第十九章 真菌.ppt

《第十九章 真菌.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第十九章 真菌.ppt（30页珍藏版）》请在得力文库 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、真真 菌菌郭庆合郭庆合郭庆合郭庆合真真 菌菌（fungus)fungus)也称也称eumycotaeumycota,来源于拉丁文来源于拉丁文fungusfungus，即蘑菇。即蘑菇。真菌自成一界，为真核细胞型微生物，它具真菌自成一界，为真核细胞型微生物，它具有典型的细胞核，不含叶绿素，营养方式为有典型的细胞核，不含叶绿素，营养方式为吸收，无吞噬作用，营腐生、寄生、共生和吸收，无吞噬作用，营腐生、寄生、共生和超寄生生活。细胞壁含几丁质和超寄生生活。细胞壁含几丁质和B-B-葡聚糖。葡聚糖。有完善的细胞器，有呼吸作用，能进行有性有完善的细胞器，有呼吸作用，能进行有性生殖和（或）无性繁殖。它与原核型微

2、生物生殖和（或）无性繁殖。它与原核型微生物有许多不同点。有许多不同点。表表19-1原核细胞型微生物与真核细原核细胞型微生物与真核细胞型微生物的比较胞型微生物的比较细胞核结构细胞核结构细胞核结构细胞核结构 原核细胞型微生物原核细胞型微生物原核细胞型微生物原核细胞型微生物 真核细胞型微生物真核细胞型微生物真核细胞型微生物真核细胞型微生物 核膜核膜核膜核膜无无无无有有有有 核仁核仁核仁核仁无无无无有有有有 分裂方式分裂方式分裂方式分裂方式主要二分裂主要二分裂主要二分裂主要二分裂分丝分裂、减数分分丝分裂、减数分分丝分裂、减数分分丝分裂、减数分裂细胞质结构裂细胞质结构裂细胞质结构裂细胞质结构质膜质膜质膜

3、质膜常缺乏固醇常缺乏固醇常缺乏固醇常缺乏固醇常有固醇常有固醇常有固醇常有固醇内膜内膜内膜内膜较简单，有中介体较简单，有中介体较简单，有中介体较简单，有中介体复杂，有内质网和复杂，有内质网和复杂，有内质网和复杂，有内质网和高尔基体高尔基体高尔基体高尔基体核糖体核糖体核糖体核糖体70S70S80S80S 呼吸系统呼吸系统呼吸系统呼吸系统质膜或中介体质膜或中介体质膜或中介体质膜或中介体线粒体线粒体线粒体线粒体人致病的真菌分为四类：人致病的真菌分为四类：病原性真菌、条件致病性真菌、产毒真菌病原性真菌、条件致病性真菌、产毒真菌及致癌真菌。及致癌真菌。真菌发病率，近年明显上升趋势，特别是真菌发病率，近年明

4、显上升趋势，特别是条件性致病真菌更为常见，这于临床滥用条件性致病真菌更为常见，这于临床滥用抗生素、经常应用激素及免疫抑制剂、抗抗生素、经常应用激素及免疫抑制剂、抗癌药物导致机体免疫功能下降有关。癌药物导致机体免疫功能下降有关。真菌的形态特性真菌的形态特性：真菌按形态分为单细胞和多细胞两大类。真菌按形态分为单细胞和多细胞两大类。单细胞真菌呈圆形或卵圆形，如酵母菌和类单细胞真菌呈圆形或卵圆形，如酵母菌和类酵母菌，以出芽方式繁殖，对人致病的主要酵母菌，以出芽方式繁殖，对人致病的主要有新生隐球菌和白假丝酵母菌。有新生隐球菌和白假丝酵母菌。多细胞真菌有菌丝和孢子，菌丝伸长分支，多细胞真菌有菌丝和孢子，菌

5、丝伸长分支，交织成团，称丝状菌，又称霉菌，对人致病交织成团，称丝状菌，又称霉菌，对人致病的有皮肤癣菌等。的有皮肤癣菌等。有些真菌因环境条件改变，可有一重形态转有些真菌因环境条件改变，可有一重形态转变为另一种形态，此真菌称为二相性真菌。变为另一种形态，此真菌称为二相性真菌。真菌的菌落特性：真菌的菌落特性：1 1、酵母型菌落，、酵母型菌落，是单细胞真菌的菌是单细胞真菌的菌落，形态与一般细菌菌落相似，但较大些，落，形态与一般细菌菌落相似，但较大些，菌落表面光滑、湿润、柔软、边缘整齐，如菌落表面光滑、湿润、柔软、边缘整齐，如新生隐球菌，有部分单细胞真菌，可在培养新生隐球菌，有部分单细胞真菌，可在培养基

6、中形成假菌丝伸入培养基中，此菌落称酵基中形成假菌丝伸入培养基中，此菌落称酵母型菌落，如白假丝酵母菌。母型菌落，如白假丝酵母菌。2 2、霉菌菌落、霉菌菌落是多细胞真菌的菌落，菌落呈是多细胞真菌的菌落，菌落呈棉絮状、绒毛状、粉末状，并棉絮状、绒毛状、粉末状，并产生不同的色素，如皮肤癣菌。产生不同的色素，如皮肤癣菌。真菌的检验方法：真菌的检验方法：类同细菌检验，真菌的检验方法类同细菌检验，真菌的检验方法包括：包括：1.1.直接镜检细菌形态直接镜检细菌形态2.2.抗原检测抗原检测3.3.真菌的分离培养与鉴定真菌的分离培养与鉴定4.4.真菌核酸检测及真菌毒素检测等真菌核酸检测及真菌毒素检测等显微镜检验：

7、显微镜检验：直接镜检对真菌的诊断较细菌更为重要。直接镜检对真菌的诊断较细菌更为重要。许多标本不需染色即可直接镜检许多标本不需染色即可直接镜检.如癣病标本多用如癣病标本多用KOH湿片检查法，即取湿片检查法，即取病变或病损部位、皮屑、甲屑置于载玻病变或病损部位、皮屑、甲屑置于载玻片，加一滴片，加一滴10%KOH液然后加盖玻片微液然后加盖玻片微微加热，使标本组织溶解透明，在显微微加热，使标本组织溶解透明，在显微镜下可观察到真菌的孢子和菌丝。镜下可观察到真菌的孢子和菌丝。显微镜检验：显微镜检验：有些真菌标本需要做染色观察，常用的染色有些真菌标本需要做染色观察，常用的染色方法有乳酸酚棉兰染色、瑞氏染色、

8、革兰染方法有乳酸酚棉兰染色、瑞氏染色、革兰染色、美蓝染色、荧光染色还有墨汁负染色。色、美蓝染色、荧光染色还有墨汁负染色。如革兰染色后，真菌孢子呈革兰阳性。如革兰染色后，真菌孢子呈革兰阳性。检测病人脑脊液标本中的新生隐球菌，需要检测病人脑脊液标本中的新生隐球菌，需要做墨汁负染色后检查，背景为黑色，新生隐做墨汁负染色后检查，背景为黑色，新生隐球菌和荚膜不着色。直接镜检简便、快速。球菌和荚膜不着色。直接镜检简便、快速。培养基培养基培养一般采用葡萄糖蛋白胨琼脂，即沙培养一般采用葡萄糖蛋白胨琼脂，即沙氏琼脂、氏琼脂、PH4.0-6.0一般细菌不宜生长。一般细菌不宜生长。许多病原性真菌如白假丝酵母菌在血琼

9、许多病原性真菌如白假丝酵母菌在血琼脂上生长良好，二相性真菌常使用营养脂上生长良好，二相性真菌常使用营养更丰富的脑心浸液琼脂。更丰富的脑心浸液琼脂。培养方法培养方法：平皿培养法、大试管培养和：平皿培养法、大试管培养和玻片培养等。玻片培养等。分离培养：分离培养：培养温度培养温度：28摄氏度，但深部真菌为摄氏度，但深部真菌为37摄氏度，对二相性真菌培养时，摄氏度，对二相性真菌培养时，28摄氏摄氏度培养真菌呈菌丝相（霉菌型），度培养真菌呈菌丝相（霉菌型），37摄摄氏度培养为组织型（酵母型）。氏度培养为组织型（酵母型）。观察菌落生长情况是鉴别真菌的主要方观察菌落生长情况是鉴别真菌的主要方法之一。法之一。

10、真菌的生化反应真菌的生化反应：试验方法同：试验方法同 细菌试验。细菌试验。分离培养：分离培养：病原性真菌病原性真菌深部真菌感染深部真菌感染 深部真菌感染是指能侵袭深部组织和内深部真菌感染是指能侵袭深部组织和内脏及全身的真菌，主要有假丝酵母菌、隐脏及全身的真菌，主要有假丝酵母菌、隐球菌、曲菌、毛霉、组织胞浆菌和卡氏肺球菌、曲菌、毛霉、组织胞浆菌和卡氏肺孢菌等，其中以隐球菌感染较常见。孢菌等，其中以隐球菌感染较常见。组织胞浆菌为二相性真菌，假丝酵母菌、组织胞浆菌为二相性真菌，假丝酵母菌、曲霉菌、毛霉和卡氏肺胞菌等为条件致病曲霉菌、毛霉和卡氏肺胞菌等为条件致病菌，只有在一定条件，才引起机体致病。菌，

11、只有在一定条件，才引起机体致病。一、假丝酵母菌一、假丝酵母菌假丝酵母菌（假丝酵母菌（Candida)Candida)，俗称俗称念珠菌，生物学分类为半知菌念珠菌，生物学分类为半知菌亚门，半知菌纲，隐球菌目、亚门，半知菌纲，隐球菌目、假丝酵母菌为最常见的致病菌。假丝酵母菌为最常见的致病菌。临床意义临床意义白假丝酵母菌通常存在与人的口腔、上呼吸白假丝酵母菌通常存在与人的口腔、上呼吸道和阴道粘膜上，当机体发生菌群失调或抵道和阴道粘膜上，当机体发生菌群失调或抵抗力降低时，可引起各种念珠菌病。抗力降低时，可引起各种念珠菌病。可引起阴道炎、外阴炎、龟头炎、包皮炎。可引起阴道炎、外阴炎、龟头炎、包皮炎。白假丝

12、酵母菌可引起体质虚弱婴儿的鹅口疮。白假丝酵母菌可引起体质虚弱婴儿的鹅口疮。引起肠炎、肺炎、膀胱炎、肾盂肾炎、脑膜引起肠炎、肺炎、膀胱炎、肾盂肾炎、脑膜炎、脑膜脑炎、脑脓肿，长期用静脉内导管炎、脑膜脑炎、脑脓肿，长期用静脉内导管引起全身假丝酵母菌病，病死率极高。引起全身假丝酵母菌病，病死率极高。白假丝酵母菌引起的皮炎白假丝酵母菌引起的粘膜白斑微生物特性：微生物特性：白假丝酵母菌呈圆白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径形或卵圆形，直径3-6UM。革兰阳性，革兰阳性，着色不均匀。出芽着色不均匀。出芽方式繁殖，在组织方式繁殖，在组织内可见芽生孢子，内可见芽生孢子，假菌丝，在玉米粉假菌丝，在玉米粉培养基中可

13、产生假培养基中可产生假菌丝和厚膜孢子。菌丝和厚膜孢子。白色念珠菌革兰染色镜下形态白色念珠菌革兰染色镜下形态白色念珠菌革兰染色镜下形态白色念珠菌革兰染色镜下形态微生物检验微生物检验标本直接检查标本直接检查（1）直接显微镜检查：取脓汁，痰和）直接显微镜检查：取脓汁，痰和局部炎性分泌物直接涂片，革兰染色局部炎性分泌物直接涂片，革兰染色后镜检，显微镜下见到革兰阳性、圆后镜检，显微镜下见到革兰阳性、圆形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝，可形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝，可确认假菌丝酵母菌感染。确认假菌丝酵母菌感染。（2）、抗原检测）、抗原检测（3）、核酸检测）、核酸检测分离培养：分离培养：将标本接种在沙氏将标本

14、接种在沙氏培养基上，培养基上，25摄氏摄氏度或度或37摄氏度培养摄氏度培养1-4天后，培养基天后，培养基表面可出现奶油色表面可出现奶油色类酵母型菌落。类酵母型菌落。白色念珠菌在沙氏培养基上白色念珠菌在沙氏培养基上白色念珠菌在沙氏培养基上白色念珠菌在沙氏培养基上的菌落特征的菌落特征的菌落特征的菌落特征鉴鉴 定定镜检可见假菌丝及芽生孢子。镜检可见假菌丝及芽生孢子。此外还可以用芽管形成试验、厚膜孢子此外还可以用芽管形成试验、厚膜孢子形成试验、糖同化和发酵试验进行鉴定。形成试验、糖同化和发酵试验进行鉴定。药物敏感试验：药物敏感试验：对二性霉素对二性霉素B、5-FC等药物敏感，但对等药物敏感，但对5-F

15、C极易产生耐药性。体外药敏实验一极易产生耐药性。体外药敏实验一般不做。般不做。隐球菌隐球菌隐球菌（隐球菌（Cryptococcus)归入半知菌亚门、归入半知菌亚门、半知菌纲，隐球菌目、隐球菌属。该菌半知菌纲，隐球菌目、隐球菌属。该菌于于1894年首先在法国发现，我国于年首先在法国发现，我国于1964年在南京首先发现。隐球菌属包括年在南京首先发现。隐球菌属包括17个个种和种和7个变种，其中仅新生隐球菌及其个变种，其中仅新生隐球菌及其变种有致病性，新生隐球菌广泛分布于变种有致病性，新生隐球菌广泛分布于自然界，也可以存在与人体体表、口腔自然界，也可以存在与人体体表、口腔和肠道中。和肠道中。（一）、临

16、床意义（一）、临床意义本菌属外源性感染。经呼吸道侵入人体，由本菌属外源性感染。经呼吸道侵入人体，由肺血行播散时可侵犯所有脏器组织，主要侵肺血行播散时可侵犯所有脏器组织，主要侵犯肺、脑及脑膜，也可侵犯皮肤、关节、骨。犯肺、脑及脑膜，也可侵犯皮肤、关节、骨。新生隐球菌病好发于细胞免疫功能低下者。新生隐球菌病好发于细胞免疫功能低下者。近二十年来，隐球菌的发病率越来越高。在近二十年来，隐球菌的发病率越来越高。在国外为国外为AIDS病最常见的并发症之一，是病最常见的并发症之一，是AIDS死亡的首要原因。在国内已将隐球菌病死亡的首要原因。在国内已将隐球菌病与病毒性肝炎同列为乙类传染病。是人类面与病毒性肝炎

17、同列为乙类传染病。是人类面临的一种严重的真菌病。新生隐球菌的致病临的一种严重的真菌病。新生隐球菌的致病物质是荚膜。物质是荚膜。原发性新型隐球菌病新型隐球菌病昏迷的患儿（二）微生物特性（二）微生物特性新生隐球菌在组织中呈圆形或卵圆形，新生隐球菌在组织中呈圆形或卵圆形，直径一般在直径一般在4-6UM，外有宽厚的荚膜，外有宽厚的荚膜，荚膜较菌体大荚膜较菌体大1-3倍，折光性强，一倍，折光性强，一般染色法不宜着色而难以发现而得名。般染色法不宜着色而难以发现而得名。常采用墨汁负染色，在黑色背景下可常采用墨汁负染色，在黑色背景下可镜检到透亮菌体和荚膜。非致病性隐镜检到透亮菌体和荚膜。非致病性隐球菌无荚膜。

18、新生隐球菌有明显的生球菌无荚膜。新生隐球菌有明显的生物学多态性，在沙氏培养基上形成白物学多态性，在沙氏培养基上形成白色至奶油色粘稠菌落。色至奶油色粘稠菌落。新型隐球菌墨汁染色镜下形态新型隐球菌墨汁染色镜下形态新型隐球菌墨汁染色镜下形态新型隐球菌墨汁染色镜下形态（三）、微生物检查（三）、微生物检查1、标本直接检查、标本直接检查（1）、直接镜检：用病人脑脊液做墨）、直接镜检：用病人脑脊液做墨汁负染色检查是诊断新生隐球菌脑膜炎汁负染色检查是诊断新生隐球菌脑膜炎最简便、快速方法之一。如用最简便、快速方法之一。如用PAS染色染色后，新生隐球菌呈红色。后，新生隐球菌呈红色。（2）、抗原检测：用乳胶凝集试验

19、、）、抗原检测：用乳胶凝集试验、ELISA和单克隆抗体法检测隐球菌荚膜和单克隆抗体法检测隐球菌荚膜多糖特异性抗原，已成为临床上的常规多糖特异性抗原，已成为临床上的常规诊断方法。诊断方法。2、分离培养与鉴定、分离培养与鉴定（1）、分离培养：将标本接种在沙氏）、分离培养：将标本接种在沙氏培养基上，病原性隐球菌在培养基上，病原性隐球菌在25摄氏度和摄氏度和37摄氏度孵育的可生长，而非致病性隐摄氏度孵育的可生长，而非致病性隐球菌在球菌在37摄氏度不生长，培养摄氏度不生长，培养2-5天后观天后观察菌落形态特点，并取菌落做墨汁负染察菌落形态特点，并取菌落做墨汁负染色镜检。快速显色培养基上生长特点见色镜检。

20、快速显色培养基上生长特点见彩图彩图32。（2）、鉴定）、鉴定1）、酚氧化酶试验：将菌落接种在）、酚氧化酶试验：将菌落接种在L-多巴枸多巴枸橼酸铁和咖啡酸培养基中，经橼酸铁和咖啡酸培养基中，经2-5天培养，新天培养，新生隐球菌呈综黑色菌落。生隐球菌呈综黑色菌落。2）、脲酶试验：新生隐球菌能产生脲酶，）、脲酶试验：新生隐球菌能产生脲酶，可分解尿素琼脂培养基的尿素形成氨和二氧可分解尿素琼脂培养基的尿素形成氨和二氧化碳，使培养基化碳，使培养基PH升高，从而培养基由黄色升高，从而培养基由黄色变为粉红色，白假丝酵母君则为阴性。变为粉红色，白假丝酵母君则为阴性。3）、糖同化及发酵试验：新生隐球菌能同）、糖同化及发酵试验：新生隐球菌能同化葡萄糖、半乳糖、蔗糖和肌醇，但不能发化葡萄糖、半乳糖、蔗糖和肌醇，但不能发酵糖类，不同化硝酸盐。非致病性新生隐球酵糖类，不同化硝酸盐。非致病性新生隐球菌则不能同化肌醇。菌则不能同化肌醇。