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1、 通常情况下,一个烈性噬菌体通过上述五个过程能合通常情况下,一个烈性噬菌体通过上述五个过程能合成成100-300个噬菌体,个噬菌体,烈性噬菌体烈性噬菌体的这种生长繁殖方式也的这种生长繁殖方式也称为称为一步生长一步生长。定量描述定量描述烈性噬菌体生长规律烈性噬菌体生长规律的实验曲线,称作一步的实验曲线,称作一步生长曲线。生长曲线。一步生长曲线一步生长曲线 一步生长曲线测定方法实验设计原则、依据:实验设计原则、依据:1个菌体被1个噬菌体感染,避免二次吸附;细菌群体被噬菌体同步感染。实验过程实验过程:敏感菌10ml 噬菌体 1ml 混匀,5min,使之吸附 离心或用抗噬菌体血清处理,去除过量噬菌体
2、高倍稀释吸附噬菌体的菌悬液(避免多次吸附)37培养,定时取样 每5min取样,样品中加入氯仿裂解细胞 24-48h 裂解液加入敏感菌液中 适当稀释混合液 涂布于琼脂培养基上 计数噬菌斑(负菌落)以以培养时间培养时间为横坐标为横坐标,以以噬菌噬菌斑数斑数为纵坐标为纵坐标,绘制成的曲线就绘制成的曲线就是一步生长曲线。是一步生长曲线。可分以下阶段:可分以下阶段:潜伏期:潜伏期:隐晦期,胞内积累期隐晦期,胞内积累期裂解期裂解期稳定期稳定期 裂解量裂解量:每一受感染细胞所释放的新的噬菌体的平均数。每一受感染细胞所释放的新的噬菌体的平均数。稳定期噬菌斑数稳定期噬菌斑数 裂解量裂解量 =潜伏期噬菌斑数潜伏期
3、噬菌斑数 不同的噬菌体裂解量不同;不同的噬菌体裂解量不同;同同种噬菌体感染种噬菌体感染不同不同敏感菌敏感菌也不同;也不同;与噬菌体种类、宿主细胞菌龄以及环境因素有关。与噬菌体种类、宿主细胞菌龄以及环境因素有关。噬菌体的危害和应用噬菌体的危害和应用噬菌体的危害:噬菌体的危害:主要是引起发酵中的噬菌体污染主要是引起发酵中的噬菌体污染例:丙酮、丁醇发酵中的噬菌体污染例:丙酮、丁醇发酵中的噬菌体污染 抗生素发酵中的噬菌体污染抗生素发酵中的噬菌体污染 食品工业上的噬菌体污染食品工业上的噬菌体污染防治:防治:控制控制活菌排放活菌排放 选育抗性生产菌株选育抗性生产菌株 生产中轮换使用菌种生产中轮换使用菌种 药物防治药物防治例如用金霉素、四环素等。例如用金霉素、四环素等。