血清尿酸TBHBA法测定作业指导书.doc

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1、血清尿酸血清尿酸 TBHBATBHBA 法测定作业指导书法测定作业指导书 1 1. . 实实验验原原理理 使用 TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸）的酶比 色测定法。尿酸酶氧化 尿酸产生过氧化氢和 尿囊素。 在过氧化物酶存在下，过氧化氢氧化4-氨基安替比林 和 TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸），产生红色醌 亚胺（ Trinder 反应产物）。 尿酸酶 尿酸 + H2O + O2 尿囊素 + CO2 + H2O2 过氧化物酶 TBHBA + 4-氨基安替比林 + 2H2O2 醌 亚胺 + 3H2O 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备： 12 小时禁食。 2.2 类

2、型：血清，肝素或EDTA 血浆，尿液。 3 3. . 标标本本存存放放： 血清、血浆的稳定性： 2025保存 可稳定 3 天；48保存可稳定 7 天；-20保存可 稳定 6 个月。 对尿液用蒸馏水作110 稀释后检测， 结果乘 11 后报告。 4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂 申能尿酸测定试剂盒。货号：141 3007170 1 试剂 1（664ml）试剂 2（616ml） 6.1.1 试剂组成 试剂 1（R1）： 磷酸盐缓冲液 pH 7.0 100mmol/L TB

3、HBA (2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸 ) 1mmol/L 试剂 2（R2）： 磷酸盐缓冲液 pH7.0 100mmol/L 4-氨基安替比林 0.3mmol/L 铁氰化钾 10mmol/L 过氧化物酶（ POD） 2000U/L 尿酸酶 30U/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于28，若 无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后放于 仪器的冰箱中可以稳定30 天。当 546nm 处的试剂空 白吸光度小于 0.5 时，试剂可正常使用。 6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊 度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不

4、 能继续使用。 6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防 腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的 预防措施使用试剂 6.2 校准品：使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准 品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和 质控品 .SOP 文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器：奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000 生化分析仪项目测定参数 .SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000

5、生化分析仪操作规程 .SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. .质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以2S 为质控警 告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质 控规则参见室内质控操作规程.SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 TruCal U 复合校准品尿酸校准值校 准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可 靠检测结果，以 mol/L 报告。 1 12 2. . 参参考考值值范范围围：（ mol/L） 血清/血浆 女性 男性 成人 137363 2

6、14488 儿童 05 天 113470 113470 14 岁 101303 131470 511 岁 178381 178381 1214 岁 190363 190440 1517 岁 190381 268482 尿液 4.76mmol/d（正常饮食） 3.57mmol/d（低嘌呤饮食） 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差 别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参 考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义： 尿酸和尿酸盐是嘌呤代谢的最终产物。 痛风是高尿酸血症最常见的并发症，血清尿酸水平的升 高导致在关节处生成尿酸钠晶体。此外导致血液中尿酸 升高的原因还有：排泄功能下

7、降的肾脏疾病，饥饿，滥 用药物，过度饮酒或某些药物的使用。高尿酸水平也是 冠心病的间接危险因子之一。低尿酸血症较少见，其与 罕见的遗传代谢紊乱有关。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围： 17.81190mol/L。 14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标 准方法， AU1000 批内精密度小于 3%，总精密度小于 3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的 NCCLS 的规则。 批内精密 xsCV 批间精密 xsCV 度 n=20 (mol/ L) (mol/ L) (%) 度 n=20 (mol/ L) (mol/ L) (%) 样品 1 163.

8、62.51.55 样品 1 159.42.41.52 样品 2 318.24.00.74 样品 2 311.15.11.63 样品 3 600.74.60.77 样品 3 593.66.31.06 14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试 剂盒(x)，同时对 70 个样品进行 UA 检测，将检测结果 作方法学比较，其统计结果如下：y=1.02x- 26.2mol/L；r=0.997。 14.4 灵敏度：本试剂的检测限为17.8mol/L。 14.5 病人结果可报告范围： 17.81190mol/L。 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理： 本法对尿酸的检测范围为

9、17.81190mol/L。当样品测定值超过上限时，应将 样品用 9g/L 氯化钠溶液作 1+1 稀释，重新测定，结果 乘以 2。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理： 当尿酸测定值 720mol/L 时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医 生汇报。 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法对尿酸的检测范围为17.81190mol/L。 当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠 溶液作 1+1 稀释，重新测定，结果乘以2。 17.2 干扰物质 ：当样品中胆红素浓度 171mol/L， 血红蛋白浓度 1.00g/L，甘油三酯浓度 22.6mm

10、ol/L 时没有观察到干扰。抗坏血酸会干扰检测结果。如需克 服抗坏血酸的干扰， 推荐使用 DiaSys 公司提供的尿 酸液体试剂（ TOOS 法） 。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂 家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献 1.Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.208-14. 2. Newman DJ, Price CP. Renal function and nitrogen metabolites. In: Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999.p.1204-70 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集 后按检验科废物处置管理规定 执行。