血清α-淀粉酶活性测定(迈克)幻灯片38586.ppt

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1、血清血清(xuqng)-淀粉酶淀粉酶AMS或或AMY活性的测定活性的测定Reagent for-Amylase Testn n一、原理一、原理(yunl)n n二、测定方法二、测定方法n n三、参考值三、参考值n n四、临床意义四、临床意义n n五、本卷须知五、本卷须知n n六、方法学评价六、方法学评价第一页，共十三页。一、原理一、原理(yunl)(yunl)：n n样品中-淀粉酶1，4-D-葡萄糖水解酶，又称淀粉内切酶，对1，4-糖苷键连接的葡萄糖有特异性。催化淀粉分子及糖原中的-1，4葡萄糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有-1，6糖苷键支链的糊精，在淀粉浓度充分的条件下，反响后参加碘液与

2、未被水解的淀粉结合成蓝色复合物，其颜色的深浅与未经酶促反响的空白管比较，从而推算出淀粉酶的活力(hul)。n n注：1、生物界存在和两种淀粉酶，但人体内仅有-淀粉酶。n n 2、淀粉酶分子量40000 50000,很易由肾排出。第二页，共十三页。二、测定二、测定(cdng)(cdng)步骤：步骤：n n各管混匀，660nm波长(bchng)(bchng)，以蒸馏水调零，测定各管吸光度值。试 剂 测定（U）空白（B）样 品 （ml）0.02 蒸馏水 （ml）0.02 试剂 R1（ml）1.00 1.00 各管混匀，置37度水浴7.5分钟。试剂 R2（ml）1.00 1.00 蒸馏水（ml）5.0

3、0 5.00 第三页，共十三页。2、计算、计算(j sun)(j sun)：n n 注：淀粉浓度注：淀粉浓度(nngd)0.4g/L(nngd)0.4g/L n n样品样品AMYAMY活力苏氏单位活力苏氏单位=n n样品样品AMYAMY活力苏氏单位活力苏氏单位)=)=第四页，共十三页。注解(zhji)(zhji)n n0.4淀粉浓度n n5.0 1单位定义消耗淀粉mg数n n15 1单位定义反响时间n n7.5 酶的实际(shj)作用时间n n100 1单位定义用血清n n0.02 样品取量第五页，共十三页。3、AMY活性单位活性单位(dnwi)(dnwi)定义：定义：n n100ml血清中的

4、淀粉(dinfn)(dinfn)酶在37，15分钟水解5mg淀粉(dinfn)(dinfn)为1个单位。第六页，共十三页。4、半自动生化、半自动生化(shn hu)(shn hu)仪的使用仪的使用n n测定法：终点点(zhngdin(zhngdin)法n n温 度：37n n波 长：623nmn n吸 量：1000 ln n参考范围：60180Un n线性范围：0400U第七页，共十三页。三、参考值：三、参考值：血清(xuqng)(xuqng)：60180U苏氏单位n n尿液：100 1200U苏氏单位第八页，共十三页。四、临床意义：四、临床意义：n n 淀粉酶主要由胰腺和唾液腺分泌，肺、肝、

5、甲状腺、脂肪等组织亦含有此酶。血清淀粉酶测定主要用于急性胰腺炎的诊断。一般于发病后612h开始升高，1224h达峰值，25d恢复正常，因此血清淀粉酶活性显著升高对急性胰腺炎的早期(zoq)(zoq)诊断价值较大。淀粉酶可通过肾小球滤过，尿淀粉酶于发病后1224h开始升高，持续时间长，下降比血清淀粉酶慢，故胰腺炎后期测尿淀粉酶更有价值。第九页，共十三页。慢性胰腺炎、胰腺癌、急性阑尾炎、溃疡性穿孔、肠梗阻、流行性腮腺炎、唾液腺化脓(hu nng)(hu nng)等血清淀粉酶均可升高。肾功能障碍时，血清淀粉酶升高，尿淀粉酶降低。各种肝病患者，血、尿淀粉酶同时降低。第十页，共十三页。五、本卷须知：五、

6、本卷须知：n n1、样品为不溶血的血清、血浆或尿液pH值应调至7.0样品应在低温(dwn)条件下运输保存，血清或血浆中淀粉酶28可稳定30天，室温可稳定7天。n n2、如果样品中AMY活力大于400苏氏单位或测定管吸光度小于空白管吸光度一半时，应将样品稀释后再进行测定，测定结果乘以稀释倍数。n n3、参加显色剂及蒸馏水后，应立即比色，否那么可致结果偏高。使用血浆时应选用肝素抗凝。n n4、如遇黄疸、溶血或乳糜标本时应作样品空白。第十一页，共十三页。六、方法学评价(pngji)(pngji)1.淀粉遇碘呈蓝色反响属有机化学的经典型反响，方法可靠，反响特异性高。2.线性范围：0400苏式单位U/L3.精密度：批内CN10%4.准确度：不准确度20%5.空白吸光度(gungd)：空白管在660nm波长处，10mm光径，吸光度(gungd)0.45第十二页，共十三页。内容(nirng)总结血清(xuqng)-淀粉酶AMS或AMY活性的测定Reagent for-Amylase Test。2、淀粉酶分子量40000 50000,很易由肾排出。0.4淀粉浓度。5.0 1单位定义消耗淀粉mg数。100 1单位定义用血清(xuqng)。0.02 样品取量。4、如遇黄疸、溶血或乳糜标本时应作样品空白。4.准确度：不准确度20%第十三页，共十三页。