微生物农药病毒精选PPT.ppt

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1、关于微生物农药病毒第1页，讲稿共80张，创作于星期日 病毒是非细胞形式的最小有机体，是一种最原始的生命形态。一个病毒由两部分构成：内部是核酸，外部是衣壳，成分是蛋白质。结构简单。只含有一种类型的核酸（RNA或DNA）。没有细胞器和细胞构造、不能独立生活，只能在活的寄主细胞内才能复制增殖。1、什么是病毒？一、病毒的主要特征第2页，讲稿共80张，创作于星期日第3页，讲稿共80张，创作于星期日2、病毒与其他生物的主要区别、病毒与其他生物的主要区别病毒只含一种核酸，病毒只含一种核酸，DNADNA或或RNARNA，而其他生物一般同时，而其他生物一般同时含有含有DNADNA和和RNARNA两种核酸；两种核

2、酸；病毒依靠自身的核酸通过复杂的生物合成过程进行复制，病毒依靠自身的核酸通过复杂的生物合成过程进行复制，而不是通过二分裂或类似二分裂方式在特定的宿主活细而不是通过二分裂或类似二分裂方式在特定的宿主活细胞中进行繁殖；胞中进行繁殖；第4页，讲稿共80张，创作于星期日病毒缺乏完整的酶系统，不含核糖体，病毒缺乏完整的酶系统，不含核糖体，必须利用宿必须利用宿主细胞的核糖体合成自身蛋白质主细胞的核糖体合成自身蛋白质，脱离宿主不能进，脱离宿主不能进行任何形式的代谢活动；行任何形式的代谢活动；病毒病毒对抗菌素对抗菌素或其他对微生物代谢途径起作用的或其他对微生物代谢途径起作用的因子因子不敏感不敏感；病毒对宿主病

3、毒对宿主DNADNA复制有一定指导性。复制有一定指导性。昆虫病毒的主要组成成分是核酸和蛋白质，只有核酸能够繁殖和具有感染能力。第5页，讲稿共80张，创作于星期日3 3、病毒的复制、病毒的复制病病毒毒在在活活细细胞胞内内，以以其其基基因因为为模模板板，在在酶酶的的作作用用下下，分分别别合合成成病病毒毒基基因因及及蛋蛋白白质质，再再组组装装成成完完整整的的病病毒毒颗颗粒粒，这这种种方式称为方式称为复制（复制（replication)replication)。从从病病毒毒进进入入宿宿主主细细胞胞开开始始，经经过过基基因因组组复复制制和和病病毒毒蛋蛋白白合合成，至释放出子代病毒的全过程，称为一个成，至

4、释放出子代病毒的全过程，称为一个复制周期复制周期。病病毒毒复复制制周周期期：包包括括吸吸附附、侵侵入入、脱脱壳壳、大大分分子子合合成成、装装配与释放配与释放五个连续步骤。五个连续步骤。第6页，讲稿共80张，创作于星期日复制周期复制周期第7页，讲稿共80张，创作于星期日4、昆虫病毒分类与性状、昆虫病毒分类与性状病毒分类主要依据：病毒分类主要依据：1、病毒粒子特性、病毒粒子特性（1）病毒的形态特征病毒的形态特征（囊膜、粒子的大小、形状以及亚显微结构）（囊膜、粒子的大小、形状以及亚显微结构）；（2）生理生化和物理性质生理生化和物理性质；（3）病毒基因组病毒基因组（核酸的类型、（核酸的类型、特性）；特

5、性）；（4）病毒蛋白病毒蛋白（数量、大小、功能、活性）；（数量、大小、功能、活性）；（5）病病毒脂类和碳水化合物的含量及特性毒脂类和碳水化合物的含量及特性；（；（6）病毒基因组组成和复制病毒基因组组成和复制特性特性。2、病毒抗原性质、病毒抗原性质3、病毒生物学特性、病毒生物学特性 天然寄主范围、传播特性、分布、致病机理、引发的病理和组天然寄主范围、传播特性、分布、致病机理、引发的病理和组织病理学特点。织病理学特点。第8页，讲稿共80张，创作于星期日 属于属于13个病毒科，个病毒科，2个病毒亚科，个病毒亚科，21个病毒属个病毒属1、根据病毒核酸的类型分为：、根据病毒核酸的类型分为：（1）双链）双

6、链DNA病毒（有囊膜）：病毒（有囊膜）：杆状病毒科；杆状病毒科；多分多分DNADNA病毒科；病毒科；痘病毒科；痘病毒科；泡囊病毒科；泡囊病毒科；（2）双链）双链DNA病毒（无囊膜）：病毒（无囊膜）：虹彩病毒科；虹彩病毒科；细尾病毒科细尾病毒科 （3）单链）单链DNA病毒（无囊膜）病毒（无囊膜）：细小病毒科：细小病毒科二、昆虫病毒分类：第9页，讲稿共80张，创作于星期日（4）双链）双链 RNA病毒病毒：呼肠孤病毒科；呼肠孤病毒科；二分二分RNARNA病毒科病毒科（5）单链）单链RNA病毒病毒：微微RNARNA病毒科；病毒科；野田村病毒科；野田村病毒科；T4T4病毒科病毒科（6）DNA和和RNA反

7、转录病毒反转录病毒，包括：，包括：前病毒科；前病毒科；变位病毒科变位病毒科第10页，讲稿共80张，创作于星期日2、根据包含体在寄主细胞中的部位，分为：（1 1）核型多角体病毒）核型多角体病毒(NPV)(NPV)寄生在寄主寄生在寄主细胞核细胞核内，包含体内含有多个杆状病毒粒子。内，包含体内含有多个杆状病毒粒子。（2 2）质型多角体病毒）质型多角体病毒(CPV)(CPV)寄生在寄主寄生在寄主细胞质细胞质中，包含体内含有多个球状病毒粒子。中，包含体内含有多个球状病毒粒子。（3 3）颗粒体病毒）颗粒体病毒(GV)(GV)在感染的在感染的细胞核里和细胞质里均可发育形成细胞核里和细胞质里均可发育形成。多为

8、椭圆形，。多为椭圆形，也有肾形，每个包含体一般仅含一个杆状病毒粒子。也有肾形，每个包含体一般仅含一个杆状病毒粒子。（4 4）无包含体病毒）无包含体病毒 如昆虫浓核病毒、感染病毒的寄主细胞核膨胀、核内物质呈如昆虫浓核病毒、感染病毒的寄主细胞核膨胀、核内物质呈浓密、丰盈现象。浓密、丰盈现象。（5 5）昆虫痘病毒）昆虫痘病毒(EPV)(EPV)于于细胞质内细胞质内，但纺锤形包涵体是不包埋病毒粒子的。，但纺锤形包涵体是不包埋病毒粒子的。第11页，讲稿共80张，创作于星期日昆虫病毒包括两类昆虫病毒包括两类昆虫病原病毒昆虫病原病毒虫媒病毒虫媒病毒昆虫病原病毒第12页，讲稿共80张，创作于星期日昆虫病原病毒

9、：是指以昆虫为宿主并对昆虫有致病性的是指以昆虫为宿主并对昆虫有致病性的病毒，超显微没有细胞结构，在活细胞里专性寄生的大分子病毒，超显微没有细胞结构，在活细胞里专性寄生的大分子微生物。微生物。在活体外具有一般大分子的特征，进入宿主细胞在活体外具有一般大分子的特征，进入宿主细胞又具有生命特征又具有生命特征 80%的昆虫病毒都是农林业中常见的鳞翅目的昆虫病毒都是农林业中常见的鳞翅目害虫的病原体，国此是害虫生物防治的巨大资源库。害虫的病原体，国此是害虫生物防治的巨大资源库。第13页，讲稿共80张，创作于星期日三、昆虫病毒研究历史和现状三、昆虫病毒研究历史和现状家家蚕蚕和和蜜蜜蜂蜂黄黄疸疸病病。中中国国

10、陈陈旉旉所所著著农农书书(1149)中中即即有有关关于于家家蚕蚕“高节高节”、“脚肿脚肿”病的记载，即中国农民俗称的病的记载，即中国农民俗称的“脓病脓病”。20世纪初才证明世纪初才证明“脓病脓病”病原是病原是核型多角体病毒核型多角体病毒1949年年加拿大加拿大引进欧洲引进欧洲云杉叶蜂云杉叶蜂NPV(核多角体病毒核多角体病毒)控制害虫。控制害虫。1940-60年代主要应用细菌防治，年代主要应用细菌防治，70年代才利用病毒年代才利用病毒。1981年年，对对病病毒毒病病的的描描述述，几几乎乎遍遍及及昆昆虫虫纲纲的的各各个个目目，记记载载了了800多种多种寄主昆虫和螨类的寄主昆虫和螨类的1200种病毒

11、病。种病毒病。1980年代年代，我国我国已经分离出已经分离出200种以上的昆虫病毒。种以上的昆虫病毒。第14页，讲稿共80张，创作于星期日俄：黄叶蜂NPV、甘蓝夜盗蛾、舞毒蛾、美国白蛾、天幕毛虫等。捷：美国白蛾GV法：松带蛾CPV日：1974年注册了赤松毛虫CPV，直升飞机喷洒。还对茶小卷叶蛾、茶卷叶蛾GV进行研究利用。埃及、中：斜纹夜蛾NPV新西兰：牧草蝙蝠蛾WNPV斐济：独角仙病毒第15页，讲稿共80张，创作于星期日 国国际际上上已已报报道道过过的的昆昆虫虫病病毒毒有有1600多多种种，分分属属于于6个个目目的的昆昆虫虫，60%为为杆杆状状病病毒毒，能能引引起起1100种种昆昆虫虫和和螨螨

12、类类发发病病，可可控控制制近近30%的的粮粮食食和纤维作物上的主要害虫。和纤维作物上的主要害虫。至少有至少有60多株进入大田应用或示范，约多株进入大田应用或示范，约20多株制成杀虫剂，仅多株制成杀虫剂，仅就俄罗斯而言，就俄罗斯而言，1990年已有年已有14种病毒杀虫剂种病毒杀虫剂，其中有，其中有7种年总产量种年总产量为为60多吨，防治面积多吨，防治面积150万公顷。万公顷。1971年，棉铃虫年，棉铃虫NPV在美国成为第一个商品化制剂在美国成为第一个商品化制剂，1987年美年美国加强了对舞毒蛾、黄杉毒蛾、苜蓿尺蠖等国加强了对舞毒蛾、黄杉毒蛾、苜蓿尺蠖等NPV的研究。的研究。第16页，讲稿共80张

13、，创作于星期日 我国我国已报道已报道220种，种，250株株，绝大部分为杆状病毒，绝大部分为杆状病毒，寄生在寄生在70多种寄主中。多种寄主中。始于始于60年代年代，先是调查、收集，先是调查、收集，70年代后做了大量工年代后做了大量工作。作。1987年我国将棉铃虫年我国将棉铃虫NPV投入商品化生产。投入商品化生产。北京北京、广东广东(斜纹夜蛾斜纹夜蛾NPV)、武汉武汉、华东华东(棉铃虫棉铃虫NPV)都进行过卓有成效的工作。都进行过卓有成效的工作。我国有我国有20株进入大田应用或示范株进入大田应用或示范，7株制成制剂株制成制剂，先后，先后建立建立5座工厂，一种新的生物农药产业。座工厂，一种新的生物

14、农药产业。第17页，讲稿共80张，创作于星期日从从防治对象防治对象来看，可分为来看，可分为二个阶段二个阶段:4060年代：食叶性年代：食叶性森林害虫森林害虫；70年代后：年代后：农业害虫农业害虫。从从病毒生产方式病毒生产方式，二个阶段二个阶段:40年代到年代到60年代：年代：野外采集野外采集；之后：之后：人工饲养虫制成杀虫剂人工饲养虫制成杀虫剂。第18页，讲稿共80张，创作于星期日四、病毒杀虫剂的优点四、病毒杀虫剂的优点1)选择性好：选择性好：2)不损伤天敌，不易引起生态平衡的破坏。2)传播性强：传播性强：很快扩散蔓延，造成流行病。3)持久性长：持久性长：4)包涵体可抵抗不良环境，具有非常好的

15、稳定性。4)经济效益高：经济效益高：剂量低，使用简便。5)安全无害：安全无害：无残留。第19页，讲稿共80张，创作于星期日五、病毒杀虫剂的缺点五、病毒杀虫剂的缺点1)防防治治效效果果慢慢：10天，潜伏期较长，往往降低其商业价值和实际效果。2)防防治治谱谱窄窄：不能成功地用来防治种植地区生长季节内繁衍的多种害虫。3)受到温度、阳光等环境条件影响较大环境条件影响较大。4)不易生产不易生产（活体生物培养）。第20页，讲稿共80张，创作于星期日存在的安全隐患昆虫病毒、其它的无脊椎动物、脊椎动物和植物病毒之间并无明确的界限。日本乙型脑炎病毒通过三带喙库蚊传染给人类。黄热病毒和登革热病毒通过伊蚊传染人类。

16、呼肠孤病毒科呼肠孤病毒科环状病毒属的全体成员、朋扬病毒科朋扬病毒科的全体成员、弹状病毒科弹状病毒科水疱病毒属和狂犬病毒属的部分成员，植物呼肠孤植物呼肠孤病毒病毒等，都是既能使昆虫致死，又能寄生植物；野田村病毒野田村病毒既能使昆虫发病，又能使哺乳动物发病致死。第21页，讲稿共80张，创作于星期日六、六、DNADNA病毒杀虫剂病毒杀虫剂一、核型多角体病毒（一、核型多角体病毒（NPVNPV）二、颗粒体病毒（二、颗粒体病毒（GVGV）三、昆虫痘病毒（三、昆虫痘病毒（EPVEPV）四、细小病毒（四、细小病毒（DNVDNV）五、其他五、其他DNADNA杀病毒杀病毒 1 1、多分、多分DNADNA病毒科病毒

17、科 2 2、虹彩病毒科、虹彩病毒科 3 3、泡囊病毒科、泡囊病毒科 4 4、细尾病毒科、细尾病毒科 5 5、棕榈独角仙病毒、棕榈独角仙病毒第22页，讲稿共80张，创作于星期日(1)杆状病毒杆状病毒 A亚组亚组核型多角体病毒核型多角体病毒(NPV)，如家蚕，如家蚕NPV，棉铃虫，棉铃虫NPV，松毛虫，松毛虫NPV，春尺蠖，春尺蠖NPV，舞毒蛾，舞毒蛾NPV，斜纹夜蛾，斜纹夜蛾NPV，粘虫，粘虫NPV，中国刺蛾，中国刺蛾NPV等；等；B亚组亚组颗粒体病毒颗粒体病毒(GV)，如黄地老虎，如黄地老虎GV，菜粉蝶，菜粉蝶GV，茶小卷叶蛾，茶小卷叶蛾GV等；等；C亚组亚组非包涵体核型杆状病毒非包涵体核型杆

18、状病毒，如印度棕榈独角仙病，如印度棕榈独角仙病毒；毒；D亚组亚组非包涵体多分体非包涵体多分体DNA基因组核型杆状病毒基因组核型杆状病毒，如甜，如甜菜尺蠖姬蜂病毒。菜尺蠖姬蜂病毒。第23页，讲稿共80张，创作于星期日感染病毒的幼虫形成大量包含体，扩散、传播杆状病毒有宿主专一性，宿主仅限于节肢动物，对脊椎动物、植物完全不感染应用安全主要见于昆虫体内，是已知昆虫病毒中类群最大、发现最早、研究最多，且实用意义最大的主要应用：1）作为载体，表达外源基因 2）作为杀虫剂，有效地控制农业害虫的发生，并且对环境不造成污染杆状病毒杀虫剂的的特点第24页，讲稿共80张，创作于星期日1)研发现状研发现状 二十世纪5

19、0年代，我国开始昆虫杆状病毒的基础性和应用性研究。有20种左右杆状病毒杀虫剂进入田间试验或实际应用，包括：棉铃虫、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、苜蓿银纹夜蛾、春尺蠖、舞毒蛾、木毒蛾、美国白蛾、甘蓝夜蛾、茶毛虫、灰茶尺蠖、茶尺蠖、大蓑蛾、油桐尺蠖等核型多角体病毒。小菜蛾、菜青虫、黄地老虎、杨扇舟蛾、玉米螟、茶蚕等颗粒体病毒。第25页，讲稿共80张，创作于星期日2)昆虫表现症状昆虫表现症状 初期：行动迟缓，缺乏食欲，体躯肿胀，变黄或乳白色，皮肤变脆，组织液化，一触即破。后期：趋向最高处，如植株项端，头朝下倒挂。第26页，讲稿共80张，创作于星期日3)杀虫活性杀虫活性 7个目，290多种害虫，主要为鳞翅目，其

20、次为膜翅目、双翅目、鞘翅目和直翅目昆虫。LD50：50100微克/头。害虫死亡高峰在施药后的4-5天。甜菜夜蛾核型多角体病毒只对甜菜夜蛾有效，药后4天达到死亡高峰；棉铃虫病毒只对夜蛾属的昆虫有效，死亡高峰在第5天 第27页，讲稿共80张，创作于星期日广谱性的杆状病毒：苜蓿银纹夜蛾病毒广谱性的杆状病毒：苜蓿银纹夜蛾病毒 对10多种害虫有效。克服防治谱窄的部分弱点 但活性低12个数量级。研究最为深入 第28页，讲稿共80张，创作于星期日重要品种：重要品种：（1）核多角体病毒）核多角体病毒(nuclear polyhedrosis viruses，简称简称NPV)是是研究最早研究最早、最详细的一个类

21、群，我国至少已发现、最详细的一个类群，我国至少已发现60多种，多种，已有比较成功的病毒制剂。已有比较成功的病毒制剂。包涵体的形态结构包涵体的形态结构：NPV的包涵体称多角体的包涵体称多角体(polyhedron)，简，简称称IB或或PIB，是在感染的细胞核中产生的包涵和保护病毒粒子的，是在感染的细胞核中产生的包涵和保护病毒粒子的一团蛋白质，呈多边形，具梭角。一团蛋白质，呈多边形，具梭角。常因寄主种类的不同而不同常因寄主种类的不同而不同。常见的有三角形、四角形、五。常见的有三角形、四角形、五角形、六角形、立方形、近圆形和不规则形。角形、六角形、立方形、近圆形和不规则形。第29页，讲稿共80张，创

22、作于星期日不同多角体的形状第30页，讲稿共80张，创作于星期日同一品系或分离株病毒的多角体的形状是趋于稳定的同一品系或分离株病毒的多角体的形状是趋于稳定的，相同寄，相同寄主而不同品系或分离株病毒的多角体的形状和平均大小就可能判别比主而不同品系或分离株病毒的多角体的形状和平均大小就可能判别比较大。较大。如从盗毒蛾幼虫体分离的如从盗毒蛾幼虫体分离的NPV的两菌株，一个多角体是多的两菌株，一个多角体是多形状的，另一个是立方形的，而用它们混合感染盗毒蛾幼虫时，在同形状的，另一个是立方形的，而用它们混合感染盗毒蛾幼虫时，在同一感染细胞内并未同时发现两个病毒株，因而一感染细胞内并未同时发现两个病毒株，因而

23、多角体的形状可以作多角体的形状可以作为辨别一个病毒品系或分离株的标志。为辨别一个病毒品系或分离株的标志。多角体的表面有膜，若多角体被溶解，则会留下囊状空泡，再多角体的表面有膜，若多角体被溶解，则会留下囊状空泡，再延长时间，也会被溶解，与核膜相似。延长时间，也会被溶解，与核膜相似。第31页，讲稿共80张，创作于星期日病毒粒子的形态结构 在在NPV中，每个囊膜可以包封一个至多个核衣壳，中，每个囊膜可以包封一个至多个核衣壳，一个囊膜内有多个排列成束的核衣壳的，常称为一个囊膜内有多个排列成束的核衣壳的，常称为病病毒束毒束.获得囊膜的病毒粒子被随机的获得囊膜的病毒粒子被随机的包埋在蛋白质构成的结包埋在蛋

24、白质构成的结晶状多角体之内晶状多角体之内，一个多角体可以包埋一个至多个病毒，一个多角体可以包埋一个至多个病毒粒子。而未被包埋的病毒粒子则只有核衣壳。粒子。而未被包埋的病毒粒子则只有核衣壳。第32页，讲稿共80张，创作于星期日核型多角体病毒的包涵体呈多角形，有两种包埋形式：核型多角体病毒的包涵体呈多角形，有两种包埋形式：1、一种是多角体内包埋着许多单个的病毒粒（单、一种是多角体内包埋着许多单个的病毒粒（单粒包埋型），简称粒包埋型），简称SEV2、另一种是、另一种是1个包膜内包裹着多个核壳个包膜内包裹着多个核壳(一般称为病一般称为病毒束毒束)，成束地被包埋于多角体蛋白基质中，成束地被包埋于多角体蛋

25、白基质中(多粒包埋型多粒包埋型)，简称，简称MEV。包涵体的大小为包涵体的大小为0.515微米。微米。C亚组与亚组与 D亚组都不亚组都不形成包涵体。形成包涵体。第33页，讲稿共80张，创作于星期日第34页，讲稿共80张，创作于星期日棉铃虫棉铃虫NPV的病毒束可有的病毒束可有2-6个核衣壳，最多达个核衣壳，最多达20 多多个；斜纹夜蛾为个；斜纹夜蛾为2-10个；盗毒蛾为个；盗毒蛾为6-10个。个。两种不同包埋型的病毒，与不同的病毒品系或分离株两种不同包埋型的病毒，与不同的病毒品系或分离株有关，是由遗传性决定的。有关，是由遗传性决定的。同一种昆虫的两种不同包埋型的同一种昆虫的两种不同包埋型的NPV

26、，它们对寄主的，它们对寄主的感染力、专一性、对环境的抵抗力以及多角体蛋白的化感染力、专一性、对环境的抵抗力以及多角体蛋白的化学持性、血清学特征等方面都可能有较大的差异学持性、血清学特征等方面都可能有较大的差异。第35页，讲稿共80张，创作于星期日扫描电子显微镜下的隐纹稻苞虫NPV的多角体第36页，讲稿共80张，创作于星期日1、对不同化学药剂具有高度抵抗力、对不同化学药剂具有高度抵抗力2、不溶于水及多种有机溶剂、不溶于水及多种有机溶剂3、不被细胞或细胞蛋白酶分解、不被细胞或细胞蛋白酶分解4、在、在pH值值22.9时，可被胰蛋白酶破坏时，可被胰蛋白酶破坏5、溶于强酸和强碱溶液、溶于强酸和强碱溶液6

27、、比重大于水，对低温有较强的抗力，抗高温能力差、比重大于水，对低温有较强的抗力，抗高温能力差7、不溶于昆虫血淋巴，所以将其接种于昆虫的血腔，幼虫不会感染。、不溶于昆虫血淋巴，所以将其接种于昆虫的血腔，幼虫不会感染。8、必须通过幼虫食入，经消化液消化后，才能释放出有感染、必须通过幼虫食入，经消化液消化后，才能释放出有感染力的病毒粒子。力的病毒粒子。核多角体的理化性质核多角体的理化性质第37页，讲稿共80张，创作于星期日9、经干燥后，可以保存多年性质不变，如家蚕多角体、经干燥后，可以保存多年性质不变，如家蚕多角体在无水氯化钙中保存在无水氯化钙中保存37年，其在碳酸钠中的溶解性不变。年，其在碳酸钠中

28、的溶解性不变。10、可以抵抗细菌的腐败作用，在提纯或死虫尸为细、可以抵抗细菌的腐败作用，在提纯或死虫尸为细菌污染时，多角体一般不受收破坏。菌污染时，多角体一般不受收破坏。11、在昆虫幼虫消化认中的溶解性不受寄主范围的限制，、在昆虫幼虫消化认中的溶解性不受寄主范围的限制，对非敏感昆虫也是如此。对非敏感昆虫也是如此。12、有较强的折光性，成熟的多角体不易被一般染料着、有较强的折光性，成熟的多角体不易被一般染料着色，但经酸碱处理一可为一些染料所强染。色，但经酸碱处理一可为一些染料所强染。第38页，讲稿共80张，创作于星期日侵染途径：侵染途径：通过幼虫通过幼虫口服侵入口服侵入。多角体在易感虫体中肠内迅

29、速。多角体在易感虫体中肠内迅速溶解，侵入上皮细胞，并出现最初的复制。溶解，侵入上皮细胞，并出现最初的复制。在侵染昆虫细胞核内充满大量的多角体。体内组织在侵染昆虫细胞核内充满大量的多角体。体内组织液化。液化。专化性强，一般只感染同种昆虫。专化性强，一般只感染同种昆虫。第39页，讲稿共80张，创作于星期日中毒症状：中毒症状：初期无明显变化，渐而行动迟缓，食欲减退，体色变淡或初期无明显变化，渐而行动迟缓，食欲减退，体色变淡或油光色，血淋巴变乳白色。油光色，血淋巴变乳白色。体内组织液化，躯体前端膨大，皮肤易裂，破后流出乳白色体内组织液化，躯体前端膨大，皮肤易裂，破后流出乳白色或褐色浓绸液体，无特殊臭味

30、或褐色浓绸液体，无特殊臭味。棉铃虫幼虫的环节处被核型多角体病毒感染棉铃虫幼虫的环节处被核型多角体病毒感染第40页，讲稿共80张，创作于星期日第41页，讲稿共80张，创作于星期日 1987年建成我国第一座棉铃虫病毒杀虫剂实验工厂，开始步入商品化生产 1993年，由中国科学院武汉病毒所同湖北蒋湖农场登记了我国第一个昆虫病毒杀虫剂产品棉铃虫核型多角体病毒杀虫剂。随后共有12个昆虫病毒制剂品种登记注册，1个原药品种获得登记。开发最成功的是棉铃虫病毒杀虫剂，十多年里，累计生产2000余吨，累计推广面积超过1000万亩次。推广应用：第42页，讲稿共80张，创作于星期日 中国科学院动物研究所与河南省济源白云

31、实业有限公司联合开展的昆虫病毒杀虫剂产业化合作项目2 2吨吨/年年50005000亿亿pib/pib/克棉铃虫核型多角体病毒原粉克棉铃虫核型多角体病毒原粉获得国家发改委的生产核准.被列入农业部首批公布的无公害农产品生产推荐农药被列入农业部首批公布的无公害农产品生产推荐农药品种和植保机械名单中品种和植保机械名单中。第43页，讲稿共80张，创作于星期日（2）颗粒体病毒）颗粒体病毒(GV)最是是法国人于最是是法国人于1926年在患病的大菜粉蝶中发现的。年在患病的大菜粉蝶中发现的。主要存在于鳞翅目昆虫幼虫中，至主要存在于鳞翅目昆虫幼虫中，至1980年，全世界已年，全世界已发现发现100种昆虫感染这种病

32、毒，其中只有一种是膜翅种昆虫感染这种病毒，其中只有一种是膜翅目昆虫目昆虫我国从我国从20多种昆虫中发现这种病毒病多种昆虫中发现这种病毒病有较强的致病性。有较强的致病性。第44页，讲稿共80张，创作于星期日包涵体的形态颗粒体是包涵和保护病毒粒子的颗粒体是包涵和保护病毒粒子的结晶状蛋白质结晶状蛋白质，体，体积较多角体小，呈卵形、椭圆形、肾形，有时也出现长积较多角体小，呈卵形、椭圆形、肾形，有时也出现长角状、角状、分叉状、不规则形、多角形等。角状、角状、分叉状、不规则形、多角形等。在同一昆虫体内，颗粒体的体积也有不同。在同一昆虫体内，颗粒体的体积也有不同。一个颗粒体仅包埋一个（偶尔一个颗粒体仅包埋一

33、个（偶尔2个）病毒粒子。个）病毒粒子。第45页，讲稿共80张，创作于星期日稻纵卷叶螟稻纵卷叶螟GV颗粒体颗粒体第46页，讲稿共80张，创作于星期日菜粉蝶GV颗粒体经弱碱溶解后释放出的病毒粒子第47页，讲稿共80张，创作于星期日颗粒体的形态结构颗粒体的形态结构病毒粒子呈杆状，常弯曲，大小因寄主种类不同而异。病毒粒子从颗粒体中释放出来后，其直径和长度有增大的现象，病毒粒子脱去囊膜，其长度也会增加。如黄地老虎GV，完整的病毒粒子大小为31070nm，脱去囊膜后，核衣壳大小为32545nm。每个病毒粒子 两层膜包被：囊膜、衣壳；两层膜之间有空隙。第48页，讲稿共80张，创作于星期日1、比重大于水2、不

34、溶于水及多种有机溶剂3、强酸和强碱条件下迅速溶解，并使粒子变性失活4、耐低温，高温和紫外线易使粒子失活5、有包涵体的颗粒体病毒，在外界环境中较稳定，在室内和野外土壤中的存活时间长达数年6、没有包涵体保护的颗粒体，稳定性差。颗粒体病毒的理化性质颗粒体病毒的理化性质第49页，讲稿共80张，创作于星期日侵染途径：侵染途径：口服侵入口服侵入易感虫体，颗粒在中肠内溶解，粒子通过易感虫体，颗粒在中肠内溶解，粒子通过肠道柱形细胞的微绒毛侵入细胞，在细胞核中增殖，新肠道柱形细胞的微绒毛侵入细胞，在细胞核中增殖，新形成的粒子释放入血液，继发感染。形成的粒子释放入血液，继发感染。第50页，讲稿共80张，创作于星期

35、日中毒症状：中毒症状：初期无明显病症，发展出现反应迟钝和停止取初期无明显病症，发展出现反应迟钝和停止取食，在不同组织中颗粒体大量累积，体色有明显变食，在不同组织中颗粒体大量累积，体色有明显变化，腹面出现淡白或乳白色或带黄色。体壁出现斑化，腹面出现淡白或乳白色或带黄色。体壁出现斑点或变色，身体变软，皮肤易破。点或变色，身体变软，皮肤易破。第51页，讲稿共80张，创作于星期日对昆虫有很强的致病性，常常在野外爆发自然流行病，对昆虫有很强的致病性，常常在野外爆发自然流行病，抑制寄主种群的发展，实验室饲养昆虫种群也往往因受抑制寄主种群的发展，实验室饲养昆虫种群也往往因受GV感染而大量死亡感染而大量死亡作

36、感染力测定常以死虫尸内含物的稀释倍数作剂量作感染力测定常以死虫尸内含物的稀释倍数作剂量单位。单位。小龄幼虫比大龄幼虫敏感，大龄幼虫受感染后，可小龄幼虫比大龄幼虫敏感，大龄幼虫受感染后，可以化蛹并发育为成虫，但受感染的蛹常常死亡。以化蛹并发育为成虫，但受感染的蛹常常死亡。经血腔接种，幼虫不受感染。经血腔接种，幼虫不受感染。专一性比专一性比NPV强强，交叉感染只限于种内或属内。，交叉感染只限于种内或属内。第52页，讲稿共80张，创作于星期日(3)痘病毒痘病毒 病毒形态相似，大小随寄主不同而不同病毒形态相似，大小随寄主不同而不同 鳃角金龟子痘病毒：鳃角金龟子痘病毒：400250毫微米毫微米 鳞翅目和

37、直翅目痘病毒：鳞翅目和直翅目痘病毒：350250毫微米毫微米 双翅目痘病毒：双翅目痘病毒：320230毫微米毫微米 包涵体有包涵体有2类：类：球形体（包埋病毒粒子）球形体（包埋病毒粒子）纺缍体（不含病毒粒子）纺缍体（不含病毒粒子）均在细胞质均在细胞质中形成中形成第53页，讲稿共80张，创作于星期日1)害虫症状与作用机理害虫症状与作用机理 害虫食入包涵体，包涵体进入消化道后溶解，散出病毒害虫食入包涵体，包涵体进入消化道后溶解，散出病毒粒子。粒子在体腔感染寄主脂肪体、气管上皮细胞和生殖腺粒子。粒子在体腔感染寄主脂肪体、气管上皮细胞和生殖腺等。等。害虫染害后，体呈恶白色，脂肪体呈泡沫状，血细胞增害虫

38、染害后，体呈恶白色，脂肪体呈泡沫状，血细胞增大，病毒在脂肪体细胞和血细胞的细胞质内增殖。大，病毒在脂肪体细胞和血细胞的细胞质内增殖。病毒传递主要通过口服和接种进行，没有卵传现象。病毒传递主要通过口服和接种进行，没有卵传现象。第54页，讲稿共80张，创作于星期日2)杀虫活性杀虫活性 Herpin和和Vago于于1983发现，可感染发现，可感染鞘翅目鞘翅目、鳞翅目、鳞翅目、双翅目双翅目和和直翅目昆虫直翅目昆虫 我国新疆地区发现的新疆西伯利亚蝗寄主。我国新疆地区发现的新疆西伯利亚蝗寄主。第55页，讲稿共80张，创作于星期日(4)虹彩病毒虹彩病毒 病病毒毒粒粒子子为为二二十十面面体体，直直径径1202

39、00毫毫微微米米，核核心为双股脱氧核糖核酸，无膜，无包涵体。心为双股脱氧核糖核酸，无膜，无包涵体。代代表表种种为为：二二化化螟螟虹虹彩彩病病毒毒，是是鳞鳞翅翅目目幼幼虫虫感感染虹彩病毒的第一个例子。发现于日本九州。染虹彩病毒的第一个例子。发现于日本九州。第56页，讲稿共80张，创作于星期日1)昆虫症状与作用机理昆虫症状与作用机理 食食入入病病毒毒感感染染，粒粒子子大大量量复复制制，在在组组织织内内形形成成大量结晶体，活体昆虫出现虹彩颜色。大量结晶体，活体昆虫出现虹彩颜色。感感染染部部位位主主要要在在脂脂肪肪细细胞胞，其其次次为为皮皮肤肤上上皮皮细细胞胞、神经细胞和肌肉细胞。神经细胞和肌肉细胞。

40、第57页，讲稿共80张，创作于星期日2)杀虫活性杀虫活性 感感染染28种种双双翅翅目目，10多多种种鳞鳞翅翅目目，也也可可感感染染鞘鞘翅翅目目、半翅目和膜翅目昆虫。半翅目和膜翅目昆虫。主主要要寄寄主主有有：棉棉铃铃象象甲甲、叶叶跳跳虫虫、深深山山叶叶蝉蝉、稻稻绿绿叶叶跳虫、黑尾叶蝉、小褐飞虱，蚊虫。跳虫、黑尾叶蝉、小褐飞虱，蚊虫。第58页，讲稿共80张，创作于星期日(5)细小病毒细小病毒 病病毒毒粒粒子子为为多多轴轴体体，直直径径约约22毫毫微微米米，核核心心为为单单股股DNA，无膜，无包涵体。，无膜，无包涵体。只有只有3个种，其中只有个种，其中只有浓核症病毒浓核症病毒侵染昆虫。侵染昆虫。第5

41、9页，讲稿共80张，创作于星期日1)害虫症状与作用机理害虫症状与作用机理 幼虫不肿胀而呈萎缩形，死后呈茶褐色，有时为暗红色。幼虫不肿胀而呈萎缩形，死后呈茶褐色，有时为暗红色。可可与与菜菜粉粉蝶蝶颗颗粒粒体体病病毒毒混混合合感感染染，也也可可单单独独感感染染，混混合合感感染染多多呈呈肿肿胀胀型，单独感染呈萎缩型。型，单独感染呈萎缩型。害虫死亡较快，在害虫死亡较快，在25下，染虫后下，染虫后23天即可死亡。天即可死亡。第60页，讲稿共80张，创作于星期日2)杀虫活性杀虫活性 国外：蜡螟浓缩核症病毒和鹿眼蝶浓缩核症病毒。国外：蜡螟浓缩核症病毒和鹿眼蝶浓缩核症病毒。国内：菜粉蝶浓缩核症病毒国内：菜粉蝶

42、浓缩核症病毒 可感染：鳞翅目、鞘翅目、膜翅目害虫可感染：鳞翅目、鞘翅目、膜翅目害虫第61页，讲稿共80张，创作于星期日七、七、RNARNA病毒杀虫剂病毒杀虫剂一、质型多角体病毒（一、质型多角体病毒（CPVCPV）二、其他二、其他RNARNA杀病毒杀病毒 1 1、双、双RNARNA病毒科病毒科 2 2、野田村病毒科、野田村病毒科 3 3、四对称病毒科、四对称病毒科 第62页，讲稿共80张，创作于星期日(1)质型多角体病毒（质型多角体病毒（CPV）属于呼肠弧病毒科属于呼肠弧病毒科 1950年年 患病灯蛾幼虫患病灯蛾幼虫 侵袭昆虫侵袭昆虫 消化管消化管 在在细胞质内寄细胞质内寄生生，细胞核中并无多角

43、体，细胞核中并无多角体 已在鳞翅目、双翅目、膜翅目、鞘翅目和脉翅目等已在鳞翅目、双翅目、膜翅目、鞘翅目和脉翅目等200多多种昆虫种昆虫 发现。发现。已知寄主种类和数量，仅次于已知寄主种类和数量，仅次于NPV，在我国已发在我国已发现有现有10多种。多种。第63页，讲稿共80张，创作于星期日 无囊膜，无囊膜，形态形态有六角形、二十面体、圆球形、椭圆形、四角形和正有六角形、二十面体、圆球形、椭圆形、四角形和正方体方体 直径直径0.20.5微米微米 不溶于水，但在水中经较长时间易被蚀刻，从而容易失去粒子。不溶于水，但在水中经较长时间易被蚀刻，从而容易失去粒子。在碱液中的溶解度小于在碱液中的溶解度小于N

44、PV，粒子在碱液中迅速失活。，粒子在碱液中迅速失活。一个多角体可以埋一个多角体可以埋1001000个病毒粒子个病毒粒子 大多数粒子为二十面体，具大多数粒子为二十面体，具12条突起条突起形态结构形态结构CPV病毒粒子模式图第64页，讲稿共80张，创作于星期日家蚕CPV立方形多角体第65页，讲稿共80张，创作于星期日2)昆虫表现症状昆虫表现症状 初初期期：食食欲欲不不振振，体体形形缩缩小小，比比例例失失调调形形成成大大头头，长长刺刺毛毛。皮皮肤肤不不被被侵侵染染，其其它它组组织织也也很很少少侵侵染染，无无组组织织液液化化现现象象。幼幼虫虫消化道吐现不透明和淡黄色或乳白色，失去半透明和淡绿色。消化道

45、吐现不透明和淡黄色或乳白色，失去半透明和淡绿色。后期：皮肤出现白色斑块。后期：皮肤出现白色斑块。中肠细胞液化后，多角体可被呕中肠细胞液化后，多角体可被呕吐出来或由粪便排出。吐出来或由粪便排出。第66页，讲稿共80张，创作于星期日3)杀虫活性杀虫活性 100多多种种害害虫虫，主主要要为为鳞鳞翅翅目目、少少数数为为双双翅翅目目和和膜膜翅翅目目。染染虫虫后后720天死亡。天死亡。口口服服感感染染。进进入入虫虫体体，在在后后部部第第7节节穿穿透透中中肠肠，在在细细胞胞间间扩扩散散，直直至至中肠前端。中肠前端。中中肠肠上上皮皮细细胞胞核核内内是是病病毒毒RNA合合成成部部位位，核核周周围围的的细细胞胞质

46、质是是病病毒毒蛋蛋白质合成部位。白质合成部位。致病性强，低剂量即可使寄主昆虫感染致病性强，低剂量即可使寄主昆虫感染 死亡率与剂量没有直接对应性死亡率与剂量没有直接对应性 可通过母代传递至寄主的子代，成为长期抑制寄主种群的一个致病因可通过母代传递至寄主的子代，成为长期抑制寄主种群的一个致病因子子第67页，讲稿共80张，创作于星期日八、影响病毒防治效果的因素八、影响病毒防治效果的因素 (1)病毒本身病毒本身 选择毒力高的病毒株系 正确掌握适宜的浓度、用药次数及合适的施药时间(2)防治对象防治对象(3)环境因素环境因素1)温度温度 15度，LT50为9天；32度，LT50为23天 2)光照光照 紫外

47、光，5cm5min可使HaNPV全部失活，2h粉纹夜蛾NPV失活3)pH值和土壤值和土壤 HaNPV pH值为2或12时，经24h活性大减，以pH值=7为宜。第68页，讲稿共80张，创作于星期日九、大量生产与应用九、大量生产与应用 用天然饲料、人工饲料饲养昆虫。原理简单：活虫体、活细胞、活组织 采集或引进昆虫病毒的原种：不同单株毒力不同，且差异很大，所以一定要选用最好的病毒株。必须经济方便：牵涉到大量饲养的方法，对一些昆虫已经解决，如斜纹夜蛾、棉铃虫等，它能用人工配制的食料来解决，若一种病毒能感染几种害虫，应选用最易感染的昆虫。找出一个最适宜的接种量、虫期、环境条件。第69页，讲稿共80张，创

48、作于星期日大量生产的方法大量生产的方法:直直接接在在害害虫虫自自然然种种群群中中繁繁殖殖：虫口密度大，适当虫期喷，把死虫收回，最简便，适于一些害虫在室内不易人工培养，如叶蜂，森林上的害虫。野外采集野外采集：采回(小区、室内)接种。完全在室内条件下用自然或人工合成的饲料来繁殖完全在室内条件下用自然或人工合成的饲料来繁殖：斜纹夜蛾、地老虎。第70页，讲稿共80张，创作于星期日病毒杀虫剂生产工艺病毒杀虫剂生产工艺(以以NPV杀虫剂为例杀虫剂为例)病毒的提取技术防菌保护剂增效诱饵剂病毒杀虫剂安全性试验填充剂辅助剂NPV剂型配制称量标准计数生物活性测定产品分装、包装、保藏病毒多角体检测感病虫体的收集、破

49、碎、匀浆过滤NPV的采集、分离、鉴定NPV毒株的引进天然饲料养、添食、使感染，大量增殖NPV直接从野外大量收集NPV虫尸用人工半合成饲料大量增殖NPV重组(遗传改良)昆虫杆状病毒第71页，讲稿共80张，创作于星期日水平传递：水平传递：经污染的环境和食物传给健康昆虫垂直传递：垂直传递：经雌虫所产的卵传递给它的子代1、由患病幼虫传播：患病毒病而死亡的幼虫，从其尸体中释放出大量的病毒，这些病毒留在植物叶子或其它食物上，甚至严重污染周围环境，从而感染其它健康昆虫。或从口和粪便中排出病毒。昆虫病毒的传播与诱发第72页，讲稿共80张，创作于星期日2、由患病成虫传播：受感染的成虫，在它们仍能飞行的时候，往往

50、将病毒传播到较大的范围。患病成虫还可通过交尾而将病毒传给对方。3、经鸟类和其它媒介传染：鸟类：鸟类：取食病虫尸的同时食入了病毒，排出的鸟粪残留期很长，并且可以传染到更远的地方寄生昆虫：寄生昆虫：沾染了病毒的寄生蜂产卵管，在产卵过程中将病毒带进寄主体内，在寻找寄主的过程也是接种和传播病毒病的过程。第73页，讲稿共80张，创作于星期日应用应用 短期防治短期防治：作为一种农药喷到田间。4-5天，还能缩短 长期防治长期防治：一次或多次地使用病毒，希望它能长期地存在于生态体系中，调节种群密度。某些病毒在不同寄主上交替感染，故它可长期保存在生态系统中。选择防治：选择防治：利用其专化强的特点，虫口密度低时杀