100 mL 100 mLD4.4.下列有关细菌纯培养的说法，不正确的是下列有关细菌纯培养的说法，不正确的是（）A.A.实验操作者接种前要用实验操作者接种前要用70%7

40、0%的酒精棉球擦手消毒的酒精棉球擦手消毒B.B.每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌C.C.培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞的克隆培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞的克隆D.D.菌液梯度稀释后用涂布法接种，得到单菌落便于计数菌液梯度稀释后用涂布法接种，得到单菌落便于计数C课堂训练5.5.将同一土壤样本经灭菌和未灭菌处理后将同一土壤样本经灭菌和未灭菌处理后，分别放在两个培养皿中分别放在两个培养皿中，在土壤表面分别在土壤表面分别放放33张废纸张废纸(主要成分是纤维素主要成分是纤维素)。然后将两个培养皿放在有较高湿度的培养室中。然后将两个培养皿放在有较高

41、湿度的培养室中，4646周后观察两个培养皿的变化情况周后观察两个培养皿的变化情况(如下图如下图)。下列相关叙述错误的是。下列相关叙述错误的是（）A.A.土壤微生物能够将废纸中的有机物分解成无机物土壤微生物能够将废纸中的有机物分解成无机物B.B.将培养皿和土壤灭菌的方法可以是高压蒸汽灭菌将培养皿和土壤灭菌的方法可以是高压蒸汽灭菌C.C.若土壤湿度不够，可加入些清水以控制无关变量若土壤湿度不够，可加入些清水以控制无关变量D.D.若某酵母菌不能利用废纸，可能是由于缺乏相应分解酶系若某酵母菌不能利用废纸，可能是由于缺乏相应分解酶系C课堂训练6.6.下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，据图分析据图分析不正确的是不正确的是（）A.A.获得图获得图AA效果的接种方法是稀释涂布平板法效果的接种方法是稀释涂布平板法B.B.获得图获得图BB效果的接种方法是平板划线法效果的接种方法是平板划线法C.C.若在纯化土壤细菌时菌液浓度过高，培养基上的菌落可能会连成一片若在纯化土壤细菌时菌液浓度过高，培养基上的菌落可能会连成一片D.D.在接种前要对培养基进行消毒处理在接种前要对培养基进行消毒处理D