微生物检验实验室肠杆菌标准操作规程.doc

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1、微生物检验实验室肠杆菌标准操作规程1. 概述肠杆菌属包括阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、阪崎肠杆菌、格高肠杆菌、中间肠杆菌、河生肠杆菌、日沟肠杆菌、生癌肠杆菌和梨形肠杆菌等14个种。2. 标本类型痰液、脑脊液、穿刺液、脓液、血液等标本。3. 鉴定3.1 形态与染色 革兰阴性粗短杆菌，有周身鞭毛，无芽胞，与其他肠杆菌科细菌相似。3.2 培养特性 在血琼脂平板上菌落呈灰白色，不溶血；在麦康凯等培养基上因发酵乳糖形成红色、较大菌落；在中国蓝琼脂平板上形成中等大小、蓝色菌落。3.3生化反应 氧化酶试验阴性，TSI为A/A；发酵葡萄糖、乳糖、山梨醇等多种糖类，不发酵卫矛醇；IMViC-+，动力、鸟氨酸脱羧酶、精

2、氨酸双水解酶和硝酸盐还原试验均阳性，H2S、赖氨酸脱羧酶试验阴性。3.4 鉴别要点3.4.1 本菌特征：发酵葡萄糖等多种糖类，IMViC-+，动力、鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶试验均为阳性。3.4.2 阴沟肠杆菌与成团泛菌的鉴别 阴沟肠杆菌鸟氨酸脱羧酶、精氨酸双水解酶试验均阳性，赖氨酶脱羧酶试验阴性；成团泛菌鸟氨酸脱羧酶、精氨酸双水解酶、赖氨酸脱羧酶试验均阴性， 并产黄色色素。3.4.3 阴沟肠杆菌与产气肠杆菌的鉴别 阴沟肠杆菌精氨酸双水解酶试验阳性，赖氨酸脱羧酶试验阴性；产气肠杆菌相反。3.4.4 产气肠杆菌与成团泛菌的鉴别 前者鸟氨酸脱羧酶和赖氨酶脱羧酶试验阳性，而后者相反。3.5 操作步

3、骤3.5.1 氧化酶试验 参见 氧化酶试验标准操作规程 。 3.5.2 从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化法进行细菌鉴定。4. 药敏参见 药物敏感性试验标准操作规程 及CLSI M100-S20最新版本文件。5. 质量控制参见 质量管理程序 。检验结果解释与分析阴沟肠杆菌既存在ESBLs问题，有存在AmpC酶的问题，故耐药情况严重，应根据药敏试验和耐药机制检测报告选药。如果检出上述两种酶，体外试验对对青霉素类、头孢菌素类或氨曲南敏感，也应报告对其耐药；同时对头霉素、酶抑制剂也耐药。重症感染者首先碳青酶烯类抗生素治疗。产气肠杆菌与阴沟肠杆菌一样，临床上使用三代头孢菌素治疗的过程易产生耐药性，通常在治疗3-4日左右即转化为耐药菌株，因此应定期复查菌株的敏感性。临床意义阴沟肠杆菌广泛存在于水、土壤等外界环境和肠道中，也是一种条件致病菌，可引起尿道感染、肾盂肾炎、呼吸道和伤口感染，以及败血症等。鉴定流程尿、痰、血液等麦康凯琼脂平板呈粉红色菌落仪器或手工鉴定并做药敏试验肠杆菌属氧化酶-参考文献 1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.2008编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人：