实验八 氨基酸纸色谱（有机化学实验第八课时教学简案）.doc

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1、实验八 氨基酸纸色谱（有机化学实验第八课时教学简案）授课班级：医学部各专业 授课时间：见课表安排 授课地点：701-1245 等 授课教材：虞虹/薛明强主编基础化学实验授课学分：三分 授课教师：见课表安排【教学课题】实验八 氨基酸纸色谱 【教学目标】学习用纸色谱法分离、鉴定氨基酸的原理和方法，掌握纸色谱法分离和鉴定 氨基酸的操作技术。 【教学重点】纸色谱法分离、鉴定氨基酸的原理、相关基本操作 【教学难点】实验原理、操作技术 【教学方法】讲述、示范、讨论相结合 【教学过程】 【引言】色谱法是分离、提纯和鉴定有机化合物的重要方法。常用的色谱法有柱色谱法、 纸色谱法、薄层色谱法和气相色谱法。本次实验

2、学习的是纸色谱法分离、鉴定氨 基酸。 【讲述】 实验八 氨基酸纸色谱 一、实验目的（略，见教学目标） 二、实验原理 纸色谱法是选用特制的滤纸作为多孔支撑物，在大多数情况下，以原先就存在滤纸中 的水分为固定相，也可用不同的溶剂（硅胶油、石蜡油、汽油等）浸渍滤纸作为固定相。将 要分离的混合物点在滤纸的一端，当流动相（展开剂）沿滤纸流动经过样点时，混合物中各组分在固定相与流动相间连续发生多次分配，结果在流动相中具有较大溶解度的物质随 展开剂移动的速度较快，而在水中溶解度较大的物质随展开剂移动的速度较慢，经过一定 的时间展开后，混合物中的各组分便逐个地分离开。展开完成后，物质斑点的位置以 Rf值 （比

3、移值）鉴别：中 中 中 中 中 中 中 中 中 中 中 中 中 中 中 中中 中 中 中 中 中 中 中 中 中 中 中Rf =Rf值是每一个化合物的特征数值。Rf值随被分离化合物的结构、固定相与流动相的性 质、温度和滤纸质量不同而异，故重复性常常很差。因此，在对未知物进行定性鉴定的层 析谱时，总是同时展开一个已知物作为对照。本实验中，采用标准氨基酸作为对照物，以 分离和鉴定混合的氨基酸。氨基酸经纸上层析后的斑点不能直接看出，故常用茚三酮显色 剂显色。三、实验步骤（略，参见课本相关内容） 四、注意事项 1、 起点记号必须清楚可视；毛细管的封口必须折去，否则试液无法滴下。 2、 点样勿过大，可先在一般的滤纸上练习，熟练后在层析滤纸上正式进行。3、 层析用滤纸尽量勿使手指触碰，可用镊子夹取；点样完成后滤纸尽量卷 成圆筒状，不要成圆锥状。 4、 层析滤纸放入层析缸前，先将层析缸摇晃一下，使缸内充满层析液蒸气， 提高层析效果。5、 展开剂液面不能超过样点，滤纸不要接触展开缸壁。 6、 显色前用冷风吹干，显色时用热风吹干。 【演示】点样、层析操作的示范演示。【讨论】1、为何不能用手直接触摸层析用滤纸？2、显色时为何要用热风？用冷风行吗？