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1、碱性磷酸酶染色(NAP)碱性磷酸酶染色NAP碱性磷酸酶染色NAP在临床的应用基本属于常规筛查的染色法。1原理偶氮偶联法:血细胞内的碱性磷酸酶在pH9.49.6的条件下将基质液中的-磷酸萘酚钠水解,产生-萘酚与重氮盐偶联构成不溶性灰黑色沉淀,定位于酶活性所在之处。2结果判定:阳性结果为胞质内出现灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀一灰褐色沉淀,为0分。+胞质出现灰褐色沉淀,为1分。+胞质深褐色沉淀,为2分。+胞质中已基本充满棕黑色颗粒状沉淀,但密度较低,为3分。+胞质全被深黑色团块沉淀所充满,密度高,甚至遮盖胞核,为4分。3参考值:成熟中性粒细胞碱性磷酸酶NAP的积分值为751。由于各实验室的实验条件
2、不同,正常值也有差异,应建立本实验室的正常值。这里的正常值仅供参考。4临床意义1生理变化:年龄变化:新生儿NAP活性增高,以后下降。儿童期各年龄大致类似,成年期较儿童期活性减低,老年期更低。应激状态下的变化:紧张、恐惧、剧烈运动等NAP活性可增高。月经周期中的变化:经前期增高,行经后降低,经后期恢复。妊娠期的变化:妊娠23个月的NAP积分值轻度增高,以后逐月增高,分娩时达高峰,产后则恢复正常。2病理性变化:感染:细菌性感染时NAP积分值增高。在细菌性感染中球菌性感染较杆菌性感染为高;在球菌性感染中,急性较慢性为高。病毒性感染时,NAP积分值一般无明显变化。因而本染色法有时可帮助鉴别细菌性感染和
3、病毒性感染;血液病:慢性粒细胞白血病的NAP积分值明显减低,常为“0,缓解时NAP积分值上升到正常。类白血病反响时的NAP积分值明显增高,中性杆状核粒细胞的碱性磷酸酶活性加强,甚至中性晚幼粒细胞也呈阳性反响。因而本法常用来鉴别慢粒和类白血病反响及观察慢粒疗效的指标之一;急性粒细胞白血病时NAP积分值减低,急性淋巴细胞白血病时NAP积分值一般增高,因而本法可作为鉴别急粒和急淋的方法之一;急性单核细胞白血病时NAP积分值一般减低,有时可正常;粒细胞白血病合并细菌性感染时NAP积分值可增高,但不如单纯细菌性感染增高的明显;再生障碍性贫血的NAP积分值增高,当病情好转时,NAP积分值可下降,完全缓解时
4、NAP活性可恢复到正常,因而本法对再障的诊断、疗效观察和估计病情均有一定意义;阵发性睡眠性血红蛋白尿的NAP积分值减低,因而本法可作为鉴别阵发性睡眠性血红蛋白尿和再生障碍性贫血的方法之一;真性红细胞增加症的NAP积分值升高,而继发性红细胞增加症的NAP积分值无明显变化。因而本法可用来鉴别真性红细胞增加症和继发性红细胞增加症;骨髓增生异常综合征的NAP积分值减低;其他3其他应用肾上腺皮质激素、雌激素和ACTH后NAP积分值增高。在碱性磷酸酶NAP积分能够用来区别再生障碍性贫血和PNH,再障的时候NAP增高、PNH时NAP积分降低。这个谁都知道。但是百思不得其解。碱性磷酸酶染色的原理是几乎只在成熟
5、的中性粒细胞中才能是阳性的,中性粒细胞碱性磷酸酶临床意义:1慢粒细胞白血病慢粒的诊断及其与类白血病的鉴别:慢粒时,NAP积分值一般常为0分,个别可正常。在类白血病则积分显著增高。如慢粒合并感染或急变时可增高。2急性白血病细胞类型的鉴别:急性淋巴细胞白血病,NAP积分增高或正常,急性粒细胞白血病则降低,急性单核细胞白血病不定。3再生障碍性贫血再障与阵发性睡眠性血红蛋白尿的鉴别:急、慢性再障,积分增高,后者可明显降低。4白血病前期白前与再障鉴别:白前积分降低,而后者增高。5细菌性肺炎与病毒性肺炎鉴别:细菌性肺炎增高,后者降低。6真性与继发性红细胞增加症的鉴别:前者增高,后者若无感染则正常。7绿色瘤
6、与神经母细胞瘤的鉴别:前者积分降低,后者则增高。参考值:NAP染色只在中性分叶核、杆状核粒细胞中,偶在中性晚幼粒细胞中出现阳性,其他细胞一般阴性。NAP的正常值与实验室的条件有很大关系,不同医院正常值的差异能够很大,因而各实验室应有本人的正常值以利比拟。在新生儿,妊娠期及应用肾上腺皮质激素后,NAP的活性要比正常人强。中性粒细胞碱性磷酸酶中性粒细胞碱性磷酸酶NAP是中性粒细胞的标志酶,主要存在于成熟中性粒细胞内,是其胞质特殊颗粒释放的一种在碱性条件pH9.39.6能催化各种醇和酚的单磷酸酯水解的非特异性水解酶。NAP活力可反映成熟粒细胞的成熟程度和功能,随着细胞的成熟,酶的活性也逐步加强。当中性粒细胞活化后,NAP阳性率及积分升高在病理情况下,NAP活性的变化常有助于某些疾病的诊断和鉴别诊断。