母液的配制学习教案.pptx

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1、会计学1母液的配制母液的配制第一页，编辑于星期二：一点 十二分。培养基类型：培养基类型：MS培养基培养基、B5培养基、培养基、N6培养基培养基 MS培养基是由培养基是由Marashige和和Skoog为培养烟草组为培养烟草组织而设计的，是应用最为广泛的培养基。织而设计的，是应用最为广泛的培养基。根据培养材料的种类、有针对性地选择根据培养材料的种类、有针对性地选择适宜的培养基，没有任何一种培养基可适合适宜的培养基，没有任何一种培养基可适合所有情况下的组织培养。所有情况下的组织培养。第1页/共23页第二页，编辑于星期二：一点 十二分。培养基制备是植物组织培养的基本工作。培养基含培养基制备是植物组织

2、培养的基本工作。培养基含有很多化学成分，而且数量多少不等，性质各有差异。有很多化学成分，而且数量多少不等，性质各有差异。特别是微量元素、维生素等微量成分，因用量少，不仅特别是微量元素、维生素等微量成分，因用量少，不仅称量麻烦，还容易出现误差，称量麻烦，还容易出现误差，所以配制母液是科学和方便所以配制母液是科学和方便的方法。的方法。使用母液不但可以保证培养基个物质成分的准确使用母液不但可以保证培养基个物质成分的准确性及配制的方便性，且便于低温保藏，从而提高工作效率。性及配制的方便性，且便于低温保藏，从而提高工作效率。第2页/共23页第三页，编辑于星期二：一点 十二分。储备液（母液）储备液（母液）

3、储备液（母液）储备液（母液）母液是将培养基成分扩大若干倍，一般为母液是将培养基成分扩大若干倍，一般为母液是将培养基成分扩大若干倍，一般为母液是将培养基成分扩大若干倍，一般为1010倍、倍、倍、倍、2020倍、倍、倍、倍、100100倍甚倍甚倍甚倍甚至更高倍数的浓缩溶液。至更高倍数的浓缩溶液。至更高倍数的浓缩溶液。至更高倍数的浓缩溶液。按试剂种类和性质将其分别称量、分别溶解、分别配制、按试剂种类和性质将其分别称量、分别溶解、分别配制、按试剂种类和性质将其分别称量、分别溶解、分别配制、按试剂种类和性质将其分别称量、分别溶解、分别配制、单独保存或几种混合保存，配制培养基时在按比列吸取即可。单独保存或

4、几种混合保存，配制培养基时在按比列吸取即可。单独保存或几种混合保存，配制培养基时在按比列吸取即可。单独保存或几种混合保存，配制培养基时在按比列吸取即可。配制母液及培养基时要选用蒸馏水，以免带入杂物质配制母液及培养基时要选用蒸馏水，以免带入杂物质配制母液及培养基时要选用蒸馏水，以免带入杂物质配制母液及培养基时要选用蒸馏水，以免带入杂物质对培养材料产生不利影响。对培养材料产生不利影响。对培养材料产生不利影响。对培养材料产生不利影响。第3页/共23页第四页，编辑于星期二：一点 十二分。实验一实验一实验一实验一 MSMS培养基贮备液（母液）的配制培养基贮备液（母液）的配制培养基贮备液（母液）的配制培养

5、基贮备液（母液）的配制一、实验目的一、实验目的 熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液（母液）的配制方法。第4页/共23页第五页，编辑于星期二：一点 十二分。二、实验原理：二、实验原理：配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。吸取母液进行稀释配制即可。以以MS培养基为例，所需

6、配制的母液可分为：培养基为例，所需配制的母液可分为：MS大量元素母液、大量元素母液、MS微量元素母液、微量元素母液、MS铁盐母液和铁盐母液和MS有有机化合物母液等。另外，还要配制生长物质母液，在不同类机化合物母液等。另外，还要配制生长物质母液，在不同类型的培养基中使用。型的培养基中使用。第5页/共23页第六页，编辑于星期二：一点 十二分。三、实验器具与药品三、实验器具与药品 电子分析天平、托盘天平、烧杯（电子分析天平、托盘天平、烧杯（50ml,100ml,500ml,1000ml）、量筒（）、量筒（1000ml,100ml,25ml）、）、容量瓶（容量瓶（1000ml,500ml,100ml）

7、、药勺、称量纸、）、药勺、称量纸、玻璃棒、滴管、电炉、冰箱。玻璃棒、滴管、电炉、冰箱。第6页/共23页第七页，编辑于星期二：一点 十二分。四、母液配制流程图四、母液配制流程图四、母液配制流程图四、母液配制流程图按照扩大倍按照扩大倍数称量数称量 母液分装母液分装确定培养基确定培养基 溶溶 解解 定定 容容 贴标签贴标签保存于冰箱保存于冰箱 按顺序混合按顺序混合第7页/共23页第八页，编辑于星期二：一点 十二分。五、实验方法及步骤五、实验方法及步骤1.大量元素母液的配制大量元素母液的配制 即含即含N、P、K、Ca、Mg、S六种元素的混合溶液，六种元素的混合溶液，一般配成浓度为一般配成浓度为10倍或

8、倍或20倍的母液。倍的母液。药品名称规定用量mg/L 扩大倍数称取量mg 母液定容体积 ml KNO3190010190001000 NH4NO316501016500MgSO47H2O370103700KH2PO4170101700CaCl22H2O440104400第8页/共23页第九页，编辑于星期二：一点 十二分。注意：注意：注意：注意：(1)(1)(1)(1)配制是各化合物应分别称量、分别溶解，经充分溶解后才配制是各化合物应分别称量、分别溶解，经充分溶解后才配制是各化合物应分别称量、分别溶解，经充分溶解后才配制是各化合物应分别称量、分别溶解，经充分溶解后才能混合。能混合。能混合。能混合

9、。（2 2 2 2）某些无机成分如）某些无机成分如）某些无机成分如）某些无机成分如CaCaCaCa2+2+2+2+、SOSOSOSO4 4 4 42 2 2 2一一一一、Mg Mg Mg Mg 2 2 2 2十十十十和和和和H H H H2 2 2 2POPOPOPO4 4 4 4一一一一等在一起可能发生等在一起可能发生等在一起可能发生等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，各种化学药品必须先以少量蒸化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，各种化学药品必须先以少量蒸化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，各种化学药品必须先以少量蒸化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，各种化学

10、药品必须先以少量蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。速度宜慢，边搅拌馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。速度宜慢，边搅拌馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。速度宜慢，边搅拌馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。速度宜慢，边搅拌边混合。待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完边混合。待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完边混合。待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完边混合。待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液倒入容全溶解后，将溶液倒入容全溶解后，

11、将溶液倒入容全溶解后，将溶液倒入容1000ml1000ml1000ml1000ml的量瓶中，再加水定容的量瓶中，再加水定容的量瓶中，再加水定容的量瓶中，再加水定容1000ml1000ml1000ml1000ml 。第9页/共23页第十页，编辑于星期二：一点 十二分。（3）CaCl22H2O要在最后单独加入（因为氯化钙易与磷要在最后单独加入（因为氯化钙易与磷 酸二氢钾形成磷酸三钙、磷酸钙之类不溶于水的沉淀）。酸二氢钾形成磷酸三钙、磷酸钙之类不溶于水的沉淀）。（4）然后，倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明配制）然后，倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明配制 日期、扩大倍数、配制人姓名、置于日期、

12、扩大倍数、配制人姓名、置于4冰箱保存备用。冰箱保存备用。第10页/共23页第十一页，编辑于星期二：一点 十二分。2.2.微量元素母液的配制微量元素母液的配制 将将将将MSMS培养基配方中微量元素的无机盐用量分别扩大培养基配方中微量元素的无机盐用量分别扩大培养基配方中微量元素的无机盐用量分别扩大培养基配方中微量元素的无机盐用量分别扩大10001000倍，用电子倍，用电子倍，用电子倍，用电子天平分别依次称取天平分别依次称取天平分别依次称取天平分别依次称取MnSO44H2O 22.3gMnSO44H2O 22.3g，ZnSO47H2O 8.6g,H3BO3 ZnSO47H2O 8.6g,H3BO3

13、6.2g6.2g，KI 0.83gKI 0.83g，Na2MoO42H2O 0.25gNa2MoO42H2O 0.25g，CuSO45H2O 0.025gCuSO45H2O 0.025g，CoCl26H2O 0.025gCoCl26H2O 0.025g，并用重蒸水逐个溶解，待全部溶解再依次混合，并用重蒸水逐个溶解，待全部溶解再依次混合，并用重蒸水逐个溶解，待全部溶解再依次混合，并用重蒸水逐个溶解，待全部溶解再依次混合后用容量瓶定容至后用容量瓶定容至后用容量瓶定容至后用容量瓶定容至1000ml1000ml，后倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标，后倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标，后倒入细口磨砂试剂瓶中，贴

14、上标，后倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4 4冰箱保存冰箱保存冰箱保存冰箱保存备用。备用。备用。备用。第11页/共23页第十二页，编辑于星期二：一点 十二分。药品名称规定用量ml/L 扩大倍数称取量mg 母液定容体积 ml MnSO44H2O22.31000 223001000 ZnSO47H2O8.61000 8600H3BO36.21000 6200KI0.83 1000 830Na2MoO42H2O 0.251000

15、250CuSO45H2O 0.0251000 25CoCl26H2O0.0251000 252、微量元素母液的配制、微量元素母液的配制第12页/共23页第十三页，编辑于星期二：一点 十二分。3.3.铁盐母液的配制铁盐母液的配制 FeFeFeFe是用量较多的一种微量元素，因铁离子是用量较多的一种微量元素，因铁离子是用量较多的一种微量元素，因铁离子是用量较多的一种微量元素，因铁离子在水溶液中不稳定，易与氢氧根离子结合二发生在水溶液中不稳定，易与氢氧根离子结合二发生在水溶液中不稳定，易与氢氧根离子结合二发生在水溶液中不稳定，易与氢氧根离子结合二发生沉淀，必须单独配制。只有其螯合物才容易被植沉淀，必须

16、单独配制。只有其螯合物才容易被植沉淀，必须单独配制。只有其螯合物才容易被植沉淀，必须单独配制。只有其螯合物才容易被植物吸收和利用，因此需要单独配制成铁盐螯合物物吸收和利用，因此需要单独配制成铁盐螯合物物吸收和利用，因此需要单独配制成铁盐螯合物物吸收和利用，因此需要单独配制成铁盐螯合物母液。母液。母液。母液。目前目前目前目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠的螯合物，必须单独配成母液的螯合物，必须单独配成母液的螯合物，必须单独配成母液的螯合物，必须单独配成母液。这种螯合物使用起。

17、这种螯合物使用起。这种螯合物使用起。这种螯合物使用起来方便，比较稳定，且不易发生沉淀。来方便，比较稳定，且不易发生沉淀。来方便，比较稳定，且不易发生沉淀。来方便，比较稳定，且不易发生沉淀。第13页/共23页第十四页，编辑于星期二：一点 十二分。药品名称规定用量mg/L 扩大倍数称取量mg 母液定容体积 ml FeSO4.7H2O 27.8 100 1390500 Na2-EDTA37.310018653、MS铁盐母液的配制铁盐母液的配制铁盐母液的配制方法是：铁盐母液的配制方法是：用电子天平称取硫酸亚（用电子天平称取硫酸亚（FeSO4.7H2O）和乙二胺四乙酸二钠）和乙二胺四乙酸二钠（Na2-E

18、DTA），分别用蒸馏水加热溶解，煮沸，使之全部），分别用蒸馏水加热溶解，煮沸，使之全部溶解，溶解后混合后继续煮沸几分钟（溶解，溶解后混合后继续煮沸几分钟（约加热约加热5min5min至溶液呈金至溶液呈金黄色黄色)，冷却后定容至冷却后定容至500ml的容量瓶中，倒入棕色磨口试剂瓶的容量瓶中，倒入棕色磨口试剂瓶中，经室温放置一段时间令其充分反应后，贴上标签，注明配中，经室温放置一段时间令其充分反应后，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4冰箱保存备用。冰箱保存备用。第14页/共23页第十五页，编辑于星期二：一点 十二分。如果将新配制的铁盐母液立即放如

19、果将新配制的铁盐母液立即放入冰箱中。入冰箱中。则会容易形成沉淀。则会容易形成沉淀。第15页/共23页第十六页，编辑于星期二：一点 十二分。4 4 4 4、有机母液的配制、有机母液的配制、有机母液的配制、有机母液的配制 MSMSMSMS培养基的有机成分包括维生素、肌醇、氨基培养基的有机成分包括维生素、肌醇、氨基培养基的有机成分包括维生素、肌醇、氨基培养基的有机成分包括维生素、肌醇、氨基酸等，由于用量小，也应配成母液。培养基中的有酸等，由于用量小，也应配成母液。培养基中的有酸等，由于用量小，也应配成母液。培养基中的有酸等，由于用量小，也应配成母液。培养基中的有机成分原则上应分别单独配制。机成分原则

20、上应分别单独配制。机成分原则上应分别单独配制。机成分原则上应分别单独配制。第16页/共23页第十七页，编辑于星期二：一点 十二分。药品名称规定用量mg/L 扩大倍数称取量mg 母液定容体积 ml 烟酸（维生素烟酸（维生素B5）5100 50100盐酸吡哆醇盐酸吡哆醇(维生素维生素B6)510050盐酸硫胺素盐酸硫胺素(维生素维生素B1)5100 50甘氨酸甘氨酸20100 200（1）维生素母液的配制）维生素母液的配制 按培养基配方用量的按培养基配方用量的100倍，用电子分析天平分倍，用电子分析天平分别称取后放入别称取后放入l烧杯中，加蒸馏水直接溶解，然后混合烧杯中，加蒸馏水直接溶解，然后混合

21、定容于定容于100ml容量瓶中，转移到储液瓶中保存于容量瓶中，转移到储液瓶中保存于4冰冰箱。箱。第17页/共23页第十八页，编辑于星期二：一点 十二分。药品名称规定用量ml/L 扩大倍数称取量mg 母液定容体积 ml 肌醇肌醇100100 1000100（2）肌醇母液的配制）肌醇母液的配制 按培养基配方用量的按培养基配方用量的100倍，用电子分析天平分倍，用电子分析天平分别称取后放入别称取后放入l烧杯中，加蒸馏水直接溶解，然后定容烧杯中，加蒸馏水直接溶解，然后定容于于100ml容量瓶中，转移到储液瓶中保存于容量瓶中，转移到储液瓶中保存于4冰箱。冰箱。第18页/共23页第十九页，编辑于星期二：一

22、点 十二分。5.5.植物生长调节剂的配制植物生长调节剂的配制 常用的激素如生长素和细胞分常用的激素如生长素和细胞分裂素等配制成母液使用起来方便、裂素等配制成母液使用起来方便、准确。准确。配制前需先用相应的少量有机配制前需先用相应的少量有机溶剂进行溶解，然后再定容。贴溶剂进行溶解，然后再定容。贴好标签，写明配制激素的浓度，好标签，写明配制激素的浓度，存放于冰箱中。存放于冰箱中。第19页/共23页第二十页，编辑于星期二：一点 十二分。激素的使用比较灵活，要根据培养的植物种类和目的而定。激素的使用比较灵活，要根据培养的植物种类和目的而定。激素的使用比较灵活，要根据培养的植物种类和目的而定。激素的使用

23、比较灵活，要根据培养的植物种类和目的而定。该培养基的生长素选择配制该培养基的生长素选择配制该培养基的生长素选择配制该培养基的生长素选择配制IAAIAAIAAIAA（吲哚乙酸）、（吲哚乙酸）、（吲哚乙酸）、（吲哚乙酸）、NAANAANAANAA（萘乙酸），母液的配制的终浓度为（萘乙酸），母液的配制的终浓度为（萘乙酸），母液的配制的终浓度为（萘乙酸），母液的配制的终浓度为1mg/ml1mg/ml1mg/ml1mg/ml：（）配制生长素类，称取（）配制生长素类，称取（）配制生长素类，称取（）配制生长素类，称取NAANAANAANAA（萘乙酸）物质（萘乙酸）物质（萘乙酸）物质（萘乙酸）物质500mg5

24、00mg500mg500mg，应，应，应，应先用少量先用少量先用少量先用少量1mol/LNaOH1mol/LNaOH1mol/LNaOH1mol/LNaOH，然后加水约，然后加水约，然后加水约，然后加水约100ml100ml100ml100ml后用后用后用后用1mol/L1mol/L1mol/L1mol/L的的的的HCIHCIHCIHCI调调调调PHPHPHPH值（当出现白色沉淀时表明值（当出现白色沉淀时表明值（当出现白色沉淀时表明值（当出现白色沉淀时表明HCLHCLHCLHCL已经过量），然后已经过量），然后已经过量），然后已经过量），然后分别用蒸馏水定容到分别用蒸馏水定容到分别用蒸馏水定容

25、到分别用蒸馏水定容到500ml500ml500ml500ml，即得质量浓度为，即得质量浓度为，即得质量浓度为，即得质量浓度为1 mg/mL1 mg/mL1 mg/mL1 mg/mL的母的母的母的母液。液。液。液。（2）配制生长素类）配制生长素类IAA（吲哚乙酸）物质，方法同上（吲哚乙酸）物质，方法同上第20页/共23页第二十一页，编辑于星期二：一点 十二分。注意：注意：所有母液都要贴上所有母液都要贴上标签，注明名称、配制标签，注明名称、配制倍数、日期，所有的母倍数、日期，所有的母液都应保存在液都应保存在04冰冰箱中，若母液出现沉淀箱中，若母液出现沉淀或霉团则不能继续使用。或霉团则不能继续使用。第21页/共23页第二十二页，编辑于星期二：一点 十二分。作业：作业：（一）MS培养基母液的配制分为几个部分？母液配制的程序是什么，有哪些注意事项？（二）如需配制MS培养基的20的 大 量 元 素 的 量 为 500 mL、100的微量元素、铁盐和有机成分各100 mL以及IAA和NAA（浓度为1 mg/mL）各50 mL，则应分别称取多少量的各种试剂？第22页/共23页第二十三页，编辑于星期二：一点 十二分。