硝酸还原酶活性测定.ppt

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1、植物生理学实验,2014.9,联系方式,李小方 13916246051； 54341016张伟13816980334,课程目标与植物生理学理论知识相应的基本实验植物生理学研究的基本思路植物生理学实验课的开展形式植物生理学实验课的内容和具体安排实验课的基本要求植物生理学实验课的考核形式,一. 课程目标,掌握基本的植物生理学实验技术，达到能够针对具体的植物生理学问题进行研究。以能够解决植物生理学问题为主,二. 与植物生理学理论知识相应的基本实验,见网上文件：“与植物生理学理论相应的基本实验”,三. 植物生理学研究的基本思路,根据研究的目标确定研究内容，根据内容选择研究方法；多数生物学问题的研究包括

2、：形态，生理生化水平变化，内源调节物变化，基因表达和蛋白质调控水平变化；要注意研究内容（或所选择的研究指标）和研究目标的相关性,四. 实验课的开展形式植物生理学,以书面作业，自学方式理解和掌握实验原理；教师讲解，学生动手操作以学生为主体，以组为单位选择研究目标，设计研究方案，在教师指导下完成,五. 实验课内容和具体安排,实验理论。（书面作业：谈谈小液流法和质壁分离法测定植物组织水势的区别）（第1周）2.植物组织培养，研究植物细胞脱分化、再分化与激素的关系。如果自定植物材料，培养基配制要自己提出方案，并有切实可行的参考文献为依据，并且自己准备实验材料。从愈伤组织诱导到最后组培苗生根移栽要有详细记

3、录、照片为重要依据，最后（约2个月）提供完整实验报告（第2、3周）3. 叶绿体色素的提取、分离和理化性质分析；（要求自己采集实验材料） （第4周） 光合速率测定。（第5周）探究性方案的确定和仪器使用培训。（第6、7周）6. 探究性实验,五. 实验课内容和具体安排,详见网上“华东师范大学教学进度安排植物生理实验20140915”,在以下探究性实验选择其一，或自行设计并解决一探究性植物生理学问题原则上每个探究性实验测定不少于3个指标10月11日-10.23前把研究方案邮件提交给教师(以同组两个同学的名字作为文件名)教师修改完善通过方案后，10月21日到12月中旬完成实验探究性实验过程中至少要交一次

4、阶段性实验结果，最后交一综合性分析报告12月下旬进行PPT口头汇 报,探究性实验的选择和要求,探究性课题,盐胁迫对小麦和蚕豆萌发过程中胚乳与真叶的生理变化的影响 （周1班）1-1. 正常条件与盐胁迫下小麦萌发过程中胚乳的生理变化差异（淀粉含量、可溶性糖、可溶性蛋白质、生物量、淀粉酶、MDA含量、电导率）（2组）1-2. 正常条件与盐胁迫下小麦萌发过程中第一对真叶的生理变化（可溶性糖、可溶性蛋白质、生物量、光合速率、叶绿素含量、含水量、MDA含量、电导率）（2组）1-3. 正常条件与盐胁迫下, 蚕豆萌发过程中子叶的生理变化（淀粉含量、可溶性糖、可溶性蛋白质、生物量、淀粉酶、MDA含量、电导率）（

5、2组）1-4. 正常条件与盐胁迫下蚕豆萌发过程中第一对真叶的生理变化（可溶性糖、可溶性蛋白质、生物量、光合速率、叶绿素含量、含水量、MDA含量、电导率）（2组）,探究性课题,2. 拟南芥gaap4 mapr3突变体对ER 胁迫（DTT条件）的响应变化（周2班）2-1. 拟南芥和gaap4 mapr3突变体在幼苗期的生长差异以及DTT对拟南芥Col和gaap4 mapr3突变体萌发的影响差异（萌发率、根长、侧根数、真叶发生率）（2组）2-2. 拟南芥和gaap4 mapr3突变体在幼苗期的根系对不同DTT浓度的敏感性差异（根长、侧根数、根毛长短、电导率）（2组）2-3. 无菌培养条件下,拟南芥和

6、gaap4 mapr3突变体在幼苗期的地上部分对不同DTT浓度的敏感性差异（叶片黄化率、 可溶性糖、可溶性蛋白质、生物量(包括含水量)、叶绿素含量、MDA含量、电导率）（2组）2-4. 土壤培养条件下，拟南芥和gaap4 mapr3突变体在幼苗期的地上部分对不同DTT浓度的敏感性差异（叶片黄化率、可溶性糖、可溶性蛋白质、生物量(包括含水量)、叶绿素含量、MDA含量、电导率）（2组）,探究性课题,3. 拟南芥gaap2突变体对ER 胁迫（DTT条件）的响应变化（周4班）3-1. 拟南芥和gaap2突变体在幼苗期的生长差异以及DTT对拟南芥Col和gaap2突变体萌发的影响差异（萌发率、根长、侧根

7、数、真叶发生率）（2组）3-2. DTT条件下，拟南芥和gaap2突变体在幼苗期的根系对不同DTT浓度的敏感性差异（根长、侧根数、根毛长短、电导率）（2组）3-3. 无菌培养条件下,拟南芥和gaap2突变体在幼苗期的地上部分对不同DTT浓度的敏感性差异（叶片黄化率、 可溶性糖、可溶性蛋白质、生物量(包括含水量)、叶绿素含量、MDA含量、电导率）（2-3组）3-4. 土壤培养条件下，拟南芥和gaap2突变体在幼苗期的地上部分对不同DTT浓度的敏感性差异（叶片黄化率、可溶性糖、可溶性蛋白质、生物量(包括含水量)、叶绿素含量、MDA含量、电导率）（2组）,探究性实验选择,在“华东师范大学教学进度安排

8、植物生理实验20140915” 文件中，从表下探究性课题中选择其一子课题进行或自行设计课题。注意三个班按照上课时间的班次分，周一班只能在第一个选题下进行选择，周二班只能在第二个选题下进行选择，周四班只能在第三个选题下进行选择，也可以自主命题。,六.植物生理实验课具体要求,1. 早上8:00上课，不迟到，不无故早退2. 上课准备足够的草稿纸备记录数据和课堂需要；所有作业以A4纸打印或A4纸大小的信笺装订好后交。3. 课前一定要预习，对每一实验指标在熟悉实验原理的基础上，如何测定要做到心中有数，在方案中有详细的实验步骤， 注意事项，每个试验方案每组有两份，一份来上课时先交给教师作为作业（作业上写两

9、个学生的学号和名字），一份留存备自己做实验用，探究性大实验的方案要在规定时间内上交任课教师，通过后可按照方案进行实验。4. 综合性、探究性大实验按照自己的方案进度，定期交阶段性实验结果；实验结束后最后交一完整实验报告（每个人都要交一份）。5. 每次实验结束离开时，上交阶段性实验结果，并通过任课教师检查所有仪器归位、耗材洗刷清洁合格后方能离开。 6. 值日生负责实验室、仪器室地面清洁和所有仪器的关闭检查等事项。,实验方案基本要素和要求：,题目：突出要解决的生物学问题 摘要：突出从哪些方面（形态学、生理指标、基因表达）入手来研究该生物学问题。 实验材料 实验器材：说明每一需要器材的用途和数量 实验

10、试剂； 实验方法：材料处理方法和条件；不同生物指标的测定方法：如可溶性糖采用蒽酮法；形态学采用解剖镜（型号）镜检；蛋白质测定采用福林酚法 实验进度安排（以周为节点）：10.12-10.18 方案完善和材料准备；10.19-25：材料处理；10.26-11.1 取材冰箱储存备后续酶活、可溶性糖含量和蛋白质含量测定测定，同时进行膜透性、色素含量测定；11.2-11.8可溶性糖含量和蛋白质含量测定测定. 实验步骤：要有每个生理指标测定的详细步骤,实验报告,是在实验方案基础上加上实验结果，分析与讨论，参考文献，可省去进度安排和实验步骤，即实验报告包括： 题目：突出要解决的生物学问题 摘要：突出从哪些方

11、面（形态学、生理指标、基因表达）入手来研究该生物学问题。 实验材料 实验器材： 实验试剂； 实验方法：材料处理方法和条件；不同生物指标的测定方法：如可溶性糖采用蒽酮法；形态学采用解剖镜（型号）镜检；蛋白质测定采用福林酚法 实验结果：不仅要有分析数据结果，还要有原始数据。 结果分析与讨论 参考文献,实验数据的科学性要求,实验数据要经得起重复，每个实验数据测定要至少有三个平行重复，这在研究方案中就要考虑，因为会涉及到器材数量的准备。每次测定最好要考虑阳性和阴性对照。要以实验数据来说明问题，端正科学研究态度。,七. 植物生理学实验课的考核形式,书面作业，实验方案2（色素性质和探究实验），作业5（水势

12、和三重反应等）实验报告3：40%实验操作和行为习惯，探究性实验的执行情况：35%PPT汇报25%(学生评分占75%，教师评分占25%),1谈谈小液流法和质壁分离法测定植物组织水势的区别2. 谈谈鲜切花卉如何保鲜？并解释保鲜的理论基础？,本周书面作业,下次实验内容（第2、3周）,植物组织培养：研究植物细胞脱分化、再分化与激素的关系。要求预习的内容：植物组织培养的基本步骤，培养基的主要成分，培养基和组培用器具的灭菌方式；植物外植体的灭菌方式。写成书面作业上交。,下次实验内容（第4周）,1 叶绿体色素的提取、分离及理化性质鉴定；2 叶绿素a,b含量的测定参考网页上课件，写出实验方案根据你要实验选取的植物材料，写一份相关的实验方案，并将植物材料课前准备好,下次实验内容（第5周）,光合速率测定。,分光光度仪的使用,按照操作指南设置参数和操作样品池的盖头轻开轻关比色杯中的液体体积是杯体积的1/2-2/3，太多易益出，注意及时擦拭益出液体。所有数据要从仪器显示窗口记录出来。从张老师处签名领比色杯，用完洗净归还,