消 毒 剂 对 皮 肤 消 毒 模 拟 现 场 试 验.docx

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1、消 毒 剂 对 皮 肤 消 毒 模 拟 现 场 试 验2.1.2.7.1 目的 测定消毒剂对人工污染于皮肤表面细菌的杀灭作用，以验证该消毒剂对皮肤消毒实用剂量。2.1.2.7.2 试验器材 （1）试验菌株：金黄色葡萄球菌 ATCC 27217，对尚需用于杀灭其他特定细菌者，可增用该特定细菌进行试验。（2）胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA），见附录 A。（3）磷酸盐缓冲液(PBS，0.03mol/L，pH7.2)。（4）中和剂（中和剂经鉴定合格）。（5）液体肥皂 200g/L。（6）金属筒 （直径 2.2cm、高度 3cm）。（7）尼龙刮菌棒。（8）无菌纱布巾。（9）吸管、试管、平皿若干。（10）

2、振荡混合器。（11）一次性接种环（直径 4mm）。（12）抗生素软膏。（13）皮肤消毒剂。（14）恒温箱。2.1.2.7.3 试验步骤（1）菌悬液的制备按 2.1.1.2.3 规定的方法和要求进行。（2）使用液体肥皂清洗受试者前臂内侧 1min，用自来水冲净残留皂液，然后用无菌纱布擦干，以去除前臂内侧表面污染的自然菌。（3）用一端醮有印墨直径为 3.0cm 的玻璃筒扣印在受试者的每只前臂中段（不要在手腕和肘皱褶处），划分出一个试验区。（4）使用加样器取 10l 上述菌悬液，接种于前臂试验区（使回收菌落数为 2106 cfu/试验区1107 cfu/试验区），用一次性接种环，把菌悬液涂成一圆形，

3、与试验区边缘应有 4mm5mm 的距离，在空气中自然干燥。（5）根据消毒剂使用说明书的方法对右前臂内侧进行消毒，一般设定作用时间为 1 min3min。（6）消毒后用中和剂对前臂上接种的区域进行取样。采样时，将金属筒放置于试验区中间部位，罩住染菌区，不要接触到盖有印墨的边缘。将 1.0ml 中和剂吸移至金属筒内，用尼龙刮菌棒刮洗金属筒罩住区域内的皮肤 60s，将筒内液体吸移至试管内，再加 1.0ml 中和剂对该区域内的皮肤进行第二次刮洗 30s，将第二次擦洗的液体，注入含第一次刮洗液体的试管中，作为试验组样本。（7）以蒸馏水代替消毒剂对左前臂中段做同样处理，作为对照组样本。（8）每次试验分别将

4、未用过的同批中和剂、稀释液各 1.0ml 作为阴性对照组样本。（9）分别取适宜稀释度试验组、对照组样本和阴性对照组样本各1.0ml，以琼脂倾注法接种平皿，每个样本接种 2 个平皿，放 37恒温箱中培养 48h， 观察最终结果。（10）计算杀灭对数值。（11）试验不得少于 15 人次。2.1.2.7.4评价规定对照组回收菌落数为 2106cfu/试验区1107cfu/试验区，阴性对照组应无菌生长，且对每一人次皮肤表面人工污染的金黄色葡萄球菌的杀灭对数值均3.00 可判为消毒合格。2.1.2.7.5 注意事项（1）受试者录用标准1）年龄介于 18 岁至 65 岁的男性或女性；2）受试者应身体健康；3）前臂皮肤应完好无损且没有皮肤病及其它皮肤问题。（2）排除受试者的标准，如果受试者有下列情况之一，不能被录用参加试验1）怀孕妇女；2）诊断患有糖尿病、肝炎、艾滋病（HIV 阳性）、器官移植者。（3）试验采样结束后，先用 70%的酒精对受试者前臂进行消毒，然后用皮肤消毒剂对两只前臂进行消毒处理，处理后清水冲洗，擦干，再涂少量的抗生素软膏于试验区，以防皮肤感染。（4）在试验完成后的 48h 至 72h 内，受试者如发现前臂上有小脓疱、水疱，隆起的红色痒疱，应及时通知检验单位。