大剂量甲泼尼松龙对大鼠液压冲击伤性脑水肿AQP4表达的影响.docx

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1、 目 录 中文摘要 . 1 英文摘要 . 5 研究论文大剂量甲波尼松龙对大鼠液压冲击伤脑水肿 AQP4 表 达的影响 弓信 . 10 第一部分不同分级液压冲击脑损伤模型的建立及病理学观察 前言 . 11 材料与方法 . 12 会課 . 14 關 . 17 赚 . 20 i 寸 i 仑 . 23 4、会吉 . 24 参考文献 . 24 第二部分大剂量甲波尼松龙对大鼠中度液压冲击伤性脑水肿 AQP4 表 达的影响 前言 . 28 材料与方法 . 29 会課 . 40 關 . 42 赚 . 49 讨论 . 51 杉吉 . 52 参考文献 . 52 结论 . 56 综述水通道蛋白 -4、内向整流钾离子

2、通道 4.1 与癫痫的关系 57 顏 . 67 个人简历 . 68 大剂量甲泼尼松龙对大鼠液压冲击伤性脑水肿 AQP4 表达的影响 摘 要 第一部分不同分级液压冲击脑损伤模型的建立及病理学观察 目的：建立不同分级液压冲击脑损伤动物模型，观察、比较其病理 学变化。 方法： 1 实验分组及模型建立：成年、清洁级、雄性 SD 大鼠 160 只（由 河 北医科大学实验动物中心提供），随机分为空白对照组（ 8 只）、假手术 组（ 8 只）、损伤组（ 144 只）。 损伤组：按 O.lmpa、 0.2mpa、 0.3mpa 三 种不同冲 击压力分为 0.1 mpa 冲击伤组、 0.2mpa 冲击伤组、 0

3、.3mpa 冲击伤组， 每组又随 机按伤后 lh、 6h、 12h、 24h、 3d、 7d 六个时间点各分为六个亚 组，每亚组 8 只 大鼠。按文献制作液压冲击伤动物模型。 空白对照组为 正常大鼠，仅予以麻醉。 假手术组大鼠只做开颅手术，不给于液压冲击。除 组大鼠 24h 处死取材外， 其余各组于对应时间点处死大鼠取材。 2 实验指标的观察： 脑组织承受冲击压力的检测：利用压力传感器对 O.lmpa、 0.2mpa、 0.3mpa 三个不同冲击压力作用大鼠脑损伤部位的最后 压力进行检测， 同时利用计算机进行数据采集。 神经行为学的观察： 以大鼠骨窗内硬膜发蓝、 出现短暂的呼吸暂停或一侧肢体的

4、偏瘫作为 TBI 模型制作成功的标准。以大鼠神 经功能行为学评分表为标准，评价各组动 物神经功能及行为学变化。 脑含水量： 采用干湿比重法测量各组不同 时间点的脑含水量。 病理学观察：应用光镜观察 各组动物损伤脑组织 的病理学改变，比较其演变趋势。以上结果所得数据采用均 数 标准差 (Ss)表示，利用 spSS13.0 统计软件进行统计分析，采用单因数方差分 析和 X2 检验，以 p0.05 )。 3 AQP4 蛋白表达的变化：与对照组相比较，脑损伤后 AQP4 表达 lh 开始 升高 ， 6h 和 12h 逐渐上升 ， 24h (免疫组化 0.1260.018， Western-blot 1

5、.1680.165, p . 5 )。 5AQP4mRNA 表达的变化：与对照组相比较，脑损伤后 AQP4mRNA 表 达 lh 开始升高， 6h 和 12h 逐渐上升、 24h(0.8850.110， p0.05 )。 结论： 1 大鼠液压冲击脑损伤后， AQP4 蛋白及 mRNA 出现了上调。 2 大 剂量 MP 能够缓解液压冲击伤性脑水肿，与其抑制 AQP4 及其基因的 表达有关。 关键词 ：甲泼尼松龙；大鼠；液压冲击脑损伤；脑水肿；水通道蛋 白 -4; 免疫组织化学； RT-PCR; Western-blot 5 Effect of high-dose methylprednisolo

6、ne on AQP4 expression after fluid percussion brain injury in rats ABSTRACT SECTION ONE Establishment of model of fluid percussion brain injury with different damage extent and pathological observations in rats Objective: To establish rat models of fluid percussion brain injury with different damage

7、extent and observed their pathological changes. Method: 1 Animals groups and model establishing: 160 adult male SD r- ats of clean grading， which came from the Experimental Animal Center of Hebei Medical University, were randomly divided into three groups: control group (8 rats)， sham-operation grou

8、p (8rats)， injury group (144 rats). the injury group were randomly divided into O.lmpa injury group, 0.2mpa injury group, 0.3mpa injury group according to hit force. According the sacrifice time of 1 h， 6h， 12h， 24h， 3d， 7d after injury， each of the injury group is divid ed into six sub-groups, whic

9、h was composed of 8 rats. (3) the control group are normal rats and only accepted anesthesia. the sham group only is operated ， not accepted the hydraulic shock. The rats of were sacrificed after operating, and those of other groups at corresponding time points, to prepere for brain sample. 2 Experi

10、mental observed indexes: The impact stress testing: the pressure sensors is used to test and record the practice impact pressure of brain injury location, while the computer is used for analysis of data. (D Neuroethology observation: the rat dura in bone window was blue and there are a brief apnea a

11、nd limb paralysis on one side in rats which are the standardization of TBI model-making successing. Neurological behavioral score cited from litera tur- es was employed to evaluate the neurological function in all groups. (3) Brain water content: the brain water content was measured by the way of dr

12、y and 6 weight. Pathological observation: light microscopy was used to observe in the pathological changes of all groups, and comparing the evolution of trends. The above results of the data were expressed with mean 士 standard deviation (又 士 s)， which was analyzed by single factor analysis of varian

13、ce and 乂 2 test a nd spssl3.0 statistical software， p 0.05). 3 AQP4 protein expression: Compared with the control group, the expression of AQP4 protein at lh began to increase, increased gradually at 6h and 12h, (immunohistochemistry 0.126 士 0.018, Western-blot 1.168 士 0.165, p 0.05). 4 AQP4mRNA exp

14、ression: Compared with the control group, AQP4mRNA expression began to increase at lh, increased gradually at 6h and 12h, rise up to the maximum (0.885 士 0.110, p 0.05). Conclusion: 1 AQP4 protein and mRNA increase in brain edema from fluid percussion brain injury in rats. 2 High-dose MP can allevia

15、te brain edema from fluid percussion brain injury in rats by down-regulation of AQP4 protein and its gene expression. Key words： Methylprednisolone; Rat; Fluid percussion brain injury; cerebral edema; AQP4; immunohistochemistry; RT-PCR; Western-blot 10 大剂量甲泼尼松龙对大鼠液压冲击伤脑水肿 AQP4 表达的影响 引 言 创伤性脑损伤 （ Tra

16、umatic brain injury, TBI)常常给患者遗留种种神 经功能障碍，轻者影响正常生活和工作，重者生活不能自理、植物生存甚 至死亡， 具有高致残率、死亡率的特点。因此，对 TBI 的基础和临床研 究一直是神经外 科领域的一个研究热点，而建立一种与人类 TBI 发病机 制相似的实验动物模型 是进行该类研究的必要前提。目前在众多建立模型 的方法中，应用侧位液压冲击 制作脑损伤模型被认为是一种最为可行、较 贴近临床发生机制的方法，而且如何 建立不同损伤程度的动物模型也是争 相研究的热点。 脑水肿是 TBI 后期继发的主要病理变化，往往关系到患者的病理演 变过程 和预后，由于颅脑损伤的原

17、发性损伤具有不可预料性和难控制性， 所以及时、正 确、有效控制脑水肿至关重要。因此，继发性脑水肿如果能 得到良好的控制，就 能争取抢救时间、降低死亡率、改善预后。近年来 , 大量研究表明 AQP4 与包括 创伤性在内的各种脑水肿的形成与消退密切 相关。因此，适时、正确的选择性调 节 AQP4 可能成为治疗脑水肿的新靶 点。 甲泼尼松龙（ MP)是一种人工合成的糖皮质激素，其脂溶性高、穿 透血脑 屏障和细胞膜的能力强、抗炎作用强和半衰期时间长的特点，在治 疗急性脊髓损 伤方面取得了良好效果，但对于急性颅脑损伤的效果是否与 其治疗急性脊髓损伤 的效果一样尚不得而知。为此，本论文首先建立了不 同分级

18、液压冲击脑损伤大鼠 模型，并应用大剂量 MP 对中度损伤模型进行 了干预，探讨其抑制创伤性性脑水 肿的效果及机制。 第一部分 不同分级液压冲击脑损伤模型的建立及病理学观察 * I 月 IJ m 创伤性脑损伤（ TBI)常常给患者遗留种种神经功能障碍，轻者影响 正常生 活和工作，重者生活不能自理、植物生存甚至死亡，具有高致残率、 高死亡率的 特点 t1， 因此，对创伤性颅脑损伤的基础和临床研究一直是 神经外科领域的一个 研究热点，而建立一种与人类创伤性脑损伤发病机制 相似的实验动物模型是进行 该类研究的必要前提。目前在众多模型建立的 方法中，应用侧位液压冲击制作脑 损伤模型被认为是一种最为可行、

19、较贴 近临床发生机制的方法 3_6。但传统的液 压冲击装置采用单摆锤 -活塞装置 推动液体冲击完整的硬脑膜，有三种缺点 7_9: 1 摆锤位置和释放必须依靠 操纵者的熟练操作； 2 活塞与管壁之间摩擦力不稳定导 致可重复性降低； 3 最重要的一点是，装置内的压力在冲击后不能立即释放，脑组织在受到 冲击后 的 15 秒内仍处于较高压力作用而受到二次损伤，偏离了实际临床 脑损伤过程。 由于致伤的条件和冲击力各异，临床上患者的损伤程度和范 围也不尽相同，但目 前有关制作不同损伤程度的分级动物模型报道较少， 而且由于造模装置密封性 差、能量衰减较大，导致脑组织实际受到的冲击 压力难以控制，更谈不上所制

20、作 动物模型脑损伤的准确定量分级，难以适 应研究的需要。 为此，我们根据液压冲击伤原理 iail，自行研制液压冲击装置，将采 用计算 机编程芯片技术，通过计算机程序控制二位三通电磁阀执行对高压 气体开放，并 在打击后按既定程序发出指令使装置内压力瞬间释放，避免 了对脑组织造成二次 损伤。同时采用一体式连接，并用不锈钢管代替有机 玻璃管，严格密封各个接口， 使该装置最终作用于动物脑组织的压力稳定， 便于精确动物模型分级。在本实验 中，我们米用 O.lmpa、 0.2mpa、 0.3mpa 三种不同打击压力，并动态观察伤后组 织学演变趋势。 12 材料与方法 1 实验动物及分组 健康、成年、清洁级

21、雄性 SD 大鼠（由河北医科大学实验动物中心提 供） 160 只，体重 250 300g，按预实验结果分别取 O.lmpa、 0.2mpa、 0.3mpa 三个 不同冲击水平，并随机分为正常对照、假手术组、 O.lmpa 冲击伤组、 0.2mpa 冲 击伤组、 0.3mpa 冲击伤组共 5 组，正常对照组和假手术组各 8 只，损伤组共 144 只，每个冲击伤组又按伤后 lh、 6h、 12h、 24h、 3d、 7d 六个时间点分为六个亚 组，每个亚组 8 只。 2 改良的液压冲击装置 （ Fig 1)。 3 冲击压力的检测 利用压力传感器对 O.lmpa、 0.2mpa、 0.3mpa 三个

22、不同冲击压力作用 大鼠脑损伤部位的最后压力进行检测，同时利用计算机进行数据采集。 4 脑冲击伤模型的建立 10%水合氯醛（ 30mg/kg)经腹腔麻醉后，大鼠头部固定于动物头架 上，常 规消毒、铺无菌巾。沿头皮正中矢状位依次切开皮肤、皮下筋膜、 骨膜至颅骨， 于距冠状缝后 5mm、矢状缝左侧旁开 5mm 处用台式牙钻磨 开一直径约 5mm 的 圆形骨窗，硬膜保持完整 12。将液压冲击管用牙托粉 牢固粘在骨窗上，连接液压 冲击装置，调节大鼠固定架螺母使大鼠头部移 动到合适的打击位置，调节压力控 制阀，液压冲击压力分别为 O.lmpa、 0.2mpa、 0.3mpa，压力传感器和计算机采 集大鼠损

23、伤部位所承受的实际冲 击压力，通过相应软件来记录、分析同一压力下 不同亚组的大鼠实测压力。 冲击后即刻观察动物的呼吸，反射。必要时气管插管 人工辅助呼吸，庆大 霉素盐水冲洗创面、骨腊封闭骨窗，缝合头皮。假手术对照 组只行开颅术， 不给予液压冲击，其余同损伤组。 5 神经行为学评分 按李力仙所综合的 Shapira 和 Wahl 的大鼠脑损伤神经功能评分方法 13， 14， 15，对大鼠进行神经行为评分 (Tab 1):正常对照、假手术组均于术后 24h 评分， 损伤组分别于冲击伤后 lh、 6h、 12h、 24、 3d、 7d 进行神经行 为学评分，采用 双盲法进行。 13 6 标本取材 每

24、次神经行为学评分后，冲击伤组大鼠在相应时间点用水合氯醛过度 麻醉， 断头处死，开颅取脑。取损伤区的前部约 lOOmg 的水肿脑组织备 测量脑含水量 之用，取损伤区的后部脑组织备病理学观察。 7 脑含水量测定 所取标本用滤纸吸去表的水分，分析平称湿重后置于 ll C 恒温干燥 箱内干重 24h 至恒 重，称干重后按 Elliot 公式计算脑含水量：脑含水量 = (湿重 -干重）湿重 XI00%。 8 病理学观察 所取脑组织标本置于 4%多聚甲醛液体中固定 24h,自来水冲洗，修 成约 4mm 厚的脑组织片，然后在室温下完成以下步骤： (1) 脱水 80%乙醇 过夜 90%乙醇 lh 100%乙醇

25、 lh 100%乙醇 lh 二甲苯 I lh 二甲苯 II 0.5h (2) 浸蜡、包埋 石蜡 2.5h 常规石蜡包埋后，连续切片厚度为 4pm 石蜡切片， 70过夜烤干。 (3) 脱蜡 二甲苯 I 5 min 二甲苯 II 5 min 无水乙醇 I 5min 二甲苯 I 5 min 二甲苯 II 5 min 无水乙醇 II 5 min 95% 乙醇 5 min 80% 乙醇 5 min 充分水洗 3 次 14 (4) HE 染色 苏木素 10 min 充分水洗 3 次 1 %盐酸酒精 14s 充分水洗 3 次 氨水 1-2 充分水洗 3 次 伊红液 4-5 min 充分水洗 3 次 80%

26、乙醇 1 min 95% 乙醇 1 min 无水乙醇 I 1 min 无水乙醇 II 5 min 二甲苯 I 5 min 二甲苯 II 5 min 中性树胶封片。 9 统计学处理 数据采用均数土标准差（ Ss)表示，利用 Spssl3 .0 统计软件进行统 计分析，采用单因数 方差分析和 x2 检验。 结 果 1 检测压力 检测压力结果示：同一冲击压力下各亚组检测压力值之间无统计学差 异，见 Tab 2。 2 行为学改变 0.1 mpa 冲击伤组 :冲击伤后大鼠出现短暂一过性四肢运动功能减弱、 一过性呼吸节律深 慢，无呼吸暂停。 0.2 mpa 冲击伤组：冲击伤后大鼠出现较明显的四肢运动功能减

27、弱， 以右侧肢体显著，冲 击伤后呼吸暂停 l .882.69s。 15 偏瘫。 冲击伤组伤后大鼠死亡率随着冲击力的增加而升高，冲击伤组共用 大鼠 144 只，死亡 11 只，总死亡率 7.64%，均为冲击伤后 15mm 内死亡 , 其中， 0.1 mpa 冲击伤组 1 只（死亡率 2.08%), 0.2 mpa 冲击伤组 2 只（死 亡率 4.17%)， 0.3 mpa 冲击伤组 8 只（死亡率 16.67%)，死亡原因多见于 脑干损伤和急性肺水肿，见 Tab 3。 3 神经功能评分 各冲击伤组损伤后神经功能学评分比正常对照组少，其中 O.lmpa 冲 击伤组： 神经功能恢复较快，在 24h

28、已与对照组无显著差异， 3d 基本恢 复正常； 0.2mpa 冲击伤组：伤后各时间点的神经功能评分明显减少， 3d 到 7d 逐渐恢复，仍与对 照组相比较呈显著差异。 0.3mpa 冲击伤组：伤后 不仅各时间点的神经功能评分 显著减少，恢复极为缓慢，到 7d 亦未恢复 至正常，且与 O.lmpa 冲击伤组、 0.2mpa 冲击伤组相比较有统计学意义， 见 Tab 2。 4 病理形态学观察 4.1 大体观察 O.lmpa 冲击伤组：大脑皮质损伤灶程度浅、范围小，偶尔可见蛛网 膜下出 血，切面仅见皮质下出血。 0.2 mpa 冲击伤组：大脑皮质损伤灶程度较深、范围较大，硬膜外出 血及蛛 网膜下出血

29、分布较为广泛。切面见伤侧灰质、白质均受累，可见脑 室出血。 0.3 mpa 冲击伤组：大脑皮质损伤灶的程度更深和范围更大、硬膜外 出血、 蛛网膜下腔出血更为严重常累及到双侧大脑半球，切面不仅伤侧灰 质、白质受累 严重，而且肼肢体及脑室出血常见，损伤累及到脑干（见 Fig. 5-6)。 4.2 光镜学观察 对照组：肉眼可见脑组织表面光滑，沟回整齐、清晰，无充血，肿胀 及出 血灶。光镜下见脑组织结构完整，神经元排列整齐，染色均勻，无肿 胀、损伤， 胞浆丰富，核仁清晰呈淡蓝色居中，细胞间隙无水肿，无毛细 血管及其间隙扩张 现象，海马的神经元排列规则，胞内，外间隙表现正常。 O.lmpa 冲击伤组：冲

30、击伤后 12h 光镜观察海马的神经元排列规则， 16 胞内，外间隙表现正常，海马上见皮质内片状出血，周围表现轻度水肿， 微血管 外间隙、神经胶质细胞和组织间隙扩大，炎细胞渗出。 24h 海马上 皮质损伤区大 量红细胞，神经元数目减少，核固缩，周围神经元呈气球样 变，大量炎细胞浸润， 微血管外间隙扩大更加明显。冲击伤后 3d 见损伤 区周围水肿减轻，胶质细胞增 生明显。7d 后损伤区红细胞减少，组织水 肿减轻明显，炎细胞稍减少，伤区周 围大量胶质细胞增生。 0.2mpa 冲击伤组：冲击伤后 12h 海马神经元排列紊乱、中断、胞内， 外间 隙扩大、细胞核固缩、其间有大量红细胞。表现为周围广泛的水肿

31、和 炎细胞渗出。 24h 后损伤区海马神经元减少，紊乱更加明显，出现核固缩 , 水肿和炎细胞渗出更 加明显。冲击伤后 3d 见海马损伤区及其周围水肿减 轻，胶质细胞增生明显。 7d 后海马损伤区红细胞减少，组织水肿减轻明 显，炎细胞稍减少，周围大量胶质细 胞增生。 0.3mpa 冲击伤组：冲击伤后 12h 不仅表现为海马下区域广泛出血， 海马神经元的广泛水 肿，而且出现神经元的溶解坏死。 24h 水肿、坏死更 加明显，见大量炎细胞浸润。 3d 到 7d 见 组织水肿减轻明显，炎细胞稍减 少，胶质细胞比前两组增生明显，见 Flg 7。 2 脑含水量 0.1 mpa 冲击伤组动物脑含水量在损伤后

32、6h 开始出现增加， 12h 增加 到一定幅度， 24h 出现高峰，高峰值达 81.120.03%; 0.2mpa 冲击伤组 脑含水量 lh 出现增加， 6h 升高达 79.481.54%并持续到 24h， 3d 开始下 降，但与正常对照组相比差异显著； 0.3 mpa 冲击伤组 增加变化最明显： lh 明显增加， 6h 到 12h 持续增加， 12h 达 81.820.06%持续到 3d， 7d 逐 渐 趋于正常，与对照组比较差异无显著，见 Tab 4。 17 附 图 Fig. 1 Fluid percusision device for rat Fig.2 Adhesion of rat

33、head tube hydraulic shock Flg.3 Keyhole size Fig.4 Damage foci size 18 Fig. 5 The changes of varying degree- s of brain injury are at lh in ventral s urface Fig.6 The changes of varying degrees of brain injury are at lh in coronal surface Fig.7A The Changes of hippocampal Fig.7B The Changes of hippo

34、campal cortex are at 12h after mild brain inj- cortex are at 12h after moderate bra- ury (HExlOO) in injury (HEx 100) 19 Fig.7C The Changes of hippocampal c ortex are at 12h after Severe brain injury (HEx 100) Fig.7D The Changes of hippocampal cortex are at 12h after mild brain injury (HEx400) Fig.7

35、E The Changes of hippocampa cortex are at 12h after moderate brain injury (HEx400) Fig.7F The Changes of hippocampal cortex are at 12h after Severe brain injury (HE0.05), 7d 趋于正常。与损伤组相应时间点比较，干预组 6h、 12h、 24h、 3d 四个时间点 脑含水量明显减轻， lh、 3d 两个时间点脑含水 量无明显差异（ p . 5)。 3 组织学观察 正常对照组、假手术组：脑组织结构完整，神经元排列整齐，染色均 勻

36、，无 肿胀、损伤，胞浆丰富，核仁清晰呈谈蓝色居中，细胞间隙无水肿， 无毛细血管 及其间隙扩张现象。 损伤组：术后 ld，损伤灶大量红细胞外渗，周围皮质神经元和神经 胶质细胞 呈轻度气球样变，其周围间隙扩大，微血管外间隙扩大。术后 6 d，损伤灶仍见大 量红细胞，神经元溶解坏死，周围皮质神经元和神经胶 质细胞明显呈气球样变， 其周围间隙、微血管外间隙进一步扩大。术后 12 d，损伤灶内神经元坏死明显， 与周围皮质分界清楚，周围神经元水肿 更加明显。术后 24 d，损伤灶内坏死神经 元减少，神经胶质细胞增多，周 围神经元水肿达到高峰，大量炎细胞浸润，血管 扩张及其外间隙明显扩大。 术后 3d，损伤

37、灶内神经胶质细胞和炎细胞明显增多， 可见新生毛细血管 形成，周围水肿明显。术后 7d,损伤灶被纤维组织填充，神经 胶质细胞 大量增生，可见大量炎细胞，周围水肿基本消退（见 Fig 8-14)。 MP 干预组：各个时间点仍存在着不同程度的脑水肿。与损伤组相比 较， lh、 7d 两个时间点脑水肿程度无明显差异（ p0.05), 6h、 12h、 24h、 3d 四个时间点 脑水肿程度减轻， 6h 和 12h 两个时间点主要表现为细胞水 肿和细胞外间隙扩大程 度明显减轻； 24h 不仅表现为细胞水肿和细胞外间 41 隙扩大程度明显减轻，而且细胞气球样变的数目减少和细胞外间隙的缩 小。 3d 则 出

38、现大量胶质细胞和纤维组织的增多。 4 免疫组化染色 正常对照组、假手术组可见 AQP4 主要分布在星形胶质细胞，特别是 与毛 细血管和软脑膜直接接触的及血管周足上，表达呈弱阳性。损伤组可 见形态不规 则、粗和细、棕色或黄色的 AQP4 表达阳性细胞，在损伤坏死 灶，由于神经胶质 细胞的溶解坏死 ,AQP4 呈低表达而其周边皮质区 AQP4 表达呈动态变化：术后 lh 开始升高， 6h 和 12h 达最大值， 3d 开始下降、 7d 逐渐接近正常； MP 干预组： 与损伤组相比较， lh 和 7d AQ P 4 表达未 见明显变化， 611、 1211、 2411、 34 人 (4 的表达明显降

39、低。（见丁 3 匕 7,?1. 15-25) 5 Western-blot 在特定的位置可见 AQP4 免疫染色反应目的条带，分子量为 34kD。 与正常 对照组、假手术组比较，损伤组 AQP4 在术后既开始升高， 6h 和 12h 逐渐上升、 24h 达最大值， 3d 开始下降、 7d 逐渐接近正常。与损伤组 比较，干预组 6h、 12h、 24h、 3d 四个时间点 AQP4 表达显著下降、差异 有统计学意义，而 lh 和 7d 两个 时间点， AQP4 的表达量减少不明显 （ p 0.05 )(见 Tab8， Fig.26)。 6 RT-PCR 损伤组动物随着时间的延长， AQP4mRN

40、A 的表达逐渐升高， lh 开始 升高， 6h 达 24h 达高峰，持续到 3d 有所下降， 7d 趋于正常，与正常对照 组、假手术组 相比较有统计学意义（ p 0.05)(见 Tab8， Fig.27)。 42 附 图 Fig.8 The normal brain tissue Fig.9 The brain edema at lh (HEX400) aftert TBI (HE_0) Fig. 10 The brain edema at 6h Fig. 11 The brain edema at 12h aftert TBI (HE400) aftert TBI (HEx400) 43 Fig. 12 The