血清乳酸脱氢酶LDH测定.doc

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1、血清乳酸脱氢酶LDH测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。2 实验原理LDHLDH催化乳酸氧化为丙酮酸，同时将NAD+还原为NADH，NADH的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活力成正比。 L-乳酸 + NAD+ 丙酮酸 + NADH + H+3 标本：3.1 病人准备：无特殊。3.2 类型：血清或EDTA血浆。3.3 标本存放：3天内的活性损失：28保存：8%；1525保存：2%。3.4 标本运输：常温条件下保存运输。3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司LDH试剂盒（沪食药监械（准）字2014第

2、2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成 试剂1（R1） 乳酸 62.5mmol/L 氯化钾 190mmol/L Tris缓冲液 100mmol/L 试剂2（R2） NAD+ 30mmol/L Tris缓冲液 100mmol/L 4.1.2试剂准备 试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存：28避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。试剂1 与试剂2 启用后，在210避光的条件下可稳定14天。4.1.4 变质指示 当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.1.5 注意事项 试剂中

3、含叠氮钠为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的LDH校准品对自动分析仪进行校准。4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-240

4、0生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。8 计算方法 以LDH复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。9 参考值范围 成人： 114240 儿童： 130天 145765 125735 31天1年 190420 170450 13岁 1

5、65395 155345 46岁 135345 155345 79岁 140280 145300 1012岁 120260 120325 1315岁 100275 120290 1618岁 105230 105235参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。我室参考值：109245u/l10 临床意义 乳酸脱氢酶（LDH）由五种不同的同工酶组成，催化L-乳酸与丙酮酸的相互转换。LDH存在于人体所有组织的细胞质中，在肝、心和骨骼肌中含量较高，在红细胞、胰腺、肾和胃中含量较低。在多种病理情况下出现LDH活力的升高，如心肌梗死、癌症、肝脏疾病、

6、血液疾病或肌肉疾病。由于LDH缺乏器官特异性，因此在鉴别诊断时，有必要作LDH同工酶和其它酶类的测定，如碱性磷酸酶、丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶。11 操作性能11.1试剂空白吸光度（340nm、1cm光径&37）：0.50A。 11.2线性范围：1000U/L10%，线性相关系数（r）0.990。 11.3准确度：用相对偏差（RE%）表示测定结果的不准确度，相对偏差（RE%）10%。 11.4精密度：(1)批内精密度：变异系数（CV%）5%；(2)批间精密度：相对极差（%）5%。 12 超出范围结果处理 本试剂的线性范围为1000U/L。当样本中乳酸脱氢酶活性高于1000U/L时，

7、应将样品用9g/L氯化钠溶液作1:9稀释，重新测定，结果乘以10。13 病危报警值的处理 无警告/危急值14 方法局限性14.1测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。 14.2甘油三酯浓度9.5mmol/L或877mg/dL、胆红素浓度490mol/L或29mg/dL对测定无影响。溶血样本可对测定结果产生干扰，应避免用于测定。 14.3有关可能干扰本测定的药物或物质， 14.4试剂启用后，在210避光的条件下可稳定14天。若试剂混浊，或以水为空白在波长340nm处的吸光度值大于0.6A，则不能使用。 15 补救措施 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献 16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书.