河北省根结线虫发生种类与分布_陈书龙.doc

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1、0 C I fl AQRICULTURAE BOREAll-SiniCA 华北农学报。 2006, 21 (4): 91-94 河北省根结线虫发生种类与分布 陈书龙,李秀花,马娟 (河北省农林科学院植物保护研究所,河北保定 071000) 摘要 :对采自河北省不同地区的根结线虫种类、分布以及种群密度进行了调查,根据根结线虫二龄幼虫、雄虫和 雌虫的形态特征,明确了河北省根结线虫种类有南方根结线虫、北方根结线虫和花生根结线虫。其中南方根结线虫 发生最为普遍,几乎遍及全省各个地区,发生量很大,土壤线虫土壤的群体密度最高达 50 条 /g, 主要为害保护地黄瓜 和番茄等作物;北方根结线虫和花生根结线虫

2、仅局部发生,北方根结线虫主要为害花生和麻山药,花生根结线虫主要 为害花生和黄瓜,北方根结线虫与花生根结线虫在土壤中的发生量相对较少,土壤线虫土壤的群体密度最高达 10 条 / g 关键词 :南方根结线虫 ;北方根结线虫 ;花生根结线虫 ;鉴定;分布 中图分类号 :S435. 6 文献标识码 :A 文章编号: 1000 7091 (2006)04 0091 04 Identification and Distribution of Root-knot Nematodes in Hebei Province CHEN Shu-long, LI Xiu-hua? MA Juan (Institute

3、 of Plant Protection, Hebei Academy of Agricultural and Forestiy Sciences, Baoding 071000, China) Abstract: The species and distribution as well as population densities of root-knot nematodes (Meloidogyne spp.) were investigated in Hebei province. The results showed that the species occured in Hebei

4、 include Mincognita Mhapla and M. arenaria. M incognita is widly spread in Hebei and causes a serious damage to the vegetable production. The highest density of this nematode in soil reach to 50 second stage juveniles per gram soil. It maily causes damage to cucumber and tomato in the protected fiel

5、ds. Mhapla and Marenaria only partially distributed in Hebei. Mhapla maily causes damage to peanut and Diosoorea opposita wliile M arenaria only causes yield loss to peanut and cucumber. The population densitiy of M hapla and M arenaria are relatively lower, and the highest density of those nematode

6、s in soil reach to 10 second stage juveniles per gram soil. Keywords: Marenaria-, Mhapla; Identification; Distribution 植物寄生线虫主要为害植株根部,造成植株矮 小和顶端黄化,通常与缺肥、缺水、水淹、营养不良、 根腐真菌和病毒病的为害症状难以区分,一般不易 引起人们重视。对于迁移性线虫,在对植株造成严 重危害后,通常在植株枯萎或死亡前离开受害植株, 造成线虫病害诊断困难,所以在评估线虫的危害时, 它所 造成的损失远比我们想象的要高 1。近年来, 随着农业生产结构的调整,线虫为害

7、日趋严重,为害 植物的线虫种类多达 30 个属、数百种,几乎每一种 植物都会受到多种线虫的危害 1。为有效地防治植 物线虫病害,做到有的放矢,必须了解植物线虫病害 的发生种类。我国陕西、福建等省份均对本省的植 物线虫病害种类做过调查 2 3,并对当地线虫病害 的防治起到指导作用,有关河北省植物线虫的种类 及发生情况尚未见系统报道,因此笔者于 2003 2005 年对河北省的植物线虫种类进行了初步调查, 旨在摸清河北省植物线虫的发生 种类及分布,为植 物线虫病害的防治提供理论依据。本研宄仅就河北 收稿日期: 2006 03_02 基金项目:河北省农业科学院重点项目 ( A03 1 一 03 25

8、) 作者简介:陈书龙 ( 1963 ),男,河北阜城人,博士,研究员,主要从事线虫学研究工作。 AQRICULTURAE ? BOREOU-SmiCA 华 北 农 学 报 21 卷 省根结线虫病害 spp.)的发生种类与分 布进行报道。 1 材 料 和 方 法 i.i样本采集 20032005 年 6 月 10 月,在河北邯郸、邢台、 石家庄、衡水、保定、沧州、廊坊等 71 个市县共采集 标样 2303 份,涉及到的作物种类有粮食作物、果树、 蔬菜、杂草等 30 余种,为随机采样,土样采自土壤表 层 5 20 cm 处的植物根际,每一地块至少米集 5 个 点,混合后留约 1500 g组成一份样

9、本。将标样带回 实验室后及时进行线虫分离,如不能及时进行分离, 土样则在 4 6 条件下保存 ;在采集土样的同时, 采集部分根样。 1 . 2 线虫分离 将每一土样充分混合后称取 100 g, 采用浅盘法 分离根结线虫二龄幼虫或 雄虫。浅盘在 20 26C 室温条件下保存 24 h, 浓缩线虫液,在线虫计数皿中 计数,统计标样中的线虫数量,并将具有典型根结线 虫危害症状的根样,在解剖镜下直接解剖分离根结 线虫雌虫。 1 . 3 线虫固定与鉴定 将盛有线虫液的离心管放在 63 65 C 的水浴 锅中温热处理 3 min 杀死根结线虫的二龄幼虫或雄 虫,然后用 FA 固定液固定 4,并放入小玻璃瓶

10、中保 存,待鉴定。将二龄根结线虫幼虫、雄虫和雌虫做成 临时玻片,在显微镜下直接进行观察与测量。同时 在甘油中剪切雌虫会阴花纹部分在显微镜下进行观 察,综合根 结线虫二龄幼虫、雄虫和雌虫的形态特征 确定根结线虫种类。 2 结 果 与 分 析 2.1 河北省根结线虫种类 在 2 303 个土样中,有 153 个标样携带根结线 虫,根结线虫检出率达 6. 6%,综合其幼虫、雄虫与 雌虫的形态特征,并与已知种类进行比较 t5 61, 确定 河北省的根结线虫有南方根结线虫、北方根结线虫 和花生根结线虫3个种类,其主要形态特征描述如 下 :n为测量线虫数量,L为线虫体长, W为线虫体 宽, ST 为线虫口

11、针长度, DGO为背食道腺开口与口 针基部球的距离。 2.1.1 南方 根结线虫 (M. 幼虫 :n=20, L= 385 (370 420 )叱 1, W= 14. 5 (14 15 )rtn, ST= 11. 5 (11. 0 12. 2 )m, DGO=3. 2 (2. 3 3.6)toi。 头冠明显,口针纤细,中食道球椭圆形, 瓣门明显,多数直肠膨大明显,但也有个别虫体直肠 不膨大,尾透明,末端大多界限明显,尾有缢缩,尾尖 尖圆或钝圆。 雄虫 :n=20, L= 1344 (114 1580 )Mm, W= 34 (32 38 )rtn, ST= 24. 2 (21. 4 26. 2

12、)m, DGO=2. 8 (2. 5 3.8 於 m。 头冠大而圆,大多中部凹陷,头区不缢 缩,DGO 较短,口针基球与口针杆分界明显,基球圆 形至扁圆形。 雌虫 :n=20 , L=602(490680)toi , W=410(350 560)toi,ST=13. 8(13. 0 14. 5)m,DGO=3. 2(2. 5 4. 排泄孔位于口针基球对应处,口针的针 锥向背面弯曲。会阴花纹背弓高、线纹略成波浪状, 无明显侧线,但有些线纹分叉(图 1-A)。 A南方根结线虫 ;B.北方根结线虫 ;C.花生根结线虫 A. Meloidogyne incognita; B. Mhapla; C. M

13、arenaria 图 i 河北省不同根结线虫种类的雌虫会阴花纹 Fig. 1 The perineal pattern of different root- knot nematodes in Hebei 2.1.2 北方根结线虫 (M./zap/a ) 幼虫: n = 20, L=361 (345 425 )Mm, W= 14. 9 (14.0 15. 8)/. ST= 12. 1(11.4 12. 8 )m, DGO= 3. 9(3. 5 4. 9)rtn。 体较纤细,头冠窄,口针纤细,口 针基球圆,个别个体直肠膨大,有些则不膨大,尾透 明,末端常界限明显,尾端形状变异较大,往往有缢 缩,

14、尾尖钝圆。 雄虫 :n= 20, L= 1412(1220 1480 )rtn, W= 32 (28. 5 34. 5 ST= 19. 2 (18. 5 20. 5 )m, DGO= 4. 3(4. 05. 2)Pm。 头冠高而窄,头区与身体分界明 显,DGO 较长,口针锥尖而细,口针细长,基球圆形。 口针基杆圆筒状,口针基部球与口针基杆分界明显。 雌虫 :n=20, L= 652 (450 790 )也, W= 431 (250 540 )灿,ST= 13. 5 (12. 5 14. 2 )rtn, DGO=4. 5 (4. 0 5.0)toi。 会阴花纹背弓圆形较低,线纹平滑至波 浪形,侧

15、区往往形成翼 ;尾区有刻点(图 1-B)。 2. 1. 3 花生根结线虫 (M. amwrz_a ) 幼虫 :n=20, L =432 (410 459) Mm, W = 14 (13 15 ) Mm, ST = 13 陈书龙等:河北省根结线虫发生种类与分布 4 期 (12.514.0)Mm, DGO = 3.5(3 4)rtn。 头冠明显, 前段低平,头区与身体分界不明显,中食道球卵圆 形,瓣门明显,多数直肠膨大明显,但也有个别虫体 直肠不膨大,尾后端有缢缩,尾末端呈指状,尖圆。 雄虫 :n=20, L=1452(1120 1680)Pm, W=36 (30 41 )m, ST=22. 5

16、(21 25 )m, DGO=5. 3 (4. 5 5. 8)Pm。 头冠低平,头区与身体分界不明显 , DGO 较长,口针锥向后逐渐变宽,较粗壮,口针基杆圆筒 状,口针基部球前缘向后倾斜,口针基部球与口针基 杆分界不明显。 雌虫 : n = 20, L= 753 (690 1020 )rtn, W= 550 (450 660)m, ST=16(14. 5 17. 6)M-m, DGO=5 (4. 5 6. 花纹背弓扁平至圆形、线纹平滑至波浪 状 ,背线与腹线相交成角度,或间有断裂,呈肩状突 起(图 1C)。 2.2 不同种类根结线虫的分布区域 南方根结线虫在河北省分布最为广泛,遍及全 省11

17、 个地区,在 71 个县市中的 29 个县市发现南方 根结线虫 ;北方根结线虫发生于秦皇岛、唐山和保定 地区,而花生根结线虫则仅在石家庄地区的新乐县 和邯郸的永年县检测到。 2 . 3 不同种类根结线虫的发生与为害 不同根结线虫的寄主植物、发生率以及土壤发 生量列于表 1。南方根结线虫在河北省不仅发生普 遍,同时也是在河北省发生数量最大、受害寄主最为 广泛的种类。在河北,其主要为害黄瓜 、番茄、丝瓜、 青椒、芹菜等,土壤中发生量每 l g最高达 50 条; AGIO 3 A0RICULTURAE -I BOREflll-SmiCA 北方根结线虫主要为害花生和麻山药等作物,发生 频率较低,其发生

18、数量也相对较少,土壤中每 l g 最多仅 9 条 ;而花生根结线虫主要发生于花生与黄 瓜等作物上,其发生频率最低 0.21%,土壤中每 100g最大发生量10 条。 本试验结果还表明, 100%的南方根结线虫采自保护 地蔬菜田中,而在陆地蔬菜中未发现此线虫 ;北方根 结线虫全部采自大田中,而花生根结线虫部分采自 大 田花生,部分采自保护地黄瓜。 .南方根结线虫 .花生根结线虫; 北方根结线虫 ; 每个符号代表多个土壤样本 . Meloidogyne incognita; A M. hapla; . M. arenaria; each symbol represents more than on

19、e soil samples 图 2 河北省不同根结线虫的分布状况 Fig. 2 The distribution of different root-knot nematodes in Hebei 表 i 河北省不同根结线虫种类发生与危害 Tab. 1 Occurrence and damage of different root- knot nematodes in Hebei province 线虫种类 Nematode species 寄主植物 Host crops 总样本数 Total number of samples 带根结线虫样本数 Number of samples with

20、 nematodes 根结线虫发生率 ( ) Percentage of samples with nematodes 根结线虫发生量 (条 /l g) Number of nematodes 南方根结线虫 Meloidogyne incognita 黄瓜、北瓜、油菜、 大葱、芹菜、辣椒、 番茄、丝瓜、莴苣 2 303 105 4.56 15 5045 北方根结线虫 Mhapla 花生、麻山药 2 303 43 1.81 8873 花生根结线虫 M arenaria 花生、黄瓜 2 303 5 0.21 6-1021 3 讨 论 目前世界上己报道的根结线虫种类有 80 多种 , 我国记载的根结

21、线虫有效种有 39 种,其中大部分分 布于我国南部如广东、福建、湖南、广西、海南等省 份。河北省的记载种类有北方根结线虫和花生根结 线虫 7,本研宄首次明确南方根结线虫在河北的发 生,并且南方根结线虫己成为河北省的优势根结线 虫种类 ;另外在北京地区曾报道有爪哇根结线虫发 生 而河北省环绕北京,其气候条件相似,在本研 A C T A - AORICULTURAE 94 BOREALI-SiniCA _ _ 宄中未发现此种线虫,因此对此线虫在河北的分布 情况有必要进行进一步调查。 根结线虫种类多,其形态特征相似,雌虫会阴花 纹的特征是鉴别根结线虫种类的主要特征,但在不 同根结线虫种群之间变异较大

22、,因此结合雌虫的会 阴花纹与雄虫和幼虫的一些形态特征才能准确地对 根结线虫的种类做出正确的鉴定,甚至在必要时采 用分子生物学手段 8 91。 植物线虫病害的病原鉴定是病害治理的基础。 通过植物线虫病害的病原鉴定,明确其发生种类,依 据其种类及其发生规律,可制定出相应的防治策略。 本研宄 结果表明,河北省蔬菜上的主要根结线虫种 类为南方根结线虫,而北方根结线虫主要为害花生 以及中草药麻山药等,可依据不同作物上根结线虫 种类的发生规律制定相应的治理策略。由于蔬菜上 的南方根结线虫比北方根结线虫或花生根结线虫的 耐寒性差,通过在寒冷的冬季对保护地的土壤进行 适当的冷冻处理,可大大降低土壤中南方根结线

23、虫 的群体数量,但此方法对于蔬菜上的北方根结线虫 或花生根结线虫效果不佳。另外,由于不同线虫之 间的寄主范围不同,生产上可依据当地根结线虫的 优势种类选择适当的作物进行轮作,从而达到控制 土壤线虫群体 数量的目的。 土壤中的线虫种群数量不仅受到作物生育期的 影响,同时与作物的种类、品种以及环境条件等密切 相关。本研宄中的根结线虫发生率代表了根结线虫 在河北的发生普遍性,但其土壤中线虫发生量仅仅 表明线虫在某一特定地块的根结线虫密度,尚不能 代表对作物的为害以及给作物造成的损失情况,因 为根结线虫对作物的为害不仅同土壤中的初始密 华 北 农 学 报 21卷 度、蔬菜的种类或品种的抗病性有关,同时

24、还会受到 环境条件的影响。因此,在河北省根结线虫对不同 作物所造成的产量损失尚需作进一步的研宄。 参考文献: 1 Nickle W R Plant and insect nematodes M . New York, USA: Marcel Dekker, Inc, 1984: 1-12. L2王汝贤 .陕西主要农作物寄生线虫种类调查 t: .西北 农业学报, 1993, 2: 59 66. 3 张绍升 .福建省主要作物根结线虫病发生调查 J.福 建农业大学学报, 1995, 24: 307 309. 4 Southey J F. Laboratory methods for work wit

25、h plant and soil nematcxies M| . London, UK: Her Majesty s Stationery Office, 1986: 59-80. 5 Nickle W R Manual of agricultural nematology M . New York, USA: Marcel Dekker, Inc., 1991: 191-214. 6 Eisenback J D. Diagnostic characters useful in the identification of the four most common species of root

26、-knot nematodes (Meloidogyne spp. ) A . Sasser J N, and Carter C C. An Advanced Treatise on Meloidogyne: Volume I biology and controlM| . Raleigh, North Carolina, USA: North Carolina State University Graphics, 1985: 95 112. 7 刘维志 . 植物线虫志 M . 北京:中国农业出版社, 2003:313-459. 8 Cameiro R M D G, Tigano M S, R

27、andig O, et al. Identification and genetic diversity of Meloidogyne spp. (Tylenchida : Meloidogynidae) on coffee from Brazil, Central America and Hawaii J. Nematology, 2004, 6: 287 298. 9 Castagnone Sereno P, Vanlerberghe Masutti F, Leroy F. Genetic polymorphism between and within Meloidogyne species detected with RAPD markers J . Genome, 1994, 37: 904 -909.

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