磷含量测定.doc

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1、磷含量测定磷含量测定1 1 试剂试剂1.1 高氯酸。1.2 浓硫酸。1.3 30%过氧化氢。1.40.04mol /L 钼酸铵取钼酸铵 5g,加蒸馏水溶解成 100ml。1.5 还原剂称取亚硫酸氢钠 6g,亚硫酸钠 1.2g,1-氨基-2-茶酚磺酸0.1g,加蒸馏水溶解成 50ml,置棕色瓶中保存,一周内可用。1.6 磷标准液精确称取已干燥至恒重的磷酸二氢钾 439.3mg,加蒸馏水溶解,移入 100ml 容量瓶中,稀释至刻度,为贮备液(1mg 磷/ml)。精确量取贮备液 2ml,于 100ml 容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,为磷标准液(20g/ml)。2 2 操作操作2.1 样品A 群脑膜炎

2、球菌多糖菌苗成品测磷至少取三支安瓿溶解后混合使用。精确量取一定体积样品(含磷 420g)于刻度试管中,加 4 滴浓硫酸(约 0.08ml),加热至炭化,再加 2 滴高氯酸(约 0.06ml),消化至无色澄清,必要时可加 12 滴 30%过氧化氢,但最后必须将过氧化氢除尽。消化后稍置片刻,趁热另2ml 蒸馏水(如冷却后加水,需再加热),加 0.4ml0.04mol /L 钼酸铵,混匀,加 0.2ml 还原剂,混匀,另蒸馏水至6ml,1520 分钟后,于 820nm 波长比色。2.2 标准曲线精确量取磷标准液(20g /ml)0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml,分别置于刻度试管中,补加蒸馏水至 1ml,其余操作同样品,可得一标准曲线。3 3 计算计算从标准曲线查出样品相当标准液之 ml 数 A。样品磷含量(g /ml)=A20/样品 ml 数核酸含量测定取含 A 群脑膜炎多糖抗原 51mg /ml 溶液,采用紫外分光法于 260nm 波长测定 OD 值,按 E1%1cm=200 计算核酸含量。

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