空气消毒模拟现场试验指导.docx

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1、空气消毒模拟现场试验1目的以人工喷雾微生物气溶胶的方法污染模拟现场受试空气，测定空气消毒机用于空气消毒 的最低安全使用剂量。2试验设备和器材2。试验菌株：白色葡萄球菌8032株。2.2 培养基：营养肉汤培养基、营养琼脂培养基、含中和剂的营养琼脂培养基（所含中和 剂为按附录C鉴定合格者，用于化学消毒因子的空气消毒机消毒后采样）。2.3 消毒试验用气雾室：气雾室宜以不锈钢、铝合金和玻璃等光洁、耐腐蚀和易清洗的材 料建造相邻的一对（容积均为20 m一个用于消毒试验，另一个用于试验对照。一对气雾 室所处环境（包括温度、相对湿度、光照、密闭性和通风条件等）应一致。应安装温度和相 对湿度调节装置以及通风机

2、过滤除菌或其他消毒装置和相应管道，开设供喷雾染菌、给药、 采样等的袖套操作和样本传递等窗口。2.4 喷雾染菌装置，包括空气压缩机、压力表、气体流量计和气溶胶喷雾器等。喷出细菌 气溶胶微粒的直径90%以上应在1 u m10 u m之间。2.5 空气微生物采样装置:六级筛孔空气撞击式采样器、抽气设备、气体流量计、计时器 等。2.6 环境监测器材:温度计、湿度计等。3试验菌悬液的制备取白色葡萄球菌第37代经361培养1824 h的新鲜斜面培养物，用TPS（胰蛋 白豚生理盐水溶液）洗下菌苔，无菌脱脂棉过滤后，用营养肉汤培养基稀释成所需浓度。4操作程序4.1 待测空气消毒机的安装试验开始前，按待测空气消

3、毒机的安装说明，将待测空气消毒机安装在试验气雾室远端， 连接好电源并确认能够正常工作，同时在对照气雾室内安装去除了空气消毒能力的与待检同 型号设备作为对照，然后将门关闭。此后，一切操作和仪器设备的操作均在室外通过带有密 封袖套的窗口或摇控器进行。直至试验结束，才可将门打开。4.2 试验环境条件设定开启计算机控制系统（或开启温、湿度调节装置），同时调节两个气雾室的温度、相对湿 度至试验要求的温度（2025）和相对湿度（50%70%）。4.3 气溶胶喷雾染菌分别在对照组和试验组气雾室中，将微生物气溶胶发生器固定在采样车上并使之位于气 雾室内中央位置距地面1.0 m处，按照不同的气溶胶发生装置设定压

4、力、气体流量和喷菌时 间喷雾染菌。边喷雾染菌，边用风扇（搅拌器）搅拌。喷雾染菌完毕，继续搅拌5 min,静止 5 min。4.4 消毒前采样静止5 min后，同时对对照组和试验组气雾室分别进行消毒前采样，作为对照组试验开 始前和试验组消毒处理前的阳性对照（即污染菌量）。气雾室内空气中各阳性对照菌数应达 5 104CFU/m3-5 10、CFU/m%消毒试验最后一个时间对照组阳性对照菌数不得小于5 104 CFU/m3 ）o4.5 消毒处理按待测空气消毒机的使用说明，开机运行。4.6 消毒后采样空气消毒机作用至预定的第一个时间（说明书规定时间的0.5倍），即刻对试验组和对照 组气雾室同时进行采样

5、；继续作用至第二个预定消毒时间（说明书规定的时间），再次按前述 方法进行采样。4.7 采样要求试验用六级筛孔空气撞击式采样器采样，采样时，将六级筛孔空气撞击式采样器放在气 雾室中央1.0 m高处，采样流量为28.3 L/min,采样时间依据预测试验确定（一般对照组和试验组消 毒处理前采样5 s10 s,试验组消毒后视其消毒效果，如消毒合格采样5 min-10 min）。4.8 培养与结果观察采样后，无菌操作取出平板，置36土1培养箱培养48h进行活菌培养计数。在完成试 验组与阳性对照组采样后，将未用的同批培养基与上述两组样本同时进行培养，作为阴性对 照。若阴性对照组有菌生长，说明所用培养基有污

6、染，试验无效，更换无菌器材重新进行。4.9 对气雾室消毒处理全程试验完毕，对气雾室表面和空气中残留的细菌做最终消毒后，打开通风机，过滤除 菌排风，排除气雾室内滞留的污染空气。4.10 理5.1空气中含菌量计算空气中含菌量按式（工）计算。J = x 100028. 3t式中：X空气含菌量，单位为菌落形成单位每立方米（CFU/m3）； S六级采样平板上总 菌数，单位为菌落形成单位（CFU）； t采样时间，单位为分（min）。5.2杀灭率的计算空气消毒机对细菌消毒效果以杀灭率（或清除率）Kt计，数值以（的）表示，按公式（3）计 算。V - VNt= /匚x 100Vo（1 -m）-VtKt = -x

7、 100Vo（1 NG式中：Kt消毒处理对空气中细菌的杀灭率（或清除率），%;V0与Vt1试验组消毒处理前和消毒过程中不同时间的空气含菌量，单位为菌落形成 单位每立方米（CFU/m3）；Nt空气中细菌的自然衰亡率；V0与Vt对照组试验开始前和试验过程中不同时间的空气含菌量，单位为菌落形成 单位每立方米（CFU/m3）。6重复试验同一条件试验重复3次。7结果判定三次试验结果的杀灭率（或清除率）均299.9%,可判为消毒合格。8注意事项8.1 试验中，因控制统一的条件较难，故每次试验均需同时设置试验组与对照组，两组条 件尽量保持一致。8.2 注意记录试验过程中的温度和相对湿度，以便分析对比。8.3 所采样本应尽快进行微生物检验，以免影响结果的准确性。8.4 每次试验完毕，气雾室应充分通风。必要时消毒冲洗，间隔4h后才可做第二次试验。8.5 试验时，气雾室必须保持密闭，设有空气过滤装置，以防染菌空气污染环境。8.6 试验时，气雾室应防止日光直射，以免造成杀菌作用不稳定。8.7 气雾室排风过滤装置中的滤材应定期更换，换下的滤材应经灭菌后再做其他处理。