2022年高三生物总复习教案第讲微生物的利用.docx

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1、精品_精品资料_资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -2022 高三生物总复习教案第 40 讲 微生物的利用教学案【考纲要求】微生物的利用考纲要求1进行微生物的分别和培育详细内容2测定某种微生物的数量3讨论培育基对微生物的挑选作用4探讨微生物的利用1培育基的配制试验内容2高压蒸汽灭菌和干热灭菌3倒平板操作试验与探究才能4平板划线操作和稀释涂布平板法5应用挑选培育基分别某种特定的微生物【考点分析】考点试卷类型分值题型2022宁夏15非挑选题2022江苏2挑选题2022山东8非挑选题2022江苏3挑选题2022广东15非挑选题2022宁夏15非挑选题2022广东

2、10非挑选题2022广东10非挑选题2022广东10非挑选题2022辽宁、宁夏15非挑选题(1) 进行微生物的分别和培育(2) 测定某种微生物的数量(3) 讨论培育基对微生物的挑选作用(4) 探讨微生物的利用(1) 培育基的配制(2) 高压蒸汽灭菌和干热灭菌(3) 倒平板操作(4) 平板划线操作和稀释涂布平板法(5) 应用挑选培育基分别某种特定的微生物2022上海9非挑选题【考点猜测】可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 1 页,共 11 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品

3、资料_资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -从近几年高考试题看, 微生物的养分、 培育基的种类和配制、 进行微生物的培育与分别等内容是命题的素材. 培育基的种类与配制是本模块的重点内容, 今年高考命题可能会从下面三个方面绽开:1 培育基及其无菌技术2 应用挑选培育基分别某种特定的微生物3 有关的试验原理、方法、步骤和猜测本专题内容侧重考查同学的实际应用才能,由于许多课题的开展具有肯定的难度,从考试的角度上讲也很难实现动手才能的考查.从近几年掰课标的区生物试题看留意考查基础知识,同时进行简洁应用的考查.考查学问点分布主要集中在微生物的养分、培育基种类和配制、程

4、序及其留意事项、无菌技术、微生物的挑选和鉴别培育等.以非挑选题为主,为选做题之一.【学问梳理】一、 微生物的试验室培育1、培育基2、无菌技术3、试验操作二、土壤中分解尿素的细菌分别与计数1、试验设计2、设置对比3、挑选菌株三、分解纤维素的微生物的分别1、纤维素2、试验设计【重点解析】微生物的试验室培育1、 微生物的养分物质及功能碳源氮源生长因子水无机拦可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_概念 凡能为微生物供应所需碳元素的养分物质凡能为微生物供应所需氮元素的养分物质微生物生长不行缺少的微量有机物可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品

5、资料_学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 2 页,共 11 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -来源 无机碳源: C02、NaHC03 无机氮源: N2、氨、铵 酵母膏、 蛋白胨、 动可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_等.有机碳源:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等盐、硝酸盐等.有机 氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等植物组织提取液可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_作用

6、 主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物.异养微生物的主要能源物质主 要 用 于 合 成 蛋 白 酶和核酸的组成成质、核酸以及含氮的分代谢产物溶剂、生化反应的介质酶 的 成分、调剂渗透压等可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_说明 不同种类的微生物,对碳源的需要差别较大.例:甲基养分菌只利用甲醇、甲烷.假单胞菌利用 90多种含碳化合物对于异养微生物,含C、H、0、N的化合物既是碳源,又是氮源微生物需要补充生长因子是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成才能有限可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_2、 培育基的种类划分标准培

7、育基种类特点用途可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_按物理性质液体培育基不加凝固剂工业生产固体培育基加凝固剂, 如琼脂 微生物分别、鉴定,活菌计数,保藏菌种可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_挑选培育基培育基中加入某种化学物按质,以抑制不需要的微生物用的生长, 促进所需要的微生途物的生长培育、分别出特定微生物如培育酵母菌和霉菌,可在培育基中加入青霉素.培育金黄色葡萄球菌,可在培育基中加入高浓度食盐可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_鉴别培育基依据微生物的代谢特点,在 鉴别不同种类的微生物,如可用伊红一可编辑资料

8、 - - - 欢迎下载精品_精品资料_培育基中加入某种指示剂或化学药品美蓝培育基鉴别饮用水或乳制品中是否 有大肠杆菌 如有, 菌落呈深紫色, 并带有金属光泽 可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 3 页,共 11 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -3、无菌技术消毒与灭菌概念常用方法应用的范畴消使用较为温顺的物理或化煮沸消毒法:在100煮沸一般物品学

9、方法仅杀死物体表面或5 6 min毒内部一部分对人体有害的微生物 不包括芽孢和巴氏消毒法: 70 75煮30 min 或在 80煮 15min对于一些不耐高温的液体,如牛奶孢子 化学药剂消毒法如用体积分数70 75 的酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等紫外线消毒: 30 W接种室空气紫外灯照耀 30 min使用剧烈的理化因素杀死灼烧灭菌:酒精灯火焰接种工具的灭菌灭物体内外全部的微生物 包 干热灭菌: 160 l70 括芽孢和孢子下灭菌 1 2 h玻璃器皿、金属工具的灭菌菌高压蒸汽灭菌:121 100 培育基及容器的灭菌kPa 条 件 下 , 灭 菌 15 30 min4制备牛肉膏蛋白胨固体培育基操

10、作分析(1) 培育基需冷却至50时开头倒平板缘由:琼脂是一种多糖,在98以上熔化,在44以下凝固,倒平板时高于50就会烫手,低于50时如不能准时操作,琼脂就会凝固.估量培育基温度的方法是:培育基从灭菌锅中取出冷却一段时间后用手触摸,感觉上以刚不烫手为准.(2) 平板倒置缘由:平板皿盖上会凝聚水珠,培育基表面的温度也较高,平板倒置后,既可使培育基表面的水分更好的挥发,又可防止肛盖上的水珠落入培育基,造成污染. 5纯化大肠杆菌操作过程中的留意事项微生物的接种方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法.(1) 平板划线法操作第一步即取菌种之前及每次划线之前接种环都需要进行火焰灼烧灭菌,划线操作可编辑

11、资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 4 页,共 11 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -终止时,仍需灼烧接种环,每次灼烧目的如下表:第一次操作每次划线之前划线终止可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_杀死接种环上原有的微生物目的杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端,使每次划线菌种数目削减杀死接种环上残存的菌 种,防止细菌污染环境和感染操作者可编辑资料

12、- - - 欢迎下载精品_精品资料_从其次次以后的划线操作总是从上一次划线末端开头,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减,最终得到由单个细菌繁衍而来的菌落.(2) 稀释涂布平板法稀释涂布平板的操作比较复杂,且各个细节均需保证“无菌”应特殊留意:酒精灯与培育皿的距离要合适.吸管头不要接触任何其他物体.吸管要在酒精灯火焰四周使用.例 1 某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情形而进行了试验.试验包括制备培育基、 灭菌、接种及培育、菌落观看计数.请回答与此试验相关的问题.(1) 培育基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培育供应了和.除此之外,培育基仍必需含有的基本:成分是和.(2) 对培育基进行灭菌,

13、应当采纳的方法是.(3) 为了尽快观看到细菌培育的试验结果,应将接种了湖水样品的平板置于中培育,培育的温度设定在37.要使该试验所得结果牢靠,仍应当同时在另一平板上接种作为对比进行试验.(4) 培育 20 小时后,观看到平板上有外形和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中种细菌.一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越.(5) 假如提高培育基中NaCl 的浓度, 可以用于挑选耐细菌, 这种培育基被称为.解析: 1 蛋白胨主要是为细菌供应氮源,淀粉只能为细茵供应碳源,其实,两者仍都能为细菌供应能源.虽然各种培育基的详细配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐.(2) 培育基常用高压蒸汽灭菌

14、,接种环等用灼烧灭茵,玻璃器皿等适于用干热灭菌.3 相宜的温度条件下微生物繁衍速度快,恒温箱可通过设定维护相宜的温度.对比组应接种不含细可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 5 页,共 11 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -菌的样品,比如接种无菌水.4 每一种类型的菌落就表示有一种类型的细菌.茵落总数与湖水遭受细菌污染的程度呈正相关.5 加入 NaCl 可制作挑选耐盐细菌的挑选培育基.蛋白质中

15、含有氮元素和碳元素,为细菌的生长供应了氮源和碳源,而淀粉只能供应碳源.培育基一般采纳高压蒸汽进行灭茵.不同的微生物形成的茵落不同,有多种茵落即有多种细菌.污染越重,茵落总数就越多.耐盐细茵可以在高浓度的NaCl 培育基中生存,而其他的细菌就 很难生存.答案: 1 氮源 碳源不作要求碳源无机盐水2 高压蒸汽灭菌3恒温培育箱无菌水 4多高5盐 或 NaCl 挑选性培育基例 2 苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着降解苯酚的微生物.某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,讨论人员从土壤中挑选出只能降解利用苯酚的细菌菌株,挑选的主要步骤如下列图,为土壤样品.请问答以下问题:(1)

16、 中培育目的菌株的挑选培育基中应加入作为碳源,中不同浓度碳源的培育基A影响. B不影响 细菌的数量,假如要测定中活细菌数量,常采纳法.(2) 为对比,微生物在中不生长,在中生长,与培育基的主要区分在于使用法可以在上获得单菌落.采纳固体平板培育细菌时为什么进行倒置培育.(3) 如何比较不同菌株降解苯酚才能的大小.(4) 试验过程中如何防止其他微生物的污染?解析: 此题以试验材料作为背景考查微生物培育及相关试验分析和设计才能等.依据试验目的知,从土壤中挑选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,说明苯酚是该种细菌的碳源.如何比较不同菌株降解苯酚才能的大小.该问中应留意自变量为不同菌株,苯酚的浓度是无关变

17、量.由于苯酚显酸性,不同菌株的菌种降解苯酚的才能不同,pH 值会不同.可考虑用pH 试纸来检测作为因变量.试验中为防止微生物污染,应从制备培育基到接种与培育等全部试验过程保持无菌操作,如用于微生物培育的器皿、接种工具和培育基等进行灭菌等.答案: 1 苯酚 A影响稀释涂布平板法.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 6 页,共 11 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -2 的培育基没有加入苯酚作为碳

18、源,培育基中加入苯酚作为碳源稀释涂布平板法或平板划线法以防止培育基冷凝后形成的水珠滴落在培育基上污染培育基.35支干净培育瓶一分别加入相同培育基 加等量的苯酚,用pH 试纸检测这5 支瓶内培育基的pH 值,用苯酚调试使它们的pH 值相等,苯酚是唯独的碳源 一分别接种5 种等量的来自不同菌株的菌种一在相同的相宜条件下培育相同的时间一再用pH试纸检测这5 支瓶内培育基的pH 值.苯酚显酸性,不同菌株的菌种降解苯酚的才能不同,5 支.瓶内培育基中的苯酚被分解的量不同,所以pH 值不同.用pH 试纸检测这5 支瓶内培育基的pH 值,从而比较不同菌株降解苯酚才能的大小.4从制备培育基到接种与培育等全部试

19、验过程保持无菌操作:a对试验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒.b将用于微生物培育的器皿、接种工具和培育基等进行灭菌. c试验操作应在酒精灯的火焰邻近进行.d试验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与四周的物品接触.【实战训练】材料: 饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中,猪、禽等动物由于缺乏有关酶,无法有效利用植酸,造成磷源铺张, 而且植酸随粪便排除后易造成环境有机磷污染.植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸,因此成为目前重要的饲料添加剂之一.(09 广东卷) 1. ( 10 分)生物技术实践(1)商品化植酸酶主要来自微生物.在产酶菌株挑选过程中,常在基本培育基中添加不溶于水的植酸

20、钙制成固体平板,植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生,可依据其大小挑选目的菌株,所得菌株需要进一步测定植酸酶活性.活性测定可以植酸钠作 为底物,活性可用肯定条件下单位时间表示.(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图:中的主要成分为.中包含多种酸酶等多种蛋白质.请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据.(3)为建设基因工程菌,可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因.PCR反应包含多次循环,每次循环包括三步:.反应过程中打开模板DNA双链的方法是.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 7 页,共 11 页 - - - -

21、 - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -(4)除植酸酶外,微生物仍应用在的生产中.答案:(1)透亮圈植酸钠的消耗量(肌醇和磷酸的生成量)(2)小分子杂质凝胶色谱法:依据蛋白质之间分子大小,吸附性质等差异进行纯化.(或电泳法:依据蛋白质之间电荷,分子大小等差异进行纯化.)(3)变性,复性,和延长加热(4)蛋白酶,脂肪酶,纤维素酶解析:此题考查对微生物的分别和培育,蛋白质的纯化, 酶活性鉴定等学问,结合实际应用.(09 辽宁、宁夏卷)2. 【生物选修1 生物技术实践】 ( 15 分)可编辑资料

22、 - - - 欢迎下载精品_精品资料_(1)在大肠杆菌培育过程中,除考虑养分条件外,仍要考虑 、 和渗透压等条可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_件.由于该细菌具有体积小、结构简洁、变异类型简洁挑选、 、 等优点,因此常作为遗传学讨论的试验材料.(2)在微生物培育操作过程中,为防止杂菌污染,需对培育基和培育皿进行 (消毒、灭菌).操作者的双手需要进行清洗和 .静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其缘由是紫外线能使蛋白质变性,仍能 .(3)如用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估量值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,仍应保证待测样品稀释的 .( 4)通常,对获得的纯菌

23、种仍可以依据菌落的外形、大小等菌落特点对细菌进行初步的 .(5)培育大肠杆菌时,在接种前需要检测培育基是否被污染.对于固体培育基应采纳的检测方法是 .(6)如用大肠杆菌进行试验,使用过的培育基及其培育物必需经过 处理后才能丢弃,以防止培育物的扩散.答案:(1)温度酸碱度易培育生活周期短(2)灭菌消毒损耗 DNA的结构(3)比例合适(4)鉴定 或分类 (5)将未接种的培育基在相宜的温度下放置相宜的时间,观看培育基上是否有菌落产生.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 8 页,共 11 页 - - - - - - - - -

24、-可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -(6)灭菌解析 :(1)大肠杆菌具有体积小、结构简洁、变异类型简洁挑选、易培育、生活周期短 等优点,培育过程中,除考虑养分条件外,仍要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件.(2)灭菌使用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物,所以对培育基和培育皿进行灭菌,消毒使用较为温顺的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,操作者的双手需要进行清洗和消毒,紫外线能使蛋白质变性,仍能损耗DNA的结构.(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液

25、分别涂布到琼脂固体培育基的表面,进行培育,应保证样品稀释的比例适合.(4)对获得的纯菌种仍可以依据菌落的外形、大小等菌落特点对细菌进行初步的鉴定.(5)培育大肠杆菌时,在接种前需要检测培育基是否被污染.对于固体培育基应采纳的检测方法是将未接种的培育基在相宜的温度下放置相宜的时间,观看培育基上是否有菌落产生.(6)由于有的大肠杆菌会释放一种剧烈的毒素,并可能导致肠管显现严峻症状,使用过的培育基及其培育物必需经过灭菌处理后才能丢弃,以防止培育物的扩散.(09 上海卷) 3 . ( 9 分)氯苯化合物是重要的有机化工原料,缘由不易降解,会污染环境.某讨论小组依照以下试验方案(图1)挑选出能高效降解氯

26、苯的微生物SP1 菌,培育基配方如表 1.(1)配制号固体培育基时,除添加号液体培育基成格外,仍应添加1%的 .(2)培育基配制时,灭菌与调PH的先后次序是 .(3)从用途上来说, 号培育基和号培育基分别属于 培育基和 培育基.在号培育基中,为SP1菌供应氮源的成分是 .(4)在养分缺乏或环境恶劣时,SP1 的菌体会变成一个圆形的休眠体,这种休眠体被称为 .可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 9 页,共 11 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_资料word 精心总结

27、归纳 - - - - - - - - - - - -(5)将 SP1菌接种在含不同浓度氯苯的号培育液中培育,得到生长曲线(如图2).从图2可 知SP1 菌 在 培 养 条件 下最 早停 止 生 长, 其原 因 是 .答案:(1)琼脂(2)先调 PH,后灭菌(3)通用挑选硝酸铵(4)芽孢(5) 20mg/L 氯苯硝酸最早耗尽解析: 此题主要考查微生物相关学问.(1)固体培育基必需含有适量的琼脂.(2)配置培育基时应先调PH后灭菌.(3)号培育基是为了获得更多的菌株,属于通用培育基,号培育基是为挑选出SP1 菌株属于挑选培育基,号培育基成分中含N 物质为硝酸铵,就应由它为SP1 菌株供应氮源.(4

28、)在恶劣环境下一些菌体会形成芽孢休眠体,来度过不良环境.(5) SP1 菌株是以氯苯为碳源,当氯苯消耗尽菌株因缺少碳源而不能连续生存,故氯苯含量越少, SP1菌株越早停止生长.【名师点拨】1无菌技术及其常用的方法灭菌是指使用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物,包括芽孢和孢子.常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线灭菌法等在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环,由于操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上可能存在的微生物污染培育物.每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线终止后, 接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次

29、数的增加,使每次划线时菌种的数目逐步削减,以便得到菌落.划线终止后灼烧接种环,能准时杀死接种环上残留的菌种,防止细菌污染环境和感染操可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 10 页,共 11 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -作者.在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线,以免接种环温度太高,杀死菌种.2. 微生物的纯化培育的两种方法:平板划线法和稀释涂布平板法(1) 平板划线法在操作的第一步以及

30、每次划线之前都要灼烧接种环,在划线操作终止时,仍旧需要灼烧接种环.在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线,以免接种环温度太高, 杀死菌种.由于划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开头, 能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减,最终能得到由单个细菌繁衍而来的菌落.(2) 稀释涂布平板法涂布平板的全部操作都应在火焰邻近进行.每一个稀释度下涂布 三个平板作为重复组,不同稀释度下涂布的平板形成对比组,且每个平板所用的样液不超过 0 1 毫升.统计试验结果时留意选取菌落数介于30 300 个之间的平板进行计数,且重复组结果要有相近性.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 11 页,共 11 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载

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