实验二 细胞器的观察及临时制片.ppt

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实验二 细胞器的观察及临时制片,前次实验报告存在问题小结!,1、图画得偏小或布局不合理;2、未找到典型细胞,形态失真;3、点点拖尾或涂阴影,线条粗细不均;4、结构标注不正确;5、细胞名称未写对。,一、实验目的,1、观察永久制片中各种细胞器的光镜下形态;,2、学习和掌握临时制片的原理和方法。,二、实验内容,1、细胞器永久制片的观察,(1)高尔基复合体,猫脊神经节切片,(1)高尔基复合体,10X,40X,(2)中心体,马蛔虫子宫受精卵细胞切片,10X,40X,(1)原理,2、洋葱内表皮临时制片,TritonX-100,一种非离子去垢剂,能去除细胞内除细胞骨架蛋白以外的所有蛋白质。,考马斯亮兰,一种非特异性的蛋白质染料,能使蛋白染色。, M缓冲液,含有促进微丝肌动蛋白聚合的所需成分。,(2)操作步骤,撕取洋葱鳞茎内表皮,6mM磷酸缓冲液5分钟,1%tritonX-100 37 23分钟,M缓冲液洗3次,5分钟/次,3%戊二醛固定10分钟,6mM磷酸缓冲液洗3次,8分钟/次,滴加0.2%考马斯亮兰染色15分钟,蒸馏水洗23次,装片观察,三、作业:,1、绘制示高尔基复合体和中心体的细胞图;2、绘制微丝的镜下结构。,

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