NY∕T 1248.7-2016 玉米抗病虫性鉴定技术规范 第7部分：镰孢茎腐病(农业).pdf

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1、ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 1248.7一2016玉米抗病虫性鉴定技术规范第7部分:镰抱茎腐病Technical specification on evaluation of maize resistance to pests一Part 7:Fusarium and gibberella stalk rot 2016-10-26发布2017-04-01实施L中华人民共和国农业部发布NY/T 1248.7-2016 目u 学叶吁吁在nf业农国中所问呐防倒口M品押凡广牢推盼术学创UI叶业业瞅瞅瞅从川全淋盹所j齐为究所晋盼轧研究川M附叩F阳明L物保鸣刺川

2、阳丑植物晓刊以优创荆特阳王出哥华叶提恻惮配时际际忡忡机慨脯际。一时卅酣ZM，叶病粉病8J管制川病病穗叶蟆茎茎自由病北省石1抱斑黑缩江1子可|时斑斑黑花米霉抱抱枯叫M川MMM叫叫MMM叫MUtM血冲部部部部部部部部部部部部部N照农草究要E123456789四川四日为按由起研主T第第第第第第第第第第第第第分分分分学分盯一一一一一一一一一一一一一部部部部科部N一一一一一一一一一一一一一本本本本物本作院I 1 范围玉米抗病虫性鉴定技术规范第7部分:镰抱茎腐病本部分规定了玉米抗镰抱茎腐病鉴定技术方法和抗性评价标准。NY/T 1248.7-2016 本部分适用于栽培玉米(Zeamays L.)自交系、杂交

3、种、群体、开放授粉品种以及野生玉米和玉米近缘种对镰抱茎腐病抗性的田间鉴定和评价。2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1 镰子包茎腐病fusarium and gibberella stalk rot 由真菌中的镰抱菌(无性态，Fusariumspp.)/赤霉菌(有性态，Gibberellspp.)侵染所引起的以玉米植株基部茎节茎髓组织分解为特征的玉米病害。该病害引起玉米植株茎节内部腐烂、叶片黄枯或青枯、果穗下垂、籽粒灌浆不足和根系发生紫红色腐烂的症状。3 镰于包菌接种体制备3.1 病原菌分离以常规组织分离法或单抱分离法从发病植株茎轩基部节位的发病茎髓组织中分离茎腐病致病镰抱菌或赤霉菌

4、。病原菌经形态学鉴定确认为镰抱菌CFusa7叩mspp.)或赤霉菌CGibberellaspp.)(参见附录A)后，进行纯化培养和致病性测定。3.2 致病种鉴定对用作抗病性鉴定接种体的病原菌应进行种的鉴定。鉴定采用形态学和分子鉴定的方法(参见附录A).确定病原菌的种级地位。3.3 病原菌繁殖在接种前需要进行病原菌的繁殖。常用繁殖方法为将在培养基上培养的病原菌接种于经高压灭菌的玉米粒或其他谷粒扩大繁殖。培养7dlO d后，菌丝布满玉米粒/谷粒，即可用于接种(参见附录A)。可采用不同地点来源的多个镰抱菌/赤霉菌菌株分别繁殖后混合接种。4 抗病性鉴定圃4.1 鉴定圃设置鉴定圃应具备良好的自然发病环境

5、，能够进行自主灌溉，一经采用不应随意更换。4.2 鉴定设计鉴定材料随机排列或顺序排列。在进行选育品种抗病性鉴定时，每30行鉴定材料设1组已知高抗、高感对照材料(参见附录B);在进行种质资源抗病性鉴定时，每50行鉴定材料设1组已知高抗、高感对照材料。4.3 种植要求鉴定材料播种时间与大田生产播种时间相同或适当调整，以便植株发病期能够与适宜的气候条件NY/T 1248.7-2016(降雨与温度)相遇。鉴定小区行长5.00m，行距0.50m或0.55m，条播或穴播，每行留苗25株30株，低于25株时视为该品种/材料鉴定无效。鉴定种质资源、时，每份鉴定材料种植11-T;鉴定选育品种时，每份材料种植2行

6、。土壤肥力水平和耕作管理与大田生产相同。5 接种5.1 接种时期接种时期为玉米大喇叭口期(V13)至天进行。5.2 接种方法接种采用土壤接种法20 g30 g接种在露出织井从内部向茎6.2 调查方调查者以株。计数每份cm)，将病原菌培养物常侵染玉米根系组即为发病、，/-i/，、.、.式中:N一一调查总株数，单病情分级及相对应的植表1病情级别描述3 发病株率0%5.0%发病株率5.1%10.0%发病株率10.1%30.0%发病株率30.1%40.0%发病株率40.1%100%7 9 口为血?性效价有评定性鉴抗叮/寸，当设置的高感对照材料达到高感程度(9级)，该批次鉴定视为有效。7.2 抗性评价标

7、准依据鉴定材料发病程度(病情级别)确定其抗性水平，划分标准见表2。病情级别3 3 7 9 7.3 重复鉴定鉴定材料7.4 抗性对初8 表2玉米对镰抱茎腐抗性的评价标准抗性高度抗病Highlyresistant(高抗HR)NY/T 1248.7-2016 抗性评价3 NY/T 1248.7一2016附录A(资料性附录)玉米镰抱茎腐病病原菌A.1 学名和形态描述A.1.1 禾谷镰抱(无性态)/玉蜀寨赤霉菌(有性态)无性态学名:FusariU7graminearum Schwabe 异名:FusnnroseU1Link 有性态学名:Gibberellar zeae(Schwein.)Petch 异名

8、:Dothidea zeae(Schwein.)Schwein.Spheria zeae Schwein.禾符镰抱无性态特征:大型分生抱子呈镰刀状，有隔膜3个7个，顶端钝圆或略微收缩，基部有明显的足细胞，3隔4隔的分生抱子大小为(2540)mX(2.54)m，5隔7隔的分生于包子大小为(4850)mX(33.5)m;小型分生于包子极少或元，无厚垣抱子。有性态特征:子囊壳卵圆状，直径约140m250m;子囊长棒状，(6085)mX(81l)m，内含8个子囊抱子，(l924)mX(34)m。A.1.2 拟轮枝镰子包(无性态)/藤仓赤霉(有性态)元性态学名:Fusriumverticillioide

9、s(Sacc.)Nirenberg 异名:Fusarium moniLiforme Sheld.Oosora verticillioides Sacc.有性态学名:GibbereLLa fuji是uroiCSawada)Wollew.异名:GibbereLLa fuj ikuroi var.moniLifonnis(W ineland)K uhlman Gibberella moniLifonnis Wineland Lisea fuj ikuroi Sawada 拟轮枝镰抱无性态特征:小型分生抱子念珠状串生，无色，单胞，(512)mX(23)m;大型分生于包子较少，无色，镰刀状，略弯，两端尖

10、，3分隔5分隔，(l560)卢口X(25)n。有性态特征:较少形成，子囊壳球状，直径220m300卢川子囊长棒状，内含8个子囊抱子;子囊抱子大小(l418)mX C4.56)m。A.2 镰于包菌/赤霉菌培养和保存马铃薯葡萄糖琼脂培养基CPotatodextrose agar,PDA):马铃薯200 g，葡萄糖20g，琼脂18g20 g,水1000mL。此培养基用于病原菌的培养和保存，培养温度为250C，保存温度为40C。A.3 镰抱菌的扩大培养玉米粒培养基:玉米粒浸泡12h，然后煮30min40 min，装人三角瓶或耐高温高压的聚丙烯塑料袋中于1210C下灭菌1h，冷却后将在PDA上培养的病原

11、菌接人三角瓶或塑料袋中，250C下培养。麦粒培养基:浸泡麦粒至略涨，装人兰角瓶中于1210C下灭菌1h，冷却后将在PDA上培养的病原菌接人瓶中，250C下培养。NY/T 1248.7-2016 A.4 镰于包菌的分子鉴定镰抱属和种的特异性分子检测:针对镰抱菌脱氧核糖核酸CDeoxyribonucleicacid,DNA)中属和种的特异性序列，用特异性引物进行扩增。镰子包属和种的特异性引物、扩增产物大小及扩增所需要的退火温度见表A.10 表A.l镰于包属、禾谷镰抱和拟轮枝镰弛的特异性引物检测真菌寻|物引物序列(5-3)扩增片段退火温度bp Fusarium spp.ItsF AACTCCCAAA

12、CCCCTGTGAACATA 431 58 ItsR TTTAACGGCGTGGCCGC F.graminean/1n Fg16NF ACAGATGACAAGATTCAGGCACA 280 57 Fg16NR TTCfTGACATCTGTTCAACCCA F.verticiLlioides VERl CT寸CCTGCGATGTTTCTCC578 56 VER2 AA丁寸GGCCA1寸GGTATTATATATCTAD NY/T 1248.7-2016 附录B(资料性附录)玉米镰抱茎腐病抗性鉴定对照材料B.1 抗病鉴定对照材料齐319，对镰抱茎腐病表现稳定的高抗(Highlyresistant,H

13、R)，选自美国玉米杂交种P785990 B.2 感病对照自交系掖478，对镰抱茎腐病表现稳定的高感CHighlysusceptible.HS)，选自玉米自交系U8112和沈5003的组配后代。6 NY/T 1248.7-2016 参考文献 lAfolabi C.G.，Oji缸丑boP.S.Ekpo E.J.A.et al,2008.Novcl sources of resistancc to F usarium stalk rot of maize in tropical AfricaJ.Plant Diseasc.92(5):772-780 2Ahmad y,Hamced A.Aslam M

14、,1997.Estimation of yield losses in com due 10 stalk rot pathogens J.Pakistan Jour nal of Botany.29(2):229-234 3Calvert O.H.,Zuber M.S,1966.lmproved technique for inoculating stalk rots in com(Zea 1I1ays L.)J.Agronomy Joumal.58(4):456 4Drepper W.J.Renfro B.L.1990.Comparison of methods for inoculatn

15、of ears and stalks of maizc with Fusarium monilifonneJ.Plant Disease(74):952-956 5Gatch E.W.Hcllmich R.L.,Munkvold G.P.2002.A comparison of maize stalk rot occurrence in Bt and non-Bt hy-bridsJ.Plant Diseasc(86):1149-1155 6 Hooker A.L.1956.Association of resistance to several seedling.root.stalk.and

16、 ear diseases of com J.Phytopathol ogy(46):379-384 7 Maloy O.C,1993.Plant diseasc control:Principles and practiccM.John Wiley&.Sons,lnc.Ncw York 8McGee D.C.1988.Maize d 凶eascs M.APS Press.Mi、叽灿4但mr 9叼Sh巳ekharM.,Kumar S,2012.lnoculation methods and diseasc rating scales for maizc diseases M.2nd ed.Alpha Printo-graphics(lndia)口OWh阳D.G,1999.Compendium of com diseases M.3时ed.APS Press.Minnesota 7