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1、第十章第十章 制备高效液相色谱制备高效液相色谱Preparative high performance liquid chromatography一、制备色谱分类一、制备色谱分类制备液相色谱制备液相色谱高速逆流色谱高速逆流色谱制备薄层色谱制备薄层色谱制备气相色谱制备气相色谱制备液相色谱法柱色谱柱色谱低压及中压色谱低压及中压色谱制备高效液相色谱制备高效液相色谱二、制备高效液相色谱二、制备高效液相色谱1.概述概述成本高,分辨率高,常用于样品纯化成本高,分辨率高,常用于样品纯化的最后阶段。的最后阶段。适于微量组分的分离纯化适于微量组分的分离纯化使用较小颗粒的固定相(使用较小颗粒的固定相(5-30um
2、)通常在超载的情况下使用通常在超载的情况下使用分类分析型液相色谱仪用于制备分析型液相色谱仪用于制备 使用常规分析柱(使用常规分析柱(4.6*250mm),制备量),制备量5-100ug半制备液相色谱,可使用分析型仪器半制备液相色谱,可使用分析型仪器 使用半制备柱(使用半制备柱(10mm i.d.),制备量),制备量20mm i.d.),制备量),制备量 10g分析型液相色谱与制备型液相色谱的比较分析型液相色谱与制备型液相色谱的比较分析型液相色分析型液相色谱谱制制备备型液相色型液相色谱谱目的目的优优化目化目标标试样试样量量柱柱负负荷荷流速流速分离要求分离要求色色谱谱柱柱检测检测器器试样处试样处理
3、理理理论论基基础础样样品的定性定量品的定性定量最大的峰容量最大的峰容量0.5mg越少越好,越少越好,10-10-10-3g/g填料填料0.5-1.0ml/min基基线线分离分离内径内径5mm,3-10 m必需,高灵敏度,必需,高灵敏度,宽线宽线性性和流和流动动相一起摒弃相一起摒弃线线性色性色谱谱理理论论样样品的分离、富集、品的分离、富集、纯纯化化最大的通量最大的通量半制半制备备0.1kg越多越好,越多越好,10-3-10-1g/g填料填料10ml/min中等分离度,与中等分离度,与纯纯度回收率有关度回收率有关内径:内径:10-1600mm,10-20 m最好有,适于大流量最好有,适于大流量收集,流收集,流动动相循相循环环使用使用非非线线性色性色谱谱理理论论2.制备基础理论制备基础理论柱的质量负载能力柱的质量负载能力3.制备实施步骤制备HPLC参考文献:参考文献:1.李瑞萍等李瑞萍等.高效制备液相色谱柱技术的研究高效制备液相色谱柱技术的研究进展进展.化学进展化学进展.2004,16(2),2742.刘国诠刘国诠.制备液相色谱技术制备液相色谱技术