血清α淀粉酶测定.doc

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1、血清淀粉酶测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确2 实验原理 AMS测定采用酶动态比色测定法。所用底物为4,6-亚乙基-a,D-麦芽七糖苷-对硝基苯酚（EPSG7）。样品中a淀粉酶分解底物EPSG7，生成对硝基苯酚（PNP），在405nm处比色，吸光度的上升速率与样品中a-淀粉酶的活力成正比。 3 标本采集与处理：3.1 病人准备：无特殊要求。3.2 标本类型：血清。3.3 血清分离 血清或血浆应在收集后尽快分离出来。未酸化的尿液，随机或限时收取。3.4 标本存放：不要用嘴吸取标本或对标本吹气，以免唾液污染标本唾液中的淀粉酶使结果升高。血清淀粉酶在2025稳定

2、一个星期，避免微生物降解作用；在28时稳定一个月。尿液样品在28可稳定10天，在1525可稳定2天。对于尿液，酸性pH值可使淀粉酶的稳定性减弱，因此，储存前pH值应调至大约7.0。3.5 标本运输 常温条件下运输3.6 标本拒收标准 细菌污染、溶血的不能做测定。4 实验材料：4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司淀粉酶试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014）4.1.1 试剂组成R1HEPES缓冲液:52.5 mmol/L,pH 7.00(37)；氯化钠：87 mmol/L；氯化镁：12.6mmol/L；氯化钙：0.075 mmol/L；-葡萄糖苷酶（微生物）：

3、4kU/L；防腐剂。 R2HEPES缓冲液:52.5 mmol/L,pH 7.00(37)；4-6-亚乙基-G7PNP：22 mmol/L；防腐剂；稳定剂。4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8C下保存期限：见试剂标签上的有效期；机上稳定期：4周4.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。4.1.5注意事项：唾液和皮肤中含有a-淀粉酶，应避免用嘴吸取试剂，避免皮肤接触试剂。试剂中含防腐剂,稳定剂，避免接触皮肤及粘膜。4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的AMY校准品对自动分析仪进行校准。4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

4、5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪西门子ADVIA-2400生化分析仪项，东芝TBA-120生化分析仪目测定参数。6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7

5、 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。8 计算方法 以AMY复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。9 参考值范围 血清 28-100U/L 随机尿液 100-1200U/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。我室的参考值:血清:35-135 U/L;随机尿:1000U/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。14 方法局限性14.1 本法线性上限为1500U/L。如

6、样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1：9稀释，重新测定，结果乘以10。14.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mmol/L，胆红素浓度684mmol/L，甘油三酯浓度11.3mmol/L时没有观察到干扰。即使极低浓度的血红蛋白都会对检测产生干扰。15 补救措施 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献：16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书。