DB4114∕T 214-2023 马铃薯容器薯生产技术规程(商丘市).pdf

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1、 ICS 65.020.20 CCS B 05 4114 商丘市地方标准 DB 4114/T 2142023 马铃薯容器薯生产技术规程 2023-10-12 发布 2023-11-12 实施 商丘市市场监督管理局 发 布 DB 4114/T 2142023 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 容器薯生产设施设备.1 5 容器薯生产技术.2 6 容器薯生产.2 附录 A（资料性）容器薯生产设备清单.4 附录 B（资料性）常用试剂及植物生长物质的配制.5 附录 C（资料性）MS 培养基母液成分及配制.6 DB 4114/T 2142023 II 前言

2、 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由商丘市农业农村局提出并归口。本文件起草单位：河南德道农业科技有限公司、商丘师范学院、商丘职业技术学院、商丘市睢阳区农业农村局、商丘市睢阳区经济作物技术推广中心、宁陵县农业农村局、商丘市梁园区农业机械发展中心、商丘市乡村产业发展中心 本文件主要起草人：陈亚伟、马丽、纪耀坤、李淑敏、轩青霞、路楠、苏寒、刘为慧、何涛、刘靖、李知翰、张驰 DB 4114/T 2142023 1 马铃薯容器薯生产技术规程 1 范围 本文件规定了马铃薯容器薯生产术语和定义、容器薯生产设施设备、容器薯生产技术、容器薯

3、生产等。本文件适用于商丘市区域马铃薯容器薯生产 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 18133 马铃薯种薯 GB/T 29375 马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程 GB/T 29376 马铃薯脱毒原原种繁育技术规程 NY/T 401 脱毒马铃薯种薯（苗）病毒检测技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 脱毒苗 应用茎尖组织培养技术获得的再生试管苗，经检测不带马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马

4、铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯A病毒（PVA）等病毒和马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)，即为脱毒苗。3.2 容器薯 用脱毒苗组织培养的方法,在培养容器内通过诱导生产的微型小薯。4 容器薯生产设施设备 组织培养室 4.1 面积20 m240 m2可调温,调湿,调光,消毒灭菌处理,能进行脱毒苗有光培养和暗培养诱导的培养室.容器 4.2 直径不小于6.5 cm普通广口玻璃瓶.生产设备 4.3 DB 4114/T 2142023 2 容器薯所需主要设备参见附录表A 玻璃器皿及耗材 4.4 包括盛装器皿（烧杯、试剂瓶等）、计量器皿（量筒、容量瓶等）以及其他常用消耗品等。主要有

5、：试剂瓶、容量瓶、烧杯、玻璃棒、洗瓶、培养瓶及瓶盖、瓶刷、工作服、手套等。5 容器薯生产技术 母液的配制与保存 5.1 配制基本培养基母液，MS基本培养基母液配制比例参见附录C。配制应使用去离子水，配好的母液置于4 保存，母液保存期应不超过30 d。母液容器上应贴好标签，注明名称、配制日期。培养基制作 5.2 扩繁培养基：MS+蔗糖30 g/L+琼脂7 g，pH 5.8，固体培养基。1 L固体培养基加蒸馏水700 mL（按所需容量的70%左右），再加入琼脂 7 g，加热并不断搅拌使琼脂完全融化。加入蔗糖 30 g，待完全溶解后，按附录A加入母液，再根据要求加入适量植物生长调节物质并充分搅拌，最

6、后定容至1 L。用0.1 mol/L的HCL或0.1 mol/L的NaOH调节pH值至5.8。制作液体培养基的过程与固态培养基基本相同，但不需要加琼脂，加热时间可以适当缩短。壮苗培养基：MS+蔗糖30 g/L，pH 5.8，液体培养基。试管薯诱导培养基：MS+500 mg/L CCC+80 g/L白糖+0.1%活性炭，pH 5.8，液体培养基。常用试剂及植物生长物质的配制见附录B。培养基灭菌 5.3 制作好的培养基分装到培养瓶中后，装入高压灭菌锅，在0.1 Mpa 压力下温度115 灭菌22 min，取出后水平摆放，冷却备用。6 容器薯生产 诱导材料选取 6.1 马铃薯种薯符合GB 18133

7、规定。选择具备该品种典型性状的株系，挑选植株健壮、长势良好、茎秆粗壮、根系发达的脱毒苗作为诱导材料。脱毒苗繁育 6.2 6.2.1 脱毒苗转接 马铃薯脱毒苗繁育符合GB/T 29375规定。将健壮基础苗剪去顶芽和基部茎节，留中间带4 个6 个节的茎段，转入壮苗培养基用浅层静止方式培养。3 周4 周后每个茎段发育成一株带有5 个7 个节的健壮苗。6.2.2 培养条件 培养室温度为白天23 25、夜间16 20 ,光照时间16 h/d，光照强度2500 Lx4000 Lx以上。DB 4114/T 2142023 3 6.2.3 病毒检测 病毒检测符合NY/T 401规定。容器薯诱导 6.3 在无菌

8、条件下，将培养瓶中原来的培养基倒掉，再注入诱导结薯培养基。在室温及光照16 h/d 条件下培养48 h以促进匍匐茎的形成，然后转入18 1 黑暗间散射光(8 h/d，光照强度500 Lx1000 Lx)培养，3 d4 d后便可以产生容器薯，40 d45 d容器薯发育到直径5 mm以上可以收获。符合GB/T 29376 规定。收获及储存 6.4 收获时将容器薯及茎段从培养瓶中取出，摘取符合收获标准的小薯，用清水多次冲洗，直至洗净表面附着的培养基，于阴凉处阴干或烘干，再贮藏于透气的容器中，置于4 条件下保存。容器薯经国家法定植检部门检验合格后，方可作为商品容器种薯。DB 4114/T 214202

9、3 4 A A 附录A （资料性）容器薯生产设备清单 容器薯生产设备清单见表A.1。表A.1 容器薯生产设备清单 设备名称 型 号 单 位 数 量 耐高温组培筐 52.5 cm42.5 cm7 cm 个 500 钢质洗瓶槽 XSC-3 套 4 半自动洗瓶机 NH-CX-12 台 1 超纯水机 SH-H-CSJ120 台 1 培养基加热炉 NH-H28 台 1 培养基自助灌装机 2D70SJ 台 1 超净工作台 NH-CJ-2S 台 4 接种器具杀菌器 NH-330/nH350 台 5 高效节能培养架 NH-PYJ-10A 套 100 臭氧发生器 120 台 2 生物显微镜 XSP-8C 台 1

10、 电子天平（1/10000g）FA1104A 台 1 电子天平（1/1000g）JA2103N 台 1 电子秤 ACS-3 台 1 酸度计 PHS-3C 台 1 高压灭菌锅 DSX-280B 台 1 低温低湿柜 CZ-250FC 台 1 智能光照培养箱 GTOP-310B 台 1 空调新风系统 KFR-35GW/BP3DNIY 台 2 冰箱 BCD-88CM88L 台 1 DB 4114/T 2142023 5 B B 附录B （资料性）常用试剂及植物生长物质的配制 B.1 0.1 mol/L HCl的配制：根据盐酸的密度 37%盐酸溶液的密度为1.19 g/mL，假设要配制1000 mL 1

11、 mol/L HCl，则需要盐酸的物质的量为1 mol，所以需要量取37%的盐酸为0.1*36.5/37%/1.19=8.2 mL B.2 0.1 mol/L NaOH 的配制：称0.4 gNaOH，溶于100 mL蒸馏水中。B.3 95%的酒精配制成75%的酒精：用量筒量取750 mL的95%酒精加入200 mL的蒸馏水，即可得到75%的酒精。DB 4114/T 2142023 6 C C 附录C （资料性）MS 培养基母液成分及配制 MS培养基母液成分及配制见表C.1。表C.1 MS 培养基母液成分及配制 母液种类 成分 称取用量（g）母液定容体 积（mL）配制1升MS培养基吸 取量（mL

12、）大量元素（A）CaCl2(无水)3.32 1000 100 KNO3 19.0 KH2PO4 1.7 NH4NO3 16.5 MgSO47H2O 3.7 微量元素（B）H3BO3 0.620 1000 10 MnSO4H2O 2.230 ZnSO47H2O 0.860 KI 0.083 Na2 MoO42H2O 0.025 CuSO4 0.0016 CoCl26H2O 0.0025 铁盐（C）EDTA-Na2 3.73 1000 10 FeSO47H2O 2.78 维生素（D）肌醇 5.000 500 10 甘氨酸 0.100 烟酸 0.025 盐酸吡哆辛(B6)0.025 盐酸硫胺素(B1)0.020 注：1.A 母液中 CaCl2，KH2 PO4，KNO3，NH4NO3 分别溶解混合加水至 800 mL左右，再称取 MgSO47H2O 溶解后 与之合并，定容至 1000 mL。2.C 母液中 EDTA-Na2 与 FeSO47H2O 应分别用热水溶解后混合并加热使其充分螯和。