常用显色剂及配制.docx

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1、TLC显色剂配比方法?显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根 据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。显色剂种类繁多,本章只能列 举一些常用的显色剂。I.通用显色剂硫酸常用的有四种溶液:硫酸水(1: 1)溶液;硫酸甲醇或乙醇(1: 1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与硫酸钱溶液,喷后110oC烤15min,不同 有机化合物显不同颜色。0.5%碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。中性0.05%高铳酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。碱性高锦酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。溶液I: 1 %高锦酸钾溶液;溶液II: 5%碳酸钠溶液;溶液I和溶液H等量

2、混合 应用。酸性高锌酸钾试剂喷1.6%高镒酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后 薄层于180oC加热1520min。酸性重铝酸钾试剂喷5%重铝酸钾浓硫酸溶液,必要时150oC烤薄层。5%磷铝酸乙醇溶液喷后120oC烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰, 则背景变为无色。铁鼠化钾-三氯化铁试剂 还原性物质显蓝色,再喷2moi/L盐酸溶液,则蓝色 加深。溶液I: 1 %铁鼠化钾溶液;溶液H: 2%三氯化铁溶液;临用前将溶液I和溶液 I【等量混合。2.专属性显色剂由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常 用的显色剂列举如下:(1)煌类硝酸银/过氧化氢检出物:卤代烧

3、类。溶液:硝酸银0.1g溶于水Iml,加2苯氧基乙醇100ml,用丙酮稀释至200mL 再加30 %过氧化氢1滴。方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;结果:斑点呈暗黑色。方法:喷雾或浸渍。结果:己糖呈绿色、甲基戊糖呈黄绿色、戊糖呈紫色、糖醛酸呈棕色。四乙酸铅/ 2, 7一二氯荧光素检出物:甘弋类、酚类、糖酸类溶液:I. 2%四乙酸铅的冰醋酸溶液;H. 1%2, 7二氯荧光素乙醇溶液。取溶液I、II各5ml混匀,用干燥的苯或甲苯稀释至200ml,试剂溶液只能稳 定2h。方法:浸板。邻氨基联苯/磷酸检出物:糖类。溶液:0.3g邻氨基联苯加85%磷酸5ml与乙醇95ml。方法:喷板后IIOoC加热15

4、20min。结果:斑点呈褐色。苯胺/二苯胺/磷酸检出物:还原糖。溶液:4g二苯胺、4ml苯胺与20ml 85%磷酸共溶于200ml丙酮中。方法:喷后于85加热lOmin。结果:产生各种颜色。1, 4己醛糖、低聚糖呈蓝色。双甲酮/磷酸检出物:酮糖。溶液:双甲酮(5, 5-二甲基环己烷-1, 3-二酮)10.3g溶于90ml乙醇与IOml85% 磷酸中。方法:喷板后于110oC加热1520min。结果:日光下观察,白色背景上呈黄色斑点,紫外光长波下呈蓝色荧光。联苯胺/三氯乙酸检出物:糖类。溶液:0.5g联苯胺溶于10ml乙酸,再加10ml40%三氯乙酸水溶液,用乙醇稀释 至 lOOmlo方法:喷后

5、置紫外光下照射15min。结果:斑点呈灰棕-红褐色。对二甲氨基苯甲醛/乙酰丙酮 检出物:氨基糖类。溶液:1.5ml 50%氢氧化钾溶液与20ml乙醇混匀,取此溶液0.5ml,加乙酰丙 酮0.5ml与正丁醇50ml的混合液10ml,此两种溶液均需新鲜配制,临用前混合; II. 1g对二甲氨基苯甲醛溶于30ml乙醇中,再加30ml浓盐酸,需要时此溶液 可用正丁醇180ml稀释。方法:先喷I后于105oC加热5min,再喷II,然后于90干燥5min。结果:斑点呈红色。(12)杀虫剂甲基黄检出物:氯化杀虫剂及抗菌化合物。溶液:0.1g甲基黄于70ml乙醇中,加25ml水并用乙醇稀释至100ml。方法

6、:喷板后于室温干燥,并在无滤光片紫外光下照射5min。结果:黄色背景上呈红色斑点。溟/四氯化碳检出物:有机磷杀虫剂。溶液:10%澳的四氯化碳溶液。方法:薰溟蒸气。锦/水杨醛检出物:有机硫代磷杀虫剂。溶液:I. 100mg氯化钵溶于100ml 80%乙醇;II.溶解1.3g 2-游建咻于小量热乙醇中,溶1g水杨醛于5ml乙醇并加12滴 冰醋酸,合并两溶液并回流30min,冷却后析出水杨-2-醛-2噪咻腺沉淀,并用 乙醇重结晶。用50mg此衍生物溶于100ml乙醇中。方法:等量溶液I及H混合后,喷板。二苯胺/氯化锌检出物:氯化杀虫剂(DDT、CPCA、氯DDT、克菌丹、甲氧氯、毒杀芬)。溶液:二苯

7、胺及氯化锌各0.5g溶于100ml丙酮中。方法:喷后200oC加热5min。溟/荧光素/硝酸银检出物:杀虫剂。溶液;I. 5%溟的四氯化碳溶液;II. 1ml 0.25%荧光素的二甲基甲酰胺溶液,用乙醇稀释至50ml;HI. 1.7g硝酸银溶于5ml水中,加2-苯氧基乙醇,用丙酮稀释至200ml。方法:展开后的薄层置试液I容器中薰30s,取出先喷溶液II,再喷溶液III,再 置紫外光下7min。(13)黄酮类乙醇胺二苯硼酸盐检出物:黄酮类。溶液:I. 1 %乙醇胺二苯硼酸盐的甲醇溶液;11.5%聚乙二醇的乙醇溶液。方法:先喷溶液I,再喷溶液II使荧光稳定,再在紫外光长波下照射2min。结果:紫

8、外灯下观察荧光。三氯化睇检出物:黄酮类。溶液:10%三氯化睇的氯仿溶液。方法:喷板。结果:紫外光长波下呈荧光。三氯化铝检出物:黄酮类。溶液:1 %三氯化铝乙醇溶液。方法:喷板。结果:紫外光长波下显黄色荧光。Benedict(硫酸铜/枸椽酸钠)试剂检出物:含邻二羟基的黄酮类及香豆精类。溶液:1.73g硫酸铜(CuS045H20): 17.3g枸檬酸钠及10g无水碳酸钠溶于水 并稀释至1 OOmlo方法:喷板。结果:紫外光长波下观察,含邻二羟基的化合物,斑点荧光减弱或猝灭。(14)含硫化合物硝普钠检出物:疏基-SH基(半胱氨酸)、双硫化物、-s-s-基(胱氨酸)及精氨酸。溶液:硝普钠溶于5ml 2

9、moi/L盐酸溶液及95ml甲醇中,加10ml 25% 氢氧化钱溶液,过滤,即得;H. 2g氟化钠溶于5ml水,用甲醇稀释至100ml。 方法:先喷溶液I、再喷溶液H。结果:筑基化合物呈红色;精氨酸由橙变为灰蓝色;双硫化物在黄色背景上显红 色。FCNP(硝普钠/铁氟化物)试剂检出物:脂肪族含硫化台物,如氨基氟、硫胭及其衍生物。溶液:10%氢氧化钠溶液、10%硝普钠溶液,10%铁氟化钾溶液与水按1: 1: 1: 3混合,用前与等体积丙酮混合,用时新鲜配制。3氯化铁/磺基水杨酸检出物:硫代磷酸酯类。溶液:I. 1 %氯化铁的80%乙醇溶液;II. 1 %磺基水杨酸的80%乙醇溶液, 方法:薄层先置

10、澳蒸气中10min后,喷溶液I,干燥15min,再喷溶液II。结果:紫色背景上呈白色。叠氮化碘检出物:含硫氨基酸、硫化物与青霉素。溶液:叠氮碘溶液-叠氮钠3g溶乎100ml 0.05moi/L碘溶液中(新鲜配制,固 体叠氮碘有爆炸性)。靛红/硫酸检出物:曜吩衍生物。溶液;0.4g靛红溶于100ml浓硫酸中。方法:喷板后120oC加热。结果:呈不同颜色。(15)类脂化合物磷铜酸检出物:胆酸、类脂化物、脂肪酸及编类。溶液:250mg磷钳酸于50ml乙醇中。方法:唆后予120oC加热。罗丹明6G检出物;类脂化物。溶液:lg罗丹明6G溶于100ml丙酮中.方法:喷后置紫外光长波下观察。滨百里酚蓝 检出

11、物:类脂化物。溶液:O. 04g溟百里酚蓝溶于100ml 0. 01 mol / L氢氧化钠溶液中。(16)阳离子双硫踪检出物:金属离子。溶液:20mg双硫腺溶于100ml丙酮中,置棕色瓶中于冰箱内保存。方法:上述溶液喷板后再喷25%氢氧化镀溶液。红氨酸(二硫代草酰胺)检出物:重金属离子。溶液:0.5%红氨酸乙醇溶液。方法:先喷上述溶液,稍干后置薄层于氨蒸气中。茜素检出物:众多阳离子、稀土及铀。溶液:茜素乙醇饱和溶液。方法:喷板后直接放入氨蒸气中。亚铁氟化钾检出物:Fe3+、Cu2+、Cl、Mo、V、W 离子。溶液:新配制的2%亚铁氟化钾溶液。二苯卡巴朋检出物:Ag+、pb2+、Hg2+、Cu

12、2+、Sn2+、Mn2+、Zn2+、Ni2+、Co2+及 Ca2+ 离子。溶液:I. 1 %2%二苯卡巴腓乙醇溶液;II. 25%氢氧化镂溶液。方法:先喷溶液I,再喷溶液II。结果:Ni2+呈蓝色、Co2+呈橙褐色、Zn2+呈红紫色,Ag+、pb2+、Cu2+、Sn2+、Mn2+呈褐色、乙酸汞加成物于800c加热片刻,斑点呈蓝色。(17)阴离子硝酸银检出物:含硫阴离子、碎酸盐、亚碎酸盐磷酸盐、亚磷酸盐及除氟外的卤素。溶液:0.10.5mol/L硝酸银溶液中加氨水直至沉淀溶解。临用前配制、储存 会形成易爆物质。方法:喷后于110120oC加热。min,必要时置紫外光下lOmin。硝酸银/氢氧化核

13、/荧光素检出物:卤素离子。溶液:I. 1g硝酸银溶于100ml 0.5moi/L氢氧化镂溶液中;II. 1g荧光索溶 于100ml乙醇中。方法:先喷溶液I,稍干,再喷溶液II。铜酸筱/亚硫酸钠检出物:硫化物、硫代硫酸盐与磷酸盐。溶液:I. 5%铝酸镂的Imol/L硫酸溶液;II. 5%亚硫酸钠溶液。方法:先喷溶液I,再喷溶液H,于105加热30min0结果:硫化物及硫代硫酸盐呈深蓝色,磷酸盐呈蓝灰色。番木鳖碱检出物:溟酸盐、硝酸盐、氯酸盐。溶液:I. 0.02%番木鳖碱的Imol/L硫酸溶液;II. 2moi/L氢氧化钠溶液。方法:先喷溶液I,再喷溶液II。结果:溟酸盐、氯酸盐呈血红色,硝酸盐

14、呈橙黄色。荧光素/溟检出物:不饱和燃。溶液:I.荧光素0.1g溶于乙醇100ml; II. 5%澳的四氯化碳溶液。方法:先喷(I),然后置含澳蒸气容器内,荧光素转变为四澳荧光素(曙红),荧光 消失,不饱和烧斑点由于溟的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和煌在 粉红色背景上呈黄色。四氯邻苯二甲酸肝检出物:芳香煌。溶液:2%四氯邻苯二甲酸酎的丙酮与氯代苯(10: 1)的溶液。方法:喷后置紫外光下观察。甲醛/硫酸检出物:多环芳烽。溶液:37%甲醛溶液0.2ml溶于浓硫酸10mL(2)醇类3, 5 一二硝基苯酰氯检出物:醇类。溶液:I. 2%本品甲苯溶液;II. 0.5%氢氧化钠溶液;IH. 0.

15、002%罗丹明溶液。 方法:先喷(I),在空气中干燥过夜,用蒸气薰2min,将纸或薄层通过试液(H)30s, 喷水洗,趁湿通过(IH)15s,空气干燥,紫外灯下观察。硝酸电巾镂检出物:醇类。溶液:I. 1%硝酸锦铁的0.2mol/L硝酸溶液;II. N,N-二甲基-对苯二胺盐酸盐1.5g溶于甲醇、水与乙酸(128m1+25m1+1. 5m1)混合液中,用前将与(II) 等量混合。喷板后于105oC加热5mino香草醛/硫酸检出物:高级醇、酚、陷类及精油。溶液:香草醛1g溶于硫酸100ml。方法:喷后于120oC加热至呈色最深。二苯基苦基偕月井检出物:醇类、菇烯、默基、再旨与醛类。溶液:本品15

16、mg溶于氯仿25ml中。方法:喷后于110oC加热5lOmin。结果:紫色背景呈黄色斑点。(3)醛酮类品红/亚硫酸检出物:醛基化合物。溶液:I. 0.01%品红溶液,通入二氧化硫直至无色;II. 0.05mol / L氯化汞溶 液;III. O.05mol/L 硫酸溶液。方法:将I、II、HI以1: 1: 10混合,用水稀释至100ml。邻联茴香胺检出物:醛类、酮类。溶液:本品乙酸饱和溶液。2, 4二硝基苯脱检出物:醛基、酮基及酮糖。溶液:I. 0.4%本品的2moi/L盐酸溶液;H.本品0.1g溶于乙醇100ml中, 加浓盐酸ImL方法:喷溶液I或II后,立即喷铁氟化钾的2moi/L盐酸溶液

17、。结果:饱和酮立即呈蓝色;饱和醛反应慢,呈橄榄绿色;不饱和戮基化合物不显 色。绕丹宁检出物:类胡萝卜素醛类。溶液:I. 1%5%绕丹宁乙醇溶液;H. 25%氢氧化钱或27%氢氧化钠溶液。方法:先喷溶液I,再喷溶液II,干燥。(4)有机酸类溟甲酚绿检出物:有机酸类。溶液:澳甲酚绿01g溶于乙醇500ml和O.1mol/L氢氧化钠溶液5mL方法:浸板。结果:蓝色背景产生黄色斑点。高镒酸钾/硫酸 检出物:脂肪酸衍生物。溶液:见通用显色剂酸性高钵酸钾。过氧化氢检出物:芳香酸。溶液:0.3%过氧化氢溶液。方法:喷后置紫外光(365nm)下观察。结果:呈强蓝色荧光。2, 6二氯苯酚靛酚钠检出物:有机酸与酮

18、酸。溶液:0.1%本品的乙醇溶液。方法:喷后微温。结果:蓝色背景呈红色。(5)酚类Emerson试剂(4氨基安替比林/铁氟化钾(III)检出物:酚类、芳香胺类及挥发油。溶液:I. 4氨基安替比林1g溶于乙醇100ml; II.铁弱化钾(III)4g溶于水50ml, 用乙醇稀释至100ml。方法:先喷溶液I,在热空气中干燥5min,再喷溶液II,再于热空气中干燥5min, 然后将板置含有氨蒸气(25%氨溶液)的密闭容器中。结果:斑点呈橙淡红色。挥发油在亮黄色背景下呈红色斑点。Boute反应检出物:酚类、氯、漠、烷基代酚。方法:将薄层置有NO2蒸气(含浓硝酸)的容器中310min,再用NH2蒸气(

19、浓 氨液)处理。氯配(四氯代对苯醍)检出物:酚类。溶液:1 %本品的甲苯溶液。DDQ(二氯二氟基苯配)试剂 检出物:酚类。溶液:2%本品的甲苯溶液。TCNE (四氟基乙烯)试剂检出物:酚类、芳香碳氢化物、杂环类、芳香胺类。溶液:0.5%1%本品的甲苯溶液。Gibbs(2, 6-二溟苯醍氯亚胺)试剂检出物:酚类。溶液:2%本品的甲醇溶液。氯化铁检出物:酚类、羟酰胺酸。溶液:1%5%氯化铁的0.5mol/L盐酸溶液。结果:酚类呈蓝色、羟酰胺酸呈红色。(6)含氮化合物FCNP(硝普钠/铁氟化物)试剂检出物:脂肪族含氮化物,如氨基氟、胭、胭与硫胭及其衍生物,肌酸及肌肝。 溶液:10%氢氧化钠溶液、10

20、%硝普钠溶液、10%铁氟化钾溶液与水按1: 1: 1: 3混合,在室温至少放置20min,冰箱保存数周,用前将混合液与丙酮等体 积混合。Dragendorff(碘化钿钾试剂)试剂检出物:芳香族含氮化合物,如生物碱类、抗心律不齐药物。溶液:I.碱式硝酸钿0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中;II .碘化钾8g溶 于水20ml中。将上述溶液I及n等量混合,置棕色瓶中作为储备液,用前取储备液Iml、冰醋 酸2ml与水lOml混合。结果:呈橘红色斑点。4 甲基伞形酮检出物:含氮杂环化合物。溶液:本品0.02g溶于乙醇35ml,加水至100ml。方法:喷板后置25%氨水蒸气的容器中,取出后于紫外灯

21、(365nm)下观察。碘伯酸钾检出物:生物碱类及有机含氮化物。溶液:10%六氯铀酸溶液3ml与水97ml混合,加6%碘化钾溶液,混匀。临用 前配制。硫酸高铺铉/硫酸检出物:生物碱及含碘有机化物。溶液:硫酸铀1g混悬于4ml水中,加三氯乙酸1g,煮沸,逐滴加入浓硫酸直至 混浊消失。方法:喷后薄层于1IOoC加热数分钟。结果:阿朴吗啡、马钱子碱、秋水仙碱、罂粟碱、毒扁豆碱与有机碘化物均能检 出。Ehrlich (对二甲氨基苯甲醛/盐酸)试剂检出物:引噪衍生物及胺类。溶液:1%本品的浓盐酸溶液与甲醇按1: 1混合。方法:喷后板于50oC加热20min。结果:呈不同颜色的斑点。(7)胺类硝酸/乙醇检出

22、物:脂肪族胺类。溶液:50滴65%硝酸于乙醇100ml中。方法:需要时120oC加热。2, 6二氯醍氯亚胺检出物:抗氧剂、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳氢化物、 药物、苯氧基乙酸除草剂等。溶液:新鲜制备的0.5%2%本品乙醇溶液。方法:喷后薄层于110oC加热10min,再用氨蒸气处理。茜素检出物:胺类。溶液:0.1 %本品的乙醇溶液。丁二酮单月亏/氯化银检出物:胺类。溶液:I. 丁二酮单后1.2g溶于热水35ml中,加氯化银0. 95g,冷却后加浓氨 水 2ml;II.盐酸羟胺0.12g溶于200ml水中。方法:将溶液I及II混合,放置1天,过滤。Pauly (对氨基苯磺

23、酸)试剂检出物:酚类、胺类和能偶合的杂环化合物。溶液:磺酸4. 5g溶于温热的12moi/L盐酸45ml中,用水稀释至500ml,取 10ml于冰中冷却,加4. 5%亚硝酸钠冷溶液10ml,于OoC放置15min。用前 加等体积10%碳酸钠溶液。硫氟酸钻(H).检出物:生物碱、伯、仲、叔胺类。溶液:硫氟酸镂3g与氯化钻1g溶于水20ml。结果:白色至粉红色背景上呈蓝色斑点,2h后颜色消退。若将薄层喷水或放入 饱和水蒸气容器内,可重现色点。1, 2-秦醍-4磺酸钠检出物:芳香胺类。溶液:本品0.5g溶于95ml水,加乙酸5ml,滤去不溶物即得。方法:喷后反应30min显色。葡萄糖/磷酸检出物:芳

24、香胺类。溶液:菊萄糖2g溶于85%磷酸10ml与水40ml混合液中,再加乙醇与正丁醇各 30mL方法:喷后于115加热lOmin。(8)硝基及亚硝基化合物。蔡胺检出物:3, 5 一二硝基苯甲酸再旨、二硝基苯甲酰胺。溶液:I. O. 5%。-茶胺乙醇溶液;H. 10%氢氧化钾甲醇溶液。方法:先喷溶液I,再喷溶液II。结果:呈红褐色斑点。二苯胺/氯化钳检出物:亚硝胺类。溶液:1.5%二苯胺乙醇溶液与0.1g氯化钳的0.2%氯化钠溶液100ml,按5: 1 *昆合。方法:喷后置紫外光(254nm)下观察。结果:显紫色斑点。(9)氨基酸及肽类玮三酮检出物:氨基酸、胺与氨基糖类。溶液:本品0.2g溶于乙

25、醇100ml中。方法:喷后于110oC加热。结果:呈红紫色斑点。荀三酮/乙酸镉检出物:氨基酸及杂环胺类。溶液:荀三酮1g及乙酸镉2.5g溶于10ml冰醋酸中,用乙醇稀释至500ml。方法:喷后于120oC加热20法n。1, 2-秦醍-4磺酸钠检出物:氨基酸。溶液:临用前将本品0.02g溶于5%碳酸钠100ml中。方法:喷后室温干燥。结果:不同氨基酸呈不同色点。靛红/乙酸锌检出物:氨基酸与某些肽类。溶液:靛红1g与乙酸锌1g溶于95%异丙醇100ml中,加热至80oC,冷却后 加乙酸1ml,冰箱保存。方法:喷后于8085”C加热30min。玮三酮/冰醋酸检出物:二肽及三肽。溶液:1 %苛三酮毗咤

26、溶液与冰醋酸按5: 1混合。方法:喷后于IOOoC加热5min。香草醛检出物:氨基酸及胺类。溶液:I.本品1g溶于丙醇50ml中;II. 1mol/L氢氧化钾溶液Iml,用乙醵稀释至lOOml。方法:先喷溶液I后于110oC干燥lOmin,再喷溶液II,于110oC再干燥lOmin, 于紫外光(365nm)下观察。(10)陷类香草醛/硫酸检出物:留体激素。溶液:1 %香草醛浓硫酸溶液。方法:喷后于105C加热5min。氯化锌检出物:雌激素类。溶液:氯化锌0.2g溶于含硫酸2ml的甲醇60ml中。方法:喷后置紫外光(365nm)下观察。高氯酸检出物:俗体激素。溶液:5%高氯酸甲醇溶液。方法:喷后

27、于110oC加热5min,置紫外光(365nm)下观察。三氯化睇/乙酸检出物:留类与二菇类。溶液:三氯化睇20g溶于乙酸20ml与氯仿60ml混合液中。方法:喷后于100oC加热5min,紫外光长波下观察。结果:二菇类斑点呈红黄-蓝紫色。对甲苯磺酸检出物:脩族化合物、黄酮类与儿茶酸类。溶液:20%本品的氯仿溶液。方法:喷后于100oC加热数分钟,紫外光长波下观察。结果:斑点呈荧光。氯磺酸/乙酸检出物:三葩、箱醇与陷族化合物。溶液:氯磺酸5ml在冷却下加乙酸10ml溶解。方法:喷后于130oC加热5lOmin,置紫外光长波下观察。结果;斑点显荧光。(11)糖类茴香胺、邻苯二酸试剂检出物:碳氢化合物。溶液:1.23g茴香胺及1.66g邻苯二酸于100ml 95%乙醇中的溶液。

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