高考生物一轮复习讲义-第10单元第4课时动物细胞工程.docx

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1、第4课时动物细胞工程目标要求1.动物细胞培养与体细胞克隆。2.细胞融合与单克隆抗体。考点一动物细胞培养1动物细胞培养的过程2动物细胞培养的条件概念辨析(1)细胞贴壁和接触抑制细胞贴壁是指体外培养的细胞贴附在瓶壁生长的现象；接触抑制是指当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的现象。细胞贴壁生长对培养瓶的要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。打破接触抑制现象的方法是将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。(2)原代培养与传代培养原代培养：动物组织消化后的初次培养称为原代培养。原代培养的细胞核型正常。传代培养：贴满瓶壁的细胞需要重新用胰

2、蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。一般情况下，细胞在传至1050代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。归纳总结动物细胞培养和植物组织培养的比较项目动物细胞培养植物组织培养理论基础细胞增殖植物细胞的全能性培养前处理无菌；用机械的方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理，使组织分散成单个细胞无菌、离体取材动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织植物幼嫩的部位或花药等培养基性质液体固体培养基成分糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、维生素和动物血清等水、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和琼脂等结果细胞培养产生大量细胞，不形成

3、新个体可产生新个体应用人造皮肤的构建；动物分泌蛋白的规模化生产；检测有毒物质；生理、病理、药理学研究快速繁殖、作物脱毒、细胞产物的工厂化生产和单倍体育种等相同点都需人工条件下的无菌操作；都需要适宜的温度、pH等条件；都进行有丝分裂，都不涉及减数分裂考向动物细胞培养1实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的是()A甲过程需要对实验小鼠进行消毒B乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶处理C丙过程是原代培养D丁过程直接将丙过程得到的细胞分瓶培养答案D解析动物细胞培养需要无毒无菌的环境，甲过程是指从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒处理，A项正确；乙过程表示将皮肤组织

4、分散成单个细胞制备成细胞悬液，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，B项正确；丁过程表示传代培养，需要再次用胰蛋白酶处理并离心收集，然后分瓶培养，D项错误。2(2023山东德州高三检测)如图为肾脏上皮细胞培养过程示意图。下列叙述不正确的是()A甲乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中进行原代培养C丙和丁过程均会出现细胞贴壁和接触抑制现象D丁过程是传代培养的细胞，该过程体现了动物细胞的全能性答案D解析甲剪碎肾脏组织块乙制成细胞悬液的过程，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使组织分散成单个细胞，A正确；丙过程还未分瓶，属于原代培养，培养基中需要添加血清，B正确；在动物细胞

5、培养过程中会出现细胞贴壁和接触抑制的现象，C正确；丁过程已经分瓶培养，属于传代培养，丁过程并没有体现动物细胞的全能性，D错误。考点二动物体细胞核移植技术和克隆动物1动物细胞核移植技术(1)概念分析供体：动物一个细胞的细胞核。受体：去掉细胞核的卵母细胞。结果：重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体。原理：动物体细胞核具有全能性。(2)哺乳动物核移植类型：胚胎细胞核移植和体细胞核移植。2体细胞核移植的过程(1)动物核移植技术的理论基础(原理)是什么？克隆动物属于有性生殖还是无性繁殖？提示动物细胞核的全能性。克隆动物属于无性繁殖。(2)为什么体细胞核移植较胚胎细胞核移植更困难？提示由于动物胚

6、胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易；而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。因此动物体细胞核移植的难度就明显高于胚胎细胞核移植。(3)受体细胞为什么选用卵母细胞？提示体积大，易操作；去核时易于同时吸走第一极体；含有激发细胞核全能性的物质。(4)为什么不是取供体细胞核进行核移植操作，而是将供体细胞整个注入去核卵母细胞中？提示保证供核不被破坏，使克隆动物更像供体动物，操作也方便。(5)在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？提示为使核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的核遗

7、传物质去掉或将其破坏。(6)从多利的产生过程可以看出多利有三个亲本，探究多利的性状表现与三个亲本的关系并分析原因。提示大多数性状与母羊A(体细胞核供体)相同，因基因型与母羊A完全一样。少数性状与母羊B(卵母细胞细胞质供体)相同，因细胞质中的基因来自母羊B，受质基因控制的性状与母羊B相同。性状与母羊C(代孕母体)无关，因母羊C没有为新个体提供遗传物质。3应用前景和存在的问题前景畜牧业加速家畜遗传改良进程保护濒危物种医药卫生作为生物反应器生产医用蛋白；转基因克隆动物的细胞、组织和器官可作为异种移植的供体；人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化形成相应的组织、器官，可用于器官移植问题成功率非常低克隆动物存

8、在健康问题，表现出遗传和生理缺陷对克隆动物食品的安全性问题存在争议源于选修3 P49“生物技术资料卡”：目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法。也可采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有刺破透明带或卵母细胞膜的情况下去核或使其中的核DNA变性。考向动物体细胞核移植技术和克隆动物32018年1月国际顶尖学术期刊Cell杂志报道，我国科学家以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体成功克隆两只猕猴，成为全球首例体细胞克隆灵长类动物。下列相关叙述错误的是()A这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性B研究中需要使用成熟卵母细胞作为核移植的受体C培育出的两

9、只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同D克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能答案A解析因为克隆的两只猕猴是以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体发育而来的，该过程经过了细胞核移植，只能说明分化的动物体细胞的细胞核具有全能性，A项错误。4(2023广东茂名高三检测)如图为克隆羊“多利”的培育过程示意图。下列有关叙述错误的是()A克隆羊“多利”的性状主要与甲羊一致，因其细胞核基因来自甲羊B此过程说明高度分化的动物细胞具有全能性C乙羊的去核卵母细胞为重组细胞基因表达提供了细胞内的环境条件D克隆羊“多利”的培育过程中采用的生物技术有动物细胞核移植和胚胎移植答案B解析此过程说明高度分化的动物细

10、胞的细胞核具有全能性，B错误。考点三动物细胞融合技术和单克隆抗体1动物细胞融合技术2单克隆抗体的制备(1)制备原理B淋巴细胞特点：一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。骨髓瘤细胞特点：能在体外大量增殖。杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。(2)制备过程图中给小鼠注射特定的抗原蛋白，其目的是什么？提示刺激机体发生免疫反应，从而产生特定的B淋巴细胞。若仅考虑细胞的两两融合，在获取杂交瘤细胞的过程中，筛选淘汰的细胞有几种类型？为什么？提示有未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(BB融合细胞、瘤瘤融合细胞)两种类型。出现不同类型是因为细胞融合不是100%的，且是随机的。单克隆抗

11、体制备过程中两次筛选的原因、方法及目的项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后会得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞延伸应用第一次筛选获得杂交瘤细胞的方法：细胞合成DNA有D和S两条途

12、径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。在培养基中加入氨基嘌呤，B淋巴细胞及同型融合细胞不能增殖，骨髓瘤细胞及同型融合细胞(氨基嘌呤阻断)不能增殖，只有杂交瘤细胞能无限增殖。3单克隆抗体的应用作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点；用于治疗疾病和运载药物，可制成“生物导弹”。归纳比较1比较植物体细胞杂交和动物细胞融合项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理除去细胞壁使细胞分散开相关酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶诱导方法物理

13、法：离心、振动、电激等；化学法：聚乙二醇(PEG)等诱导除物理法和化学法，还可用灭活的病毒诱导结果杂种植株杂交细胞应用培育植物新品种主要用于制备单克隆抗体意义突破远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合相同点动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法相似2.细胞工程的各种技术手段及其原理总结考向单克隆抗体5人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒，可诱发细胞癌变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程如下图所示。下列叙述错误的是()A在HAT培养基上存活的

14、杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体B单克隆抗体的特点是灵敏度高、特异性强，可以大量制备C可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞D单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选择透过性答案D解析单克隆抗体的制备过程主要运用的细胞工程技术包括动物细胞培养和动物细胞融合，原理依次是细胞的增殖、细胞膜的流动性，D项错误。6(2023陕西渭南高三检测)如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，下列有关叙述错误的是()甲小鼠乙丙丁A图中给实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙C用特定的选择培养基对乙进行

15、筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长D对丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁答案C解析用特定的选择培养基对乙进行筛选，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长，C错误。1(2021山东，15)一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是()A注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大B单抗制备过

16、程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合C利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗Dp72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况答案D解析单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越高，产生的多抗纯度越高，因此抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小，A错误；单抗制备过程中通常是免疫后将脾脏破碎，然后用离心法将脾脏细胞(包含各种产生或不产生抗体的B细胞)和红细胞分开，然后用脾细胞与骨髓瘤细胞融合，而不能直接分离出浆细胞，B错误；非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 上有多种抗原决定簇，一个抗决定簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠体内注入p72 后，可以刺激小鼠产生多种抗p72的单抗

17、，C错误；p72 部分结构改变只改变了部分抗原决定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效，D正确。2(2022山东，15)如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是()A双抗可同时与2种抗原结合B利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞答案D解析根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2种抗原结合，A正确；根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性

18、，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物发挥相应的作用，B正确；由于双抗是在两种不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成的，因此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原抗体检测，从而实现对双抗的筛选，C正确；同时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，D错误。3(2018全国，38)2018年细胞期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴“中中”和“华华”。回答下列问题：(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程，核移植是指_。通过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆

19、猴体细胞的染色体数目_(填“减半”“加倍”或“不变”)。(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度_(填“大于”或“小于”)体细胞核移植，其原因是_。(3)在哺乳动物核移植的过程中，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，通常，所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目_(填“相同”或“不同”)，性染色体组合_(填“相同”或“不同”)。答案(1)将动物的一个细胞核，移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中不变(2)小于胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易(3)相同不同解析(1)核移植是指将动物的一个细胞核，移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中，形成重

20、组细胞。因为染色体在细胞核中，所以克隆动物体细胞的染色体数目与提供细胞核的个体的体细胞相同。4(2020全国，38)为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。回答下列问题：(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是_。(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤： _。(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于_，使用该培养基进行细胞培养的结果是_。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是_。(4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有_(答出2点即可

21、)。答案(1)诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞(2)取小鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液(3)选择培养基只有杂交瘤细胞能够生存抗原与抗体的反应具有特异性(4)将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养解析(1)利用小鼠甲制备单克隆抗体时，先要给小鼠甲注射相应的抗原，目的是获得经免疫的、能产生相应抗体的B淋巴细胞。(2)利用小鼠甲的脾脏制备单细胞悬液的主要步骤是取小鼠甲的脾脏并剪碎；用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞；利用培养液将分散的细胞制成细胞悬液。(3)为了得到所需要的杂交瘤细胞，在细胞培养过程中要进行筛选。第一次筛选(筛选

22、1)是利用选择培养基进行筛选，在选择培养基上只有融合的杂种细胞才能生长，未融合的、同种细胞融合的细胞都不能存活。后续过程还需要利用抗原与抗体的反应具有特异性的原理进行多次筛选(筛选2)，目的是得到能产生所需要的抗体并能无限增殖的杂交瘤细胞。(4)若要将得到的杂交瘤细胞进行大量培养，可以在体外条件下进行大规模培养或将其注射到小鼠腹腔内增殖。一、易错辨析1制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理()2动物细胞培养时，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH()3制备单克隆抗体时，要选用已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞()4灭活的病毒能促进动物细胞融合，

23、但不能促进植物细胞融合()5克隆动物都只具备一个亲本的遗传特性()6克隆动物的制备属于有性繁殖()二、填空默写1(选修3 P44)细胞贴壁：细胞悬浮液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。2(选修3 P45)接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的现象。3(选修3 P45)原代培养和传代培养：动物组织消化后的初次培养称为原代培养，将分瓶后的细胞培养称为传代培养。4(选修3 P46)细胞培养所需要气体主要有氧气和二氧化碳，氧气是细胞代谢所必需的，二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH。5(选修3 P47)动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细

24、胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。6(选修3 P47)动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的原因是由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复全能性十分困难。7(选修3 P49)通过体细胞核移植方法生产的克隆动物，不是对体细胞供体动物进行了100%的复制，原因是克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA来自受体卵母细胞。此外，动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系。8(选修3 P52)动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后

25、形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。9(选修3 P54)杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体。10(选修3 P54)单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高，并能大量制备。课时精练一、选择题1下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是()A动物细胞培养所需的营养物质与植物细胞培养不同B传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞C癌细胞在培养瓶中培养会出现接触抑制现象D动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染答案C解析动物细胞培养需要血清、血浆等，植物细胞培养需要蔗糖等，A项正确；传代培养时需要用胰蛋白酶等处理贴壁生长的细胞，不然会因为接触抑制而无法继续分裂，

26、B项正确；癌细胞膜表面的糖蛋白减少，细胞间信息交流受到限制，在培养瓶中培养不会出现接触抑制现象，C项错误。2如图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)，在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述不正确的是()A可用灭活的病毒诱导细胞融合B两两融合的细胞都能在HAT培养液中生长C杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D细胞膜的流动性是细胞融合的基础答案B解析动物细胞融合可以用灭活的病毒、聚乙二醇(PEG)、电激等进行诱导，A正确；两两融合的细胞包括：免疫B细胞的融合细胞、骨髓瘤细胞的融合细胞、杂交瘤细胞，由题干信息可知，骨髓瘤细胞在HAT筛选培

27、养液中无法生长，因此骨髓瘤细胞的融合细胞在HAT培养液中无法生长，B错误；融合后产生的杂交瘤细胞并不是都能表达产生所需的单克隆抗体，还需要进一步筛选才能用于生产，C正确；动物细胞融合依据的原理是细胞膜的流动性，D正确。3(2023山东德州高三模拟)我国科学家利用基因编辑技术，获得一只生物节律核心基因BMAL1敲除的猕猴。取其成纤维细胞与去核的卵母细胞融合，发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，获得5只克隆猴，用于研究节律机制。下列叙述不正确的是()A克隆猴基因组成差异小，作为实验动物便于研究B可用灭活的病毒诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合C受精卵经基因编辑后形成的胚胎可发育为克隆猴D克隆猴的获得体现

28、了动物体细胞的细胞核具有全能性答案C解析由于克隆猴基因组成差异小，用克隆猴作为实验动物，有利于实验中的无关变量的控制，有利于增强实验的可信度，A正确；细胞融合的过程需要人工诱导，如聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等，可用灭活的病毒诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合，B正确；受精卵经基因编辑后形成的胚胎发育成的个体不能叫做克隆猴，克隆猴是通过核移植技术后发育而成的，没有两性生殖细胞的结合，C错误；动物细胞核含有该物种的全套遗传信息，克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性，D正确。4(2023河南洛阳高三模拟)对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列说法错误的是()A在利用肝组织块制备细

29、胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B动物细胞培养应在含5%CO2的CO2培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pHC为了防止动物细胞培养过程中受污染，可向培养液中加入适量的干扰素D在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分答案C解析在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，以分解组织细胞间的蛋白质，得到单个细胞，A正确；为防止动物细胞培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素，C错误；使用合成培养基培养动物细胞时，通常要加入血清或血浆等一些天然的成分，以利于动物细胞生长，D正确。5肿瘤细胞表面抗原不能诱导强的免疫应答，树突状细胞(DCs)与肿瘤细胞的融合细胞

30、保持了DCs和肿瘤细胞的特性，能高效地将肿瘤抗原呈递给免疫系统，激发机体的免疫应答，同时还可以维持较长时期的抗肿瘤免疫。这种方法在临床应用中有着非常诱人的前景。下列有关叙述错误的是()A动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同B融合细胞主要激活B淋巴细胞产生免疫应答C树突状细胞可在体内起呈递肿瘤抗原的作用D体外培养动物细胞需要在培养液中添加适量抗生素答案B解析动物细胞融合和植物原生质体融合的基本原理都是细胞膜的流动性，A项正确；融合细胞主要激活T淋巴细胞产生免疫应答，B项错误。6植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理相符的是()A原生质体融合和动物细胞融合生物膜的选择透过性B动物细胞

31、培养细胞的全能性C纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理酶的高效性D紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养细胞分裂答案D解析原生质体融合和动物细胞融合的过程中，都利用了细胞膜具有一定的流动性，A错误；动物细胞培养没有利用细胞的全能性(利用了细胞增殖的原理)，B错误；细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，利用酶的专一性，纤维素酶和果胶酶能够去除细胞壁，动物细胞培养时用胰蛋白酶处理，C错误。二、非选择题7(2023湖南衡阳八中联考)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下面是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题：(1)制备单克隆抗

32、体过程中要用到_技术和_技术。(2)制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于_，使小鼠产生能分泌相应_的B淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的_免疫。(3)在细胞内DNA的合成一般有两条途径，主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶的催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的_具有筛选杂交瘤细胞的作用。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_。(4)此过程生产的单克隆抗体可以与_特异性结合，从而诊断早孕。答案(

33、1)动物细胞培养动物细胞融合(2)抗原抗体体液(3)氨基嘌呤既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体(4)人绒毛膜促性腺激素(或HCG)解析(1)制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养技术培养骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞、动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞。(3)DNA合成途径不同的特点：氨基嘌呤可以阻断合成DNA的主要途径；次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下可通过辅助途径合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。据此可知在配制的HAT培养基中添加的氨基嘌呤成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。杂交瘤细胞具有既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体的特点。(4)人绒毛膜促性腺激素(H

34、CG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，单克隆抗体可以与它特异性结合，从而诊断早孕。8Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间黏附分子1(ICAM1)，导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试。(1)用ICAM1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入_以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出抗原抗体反应最_(填“强”或“弱”)的培养孔所对应的小鼠M。(2)取小鼠M的脾脏细胞制成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有

35、_能力的细胞。核酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径(如图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”筛选出特定的杂交瘤细胞。融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中_(填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量增殖的原因是_。(3)将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用ICAM1检测，从中选择_的杂交瘤细胞，将其植入小鼠腹腔中进行克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。(4)若进一步比较实验用抗体

36、和131I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计。对照组(A)131I治疗组(B)单克隆抗体治疗组(C)给GD模型小鼠腹腔注射0.1 mL无菌生理盐水给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的131I答案(1)ICAM1强(2)无限增殖无杂交瘤细胞可以进行补救合成途径(3)大量产生抗ICAM1抗体(4)给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的抗ICAM1单克隆抗体解析(1)抗原和抗体结合具有特异性，多孔培养板中需加入ICAM1以检测小鼠是否产生抗ICAM1的抗体。依据反应结果，选出阳性(或“抗原抗体”)反应最强的培养孔所对应的小鼠

37、M。(2)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞无限增殖的特点。制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶，无法进行补救合成途径，且物质A阻断了全合成途径，故在HAT培养基中无骨髓瘤细胞生长。杂交瘤细胞含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，可以进行补救合成途径，故可以在HAT培养基上大量增殖。(3)根据抗原和抗体结合的特异性，用ICAM1检测，从中选择大量产生抗ICAM1抗体的杂交瘤细胞，将其植入小鼠腹腔中进行克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。(4)根据题干中实验目的“比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用”，依据实验的单一变量原则，单克隆抗体治疗组

38、(C)中应给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的抗ICAM1单克隆抗体。9科学家们发现，在核移植过程中，卵母细胞通过表达一些特异因子“修补”了体细胞核中缺失的端粒酶基因，最终成功地从端粒酶杂合缺失的小鼠体细胞中得到多能干细胞，该多能干细胞的端粒长度被有效延长，功能得以恢复。通过核移植后形成的多能干细胞，能分化发育成身体内多种细胞，可用于自身组织修复，并具有安全性。这一成果从实验和理论层面都表明人类“返老还童”不再是梦想。请回答下列问题：(1)动物体细胞核移植所用的受体细胞通常是_，选择该细胞的主要原因是_。(2)目前动物核移植技术中普遍使用的去核方法是_。哺乳动物的核移植可以分为

39、_和体细胞核移植，其中移植成功率较高的是_。(3)端粒学说认为，细胞衰老的原因是染色体上的端粒结构缩短，而端粒酶能够修复缩短的端粒，从而延缓细胞衰老。由此分析，题干中核移植小鼠的端粒酶活性应较正常小鼠的_。(4)早期胚胎最终要通过_技术才能发育成一个完整的个体。答案(1)(M期)去核的卵母细胞卵细胞内含有激发体细胞核全能性表达的成分(2)显微操作法胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植(3)高(4)胚胎移植10新型冠状病毒(RNA病毒)可通过表面的刺突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体，引起感染。抗体可阻断病毒的黏附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠感染的研究热点之一。

40、如图为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图，序号表示细胞。据图回答下列问题：(1)诊断是否感染新型冠状病毒，可通过咽拭子取样，其检测的是病毒的_。但由于采集的样品量较少，为了增加检材数量可进行_；还可采集血液样本检查血清中_；另外通过胸透检测胸部是否有病毒侵染的阴影，也可确诊。(2)研制抗S蛋白单克隆抗体时，需先给小鼠注射_以激活小鼠的免疫细胞。图中、分别表示_，用HAT培养基筛选获得的为_，为_，细胞还要进行_。(3)细胞、融合常用的诱导因素有_，细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使_成为可能。答案(1)RNAPCR扩增是否含有抗体(2)S蛋白B淋巴细胞、骨髓瘤细胞杂交瘤细胞能产生特定抗

41、体的杂交瘤细胞克隆化培养和抗体检测(3)聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等远缘杂交11我国科学家突破了体细胞克隆猴的世界难题，成功培育出世界上首个体细胞克隆猴“中中”和“华华”。这标志着我国将率先开启以猕猴作为实验动物模型的时代。下图为克隆猴的流程示意图。请回答下列问题：(1)我国克隆猴利用的是猴胎儿成纤维细胞，该细胞是一种已分化的体细胞，从理论上分析，它具有细胞的全能性，这是因为_。(2)克隆猴时需要进行“去核”操作，即去掉卵母细胞的细胞核。先在体外培养卵母细胞让其分裂，一般选择_的细胞进行去核操作；然后进行“核移植”，即将体细胞的细胞核移到去核卵母细胞中形成重组细胞；此时采用的技术是_；得到的重组细胞再进行人工激活使其分裂形成胚胎。(3)科学家将79枚克隆胚胎移植到21只代孕母猴中，最终只有两只母猴正常怀孕产下“中中”和“华华”，它俩的性别是否一致？_；原因是_