总花色苷含量测定.doc

《总花色苷含量测定.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《总花色苷含量测定.doc（3页珍藏版）》请在得力文库 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、总花色苷含量测定总花色苷含量测定分光光度法1、综合国内外资料，主要有以下几种计算吸光值A 的方法1：（1) 当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时，需消除叶绿素吸收含量的影响;此时，计算公式为： A = (Amax A620） - 0。1（A650 - A620)（2） 含有其它干扰物质时花色苷总量的测定:a) 直接法:在新鲜的植物提取物中,因为很少含有在花色苷的最大吸收区发生吸收的干扰物质，花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的吸光度来测定。计算公式为： A = Amax 直接法吸收光谱测定：用分光光度计于250 - 800nm 下全波长扫描，得到花色苷在0.1 % 盐酸80 乙醇中的可

2、见光区最大吸收波长，在此最大波长下测定各样品的吸光值A 。b) pH 示差法：在加工或储藏过程中，会产生褐色降解物,这些降解物和花色苷具有相同的能量吸收范围。这类花色苷总量的测定，通常用pH示差法8 。计算公式为： A = （Amax - A700) pH1.0 （Amax A700) pH4。5 pH 示差法吸收光谱测定:先确定合适的稀释因子,使样品在max下的吸光度在分光光度计的线性范围内；然后制备两个样品稀释液,其中一个用氯化钾缓冲液(0。025M，pH1。0) 稀释，另一个用醋酸钠缓冲液(0.4M，pH4.5） 稀释,将稀释液平衡15min 后，用蒸馏水做空白,分别测定两种样品稀释液在

3、max和700nm处的吸光值A。2、花色苷总含量的测定2：通过波长扫描，确定花色苷在可见区的最大吸收波长为max。利用花色苷的结构特性，当pH为1.0时在max处有最大吸收峰，而当pH为4.5时,花色苷转变为无色查尔酮形式,在max处无吸收峰，用示差法计算溶液中总花色苷含量。计算公式为: C (mg/ g) = (A0 A1） V n M / （m ） 式中： A0 、A1 分别为pH1。0、pH4。5时花色苷在max处的吸光值V -提取液总体积（mL ） n 稀释倍数M cy3-glu （矢车菊 3葡萄糖苷)的相对分子质量（449。4）-cy-3-glu的消光系数( 29600)m 样品质量

4、( g) 3、花色苷含量TAcy的计算公式为（以天竺葵色素-3葡萄糖苷计）3 :TAcy （mg/ hg） =(A 433 10 V）(22 400 m）100 A = （OD500nm OD700nm) pH1.0 - （OD500nm -OD700nm) pH4.5 式中: V 提取液的总体积（mL)m 取样量(g）22 400 -天竺葵色素-3葡萄糖苷的摩尔消光系数433 天竺葵色素3-葡萄糖苷的摩尔分子量。4、花色苷含量测定4样品处理： 将各品种的干燥样品粉碎（40目）后,准确称取0。5 g用10 mL 65的酸性乙醇提取24 h，提取3次，然后将3次提取液混合抽滤,真空旋转挥发回收乙

5、醇，用蒸馏水定容到100 mL，摇匀，静止备用。测定方法:含量测定用pH示差法，按照下面公式计算,测定3 次取其平均值。C(mg/L ) = （OD M DF 1000）/ 1 式中： OD 为吸光度， DF为稀释倍数,M 为分子量，=26900。 花色苷5:将提取液稀释合适倍数，用1cm 比色杯测其吸光值，参照Fuleki6的计算方法转换成总花色苷浓度，公式如下：C/（mg/mL）=（AMW DF 1000）/（1)式中:A为吸光值；MW 为分子量（以矢车菊素-3-葡萄糖苷为标准7，449。4)；DF为稀释倍数;为消光系数，26900 L.cm1。mg-1。参考文献1 霍琳琳，苏平，吕英华，

6、 分光光度法测定桑葚总花色苷含量的研究J. 酿酒, 2005 年7月，第32卷第4期.2 李颖畅,孟宪军，张琦，于娜，蓝莓果主要物质含量及处理方式对其花色苷的影响J。 食品工业科技， Vol. 29， N o. 05， 2008。3 盛小娜,王璋， 不同预处理方式对速冻草莓花色苷含量的影响J. 冷饮与速冻食品工业， 2006年12月第12 卷第4期.4 王振江，肖更生，廖森泰等,不同品种桑椹的抗氧化作用与其花色苷含量的相关性研究J。 蚕业科学，2006，32(3)。5 吕英华，苏平,那宇，李辉, 桑椹色素体外抗氧化能力研究J. 浙江大学学报（农业与生命科学版） 33(1）：102107,200

7、6 Fuleki T, Francis F J Quantitative methods for anthocyanins 1 Extraction and determine-ation of total anthocyanin in cranberriesDFood Sei，1968。33:72-787 Suh H J，Noh D 0，Kang C S，eta1Thermal kinetics of color degradation of mulberry fruit extract DNahrung Food200347（2)：132-1358 Ronald E1Wrolstad ， Steven J1Schwartz ， M Giusti1Handbook of Food Analytical Chemistry Water , Proteins , Enzymes ， lipids , and Carbohy2 dratesM1Wiley US ，20051