农林专业-组织培训.pdf

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1、一、名词解释（共一、名词解释（共 4040 题）题）1(1(植物组织培养）植物组织培养）：在无菌条件下：在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞、胚胎、原将离体的植物器官、组织、细胞、胚胎、原生质体，培养在人工配制的培养基上生质体，培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件，诱发产生愈伤组织给予适宜的培养条件，诱发产生愈伤组织或丛或丛 生芽等生芽等,进而长成完整的植株的过程。进而长成完整的植株的过程。2(2(细胞全能性）细胞全能性）：指植物体任何一个细胞都携带有一套发育成完整植株的全部遗：指植物体任何一个细胞都携带有一套发育成完整植株的全部遗传信息传信息.3 3（再分化（再分化)：经脱分化

2、的组织或细胞在一定的培养条件下，产生出新的具有特：经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下，产生出新的具有特定结构和功能的组织或器官，形成完整植株的过程。定结构和功能的组织或器官，形成完整植株的过程。4 4（外植体（外植体):):把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官5(5(培养基培养基)：是供微生物、是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐以及维生素和水等一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐以及维生素和水等.不同培养基可根不同

3、培养基可根据实际需要据实际需要,添加一些自身无法合成的化合物，即生长因子添加一些自身无法合成的化合物，即生长因子.6 6（愈伤组织（愈伤组织)：植物在受伤之后，在伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组织培植物在受伤之后，在伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组织培养中，是指在培养基上由培养物产生的无序的薄壁细胞团。养中，是指在培养基上由培养物产生的无序的薄壁细胞团。7 7（愈伤组织培养）（愈伤组织培养）：将一个细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过去分化形：将一个细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过去分化形成愈伤组织，并在体外培养使之再分化成植株的技术。成愈伤组织，并在体外培养使之再分化成植株的技术。8 8

4、（脱分化）（脱分化）：失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂：失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂,形成无分化的形成无分化的细胞团即愈伤组织的现象细胞团即愈伤组织的现象9(9(初代培养）初代培养）：即无菌接种完成后，外植体在适宜的光、温、气等条件下被诱导：即无菌接种完成后，外植体在适宜的光、温、气等条件下被诱导成无菌短枝、不定芽、胚状体或原球茎的过程。成无菌短枝、不定芽、胚状体或原球茎的过程。10(10(继代培养继代培养)：中间繁殖体由于数量有限，所以需要将他们切割、分离后转移：中间繁殖体由于数量有限，所以需要将他们切割、分离后转移到新的培养基中培养增殖，这个过程称为继代培养到新

5、的培养基中培养增殖，这个过程称为继代培养.11(11(母液母液):):指将所用培养基配方的化学成分按一定比例配成的浓缩液。指将所用培养基配方的化学成分按一定比例配成的浓缩液。12(12(大量元素）大量元素）：指植物正常生长发育需要量或含量较大的必需营养元素指植物正常生长发育需要量或含量较大的必需营养元素.13(13(胚状体胚状体):):离体培养条件下，没有经过受精过程离体培养条件下，没有经过受精过程,但是经过了胚胎发育过程所但是经过了胚胎发育过程所形成的胚状类似物形成的胚状类似物14(14(植物生长调节物质）植物生长调节物质）:人工合成的能调节植物的生长、分化、发育的化学物人工合成的能调节植物

6、的生长、分化、发育的化学物质质1515（微量元素）（微量元素）:习惯上把研究体系（矿物岩石等）中元素含量小于习惯上把研究体系（矿物岩石等）中元素含量小于 0.10.1称为称为微量元素微量元素二、填空题1、一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为”_脱分化脱分化3、32.在组织培养中,ZT 和 GA 必须用_ _过滤过滤_法灭菌，而接种室空间采用_紫外线紫外线照射照射_ _或或_ _ 甲醛熏蒸甲醛熏蒸_法灭菌6、茎尖培养根据培养目的和取材大小，可分为_普通茎尖普通茎尖_培养和_ _茎尖分生茎尖分生组织组织_培养两种类型。8、不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一

7、样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生_ClCl+(clo(clo）_来杀菌的；升汞是靠_汞离子汞离子_来达到灭菌目的。9、去除植物病毒的主要方法是_理化法理化法_和_ _组培法组培法_两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。11、在组织培养中，非洲菊是靠 _从生芽从生芽_的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以 _ _原球茎原球茎_的方式进行快繁的。14、植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为_适光适光_培养和_嗜光嗜光_培养.17、通过茎尖培养脱毒苗的过程中，切取茎尖的大小与其成活率成 _正比正比_,而与脱毒效果成_ _反比反比_.18、在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成_正比正比_

8、，而与脱毒效果成_ _正比正比_。21、愈伤组织的形态发生有_ _器官器官_和_体细胞胚发生体细胞胚发生_两种情况。22、用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_80_80_的温度范围内，而若用它高温干燥灭菌则需在_150150_的温度下 13 小时;烘干植物材料的温度是_60_60_.23、一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象称为”_ _脱分化脱分化24、植物的胚胎培养，包括_ _胚胎胚胎_培养、_ _幼胚幼胚_培养、_ _胚乳胚乳_培养、_胚珠胚珠_培养。25、幼胚培养时，其发育过程有_早熟萌发早熟萌发_ _、_ _胚性萌发胚性萌发_ _、_形成愈伤形

9、成愈伤_三种方式.26、植物组织培养按培养对象分为_组织培养组织培养_、_器官培养器官培养_、_细胞培养细胞培养_ _、_原生质体培养原生质体培养_ _等几种类型。27、1902 年德国植物生理学家 Haberlandt 第一次提出植物_ _细胞具有全能性细胞具有全能性_ _的理论概念;1943 年 White 提出植物细胞“_ _全能性全能性_”学说，并出版了植物组织培养手册，从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。28、细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的_全部遗传物质全部遗传物质_和_形成成完整植株的潜在完整植株的潜在_ _的能力。29、6BA/NAA 的高低决定了外植体的发育方向，

10、比值低时促进_根根_ _的生长，这时_ _脱分化脱分化_占主导地位；比值高促进_ _芽芽_的生长，这时_分分化化_占主导地位。30、在组织培养中,不耐热的物质用_ _过滤过滤_法灭菌，而培养基常用_ _湿热灭湿热灭菌菌_法灭菌。31、组织培养中有三大不易解决的问题,它们分别是_黄化_、_褐化_、玻璃、玻璃化化_._.1960 年,英国学者 Cocking 用_ _真菌纤维素酶酶解真菌纤维素酶酶解_ _分离原生质体成功，从而创新原生质体的培养技术。三、简答题三、简答题1 1、（培养基一般包括哪些基本成分、（培养基一般包括哪些基本成分)?)?无机盐、有机物、水天然复合物、培养基的支持材料。无机盐、

11、有机物、水天然复合物、培养基的支持材料。2 2、（茎尖脱毒的基本原理是什么）、（茎尖脱毒的基本原理是什么）?分生组织中无微管系统细胞间通过胞间连丝扩散慢分生细胞中，代谢性高，病分生组织中无微管系统细胞间通过胞间连丝扩散慢分生细胞中，代谢性高，病毒无法复制茎尖中存在的高水平内源生长素毒无法复制茎尖中存在的高水平内源生长素,抑制病毒增长茎尖“病毒钝化系抑制病毒增长茎尖“病毒钝化系统”活性高统”活性高3 3、（植物组织培养所需的无机物质有哪些元素、（植物组织培养所需的无机物质有哪些元素)?)?大量元素：大量元素：N N、P P、K K、CaCa、MgMg、S S。微量元素：微量元素：FeFe、MnM

12、n、CuCu、MoMo、ZnZn、CoCo、B.B.4 4、(植物组织培养所需的有机物质有哪些植物组织培养所需的有机物质有哪些)?)?碳源、维生素、肌醇、氨基酸、天然有机复合物。碳源、维生素、肌醇、氨基酸、天然有机复合物。5 5、（琼脂在固体培养中有什么作用）？、（琼脂在固体培养中有什么作用）？在固体培养时琼脂是最好的固化剂。琼脂的用量在在固体培养时琼脂是最好的固化剂。琼脂的用量在 6 10g/L6 10g/L，若浓度太高若浓度太高,培培养基就会变得很硬养基就会变得很硬,营养物质难以扩散到培养的组织中去营养物质难以扩散到培养的组织中去.若浓度过低，凝固性若浓度过低，凝固性6 6、（植物组织培养

13、的接种室设置如何、（植物组织培养的接种室设置如何)？接种室面积应根据生产规模而定，要求干爽安静、清洁明亮、墙面光滑平整、接种室面积应根据生产规模而定，要求干爽安静、清洁明亮、墙面光滑平整、地面平坦无缝。地面平坦无缝。设计时注意问题设计时注意问题:（1)1)根据工作量的大小决定接种间的面积，不宜过大根据工作量的大小决定接种间的面积，不宜过大,可多设几个小接种间可多设几个小接种间.(2)(2)为便于无菌操作和提高接种的工作效率，为便于无菌操作和提高接种的工作效率，以选用平流风式单人单面超净工作以选用平流风式单人单面超净工作台为宜。台为宜。（3 3）在接种车间内可设计一个紫外光消毒间）在接种车间内可

14、设计一个紫外光消毒间,与培养间相邻。与培养间相邻。（4)4)在接种车间外设置风淋室并配备定的防火设备。在接种车间外设置风淋室并配备定的防火设备。7 7、（怎样对培养基进行高压灭菌）？、（怎样对培养基进行高压灭菌）？将装好培养基的组培瓶放入框内，放入高压锅关好锅盖。高压灭菌开始时，先将装好培养基的组培瓶放入框内，放入高压锅关好锅盖。高压灭菌开始时，先打开排气口，待热水蒸气排出数分钟后打开排气口，待热水蒸气排出数分钟后,关闭阀门灭菌，关闭阀门灭菌，121121 度，度，2020 分钟。待压分钟。待压力降到力降到 0 0 后放气。在一定冷却时间后就可以打开高压锅了。后放气。在一定冷却时间后就可以打开

15、高压锅了。8 8、（举出五种以上植物培养所需的常用设备）、（举出五种以上植物培养所需的常用设备）?纯水器、电磁炉、天平、高压灭菌锅、超净工作台纯水器、电磁炉、天平、高压灭菌锅、超净工作台9 9、（、（MSMS 培养基的特点是什么）？培养基的特点是什么）？其无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液其无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液.其养分的数量和比例较合适，其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量比其他培养基高，广泛地应用可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量比其他培养基高，广泛地应用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演于植

16、物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而来的。变而来的。1010、（配制母液应注意什么问题、（配制母液应注意什么问题)?)?例如将大量元素母液可配制成浓度例如将大量元素母液可配制成浓度 1010 倍母液，用分析天平按培养基配方称取药倍母液，用分析天平按培养基配方称取药品，分别加品，分别加 100mL100mL 左右蒸馏水溶解后，再用磁力搅拌器搅拌，促进溶解。注意左右蒸馏水溶解后，再用磁力搅拌器搅拌，促进溶解。注意CaCa2+2+和和 PO3PO34 4，易发生沉淀。然后倒入，易发生沉淀。然后倒入 1000mL1000mL 定容瓶中，再加水定容至刻度，成定容瓶中，再加

17、水定容至刻度，成为为 1010 倍母液。倍母液。注意事项：配制时注意一些离子之间易发生沉淀配制母液时要用蒸馏水或注意事项：配制时注意一些离子之间易发生沉淀配制母液时要用蒸馏水或重蒸馏水重蒸馏水.药品应选取等级较高的化学纯或分析纯母液配好后放入冰箱内药品应选取等级较高的化学纯或分析纯母液配好后放入冰箱内低温保存，用时再按比例稀释。低温保存，用时再按比例稀释。1111、（植物组织培养在生产实践中的应用有哪些方面）？、（植物组织培养在生产实践中的应用有哪些方面）？植物体的无性快速繁殖及脱毒；花粉培养和单倍体育种植物体的无性快速繁殖及脱毒；花粉培养和单倍体育种;人工种子人工种子;药药用植物的工厂化生产

18、；原生质体培养和体细胞杂交。用植物的工厂化生产；原生质体培养和体细胞杂交。四、论述题（共四、论述题（共 1010 题）表题）表 1 1 母液配制配方母液配制配方称取称取规定量规定量扩大倍扩大倍母液体母液体配制配制1L1L培养基培养基成分成分量量(mg/L)(mg/L)数数积（积（mlml）吸取量（吸取量（ml)ml)（g)g)CaClCaCl2 2.2H.2H2 2O OKIKI4404400 0。8383505020020011110 0。0332033250050020020020205 5NAANAA0.01mg/ml0.01mg/ml1 1100100某组培公司接到意向性订单，要求在一

19、年内提供某组培公司接到意向性订单，要求在一年内提供 5050 万种苗，已知万种苗，已知该公司现有母苗约该公司现有母苗约 500500 株，该植物的增殖系数为株，该植物的增殖系数为 5,5,继代周期为继代周期为 8 8 周，周，污染损耗率为污染损耗率为 3 3，移栽生根成活率为，移栽生根成活率为 7575,请问该订单是否能接请问该订单是否能接,如如能接请指定生产计划，如不能，请说出合理理由。能接请指定生产计划，如不能，请说出合理理由。日期日期/d/d继代次数继代次数继代增殖苗继代增殖苗成活苗成活苗0560560 05005005 5（1-3%1-3%）=2425=24251121121 1242

20、524255*975*97=11761=117611681682 211761*511761*597%=5704297%=570422242243 357042*5*9757042*5*97=276654=276654276654*276654*（2/32/3）757597%=13417797%=1341772802804 492218*5*97%=44725792218*5*97%=447257447257*(6/7447257*(6/7）*75%*97%=278896*75%*97%=2788963363365 563893*563893*59797=309881=309881309881

21、*75%309881*75%97%=22543897%=225438合计合计5050 万万二、简答题二、简答题 1 1、(什么是植物组织培养什么是植物组织培养)?)?指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞原生质体等，通过无菌操指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。3 3、（如何防止组培污染（如何防止组培污染)？改善环境条件严

22、格执行无菌操作严查接种材料在培养基中加入适量的改善环境条件严格执行无菌操作严查接种材料在培养基中加入适量的抗生素利用培养基中高盐或高糖的浓度抗生素利用培养基中高盐或高糖的浓度,抑制微生物的生长抑制微生物的生长 减少培养基中减少培养基中的某些有机成分，可抑制微生物的生长繁殖的某些有机成分，可抑制微生物的生长繁殖 5 5、（什么是植物激素（什么是植物激素?有什么作用有什么作用)?)?植物激素是由植物自身代谢产生的一类有机物质，并自产生部植物激素是由植物自身代谢产生的一类有机物质，并自产生部 位移动到作位移动到作用部位，在极低浓度下就有明显的生理效应的微量物用部位，在极低浓度下就有明显的生理效应的微

23、量物 质，具有两重性，即可促质，具有两重性，即可促进生长又可抑制生长。进生长又可抑制生长。6 6、（简述培养基的制作（简述培养基的制作?简述培养基的灭菌简述培养基的灭菌)?)?取出母液并按顺序排好，并将有机营养物质贮液溶化待用。取出母液并按顺序排好，并将有机营养物质贮液溶化待用。再取出洁净各种的玻璃器皿如：烧杯再取出洁净各种的玻璃器皿如：烧杯,玻璃棒，移液管玻璃棒，移液管,移液枪，量筒放移液枪，量筒放在指定位置在指定位置.取一个大烧杯，倒入三分之一的纯水，并依母液所需量按顺序加取一个大烧杯，倒入三分之一的纯水，并依母液所需量按顺序加入，并不断搅拌入，并不断搅拌.再加入蔗糖，琼脂，并加热使其完全

24、溶解。加入植物生长再加入蔗糖，琼脂，并加热使其完全溶解。加入植物生长调节剂，调节剂，用纯水定容。用纯水定容。调节调节 pH,pH,用预先配制好的氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液进用预先配制好的氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液进行调节。将培养基分装到各培养器皿行调节。将培养基分装到各培养器皿,并封好瓶口。将培养基装入高压灭菌并封好瓶口。将培养基装入高压灭菌锅中，待灭菌完成后取出备用锅中，待灭菌完成后取出备用7 7、（植物组织培养有哪些特点（植物组织培养有哪些特点)？1 1、组培技术是无菌操作技术、组培技术是无菌操作技术;2;2、组培材料处于完全的异养状态、组培材料处于完全的异养状态;3 3、组培材料可以是离体状

25、态的器官、组织、细胞或原生质体；、组培材料可以是离体状态的器官、组织、细胞或原生质体；4 4、组培培养物可以形成克隆也可以进行茎芽增殖或生根；、组培培养物可以形成克隆也可以进行茎芽增殖或生根；5 5、组培容器内的气体和环境气体可以通过封口材料进行交换、组培容器内的气体和环境气体可以通过封口材料进行交换,相对湿度相对湿度通常是几乎通常是几乎 100%100%6 6、组培的环境温度、组培的环境温度,光照强度和时间都是人为设定的，其参数可调。光照强度和时间都是人为设定的，其参数可调。8 8、(生长素有哪些？在植物组织培养中有什么作用）？生长素有哪些？在植物组织培养中有什么作用）？生长素在植物组织培养

26、中生长素一方面用于诱导愈伤组织的形成和生根，生长素在植物组织培养中生长素一方面用于诱导愈伤组织的形成和生根，另一方面是与一定量的细胞分裂素配合共同诱导不定芽的分化、侧芽的萌发与另一方面是与一定量的细胞分裂素配合共同诱导不定芽的分化、侧芽的萌发与生长以及某些植物胚状体的诱导生长以及某些植物胚状体的诱导.9.9.（在植物组织培养中细胞分裂素和生长素各有什么作用）（在植物组织培养中细胞分裂素和生长素各有什么作用）?生长素可刺激形成层细胞分裂；刺激枝的细胞伸长、抑制根细胞生长；促生长素可刺激形成层细胞分裂；刺激枝的细胞伸长、抑制根细胞生长；促进木质部、韧皮部细胞分化进木质部、韧皮部细胞分化,促进插条发

27、根、调节愈伤组织的形态建成促进插条发根、调节愈伤组织的形态建成.细胞分裂素的生理作用主要是引起细胞分裂细胞分裂素的生理作用主要是引起细胞分裂,诱导芽的形成和促进芽的生长诱导芽的形成和促进芽的生长 12 12。(简述外植体灭菌的一简述外植体灭菌的一-般流程。般流程。）洗衣粉浸泡洗衣粉浸泡-流水冲洗流水冲洗 10-20min10-20min 或更长时间或更长时间70707575酒精酒精中浸泡中浸泡 30s30s0 0。1 1-0-0。2 2氯化汞液中浸泡氯化汞液中浸泡 10min10min 左右、在左右、在 10%10%的次氯酸钠、的次氯酸钠、饱和漂白粉浸泡饱和漂白粉浸泡 30min30min 左

28、右蒸馏水冲洗左右蒸馏水冲洗 4 45 5 次次三、问答题三、问答题 1 1、（植物组织培养的应用有哪些）（植物组织培养的应用有哪些）?1 1。种苗快速繁殖种苗快速繁殖 2.2.无病毒苗的培养无病毒苗的培养 3.3.倍性育种缩短育种年限杂种优势明倍性育种缩短育种年限杂种优势明显显 4.4.克服远缘杂交的不亲合性和不孕性克服远缘杂交的不亲合性和不孕性 5.5.保存种质保存种质 6.6.创造变异创造变异2 2、（外植体在经过脱分化和再分化再生出新的植物体的过程中，成苗途径（外植体在经过脱分化和再分化再生出新的植物体的过程中，成苗途径有那有那 3 3 种种)1 1。外植体先形成愈伤组织，然后再分化成完

29、整的植株。具体分化过程又可。外植体先形成愈伤组织，然后再分化成完整的植株。具体分化过程又可分分 3 3 种种.在愈伤组织上同时长出芽和根，以后连成统一的轴状结构，再发育成植在愈伤组织上同时长出芽和根，以后连成统一的轴状结构，再发育成植株；株；在愈伤组织中先形成茎在愈伤组织中先形成茎,后诱导成根后诱导成根,再发育成植株再发育成植株;在愈伤组织中最常见在愈伤组织中最常见的再分化是先形成根，再诱导出芽的再分化是先形成根，再诱导出芽,得到完整植株。得到完整植株。2 2。在组织培养中再生植株可通过与合子胚相似的胚胎发生过程，在组织培养中再生植株可通过与合子胚相似的胚胎发生过程，即形成胚即形成胚状体状体,再发育成完整植株。再发育成完整植株。3 3 外植体经诱导后直接形成根与芽，发育成完整的植株。外植体经诱导后直接形成根与芽，发育成完整的植株。