血清甘油三酯酶试剂法测定法作业指导书.doc

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1、血血清清甘甘油油三三酯酯 酶酶试试剂剂法法 测测定定法法 作业指导书作业指导书 1 1. . 实实验验原原理理 脂蛋白酯酶（ LPL） 、甘油激酶（ GK） 、甘油 -3-磷 酸氧化酶（ GPO） 、过氧化物酶 (POD)、Trinder 反应 偶联比色终点法。 反应式如下： LPL 甘油三酯 + H2O 甘油 + 脂肪酸 GK 甘油 + ATP 甘油-3-磷酸 + ADP GPO 甘油-3-磷酸 + O2 二羟丙酮磷酸 + H2O2 POD 2H2O2 + 4-氨基安替比林 + 4-氯酚 醌亚胺 + HCl + 4H2O 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备： 12 小时禁食。 2.2

2、 类型：血清，肝素或EDTA 抗凝血浆。 3 3. . 标标本本存存放放： 血清稳定性： 2025保存可稳定 2 天；48保存可稳定 1 周；-20保存至少可稳定 1 年。 4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂 申能甘油三脂试剂盒（货号：112 5717170 1 试剂 870ml） 6.1.1 试剂组成 Goods 缓冲液 pH 7.2 50mmol/L 4-氯酚 4mmol/L ATP 2mmol/L 镁离子 15mmol/L 4-氨基安替比林 0.5mmol/L 甘

3、油激酶（ GK） 400U/L 过氧化物酶（ POD） 2000U/L 脂蛋白酯酶（ LPL） 2000U/L 甘油-3-磷酸氧化酶（ GPO） 500U/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于28，若 无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊 度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不 能继续使用。 6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95 g/L）为防 腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的 预防措施使用试剂 6.2 校准品：使用 DiaSys 公司提供的 TruCal

4、U 校准 品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和 质控品 .SOP 文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器：奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见AU1000 生化分析仪项目测定 参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见AU1000 生化分析仪操作规程 . SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以2S 为质控 警告限，

5、3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。 质控规则参见室内质控操作规程.SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 TruCal U 复合校准品甘油三脂校准 值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报 告可靠的检测结果。 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 （单位： mmol/L） 合适范围： 2.3mmol/L 高度危险临界值： 2.34.5mmol/L 高度危险范围： 4.5mmol/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差 别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参 考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义： 甘油三酯是甘油与3 个脂肪酸形

6、成的 酯，是天然脂肪中含量最多的。在血液中，甘油三酯和 载脂蛋白结合形成极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微 粒，运送到全身。甘油三酯的检测用于对脂肪状态的过 筛，以检出致动脉粥样硬化的危险；监视降脂治疗的效 果。近期的研究说明，甘油三酯的增高同时伴有低密度 脂蛋白（ LDL）的升高，特别对发生冠心病（CHD）具 有高度危险。甘油三酯的升高也和肝、肾以及胰腺疾病 有关。 流行病学研究观察到，若同时出现血清甘油三酯 2mmol/L、高密度脂蛋白胆固醇（ HDL-C） 2.3mmol/L）的临床应用需 结合 CHD 的其他危险因子。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围： 0.0

7、111.3mmol/L。 14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标 准方法， AU1000 批内精密度小于 3%，总精密度小于 3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的 NCCLS 的规则。 批内精密 xsCV 天间精密 xsCV 度 n=20 (mmol/L ) (mmol/L ) (%) 度 n=20 (mmol/L ) (mmol/L ) (%) 样品 1 0.910.0141.53 样品 1 1.130.0181.60 样品 2 1.200.0221.82 样品 2 2.000.0211.04 样品 3 2.400.0351.47 样品 3 2.290.0241.0

8、6 14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试 剂盒(x)，同时对 77 个样品进行 TG 检测，将检测结果 作方法学比较，其统计结果如下： y=0.98x+0.014mmol/L；r=0.993。 14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.01mmol/L。 14.5 病人结果可报告范围： 0.0111.3mmol/L。 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理： 本法对甘油三酯的检测范围 为 0.0111.3mmol/L。当样品测定值超过上限时，应 将样品用 9g/L 氯化钠溶液作 1+4 稀释，重新测定，结 果乘以 5。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处

9、处理理： 当甘油三脂测定值 4.5mmol/L 时，在经过复查等确认手段处理后应及时向 临床主管医生汇报。 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法对甘油三酯的检测范围为 0.0111.3mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将 样品用 9g/L 氯化钠溶液作 1+4 稀释，重新测定，结果 乘以 5。 17.2 干扰物质：当样品中胆红素浓度684mol/L 时 没有观察到干扰。当抗坏血酸浓度341mol/L、血红 蛋白浓度 2.50g/L 时有干扰。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂 家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献

10、1. Rifai N, Bachorik PS, Albers JJ. Lipids, lipoproteins and apolipoproteins. In: Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. P.809-61. 2. Cole TG, Klotzsch SG, McNamara J. Measurement of triglyceride concentration. In: Ri

11、fai N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds. Handbook of lipoprotein testing. Washington: AACC Press, 1997.p.115-26. 3.Recommendation of the Second Joint Task Force of European and other Societies on Coronary Prevention. Prevention of coronary heart disease in clinical practice. Eur Heart J 1998;19:1434-503. 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集 后按检验科废物处置管理规定 执行。