常用的灭菌方法介绍、环氧乙烷灭菌原理、残留.docx

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1、常见的名词解释1 .灭菌：经确认的使产品无存活微生物的过程。目前 国际上规定，灭菌过程必须使物品污染微生物存活概率减 少到10一6及以下。2 .灭菌剂：能够杀灭特定外环境或物品中一切微生物 （包括细菌繁殖体、芽抱、真菌、病毒、立克次体、原生 动物和藻类等）的化学物质或其复方制剂。3 .微生物：在显微镜下才能看到的微小实体，包括细 菌、真菌、原生动物和病毒。4 .生物指示物：对规定的灭菌过程有特定的抗力，含有 活微生物的测试系统。5 .化学指示物（非生物指示物）：根据暴露于某一灭 菌过程所产生的化学或物理变化，显现一个或多个预定过程 变量变化的测试系统。6 .无菌保证水平（SAL）：灭菌后产品上

2、存在单个活 微生物的概率。每个人工晶状体E0残留量每天不应超过0.5ug,或每 个晶状体不应超过1.25ug。以单个人工晶状体质量20mg 计算，其他眼内器械根据其质量按比例算出限量。由于产 生眼毒性的ECH水平大约比相应E0水平高四倍，含氯的黏 弹性材料制成的眼内器械的ECH可接受水平需要进行评 价。对患者和献血者使用的血细胞分离器，E0的最大允许 剂量为10mg, ECH的最大允许剂量不应超过22mg。对血液氧合器和血液分离器，E0对患者的最大允许剂 量为60mg, ECH对患者的最大允许剂量不应超过45mgo对心肺旁路过程所用的器械，E0的最大允许限量应为 20mg, ECH的最大允许限

3、量应为9mg。对体外血液净化器械，每个器械的E0和ECH规定限量 应为4. 6mg,但可能会超过E0 一生可允许剂量。对于预期仅接触完好皮肤的手术单，E0的最大允许限 量为lOug/cm?的可耐受接触限量，ECH 5mg/cm2,或手术 单应显示出如ISO 10993-10中规定的极轻微刺激反应。五、E0残留量检测方法气相色谱法是E0残留量检测的常规方法。气相色谱法 是利用气体作流动相的色谱法。汽化的试样被载气带入色 谱柱，试样中各组分分子由于与色谱柱中的固定相作用力 不同，从色谱柱中流出时间不同而彼此分离；各组分先后 进入检测器，用数据处理系统记录色谱信号，根据信号强 度对测试组分进行定量。

4、气相色谱仪由载气源、进样部分（一般为顶空进样系 统）、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。检测流程如下：先取标准溶液于顶空进样系统中进行 培养。当试样达到气液平衡时，不同浓度的液体会生成不 同浓度的气体，取平衡后的气体，注入进样器，记录E0的 峰高（或面积）。根据不同浓度的标准溶液对应的峰高 （或面积），绘制峰高（或面积）一浓度标准曲线。取样 品适量，制取浸提液，同法测定峰高（或面积），以测得 的峰高（或面积）从标准曲线上查得相应的标准溶液的浓 度。根据公式，计算出E0留量。检测方法应明确浸提液的制备方式、标准曲线的制备 以及试样的测试条件等。（一）浸提液的制备方式包括：模拟使用浸提法、

5、加 严浸提法和极限浸提法。模拟使用浸提法是指采用使浸提尽量模拟产品使用的 方法。这一模拟过程使测量的环氧乙烷残留量相当于患者 使用该器械的实际环氧乙烷摄入量。加严浸提法是与临床使用条件下相比，预期会导致更 多或更大量化学成分释放的浸提。极限浸提法是指再次浸提测得的环氧乙烷的量小于首 次浸提测得值的10%,或浸提到测得的累积残留量无明显增 加。浸提液的制备方式应明确浸提液类型（一般为水）、 浸提温度、浸提时间、浸提的方式等。（二）标准溶液的制备，首先应尽量选择有标准物质 证书的E0纯品或E0标准溶液，使用前应确认标准物质是 否在有效期内，存储环境是否符合说明书的要求。取标准 物质进行逐级稀释，制

6、取至少5个浓度的系列标准溶液 （不应把零浓度的溶液作为标准溶液），用于标准曲线的 制备。（三）试样的测试条件，应明确顶空进样设备的条件 （加热温度和时间）、色谱柱类型、进样口温度、进样 量、柱温箱温度、升温程序、检测器类型和温度等。目前医疗器械标准中E0残留量的检测方法大部分引用 GB/T 14233. 1中推荐的极限浸提和加严浸提的气相色谱 法。引用该标准或其他标准中的检测方法时，应进行方法 学的验证，确保引用方法适用于所检测产品。也可以使用其它经确认的分析方法，如质谱法。参考资料五:辐射灭菌工作原理辐射灭菌是利用电离辐射杀灭微生物的的物理过程。 常用的辐射射线有叱0或137cs衰变产生的丫

7、射线、电子加 速器产生的电子束和X射线装置产生的X射线。电离辐 射可以直接作用于微生物体内的蛋白质、核酸、酶等对生 命有重要意义的大分子，破坏或改变生物大分子的结构， 从而达到杀灭微生物的目的。同时，电离辐射也可作用于 微生物体内的水分子，引起水的电离和激发，通过产生自 由基和对生物起化学腐蚀作用的活性分子来破坏微生物。辐射灭菌有灭菌彻底、节约能源、操作方便、宜于工 业化连续操作等优点。参考资料六:湿热灭菌工作原理湿热灭菌法是指在灭菌器内利用高压蒸汽或其他热力 学灭菌手段杀灭物品中的微生物。通常利用饱和蒸汽、蒸 汽-空气混合物、蒸汽-空气-水混合物、过热水等湿热的方 法，使微生物体内的蛋白质和

8、核酸发生变性，达到杀灭微 生物的目的。这种变性首先是生物大分子中的氢键断裂， 蛋白质和核酸内部结构被破坏，进而丧失原有功能。灭菌温度和时间是影响湿热灭菌效果的最关键因素。 此外，同等灭菌温度和时间下，被灭菌物品的热稳定性和 热穿透性、生物负载数量和种类、装载方式等也会影响最 终的灭菌效果。根据被灭菌物品的微生物污染水平和耐受湿热能力的 不同，湿热灭菌程序通常可划分为过度杀灭法和残存概率 法，都可使被灭菌的产品和材料达到相同的无菌保证水 平。湿热灭菌具有穿透力强、传导快、灭菌能力强的特 点，且无残留、不污染环境、不破坏产品表面、易控制和 重现性好，是医药行业中常用的灭菌方法。参考资料二:常用的灭

9、菌方法介绍常用的灭菌方法有湿热灭菌法、干热灭菌法、辐射灭 菌法、气体灭菌法、过滤除菌法、汽相灭菌法、液相灭菌 法等，可根据被灭菌物品的特性采用一种或多种方法组合 灭菌。一、湿热灭菌法本法系指将物品置于灭菌设备内利用饱和蒸汽、蒸汽- 空气混合物、蒸汽-空气-水混合物、过热水等手段使微生 物菌体中的蛋内质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。 该法灭菌能力强，为热力灭菌中最有效、应用最广泛的灭 菌方法，适用于药品、容器、培养基、无菌衣、胶塞以及 其他遇高温和潮湿性能稳定的物品。湿热灭菌条件通常采 用温度-时间参数或者结合F。值（F。值为标准灭菌时间，系 灭菌过程赋予被灭菌物品121 C下的等效灭菌时间

10、）综合 考虑。二、干热灭菌法本法系指将物品置于干热灭菌柜、隧道灭菌器等设备 中，利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原物质的方 法。适用于耐高温但不宜用湿热灭菌法灭菌的物品灭菌， 如玻璃器具、金属制容器、纤维制品、陶瓷制品、固体试 药、液状石蜡等。干热灭菌条件通常采用温度-时间参数或 者结合Fh值（鼻值为标准灭菌时间，系灭菌过程赋予被灭 菌物品160 C下的等效灭菌时间）综合考虑。三、辐射灭菌法本法系指利用电离辐射杀灭微生物的方法。常用的辐 射射线有6。或Cs衰变产生的Y射线、电子加速器产生 的电子束和X射线装置产生的X射线。适用于能够耐辐射 的医疗器械、生产辅助用品、药品包装材料、原料药及成

11、品等。辐射灭菌控制的参数主要是辐射剂量（指灭菌物品 的吸收剂量），为保证灭菌过程不影响被灭菌物品的安全 性、有效性及稳定性，应确定最大可接受剂量。、气体灭菌法本法系指用化学灭菌剂形成的气体杀灭微生物的方 法,最常用的化学灭菌剂是环氧乙烷，一般与80%90%的 惰性气体混合使用，在充有灭菌气体的高压腔室内进行。 适用于不耐高温、不耐辐射的物品（如医疗器械、塑料制 品和药品包装材料等），干粉类产品不建议采用本法灭 菌。采用环氧乙烷灭菌时，腔室内的温度、湿度、灭菌气 体浓度、灭菌时间是影响灭菌效果的重要因素，同时需确 认灭菌完成后灭菌气体和反应产物残留量对灭菌物品的安 全性、有效性和稳定性的影响。五

12、、过滤除菌法本法系指采用物理截留去除气体或液体中微生物的方 法，常用于气体、热不稳定溶液的除菌。应根据待过滤介 质属性及工艺目的选择合适的过滤器，除菌级过滤器的滤 膜孔径通常选用0.22uni（或更小孔径或相同过滤效力）。 过滤器的孔径定义来自过滤器对微生物的截留能力，而非 平均孔径的分布系数。选择过滤器材质时，应充分考察其 与待过滤介质的兼容性。六、汽相灭菌法本法系指通过分布在空气中的灭菌剂杀灭微生物的方 法，常用的灭菌剂包括过氧化氢、过氧乙酸等。适用于密 闭空间的内表面灭菌。灭菌效果通常与灭菌剂量（一般是指 注入量）、相对湿度和温度有关。七、液相灭菌法本法系指将被灭菌物品完全浸泡于灭菌剂中

13、达到杀灭 物品表面微生物的方法。具备灭菌能力的灭菌剂包括：甲 醛、过氧乙酸、氢氧化钠、过氧化氢、次氯酸钠等。灭菌 剂种类的选择应考虑灭菌物品的耐受性。灭菌剂浓度、温 度、pH值、生物负载、灭菌时间、被灭菌物品表面的污染 物等是影响灭菌效果的重要因素。环氧乙烷灭菌原理环氧乙烷（以下简称E0）是一种最简单的环醴，低温 时为无色易流动液体，沸点在该温度以上为无色 气体。E0液体在室温下易挥发，有醒味。E0杀灭微生物是 由于它能与微生物的蛋白质、DNA和RNA发生强烈的非特异 性烷基化作用，可以与蛋白质上的游离竣基（-COOH）、氨 基（-NHz）、硫氢基（-SH）和羟基（-0H）发生烷基化作 用，造

14、成蛋白质失去反应基团，阻碍了微生物蛋白质的正 常化学反应和新陈代谢，导致微生物死亡。E0也可以抑制 生物酶的活性。E0是一种广谱、高效和对灭菌物品无损害的气体杀灭 消毒剂。E0杀菌能力强且广泛，可以杀灭病原微生物，包 括细菌繁殖体、芽抱、病毒和真菌。蒸汽压高，对消毒物 品的穿透力强，可达到物品深部，适合于包装物品的灭 菌。典型的灭菌工艺要经过正压过程和负压过程：产品进 入灭菌器后关闭闸门，首先对灭菌室加温，直到温度达到 预定的灭菌温度；然后，灭菌室抽真空，当达到预定的真 空度后，开始对灭菌室加湿、加药；在上述过程后，灭菌 过程开始，灭菌计时器开始计时，在整个灭菌过程中需保 持恒温状态；灭菌时间

15、到达预设值，则开始对灭菌室进行换气，即用经过过滤后的清洁空气置换灭菌室内的残余EO 气体，将残气排出（通常通过水解对残气进行处理），灭 菌过程结束。常见的E0灭菌器由灭菌箱体、辅助设备、监测设备和 控制装置组成。灭菌箱体包括灭菌室、部件管路、密封材 料、安全阀和门；辅助设备包括加热及热循环装置、真空 装置、加湿装置、加药及气化装置、密封装置和残气处理 装置等；监测设备和控制装置包括温度传感器、压力传感 器、湿度传感器和温度指示器、压力指示器、湿度指示 器、计时器、记录仪表及报警装置。环氧乙烷残留一、医疗器械产品如采用环氧乙烷（以下简称E0）灭 菌，应不断提高各类人员对E0残留量造成健康风险的意

16、 识：E0能够高效地对医疗产品进行灭菌；在杀灭微生物的 同时，医疗产品上的E0残留也会对使用者和患者的身体带 来一定的毒害。其毒性主要包括两个方面：（一）E0本身的毒性。在很多情况下，环氧乙烷具有致突变性、胎儿毒性和 致畸特性，对睾丸功能具有不良作用，并能对体内的多个 器官系统产生损害。通过呼吸器官吸入体内刺激呼吸道， 可引起恶心、呕吐、头昏、头痛、嗜睡等症状，严重者可 引起肺水肿；通过皮肤、粘膜接触后，可引起红肿、水泡 及血泡，严重者可出现局部皮肤烧伤及粘膜组织灼伤，造 成毛发脱落；超量进入人体血液内，可致红细胞溶解，补 体灭活和凝血酶破坏引起全身性溶血。在动物致癌研究 中，当食入或皮下注射

17、E0时，会在接触部位形成肿瘤；吸 入E0可产生几种赘生性变化，包括白血病、脑肿瘤和乳房 肿瘤。（二）灭菌后生成物的毒性。残留的E0与产品中氯元素接触产生2-氯乙醇（以下简 称ECH）,与水接触形成乙二醇，这两种物质都具有一定的毒性。特别是ECH,在中毒剂量下可通过皮肤快速吸 收，具有急性毒性、体表刺激、轻微的致突变性，具有产 生胎儿毒性和致畸性改变的潜能，可对肺、肾、中枢神经 系统和心血管系统等器官系统造成损伤。二、经E0灭菌的医疗器械应采用透气性好，有助于消 除E0残留的纸塑包装，以最大限度地降低E0残留，降低 器械使用的风险。产品灭菌后还必须按规定进行解析，一般纸塑包装灭 菌后至少应解析7

18、天，全塑包装灭菌后至少应解析14天， 并经检测确定器械上的E0残留量应符合产品技术要求。产品的解析时间应进行验证，若无强制解析的条件， 还应考虑验证不同季节中产品的解析时间。三、医用敷料、无纺布、合成医用乳胶手套等对E0气 体有很强的吸附性，吸附在这类产品上的残留量很难彻底 解析，所以对此类产品，应关注E0的解析，或参考相关标 准（如：YY/T 1267-2015适用于环氧乙烷灭菌的医疗器械 的材料评价），从材料相容性角度考虑E0灭菌的适用性。四、对每一种医疗器械，按接触时间分类，其所允许 释放给患者的E0和ECH的最大日剂量应不超过以下给出 值：（一）对于持久接触器械（超过30天以上一次、多

19、次 或重复长期使用或接触的器械）E0对患者的平均日剂量不应超过0. Imgo此外最大剂 量：前24小时不应超过4mg；前30天不应超过60mg； 一 生不应超过2. 5g0ECH对者的平均日剂量不应超过0. 4mgo此外最大剂 量：前24小时不应超过9mg；前30天不应超过60mg； 一 生不应超过10go（二）对于长期接触器械（超过24小时以上30天以 内一次、多次或重复长期使用或接触器械）E0对患者的平均日剂量不应超过2mg。此外最大剂 量：前24小时不应超过4mg；前30天不应超过60mg。ECH对患者的平均日剂量不应超过2mgo此外最大剂 量：前24小时不应超过9mg；前30天不应超过60mg。（三）短期接触器械（在24h以内一次、多次或重复 使用或接触的器械）E0对患者的平均日剂量不应超过4mgoECH对患者的平均日剂量不应超过9mgo（四）表面接触的器械和植入物可耐受接触限量E0可耐受接触限量均不应超过10 Li g/cm2,或应显示出 如IS010993-10中规定的极轻微刺激反应。ECH的可耐受接触限量均不应超过5mg/cm2,或应显示 出如IS010993-10中规定的极轻微刺激反应。（五）特殊情况对于多器械系统，应对每个患者接触的器械规定限量。