2019浙科版高中生物一轮复习选修ppt课件.ppt

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1、 选修1 第1讲微生物的利用 考点一培养基及无菌技术考点一培养基及无菌技术1.1.培养基培养基: :(1)(1)概念概念: :由适于微生物生长繁殖需要的各种营养物质由适于微生物生长繁殖需要的各种营养物质人工配制而成的基质。人工配制而成的基质。(2)(2)类型类型: :划分划分标准标准种类种类特点特点用途用途按物理按物理性质分性质分固体固体培养基培养基加入凝固剂加入凝固剂, ,如琼脂、如琼脂、明胶、硅胶等明胶、硅胶等常用于微生物分离、鉴定、常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面计数和菌种保存等方面划分划分标准标准种类种类特点特点用途用途按物理按物理性质分性质分半固体半固体培养基培养基在液体

2、培养基中加入少在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状量凝固剂而呈半固体状态态可用于观察细菌的运动、可用于观察细菌的运动、鉴定菌种等方面鉴定菌种等方面液体液体培养基培养基不加任何凝固剂不加任何凝固剂常用于发酵工业和微生物常用于发酵工业和微生物扩大培养扩大培养划分划分标准标准种类种类特点特点用途用途按用按用途分途分选择选择培养基培养基根据某一种或某一类微生物的根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基化学抗性而设计的培养基培养、分离特定的微生物培养、分离特定的微生物鉴别鉴别培养基培养基加入某种试剂或化学药品加入某种试剂或化学药品, ,使培

3、使培养后发生某种变化的培养基养后发生某种变化的培养基鉴别不同类型的微生物鉴别不同类型的微生物(3)(3)培养基成分培养基成分: :一般都含有水、碳源、氮源、无机盐、一般都含有水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等生长因子等, ,此外还要满足微生物生长对此外还要满足微生物生长对pHpH、特殊营、特殊营养物质以及氧气的要求。养物质以及氧气的要求。2.2.无菌技术无菌技术: :(1)(1)灭菌的目的灭菌的目的: :无菌技术除了用来防止实验室的培养无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外物被其他外来微生物污染外, ,还能有效避免操作者自还能有效避免操作者自身被微生物感染。身被微生物感染。(

4、2)(2)灭菌原因灭菌原因: :使所利用的微生物不被其他微生物污染。使所利用的微生物不被其他微生物污染。(3)(3)无菌操作的条件。无菌操作的条件。各种器皿必须是无菌的。各种器皿必须是无菌的。各种培养基必须是无菌的。各种培养基必须是无菌的。细菌转移操作的过程必须是无菌的。细菌转移操作的过程必须是无菌的。(4)(4)三种常用灭菌方法的比较三种常用灭菌方法的比较: :灭菌灭菌方法方法适用材料或用具适用材料或用具灭菌条件灭菌条件灭菌灭菌时间时间灼烧灼烧灭菌灭菌接种环、接种针或其他金属接种环、接种针或其他金属用具用具在酒精灯火焰的充分燃在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧烧层灼烧直至烧红直至烧红干热干热灭菌灭

5、菌玻璃器皿玻璃器皿( (吸管、培养皿吸管、培养皿) )和和金属用具等金属用具等干热灭菌箱内干热灭菌箱内,160,160170 170 加热加热1 12 h2 h高压蒸高压蒸汽灭菌汽灭菌培养基等培养基等100 kPa,121 100 kPa,121 151530 min30 min(5)(5)消毒和灭菌消毒和灭菌: :项目项目消毒消毒灭菌灭菌理化因素的理化因素的作用强度作用强度较为温和较为温和强烈强烈方方 法法煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒、煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒、紫外线消毒紫外线消毒灼烧灭菌、干热灼烧灭菌、干热灭灭菌、高压蒸汽灭菌、高压蒸汽灭菌菌项目项目消毒消毒灭菌灭菌消灭微生物消

6、灭微生物的数量的数量部分生活状态的微生物部分生活状态的微生物全部微生物全部微生物芽孢和孢子芽孢和孢子能否被消灭能否被消灭不能不能能能考点二大肠杆菌的培养和分离考点二大肠杆菌的培养和分离1.1.培养和分离实验步骤培养和分离实验步骤: :2.2.纯化大肠杆菌的方法纯化大肠杆菌的方法: :常用的微生物接种方法有划线分离法和涂布分离法。常用的微生物接种方法有划线分离法和涂布分离法。(1)(1)划线分离法划线分离法: :是通过接种环在琼脂固体培养基表面是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作连续划线的操作, ,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。基的表面。(2)(

7、2)涂布分离法涂布分离法: :是将菌液进行一系列的梯度稀释是将菌液进行一系列的梯度稀释, ,然然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面表面, ,进行培养。进行培养。3.3.两种纯化大肠杆菌方法的比较两种纯化大肠杆菌方法的比较: :比较比较项目项目划线分离法划线分离法涂布分离法涂布分离法工具工具接种环接种环玻璃刮刀玻璃刮刀原理原理通过接种环在琼脂固体培通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作养基表面连续划线的操作, ,将聚集的菌种逐步稀释分将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次散到培养基表面。在数次划线后培养划线后培养, ,可以

8、分离到可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的细胞群体眼可见的细胞群体, ,即菌即菌落落将菌液进行一系列的梯度稀释将菌液进行一系列的梯度稀释, ,然然后将不同稀释度的菌液分别涂布到后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。琼脂固体培养基的表面进行培养。在稀释度足够高的菌液里在稀释度足够高的菌液里, ,聚集在聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞一起的微生物将被分散成单个细胞, ,从而能在培养基表面形成单个的菌从而能在培养基表面形成单个的菌落落比较比较项目项目划线分离法划线分离法涂布分离法涂布分离法优点优点可以观察菌落特征可以观察菌落特征, ,对混合菌对混合

9、菌进行分离进行分离单菌落更易分开单菌落更易分开, ,可以计数可以计数, ,可以观察菌可以观察菌落特征落特征比较比较项目项目划线分离法划线分离法涂布分离法涂布分离法缺点缺点不适宜计数不适宜计数吸收量较小吸收量较小, ,操作较复杂操作较复杂, ,平板不干燥平板不干燥效果不好效果不好, ,容易蔓延容易蔓延目的目的使培养基上形成单个细胞繁殖而来的子细胞群体使培养基上形成单个细胞繁殖而来的子细胞群体菌落菌落考点三分离以尿素为氮源的微生物考点三分离以尿素为氮源的微生物1.1.实验原理实验原理: :(1)(1)以尿素为唯一氮源的培养基培养细菌时以尿素为唯一氮源的培养基培养细菌时, ,只有含有只有含有脲酶的细

10、菌能够正常生长脲酶的细菌能够正常生长, ,据此可分离出以尿素为氮据此可分离出以尿素为氮源的微生物。源的微生物。(2)(2)细菌合成的脲酶能将尿素分解成细菌合成的脲酶能将尿素分解成NH3,NH3,使使pHpH升高升高, ,使使酚红指示剂变红。酚红指示剂变红。2.2.实验步骤实验步骤: :3.3.注意事项注意事项: :(1)(1)一般选择菌落数在一般选择菌落数在3030300300的平板进行计数。的平板进行计数。(2)(2)统计菌落数往往比活菌的实际数目低。统计菌落数往往比活菌的实际数目低。(3)(3)统计菌落数一般用菌落数而不是用活菌数来表示。统计菌落数一般用菌落数而不是用活菌数来表示。(4)(

11、4)设置对照设置对照: :目的是排除实验组中非测试因素对实验目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响结果的影响, ,提高实验结果的可信度。提高实验结果的可信度。类型一培养基及无菌技术类型一培养基及无菌技术1.(20171.(2017杭州模拟杭州模拟) )据报道据报道, ,葡萄球菌是一群革兰氏葡萄球菌是一群革兰氏阳性球菌阳性球菌, ,因常堆聚成葡萄串状因常堆聚成葡萄串状, ,故得名。多数为非致故得名。多数为非致病菌病菌, ,少数可导致疾病。葡萄球菌能分解卵黄中的卵少数可导致疾病。葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂磷脂, ,在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围

12、会出现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题。现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题。(1)(1)某小组想检测某饮料中是否含有葡萄球菌以及该某小组想检测某饮料中是否含有葡萄球菌以及该菌的含量菌的含量, ,请帮他们完善相关步骤。请帮他们完善相关步骤。配制培养基配制培养基: :称取适量的牛肉膏、蛋白胨、称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaClNaCl、琼脂等琼脂等, ,加入蒸馏水加入蒸馏水, ,搅拌加热至完全溶解后搅拌加热至完全溶解后_,_,分装到锥形瓶后利用分装到锥形瓶后利用_进进行灭菌行灭菌, ,在无菌状态下加入卵黄液在无菌状态下加入卵黄液(100 mL 10%(100 mL 10%灭菌灭菌NaClN

13、aCl溶液中加一个鸡蛋黄溶液中加一个鸡蛋黄, ,振荡均匀振荡均匀),),摇匀后立即倒摇匀后立即倒平板。平板。接种接种: :将将1 mL1 mL待检测饮料稀释待检测饮料稀释1010倍倍, ,在在5 5个平板上接个平板上接入入0.1 mL0.1 mL的稀释液。将上述接种后的平板同时放在的稀释液。将上述接种后的平板同时放在37 37 的恒温箱中培养的恒温箱中培养24 h24 h。观察观察: :观察平板观察平板,5,5个平板上的菌落数分别为个平板上的菌落数分别为2020、1818、1212、1414、16,16,据此可得出每升饮料中的活菌数为据此可得出每升饮料中的活菌数为_个。个。(2)(2)培养基中

14、的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供殖提供_。(3)(3)下列有关划线分离法的操作正确的是下列有关划线分离法的操作正确的是_。A.A.接种环在每次划线前需在菌液中蘸取一次接种环在每次划线前需在菌液中蘸取一次B.B.在超净台上进行接种时必须保证紫外灯处于开放状在超净台上进行接种时必须保证紫外灯处于开放状态态C.C.接种前接种前, ,应先使接种环接触培养基以达到冷却的目应先使接种环接触培养基以达到冷却的目的的, ,然后再取菌体然后再取菌体D.D.在每份固体培养基表面都可形成单菌落在每份固体培养基表面都可形成单菌落【解析】【解析】(1)(1)配制培养基时

15、配制培养基时, ,分装前要调节分装前要调节pH,pH,培养基培养基通常用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌处理。通常用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌处理。0.1 mL0.1 mL稀释液稀释液含细菌数为含细菌数为(20+18+12+14+16)(20+18+12+14+16)5=165=16个个, ,可得出每升可得出每升饮料含有的活菌数为饮料含有的活菌数为1616101010103 310=1.610=1.610106 6( (个个) )。(2)(2)牛肉膏和蛋白胨能为葡萄球菌的生长和繁殖提供碳牛肉膏和蛋白胨能为葡萄球菌的生长和繁殖提供碳源和氮源。源和氮源。(3)(3)接种环在初次划线前在菌液中蘸取一接种环在初次划

16、线前在菌液中蘸取一次次,A,A错误错误; ;在超净台进行操作时应关闭紫外灯在超净台进行操作时应关闭紫外灯,B,B错误错误; ;接种前接种前, ,应先使接种环接触培养基以达到冷却的目的应先使接种环接触培养基以达到冷却的目的, ,然后再取菌体然后再取菌体, ,防止过高的温度使菌体死亡防止过高的温度使菌体死亡,C,C正确正确; ;划划线分离不一定在每个培养基上都出现单菌落线分离不一定在每个培养基上都出现单菌落,D,D错误。错误。答案答案: :(1)(1)调节调节pHpH高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅1.61.610106 6(2)(2)碳源和氮源碳源和氮源(3)C(3)C2.2.有机农药苯磺隆是一种除

17、草剂有机农药苯磺隆是一种除草剂, ,长期使用会污染环长期使用会污染环境。研究发现境。研究发现, ,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。如图甲、乙所示。(1)(1)该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源碳源, ,其原因是其原因是_。(2)(2)纯化菌株时纯化菌株时, ,通常使用的划线工具是通常使用的划线工具是_。划。划线的某个平板培养后线的某个平板培养后, ,第一划线区域的划线上都不间第一划线区域的划线上都不间断

18、地长满了菌断地长满了菌, ,第二划线区域所划的第一条线上无菌第二划线区域所划的第一条线上无菌落落, ,其他划线上有菌落。造成划线无菌落的操作失误其他划线上有菌落。造成划线无菌落的操作失误不可能是不可能是_。A.A.接种环灼烧后未冷却接种环灼烧后未冷却B.B.划线未从第一区域末端开始划线未从第一区域末端开始C.C.接种环没有经过灭菌接种环没有经过灭菌D.D.划线时从空白处开始划线时从空白处开始(3)(3)为探究苯磺隆的降解机制为探究苯磺隆的降解机制, ,将该菌种的培养液过滤将该菌种的培养液过滤离心离心, ,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_,_,该实该

19、实验设计是否合理验设计是否合理?_,?_,为什么为什么?_?_。【解析】【解析】(1)(1)选择培养基只允许特定种类的微生物生选择培养基只允许特定种类的微生物生长长, ,实验中要分离降解苯磺隆的菌株实验中要分离降解苯磺隆的菌株, ,因而所用选择培因而所用选择培养基必须以苯磺隆作为唯一碳源。养基必须以苯磺隆作为唯一碳源。(2)(2)纯化菌株时纯化菌株时, ,通通常使用的划线工具是接种环常使用的划线工具是接种环; ;接种环在平板上每一次接种环在平板上每一次划线前划线前, ,都要先灼烧灭菌并冷却都要先灼烧灭菌并冷却, ,而且要从上一次划线而且要从上一次划线末端而非空白处开始划线末端而非空白处开始划线

20、, ,不冷却会烫死上次划线末不冷却会烫死上次划线末端菌株端菌株, ,而空白处不存在菌株。而空白处不存在菌株。(3)(3)图乙中将蛋白酶溶图乙中将蛋白酶溶液加入上清液中液加入上清液中, ,可知蛋白酶用于水解上清液中的某可知蛋白酶用于水解上清液中的某蛋白质蛋白质, ,由此可判定实验假设是目的菌株通过分泌某由此可判定实验假设是目的菌株通过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆种蛋白质来降解苯磺隆, ,但是需要设置不加入蛋白酶但是需要设置不加入蛋白酶的对照实验的对照实验, ,否则没有说服力否则没有说服力, ,因而实验设计不合理。因而实验设计不合理。答案答案: :(1)(1)只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖只

21、有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖(2)(2)接种环接种环C C(3)(3)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理缺少空白对照白质不合理缺少空白对照类型二大肠杆菌的培养和分离类型二大肠杆菌的培养和分离1.(20171.(2017湖州模拟湖州模拟) )请回答下列与请回答下列与“大肠杆菌的培养大肠杆菌的培养和分离和分离”实验有关的问题实验有关的问题: :(1)(1)该实验中该实验中, ,常采用常采用_培养基扩大培养大培养基扩大培养大肠杆菌肠杆菌; ;扩大培养后再在扩大培养后再在_培养基上划线培养基上划线进行分离。进行分离。(2)(2)分离大肠杆菌的两种方法各有特点分离

22、大肠杆菌的两种方法各有特点, ,其中其中_法操作简单法操作简单, ,而而_法操作复杂法操作复杂些些, ,但是单菌落更易分开。但是单菌落更易分开。(3)(3)该实验中该实验中, ,将菌液在培养基上划线后要盖好培养皿将菌液在培养基上划线后要盖好培养皿, ,最后将培养皿最后将培养皿_,_,放在恒温培养箱中培放在恒温培养箱中培养。养。(4)(4)利用大肠杆菌做实验利用大肠杆菌做实验, ,使用过的器皿都必须进行使用过的器皿都必须进行_处理。处理。【解析】【解析】(1)(1)大肠杆菌的培养和分离实验中大肠杆菌的培养和分离实验中, ,常采用常采用LBLB液体培养基对大肠杆菌进行扩大培养液体培养基对大肠杆菌进

23、行扩大培养; ;在进行划线分在进行划线分离时离时, ,则采用则采用LBLB固体培养基进行划线分离。固体培养基进行划线分离。(2)(2)分离大分离大肠杆菌的两种方法各有特点肠杆菌的两种方法各有特点, ,其中划线分离法操作简其中划线分离法操作简单单, ,而涂布分离法操作相对复杂一些而涂布分离法操作相对复杂一些, ,但是单菌落更易但是单菌落更易分开。分开。(3)(3)该实验中该实验中, ,将菌液在培养基上划线后要盖好将菌液在培养基上划线后要盖好培养皿培养皿, ,最后将培养皿倒置最后将培养皿倒置( (盖在下面盖在下面),),放在恒温培养放在恒温培养箱中培养。箱中培养。(4)(4)利用大肠杆菌做实验利用

24、大肠杆菌做实验, ,使用过的器皿都使用过的器皿都必须进行灭菌处理必须进行灭菌处理, ,防止污染。防止污染。答案答案: :(1)LB(1)LB液体液体LBLB固体固体(2)(2)划线分离涂布分离划线分离涂布分离(3)(3)倒置倒置(4)(4)灭菌灭菌2.2.下列是有关大肠杆菌的培养实验下列是有关大肠杆菌的培养实验, ,请回答请回答: :(1)(1)配制培养大肠杆菌的培养基时配制培养大肠杆菌的培养基时, ,根据根据“细菌喜荤细菌喜荤, ,霉菌喜素霉菌喜素”的规律的规律, ,通常在培养基中加入蛋白胨和通常在培养基中加入蛋白胨和_作为营养物质作为营养物质, ,为维持一定的渗透压为维持一定的渗透压, ,

25、常需常需加入一定量的加入一定量的_。(2)(2)大肠杆菌培养和分离的实验中大肠杆菌培养和分离的实验中, ,为了检测接种、培为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及养过程是否受杂菌污染以及_,_,应同时将未接种的培养应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱中培养。基放入恒温培养箱中培养。(3)(3)关于关于“大肠杆菌的培养和分离大肠杆菌的培养和分离”操作中操作中, ,下列叙述下列叙述正确的是正确的是_。A.A.高压灭菌加热结束时高压灭菌加热结束时, ,打开放气阀使压力表指针回打开放气阀使压力表指针回到零后到零后, ,开启锅盖开启锅盖B.B.倒平板时倒平板时, ,应将打开的皿盖放到一边应将打开的皿盖放

26、到一边, ,以免培养基溅以免培养基溅到皿盖上到皿盖上C.C.为了防止污染为了防止污染, ,接种工具经火焰灭菌后应趁热快速接种工具经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落挑取菌落D.D.用记号笔标记培养皿中菌落时用记号笔标记培养皿中菌落时, ,应标记在皿底上应标记在皿底上【解析】【解析】(1)(1)细菌培养基通常加入蛋白胨和酵母提取细菌培养基通常加入蛋白胨和酵母提取物作为营养物质物作为营养物质, ,并加入一定量的氯化钠维持渗透并加入一定量的氯化钠维持渗透压。压。(2)(2)培养过程中培养过程中, ,为检测接种、培养过程是否受杂为检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及无菌操作是否规范菌污染以及无菌操作是否规范

27、, ,通常将未接种的培养通常将未接种的培养基放入恒温培养箱中培养作为对照基放入恒温培养箱中培养作为对照, ,若出现菌落若出现菌落, ,说明说明上述操作存在杂菌污染。上述操作存在杂菌污染。(3)(3)高压灭菌锅随着加热高压灭菌锅随着加热, ,锅锅内压力升高内压力升高, ,有压力后开始计时灭菌有压力后开始计时灭菌15 min,15 min,灭菌后灭菌后, ,待高压锅或灭菌锅压力与大气压相同时待高压锅或灭菌锅压力与大气压相同时( (即没有压力即没有压力了了) )打开锅盖打开锅盖, ,此时压力不为此时压力不为0,A0,A错误错误; ;倒平板时倒平板时, ,在超在超净台上将培养皿打开上盖的一边净台上将培

28、养皿打开上盖的一边, ,将培养基倒在培养将培养基倒在培养皿中皿中, ,立即盖上上盖立即盖上上盖, ,置于水平位置上置于水平位置上,B,B错误错误; ;接种工接种工具经火焰灼烧灭菌后具经火焰灼烧灭菌后, ,接种前接种前, ,应先使接种工具接触培应先使接种工具接触培养基以达到冷却的目的养基以达到冷却的目的, ,然后再取菌体然后再取菌体,C,C错误错误; ;可在培可在培养皿皿底上使用记号笔标记培养皿中的菌落养皿皿底上使用记号笔标记培养皿中的菌落,D,D正确。正确。答案答案: :(1)(1)酵母提取物氯化钠酵母提取物氯化钠(2)(2)无菌操作是否规无菌操作是否规范范(3)D(3)D类型三分离以尿素为氮

29、源的微生物类型三分离以尿素为氮源的微生物(2016(2016浙江浙江1010月选考真题节选月选考真题节选) )请回答从土壤中分离请回答从土壤中分离产脲酶细菌和脲酶固定化实验的有关问题产脲酶细菌和脲酶固定化实验的有关问题: :(1)LB(1)LB固体培养基固体培养基: :取适量的蛋白胨、酵母提取物、取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl,NaCl,加入一定量的蒸馏水溶解加入一定量的蒸馏水溶解, ,再加再加_,_,灭菌灭菌备用。备用。(2)(2)尿素固体培养基尿素固体培养基: :先将适宜浓度的尿素溶液用先将适宜浓度的尿素溶液用_灭菌过的灭菌过的G6G6玻璃砂漏斗过滤玻璃砂漏斗过滤, ,因为因为G6G

30、6玻璃玻璃砂漏斗砂漏斗_,_,故用于过滤除菌。然后故用于过滤除菌。然后将尿素溶液加入已经灭菌的含有酚红的培养基中将尿素溶液加入已经灭菌的含有酚红的培养基中, ,备备用。用。(3)(3)取适量含产脲酶细菌的取适量含产脲酶细菌的1010-4-4、1010-5-5两种土壤稀释液两种土壤稀释液, ,分别涂布接种到分别涂布接种到LBLB固体培养基和尿素固体培养基上固体培养基和尿素固体培养基上, ,培养培养48 h,48 h,推测固体培养基上生长的菌落数最少的是推测固体培养基上生长的菌落数最少的是_(A.10_(A.10-5-5稀释液稀释液+ +尿素固体培养基尿素固体培养基B.10B.10-5-5稀稀释液

31、释液+LB+LB固体培养基固体培养基C.10C.10-4-4稀释液稀释液+ +尿素固体培养基尿素固体培养基D.10D.10-4-4稀释液稀释液+LB+LB固体培养基固体培养基) )。(4)(4)制备固定化脲酶时制备固定化脲酶时, ,用石英砂吸附脲酶用石英砂吸附脲酶, ,装柱。再装柱。再用蒸馏水洗涤固定化酶柱用蒸馏水洗涤固定化酶柱, ,其作用是其作用是_。【解析】【解析】(1)(1)配制固体培养基时通常加入琼脂糖作凝配制固体培养基时通常加入琼脂糖作凝固剂。固剂。(2)(2)实验常用高压蒸汽灭菌法对实验常用高压蒸汽灭菌法对G6G6玻璃砂漏斗灭菌玻璃砂漏斗灭菌;G6;G6玻璃砂漏斗孔径小玻璃砂漏斗孔

32、径小, ,细菌不能滤过细菌不能滤过, ,所以常用于过滤除所以常用于过滤除菌。菌。(3)(3)尿素固体培养基上只有产脲酶细菌可以生长尿素固体培养基上只有产脲酶细菌可以生长, ,所以所以同等条件下在尿素固体培养基上形成的菌落数比在同等条件下在尿素固体培养基上形成的菌落数比在LBLB固体培养基上形成的菌落数少。同等条件下稀释倍数固体培养基上形成的菌落数少。同等条件下稀释倍数越大越大, ,在固体培养基上形成的菌落数越少。综合以上在固体培养基上形成的菌落数越少。综合以上分析分析, ,培养培养48 h48 h后后, ,形成菌落数最少的是形成菌落数最少的是A A。(4)(4)制备固定化脲酶时制备固定化脲酶时, ,用蒸馏水洗涤固定化酶柱的目用蒸馏水洗涤固定化酶柱的目的是除去酶柱中未被固定的游离的脲酶的是除去酶柱中未被固定的游离的脲酶, ,以防止脲酶以防止脲酶混入反应产物。混入反应产物。答案答案: :(1)(1)琼脂糖琼脂糖(2)(2)高压蒸汽孔径小高压蒸汽孔径小, ,细菌不能滤细菌不能滤过过(3)A(3)A(4)(4)除去游离的脲酶除去游离的脲酶