血清肌酸激酶CKDGKC推荐方法测定.doc

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1、血清肌酸激酶血清肌酸激酶 CKDGKCCKDGKC 推荐方法测定推荐方法测定1.1. 实验原理实验原理德国临床化学学会(DGKC)和国际临床化学学会(IFCC)推荐的连续监测法。ADP + 磷酸肌酸 肌酸 + ATPATP + 葡萄糖 ADP + 葡萄糖 -6-磷酸葡萄糖 -6-磷酸 +NADP+ 6-磷酸葡萄糖酸 +NADPH+H+NADPH 在 340nm 处有特异吸收，通过测定NADPH 生成速率计算出 CK 活性。2 2. . 标标本本：2.1 病人准备：无特殊要求。2.2 类型：血清，肝素或EDTA 血浆。3 3. . 标标本本存存放放： 稳定性： 28保存稳定 7 天;1525保存

2、稳定 1 天;-20保存稳定 4 周（避光保存）。3 天内的活性损失： 28保存 24 小时或 1822保存 1 小时至少损失 10%。4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下保存运输。CK己糖激酶(HK)(G6P-DH)5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂 奥林巴斯 CK 测定试剂盒（试剂1+试剂 2 ）6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质

3、，不能继续使用。6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯 AU2700 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数：参见AU2700 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件8.2 仪器操作步骤：参见AU2700 生化分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与

4、分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以2S 为质控警告限，3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程 .SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 TruCal U 复合校准品 CK 校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行CK 活力检测，可以直接使用 A/min 均值乘以计算因子得到结果，但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算CK 活力的计算因子见下表： A A/ /m mi in n因因子子 = = C CK K

5、 活活力力 U U/ /L L 计算因子（ 37）： 340nm 4127334nm 4207365nm 47291 12 2. . 参参考考值值范范围围1：（U/L）成人：女性 24167男性 24190参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义 1 1、 2 2 ：肌酸激酶（ CK）主要由存在于肌肉中的同工酶（ CK-M）和存在于脑中的同工酶（CK-B）组成。在血清中 CK 形式为 CK-MM，CK-MB，CK-BB 和巨酶等的二聚物。在心肌损伤或骨骼肌疾病时可以观测到CK活力的升高。 CK 和 C

6、K-MB 一起检测有助于心肌梗死的诊断和监视。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围 1200U/L14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法， AU2700 批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。批内精密度n=20x(U/L)s(U/L)CV(%)批间精密度n=20x(U/L)s(U/L)CV(%)样品 11593.182.00样品 149.51.052.12样品 22201.540.70样品 21571.631.04样品 35083.690.73样品 32282.311.0114.3 方法学比较：

7、本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 71 个样品进行 CK 活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.98x+0.02（U/L） ；r=1.000。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为5U/L。14.5 病人结果可报告范围： 5-1200U/L。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理： 无。1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法对 CK 活力的线性上限为1200U/L，当测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作 1+10 稀释，重新测定，结果乘以11。17.2 干扰物质 ：当样品中抗坏血酸浓度 1704mol/L，胆红素浓度

8、 684mol/L，血红蛋白 2.00g/L，甘油三酯浓度 22.6mmol/L 时没有观察到干扰。1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。1 19 9. . 参参考考文文献献1.Stein W. Creatine kinase (total activity)， creatine kinase isoenzymes and variants. In: Thomas L ed. Clinical laboratory diagnostics. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.71-80.

9、2.Moss DW， Henderson AR. Clinical enzymology. In: Burtis CA， Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. P.617-721.3.Recommendations of the German Society for Clinical Chemistry. Standardization of methods for the estimation of enzym

10、e activities in biological fluids: Standard method for the determination of creatine kinase activity. J Clin Chem Clin Biochem 1977;15:255-60.4. Lorentz K， Rohle G， Siekmann L. Introduction of new standard methods 1994 for the determination of catalytic enzyme concentrations at 37. DG Klinische Chemie Mitteilungen 1995;26:290-3.2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。