贵州工业大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室研究生手册.pdf

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1、贵州工业大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室研究生手册、，一,A刖s贵州省发酵工程与生物制药重点实验室是进行课题研究及研究生完成学位论文工作的重要基地。所配置的仪器设备在国内外都具有一定的先进水平，因此为了更有效、更安全地规范操作,并使这些仪器设备更好地配合科研工作的顺利开展，维护实验室的正常工作秩序，特制定此仪器设备操作规程。本手册包括了各大小型仪器设备的操作规程。每一位工作人员和研究生在进行操作前都应当详细阅读，严格按照操作规程上的要求规范自己的操作，自觉爱护实验室的仪器设备及各种软硬件设施，以延长仪器设备的使用寿命，确保实验工作的正常进行。凡是违背了正规的操作程序进行操作者，将会受到相

2、应的追究。仪器设备是从事科研工作所必备的工具，爱护好自己的工具就是向成功迈出了第一步。贵州省发酵工程与生物制药重点实验室2003年7月目 录发酵工程与生物制药重点实验室研究生管理规范.(4)发酵工程与生物制药重点实验室科研项目收费标准.(7)ECLIPSEE200型显微镜操作规程.(9)YS100型显微镜操作规程.(11)梅特勒一托利多AG135天平操作规程.(13)奥豪斯Adventurer天平操作规程.(15)SIGMA115K离心机操作规程.(16)SIGMA3K18离心机操作规程.(17)HHB11电热恒温培养箱操作规程.(19)SPXG光照培养箱操作规程.(20)SPX250B生化培

3、养箱操作规程.(22)MJ160B-II霉菌培养箱操作规程.(23)水浴恒温振荡器操作规程.(24)ZHW Y-U1B型恒温培养振荡器操作规程.(25)电热蒸播水器操作规程.(26)H L-01溶剂过滤器操作规程.(27)超声波清洗器操作规程.(28)岛津LC10A高效液相色谱工作站操作规程.(29)超净工作台操作规程.(32)立式压力蒸汽灭菌器操作规程.(33)ALPHA 1-4 冷冻干燥机操作规程.(35)Biostat C Fermenter 发酵罐操作规程.(40)B290喷雾干燥机操作规程.(46)岛津UV2550紫外分光光计操作规程.(47)附表一：发酵工程与生物制药重点实验室课题

4、研究申请书(48)附表二：研究生课题完成小结.(49)附表三：发酵工程与生物制药重点实验室部分药品.(50)附表四：基本实验耗材.(53)发酵工程与生物制药重点实验室研 究 生 管 理 规 范贵州省发酵工程与生物制药重点实验室是研究生完成学位论文的重要基地。为了保证实验教学和研究生研究课题的顺利进行，以及本实验室各项工作有序运行。培养严肃认真的工作作风和良好的实验工作习惯，特制定下列规则：1、进入本实验室完成课题的程序：提前填写入室申请书（见附表一），内容包括：课题名称；研究内容及方法；拟用设备；主要耗材和试剂；经费结算方式；研究起止期限；申请者及导师签名。待批准后，方可入室进行课题研究。实验

5、结束时，需缴纳仪器使用、水电和普通试剂费，或将经费直接划拨至本室账号：02020023。2、遵守本实验室的规章制度，包 括 贵州工业大学作息制度、安全守则和 卫生清扫制度等。3、严格遵守 设备操作规程，正确使用实验设备。发现故障及时向责任管理老师反映，爱护仪器，未经允许，不得动用其它仪器。如发现仪器丢失，追究当事人的责任，若违反操作规程，将被停止使用设备，并处以相应的经济处罚。4、节约用水、用电，回收的实验耗材（如试管、玻片、乳胶手套等）应及时清洗，不可乱堆、乱扔、乱放。5、本实验室的一切实验器材、试剂及书籍资料，不得带出实验室。一经发现，将终止其在本实验室的工作，并给予相应的经济处罚。6、对

6、晚间实验借领实验室钥匙的规定：原则上，实验应安排在上班时间内进行。若流程需要晚间实验，应事先向本室有关老师汇报。借领钥匙的时间：当日下午5：0 0前在办公室领取并登记，次日上午上班时必须归还。夜间实验期间，必须关闭大门，以确保实验室安全。离开实验室时需检查水电是否关好、门窗是否锁好、用电器是否已断电。7、不得邀约未经本实验室同意的人员进入实验室。8、进入实验室应更换拖鞋、工作衣，保持安静，不准抽烟和随地吐痰。保持实验室清洁。9、卫生清扫制度：每日清扫：实验工作开始前进行，包括所在实验室台面、地面和公共走廊、楼道。周五清扫：下 午5：00进行全面清扫，包括实验室、地面、公共走廊、楼道、门窗、桌凳

7、和设备等。实验废弃物要及时清走。每使用完一种仪器应及时清理仪器及桌面，如有不履行者，作相应经济处罚。保持工作衣及拖鞋的清洁。10、课题完成后，须 填 写 研究生课题完成小结（见附表二）方可离室。发酵工程与生物制药重点实验室科研项目收费标准发酵工程与生物制药重点实验室为了实现实验室资源共享，促进实验室可持续发展，特向相关学科和技术领域全方位开放，并实行有偿服务。相关项目收费标准如下：1、仪器使用、水电和普通试剂费本项收费为仪器折旧、水电及普通试剂费用的最低补偿限额。收费标准为：200元/人/月。不 足15天按月计算，超 过15天不足30天，按全月计算。缴纳此费用后，申请者享有仪器(大型专用设备的

8、使用按“2”项收费)的使用权、水(包括自来水、蒸储水和超纯水)、电的使用权，普通试剂(见附表3)的使用权，不再另缴相关费用。2、实验项目检测费本项收费为特殊检测项目的参考费用。(1)HPLC 检测：100300 元/样(2)紫外分光光度计检测：3050元/样(3)ALPHA1-4冷冻干燥设备：3050元/样(4)B290喷雾干燥设备：3050兀/样(5)冷冻离心机：510元/样3、低质耗材费实验室可向研究生和客座研究人员提供实验低质耗材一（见附表4）,收费按成本价收取。4、特殊试剂费原则上本实验室不向研究生和客座研究人员提供特殊试剂，但在可能的情况下，实验室可调剂部分特殊试剂，收费按成本价+5

9、%的管理费收取。5、管理费用本项收费为低质耗材运输、库存及领取的管理费用，按本收费 标 准“第一条”实际发生额的5%收取。6、收费方式由我实验室开具缴费通知单，到实验室办公室缴费，或通过划拨单直接转帐至02020023,即可邻取相关材料并安排实验。ECLIPSEE200型显微镜操作规程一、操作：1、打开电源开关，旋转视场亮度调节钮来调节视场明亮度。2、调节目镜筒间距，使左右眼的视场重叠合一。3、转动左右目镜筒上的屈光度调节环，使其底部边缘与刻度线对齐。4、将切片放在载物台上，用手指拨开标本夹弹片，将切片固定住。5、将 10X物镜移入光路，通过转动粗微调焦手轮对标本的像进行聚焦。6、根据左右眼视

10、力差，调节目镜筒上的屈光度调节环。7、视场光阑对中、聚焦：将 10义物镜移入光路，旋转视场光阑环，将视场光阑关至最小；通过目镜观察，旋转聚光器调焦手轮，将视场光阑像聚焦在标本表面；旋转视场光阑左、右对中螺钉，直至视场光阑像呈在视场中心；将 40X物镜移入光路，旋转视场光阑环，使视场光阑像与视场一样大小;如果视场光阑像不在中心，再调节对中螺钉。8、选择所需放大倍率的物镜，根据所选物镜调节孔径光阑（使调节杆与光路中物镜倍率相同数字对齐）。9、调节视场光阑，使光阑大小与视场边缘外切。10、进行观察。11、使用完后，关闭电源开关。等场镜足够冷却后罩上防尘罩。二、操作流程图：打开电源I 1瞳距调节器I斗

11、将屈光度调节环与刻度线对弄1 I放置标本切片叶 用10义物镜对焦I-斗屈光度调节I一 I视场光阑对中和聚焦1-1选择物镜，调节孔径光阑I I调节视场光阑I I进行观察I-M关闭电源IYS100型显微镜操作规程一、操作：1、打开电源开关，旋转视场亮度调节钮来调节视场明亮度。2、调节目镜筒间距，使左右眼视场重叠合一。3、转动左右目镜筒上的屈光度调节环，使其底部边缘与刻度线对齐。4、将切片放在载物台上，用手指拨开标本夹弹片，将切片固定住。5、将 10X物镜移入光路，通过转动粗微调焦手轮对标本的像进行聚焦。6、根据左右眼视力差，调节目镜筒上的屈光度调节环。7、利用聚光器垂直运动手柄将其调至上端极限处，

12、然后稍微往下降低，尤其在视场背景上发现散射图像，即将聚光器作上下微调节，使其现象消失。8、选择所需放大倍率的物镜，根据所选物镜调节孔径光阑（使调节杆与光路中物镜倍率相同数字对齐）。9、进行观察。10、使用完后，关闭电源开关。等场镜足够冷却后罩上防尘罩。二、操作流程图:打开电源I-I瞳距调节1 -H将屈光度调节环与刻度线对拓 1放置标本切用 I用10义物镜对蕉 I屈光度调节I 1聚光器垂直位置调节I_ _ I选择物镜，调节孔径光阑*进行观察I-I关闭电源I梅特勒-托利多AG135天平操作规程一、去皮称量：1、将空容器置于秤盘上，关闭风罩。2、按一下 0/T键开始去皮。3、放入样品进行称量，其显示

13、结果即为样品净重。4、在去皮称量完成后，按一下 O/T键则恢复初始状态。二、简略的快速称量：1、在所称量样品读数不需要很准确时，可以使用此方法。2、天平正常读数的小数点位数是根据天平型号而固定的，按一下键，天平操作的最低精度至少保留一位小数，但显示数据结果时速度很快。3、称量完后再按一下“l/10d”键，则回到标准称量状态。三、转换称量单位：1、天平的称量单位默认为“克2、按 一 下“F”键，天平即转换成第二种称量单位“毫克”。3、再次按下“F”键，又回到第一种称量单位“克二四、天平的双量程:1、AG135设有一个半微量量程，其量程为031克，在此范围内有很高的分辨率，可比标准所测数据多保留一

14、位或更多小数。2、使用时按一下“l/10d”键即可转换到半微量量程。3、如称量超过31克，天平自动退出回到标准量程。奥豪斯Adventurer天平操作规程一、操作：1、按0/T 键，天平开机，此时即可以克为单位进行称量。2、如需要其它单位称量，则按住0/T 键直到显示出现M E N U后松开，进 入“UNITS-”进行选择。3、若需显示回零，请快速按一下O/Tv键。4、将样品置于秤盘上并从显示屏上读取称量值。当稳定指示器出现后，读数为稳定值。5、若样品需置于容器中称量，则先将空容器置于秤盘上，按0 键回零。此时当样品加入容器中时，显示的就是样品的净重。称量完后再次按0/T 键，即恢复初始状态。

15、二、维护和保养：1、保持天平适度使用，保持外壳和操作面板的清洁。2、必要时，可使用沾有温和型清洁剂的湿布擦洗。保持校准祛码放置在干燥安全的地方。SIGMA1-15K离心机操作规程一、操作：1、转头安装正确后，将样品对称放置。2、关上机盖，运 转（START）指示灯及开盖（LID）指示灯被点凫。3、旋转仪器面板左边旋钮直到所需要的时间为止。4、旋转仪器面板右边旋钮将光标移至相应的参数。5、旋转仪器面板左边旋钮直到所需要的数值。6、按运转（START）键开始离心。二、注意事项：1、离心机应放在平稳且通风良好的台面上。2、仪器周围至少有30厘米的空间。3、离心时一定要配平，放置要对称。4、转头转轴和

16、螺丝要经常上油（S I G M A 货号NO70284）,吊篮和适配器经常清洗上油（S I G M A 货号N070104）。SIGMA3K18离心机操作规程一、操作面板：1、启动键：启动离心机，开始运转。条件：盖子必须是关好的,启动键灯亮。2、停止键：按下该键离心机将以预设的速度减速并完全停止。3、开盖键：用来打开离心机盖子。条件：离心机完全停止，开盖键灯亮。4、按 钮：用来选择或改变参数。二、操作：1、按一下或转动按钮，光标出现。其出现处是激活状态。2、旋转按钮使光标移到需要修改的参数上，按一下按钮确定，SET将点亮，即处于可修改状态。3、转动按钮直到你所需要的数字出现。4、按一下按钮确认

17、该数字。5、如果没有其他参数修改或输入，光标20秒后将自动熄灭。6、以同样的方法改变其它参数。三、注意事项：1、离心机应放在平稳且通风良好的台面上。2、仪器周围至少要有30厘米的空间。3、离心时一定要配平，放置要对称。4、离心前一定要检查安装的转头编号与离心机程序所设定转头编号是否一致。5、每次使用完后必须将盖子打开让离心腔回到室温，并且用软布将离心腔里冷却水和赃物清理干净。6、转头转轴和螺丝要经常上油（S I G M A 货 号 NO70284）,吊篮和适配器经常清洗上油（S I G M A 货号N070104）。7、建议每次使用完后将转头取下单独放在4 度冰箱中保存。H H-B11电热恒温

18、培养箱操作规程一、操作：1、当试验物品放入培养箱内后，关上箱门，并将箱顶上风顶活门适当旋开。2、接通电源，开启电源开关。3、温度设定：按下设定、测量按钮开关，旋转设定旋钮，设定所需温度，设定完毕再按一下设定、测量按钮开关，使其弹回，此时则显示箱内测量温度。4、使用时应防止较硬物件接触，碰撞传感器控头，以免损坏。二、注意事项和维护：1、在通电使用时，切忌用手触及箱左侧空间的电器部份或用湿布揩抹及用水冲洗。2、实验物品放置在箱内不宜过挤，使空气流动畅通，保持箱内受热均匀，内室底板因靠近电热器，故不宜放置实验物。3、注意适当旋开风顶活门，以利于调节箱内温度。4、非必要时，不得打开温度控制仪以防损坏。

19、5、每次使用完毕后，须将电源切断，并保持箱内外清洁和水箱内水的清洁。SPXG 光照培养箱操作规程操作:1、打开电源开关。3、时间设定：同温度设定。4、可编程式控制器的使用:如设定错误，按（清除）键即可。步骤按键设定项目1按（设定）进入定时开设定2按（星期）设定每天相同、不同或星期1-5相同6-7不同3按（时）（分）设定开的时间4按（设定）进入定时关设定5按（时）（分）设定关的时间6按（星期）如设定关的日期与开的相同可不按此键7重复2-6步骤设定第2-8次开关的时间8按（时钟）结束时间设定1、完成设定后，按“开/自动/关”键，使显示器的最下行显示为 ON-AT 或 AT-OFFo二、注意事项：1

20、、开关时间的设定，应按时间的顺序设定。2、实行定时开关控制时一定要将状态设定在自动，即显示ON-AT 或 AT-OFFoSPX250B生化培养箱操作规程一、操作：1、打开电源开关。2、温度设定：|按“温度/时间”键到温度设定指示灯亮L按“设定”键 l 通过设定温度上再 按“设定”键3、时间设定：同温度设定。二、注意事项：1、使用中切勿频繁改变设定值，以免压缩机频繁启动造成过载。2、切勿触摸，碰撞箱内感温探头，造成温度失控。MJ-160B-II霉菌培养箱操作规程一、操作：1、将已加水的加湿器插头插在箱子底部后面的插座上，加湿器放置在箱子后，将箱后的塑料管套在接头上，并把湿度调节旋钮逆时针方向转到

21、底（即湿度设定为最小值）。2、接通电源，打 开“电源”开关，LED数码管亮，此时数码管显示的分别是箱内实际温度和实际湿度。3、调节温度：按下温度设定按钮，数字显示即为当前值，然后旋转温度调节电位器到所需温度值，松开按钮即可。4、调节湿度：按下湿度设定按钮，数字显示即为当前值，然后旋转湿度调节电位器到所需湿度值，松开按钮即可。二、注意事项：1、调节所需温度时，不能随便将控温旋钮来回多次旋转，以免压缩机启动频繁，影响寿命。2、培养箱使用完毕后，应倒掉位于箱内底部积水盘内的积水。3、若湿度长期不用时，应将盒内水倒尽。水浴恒温振荡器操作规程一、操作：1、调节调速旋钮至最小位置，检查“振荡开关”是否处于

22、关闭状态。2、装培养试瓶：注意均匀分布，装液不能偏少，密封好试瓶口。3、注入自来水，水位应略高于培养试瓶内液面。4、接通电源，将温度”设置一测量”开关拨向“设置”处，调节温控旋钮到所需数字。当拨向“测量”时所得温度为工作腔内温度。5、选择确定后，打开“振荡”开关，再缓慢调节调速旋钮到所需转速。二、注意事项：1、每次停机前，应检查各开关是否已置于非工作状态。2、禁止水箱在无水状态下使用加热器。3、当需要选择不同的振荡方式时，只需改变换向螺钉的位置即可。ZH W Y-111B型恒温培养振荡器操作规程一、操作：1、温度设定：参数修改/确认亍叶一 键至3 1 温度”键l 按或设定温度 1 ”参数修改/

23、确认”键确认2、转速设定：同温度设定。3、定时设定：同温度设定。4、按 下“启动”键，仪器即按已设定的程序运行。二、注意事项：1、开启仪器箱门时，应确认托盘已处于静止状态。2、仪器表面不可与汽油、香蕉水等挥发性化学品接触。3、保持箱内外清洁。4、仪器关机时，还必须将仪器右侧的电源总开关关闭。电热蒸储水器操作规程一、操作：1、关闭放水阀，开启水源阀，使自来水经进水阀升至玻璃水位窗中间处，即关小水源。2、接通电源加热，当蒸发锅内水沸腾产生蒸汽后，重新开大进水阀，并调节到既有蒸储水产生，又有冷却水从集水杯排出。3、收集蒸馈水。二、注意事项：1、使用中，必须保持自来水水压稳定，否则容易溢水。2、使用前

24、应洗刷蒸发锅，将存水排尽，以保证水质。3、蒸储水器工作时，外表温度很高切勿接触。H L-01溶剂过滤器操作规程一、操作：1、将滤瓶、滤杯、滤头清洗干净。2、将滤头插放在集液瓶外磨口上，并使之配合紧密。3、连接滤头上的吸气嘴与真空泵的抽气嘴。4、选取恰当的滤膜置于滤头筛板上，用滤杯轻压住滤膜，同时用固定夹固定滤头和滤杯的平面磨口法兰。5、将过滤溶液适量倒入滤杯，启动真空泵进行过滤。二、注意事项：1、倒入滤杯的溶液不能超过满刻度。需连续过滤时，应待液面下降到最低刻度时再加入。2、集液瓶内过滤后的溶液一般不超过容量的3/4。3、一般泵的连续运转时间不超过30分钟。4、过滤同种溶剂，当过滤速度减慢时，

25、应及时更换滤膜。超声波清洗器操作规程一、操作：1、向清洗槽内加入清洗液，水面最好在槽子的二分之一位置。物体应悬于水中。2、接通电源，扳动电源开关，或扭动定时器。水面即呈现沸动状态。3、槽内温度不可超越7 0 ,要经常换水，物体清洗完毕，擦干清洗槽，以使外部水不至流入箱体。二、注意事项：1、对于较重的清洗件，不能直接放在槽底板上，应用篮子、筐等盛具吊起来清洗，并保持筐底与槽底相距1 cm。2、不要让水漏入风机孔内。岛津LC10A高效液相色谱工作站操作规程一、仪器组成：本高效液相色谱系统主要由工作站、两个输液泵、紫外检测器、示差检测器、柱温箱和系统控制器等部件组成。各部分的操作及数据处理均由工作站

26、计算控制完成。二、开机：1、接通电源，打开计算机并依次打开输液泵、紫外检测器、示差检测器、柱温箱，最后打开系统控制器。预热约30秒钟后，进入待机状态。2、点击图标连接“在线工作”，打开工作站。三、设定色谱条件：1、直 接 设 定：点击“FILE”一 “METHOD”一“NEWMETHOD,即弹出需设定的各个项目，将各参数键入设置画面后点击“DOWNLOAD”即发送到各组成仪器。然后再点 击“METHOD，选 择“SAVE METHOD”保存方法，给出新文件名，确定即可。2、调用已设置好的文件：在“METHOD”下，选 择“LOADMETHOD,然后选定文件，单 击“OK”。此时，工作站即调用所

27、选用文件中设定的参数。四、仪器的运行：1、点击打开仪器的快捷方式，仪器即开始运作。观察画面，当各参数达到设定值时，图标上部的黄色将会变绿，“NOTREADY”将 变 为“READY”。现在即可进行分析。2、点 击“基线”快捷方式，可观察基线，当基线走势趋于平缓时，再 单 击“强行调零”方式，即可准备进样。五、进样分析：本套高效液相色谱系统采用的是手动进样。因此进样时应选择单次进样。1、进样：用专用针管取样，取样时应注意避免有气泡。进样时应注意速度，将取样针插入进样孔，开关上拨，注射，开关下拨。即开始进样分析。2、数据分析：见相关资料。六、注意事项：1、供试品溶液必须澄清，必要时须经离心，微孔薄

28、膜过滤。2、流动相作载体应采用色谱纯。不要使用存放多日的纯水（易长菌），应注意流动相与样品溶剂的相溶性，不可使用互不相溶的溶剂。3、流动相中如加有固体试剂，须用玻璃漏斗抽滤。流动相在使用前经超声波脱气2030分 钟（脱气不好就会造成机械不稳）。在使用中需将流动相过滤器浸入流动相中。4、使用流动相前还应将管中气体排尽，此时需打开输液泵上的排 泄 阀（逆时针旋转180）,再 按“PURGE”键设为最大流速进行排气。此操作在更换流动相时，以及有缓冲盐时也同样适用。排尽后再按“PURGE”停止，并关闭排泄阀。5、供试品的pH值应在27.5之间，柱子能承受的最大压力为20M pa,输液泵的流量应控制在0

29、.0019.999ml/min之间。超净工作台操作规程一、操作：1、接通电源，按“电源”键，指示器即指示风机电压，按“”可减少风机工作电压。2、操作前按“杀菌”键对工作区进行照射杀菌约30分钟。3、进入工作区操作前10分钟，按 将 风 机 启 动，并可通过“”调节适当风速。4、操作时按“照明”键打开照明灯，关掉杀菌灯，即可进行操作。二、注意事项：1、操作过程中，工作人员应尽量避免能引起扰乱气流的动作，以免造成人身污染。2、操作者应穿着洁净工作服，带好口罩。立式压力蒸汽灭菌器操作规程一、操作：1、旋转手轮，推开外桶盖，揭开灭菌桶盖并取出灭菌桶。向桶中加入清水至搁脚处，约56升。连续使用时，必须在

30、每次灭菌后补足水量。放回外桶，将妥善包扎的灭菌物品，有序放入灭菌桶内的筛板上，相互间留有间隙。2、盖上灭菌桶盖，推进外桶盖，对准外桶上口位置旋紧手轮，使外桶盖与外桶上口密封圈密合，并使上盖限位开关对准撞块凹处。3、打开电源，旋转压力控制器旋钮，选择所需压力，同时将定时器旋钮旋至ON上，即开始工作。此时旋开放气旋钮，使外桶内空气从放气管中逸出，当有蒸汽喷出时应立即关闭放气旋钮。4、当压力表指示达到设定压力时，“工作”指示灯灭，“灭菌”指示灯亮，即可将定时旋钮旋到所需灭菌时间。此时“灭菌”灯 和“工作”灯交替闪烁，表明已达到恒温恒压状态，进入自动计时灭菌。5、灭菌结束后，必须先将电源切断，停止加热

31、，待其冷却至压力表指针恢复至零位，打开放气旋钮排尽余气，才能旋转手轮把外桶盖打开。二、注意事项：1、堆放灭菌物品时，严禁堵塞安全阀的出气孔。2、每次使用前必须检查外桶内水量是否保持在灭菌桶搁脚处。3、灭菌液体时，应将液体罐装在硬质的耐热玻璃瓶中，以不超过 3/4体积为好，瓶口选用棉花纱塞，切勿使用未开孔的橡胶或软木塞。特别注意：在灭菌液体结束时，不准立即释放蒸汽，必须待压力表指针回零位方可排放余气。4、对不同类型，不同灭菌要求的物品，如敷料和液体等，切勿放在一起灭菌，以免顾此失彼，造成损失。5、灭菌终了时，若压力表指针已恢复零位，而外桶盖不能开启时，则可将放汽旋钮打开。6、注意观察当压力表指示

32、0.17Mpa时，安全阀是否能正常开启。ALPHA 1-4 冷冻干燥机操作规程一、操作：1、预冻：样品盘或圆底瓶盛装的液态样品需放在超低温冰箱中预冻。预冻温度取决于所做样品的冰点，即：Tpre-freezingTfreezing point 10 C如冰点未知，应在一40下冷冻2小时以上。最好过夜。有两种冷冻方式：（1）、直接冷冻：将样品放在搁板上，搁板与样品应同时放在超低温冰箱中预冻。（2）、圆底烧瓶或桶形冻干瓶盛装的液态样品需放在旋冻器或液氮中旋转冷冻，直至样品均匀地涂布在冻干瓶表面。注意：以上两种冷冻方式，样品厚度均不能超过1cm。2、准备仪器及使用仪器：（配 备LDC1M控制器和电磁压

33、力控制阀）A、操作顺序：（1）、打开主机电源开关，首先按下RM1键，使压缩机开始工作，再按下VAC.PUMP键打开真空泵，使泵预热约2030分钟。（2）、将预冻好的样品利搁板从超低温冰箱中取出，放在干燥室内;(3)、检查所有的外挂瓶阀，确认其处于关闭状态(大头向上)；(4)、检查仪器右侧的放水阀，确认其处于关闭状态(置箭头于close处)；(5)、观察控制器上的冷凝室温度显示，当冷凝室内的温度降至一40以下时，按下MVPr.con键，打开电磁压力控制阀，使真空泵与系统连通。(6)、观察控制器上的真空值显示，当真空值降至O.lmbar以下时，主干燥开始。B、外挂瓶操作的注意事项：(1)、只有当真

34、空值降至O.lmbar时，才可挂外挂瓶；(2)、将预冻好样品的冻干瓶顶在橡胶阀口，将橡胶阀非常缓慢地旋至开启状态(大头向下)，确定瓶被吸牢后，外挂瓶挂好。C、实验参数设置：(1)温度面板：set value main drying:仅用于配备了加热扩展单元HED16M及加热搁板时，用于设定主干燥过程中的搁板温度。搁板温度根据样品种类不同，设定值不同。一般对热不敏感的样品，搁板可加热至室温或26。如果加热过快,加热安全压力设置会自动切断加热功能。(2)、压力面板：set value main drying:仅用于配备电磁控制阀时，设定主干燥过程中的压力。设定值大小取决于所做样品的冰点，即：Tma

35、in drying Tpre-freezingTfreezing poing-I O C Pmain dryingSafety pressure heating:仅用于配备了加热扩展单元HED一16M及加热搁板，电磁压力控制阀时，限制搁板加热速率过快,当压力超过设定值时，切断加热功能；当压力低于设定值时，搁板重新加热。设定值大小取决于所做样品的冰点，即:TsafetyTfreezing point-5 C =7PsafetyD、干燥时间应根据样品种类的不同及干燥条件的不同，控制 在1224小时左右。3、结束实验及关闭仪器：关闭程序：(1)、按下MVPr.con键，关闭电磁压力控制阀，切断真空泵

36、与系统的连通。(2)、先卸外挂瓶：将橡胶阀缓慢地旋至关闭状态(大头向上)，待放气声完全停止后，再拆下外挂瓶；(3)、如果配备了微通气阀，非常缓慢地打开阀门，如果没有配备微通气阀，则从任一橡胶阀口非常缓慢地向开启方向旋转阀门，听到轻微放气声时，停止等待气体进入，观察控制器上的真空值显示，当真空值显示在200mbar以上时，可稍微增大放气量，直至与外界大气压平衡时，将全部阀门打开；7E(4)、按下R M 1 键，关闭压缩机，移走罩子(注意：要将罩子反放在垫子上)，取出样品；(5)、实验结束后，必须要对冷凝室进行除霜(空气加热或温水加热化霜均可)，用干净的布擦净腔内的水分，保持腔体的清洁。(6)、从

37、主机侧板上拉出排水管，接好容器，打开放水阀，将除霜水放净，关闭放水阀。二、注意事项：1、罩子的下密封表面一定要保护好，千万不可碰伤，移走罩子时一定要将罩子反放在垫子上，长期不用时，应将罩子反放在垫子上。2、挂上一个外挂瓶以后，应等待干燥腔内真空值稳定后，再挂上一个外挂瓶，以防止腔内气压升高导致样品融化；3、真空泵的气体平衡阀的使用：准备挂外挂瓶时，将气体平衡阀关闭，以提高真空度，防止样品融化；当主干燥开始后，应打开气体平衡阀，将从样品中抽出的水分放走；待主干燥结束后，应关闭气体平衡阀，提高真空度并减少泵油流失。4、判断主干燥结束的方法：当样品温度探头实测的样品温度值与搁板温度的实测值相比，差

38、别 在 35时，可以判断主干燥接近结束。5、工作完后通过微通气阀放气，不要拔掉样品等搁板的电线。6、真空泵工作500小时后要换油。B io s tat C F er m en ter 发酵罐操作规程一、校正1、p H 的校正：1）按 C al ibr atio n 至 lj p H 菜单，将,A uto 改为 m an,按 E n ter确认；将光标移到T em p,输入室温，按 E n ter 确认；2）将光标移到B ufz,输入室温下相对应的p H 值，按 E n ter确认，将 p H 电极头部浸入缓冲液中，待 p H 值稳定后按E n ter确认；3）将光标移到B ufz,输入室温下相

39、对应的p H 值，按 E n ter确认，将 p H 电极头部浸入缓冲液中，待 p H 值稳定后按E n ter确认；2、P 0 2 的校正1）按 C al ibr atio n 到 P O2 菜单,将 A uto 改为 m an,按 E n ter确认；2）将光标移到T em p,输入室温，按 E n ter 确认；3）将光标移到N I T R,按 E n ter 确认;通入M 待 P 0?值稳定后按E n ter 确认；4）将光标移到A I R,按 E n ter 确认;通入空气，待 P 0?值稳定后按E n ter 确认；3、A cid,B as e,A fo am,L evel 蠕动泵

40、的校正1）将硅胶管夹入相应的泵中，入口处放置清水，将硅胶管中充满清水，并在出口处放一量筒或量杯；2）按 C al ibr atio n 到相应的泵的校正菜单，将 T o tal 改为C al ib后按E n ter 确认，光标移至S tar,按 E n ter 确认，变为 s to p,待液体达到一定量时按E n ter 确认；3）光标移至T o tal,输入流过的液体的量，按 E n ter 确认后，光标自动移至F l o w,并换算出该泵的流量。二、控制1、温度的控制1）按 C o n tr o l L o o p 至 T em p 菜单，将光标移至S etp,输入设定温度值，按 E n

41、ter 确认；2）将光标移至m o de,将 o ff改为auto,按 E n ter 确认。2、p H 的控制1）按 C o n tr o l L o o p 至 p H 菜单，将光标移至S etp,输入设定 P H 值,按 E n ter 确认;2）将光标移至m o de,将 o ff改为auto,按 E n ter 确认。3、P 0 2 的控制1）按 C o n tr o l L o o p 至 P 0 2 菜单，将光标移至S etp,输入设定 P 0 2 值,按 E n ter 确认;2）将光标移至m o de,按 E n ter 确认后，光标移至S tir r,根据实际需要选择控制方

42、式后按E n ter 确认；3）将光标移至m o de,将 o ff改为auto,按 E n ter 确认。4、转速的控制1）按C o n tr o l L o o p 至 S tir r 菜单，将光标移至S etp,输入设定转速，按 E n ter 确认；2）将光标移至m o de,将 o ff改为auto,按 E n ter 确认;3）当P 0 2 控制方式为S tir r 时，上述操作均不能进行。4）当P 0 2 控制方式为S tir r 时，为维持一定的转速或防止转速过高时，可通过以下步骤进行：a）将光标移至P ar a,输入1 9 后按E n ter 进入下一级菜单；b）光标移至m

43、in,根据需要输入最低转速对应的百分率，按E n ter 确认；c）光标移至m ax,根据需要输入最低转速对应的百分率，按E n ter 确认。5、空气流量的控制1）按 C o n tr o l L o o p 至 A ir fl 菜单，将光标移至S etp,输入设定流量值，按 E n ter 确认；2）将光标移至m o de,将 o ff改为auto,按 E n ter 确认；3）当P 0 2 控制方式为A ir fl 时，上述操作均不能进行。4）当P 0 2 控制方式为A ir fl 时，为维持一定的通气量或防止通气量过大时，可通过以下步骤进行：a）将光标移至P ar a,输入1 9 后按

44、E n ter 进入下一级菜单；b）光标移至m in,根据需要输入最小通气量相对应的百分率,按 E n ter确认;c）光标移至m ax,根据需要输入最大通气量相对应的百分率，按 E n ter 确认。6、消泡的控制1）按 C o n tr o l L o o p 至 F o am 菜单，将光标移至m o de,将 o ff改为auto,按 E n ter 确认;2）将光标移至cycl e,根据需要调整周期时间，按 E n ter 确认；3）将光标移至p ul s e,根据需要调整肪冲时间，按 E n ter 确认；4）将光标 移 至 s en s i,根据需要调整灵敏度（-4级），按E n

45、ter 确认；7、s ubs l 的控制1）按 C o n tr o l L o o p 至 s ubs l 菜单,将光标移至S etp,根据需要输入流量百分率，按 E n ter 确认；2）将光标移至m o de,将 o ff改为auto,按 E n ter 确认。8、s ubs 2 的控制1）按 C o n tr o l L o o p 至 s ubs 2 菜单,将光标移至S etp,根据需要输入流量百分率，按 E n ter 确认；2）将光标移至m o de,将 o ff改为auto,按 E n ter 确认。三、灭菌的控制1、灭菌前的检查观察夹套压力表的压力显示，夹套压力应保持0.5b

46、 a r,如果压力较低，则同时调整进水阀与排水阀，使压力表的显示值为0.5b a ro2、提起进气过滤器到灭菌位置。3按 S t er i l i z a t i o n 键，将光标移至S t i me,输入灭菌时间，按 E n t er 确认。4、将光标移至S t emp,输入消毒温度，按 E n t er 确认。5 将光标移至F t emp,输入发酵温度，按 E n t er 确认。6、将光标移至M o d e,将 o f f 改为s t a r t,按E n t er 确认。7、按 C o n t r o l Lo o p 至温度菜单，将温度设置为改为灭菌温度。8、关闭冷凝器进水阀。9、

47、灭菌结束开始降温后，打开冷凝器进水阀。1 0、温度降到90 以下后，将进气过滤器降到发酵位置。四、注意事项1、每次发酵结束应及时检查并清洗进气及排气过滤器。2、定期检查。型圈并及时更换。3、pH电极在不使用时应将电极头浸泡在电极液中保存。4、pH电极应定期清洁。5、在长期不用时就将P02电极头中的电解液倒出，重新使用时再加入。6、每月至少开机运行二次，每次不少于是1小时。B-290喷雾干燥机操作规程一、操作：1、打开电源开关。2、设定进口温度:在S E TTI N G S I N LE T()下，按 A P 或 DO WN键设定温度至所需进口温度，一般1 50。3、设定出口温度：在 A S P

48、 I P A TO R (%)下，按 A P 或 DO WN 键设定温度至所需出口温度，一般为1 0 0%。4、旋转Q-F LO W旋纽，使进液管充满样品液。5、旋转氮气瓶的压力阀，压力控制在0.6 0.7P。6、启动泵：在 P UM P 下，按 0 N 键启动进料泵，调节进液量。7、在 N O ZZLE C LE A N E R D下，按 A P 或 DO WN 键，调节喷嘴输通(清洁)器的输通频率，使喷嘴不堵塞。8、加热：在 S E TTI N G I N LE T()下，按 O N 键，进行加热。9、关机主要顺序，关闭加热自来水清洗进料管关闭进料泵一一在温度70 左右关机。二、注意事项1

49、、瓶空压表的压力控制在0.6-0.8PO2、布滤袋压力表控制在-50-1 0 0 之间。岛津uv2550紫外分光光度计操作规程一、操作：1、打开分光光度计电源，连接工作站。2、以光谱模块为例，选择所需使用的模块，进行操作步骤如下:(1)、连接仪器并进行仪器自检。(2)、选定工具栏中的“方法”，确定测量所需的条件，如：检测范围、狭缝宽度等。(3)、在分光光度计的两个测量窗口放入空白溶液，调整基线。(4)、点击“到波长”键，确定波长范围。(5)、点击“开始”，进行分析。(6)、得到光谱图后，可根据需要标注峰(谷)值，处理光谱图。(7)、打印图谱。3、光度模块、动力学模块的使用方法同光谱模块。二、注

50、意事项：1、分析时样品溶液放外侧，空白溶液放内侧；2、使用进口比色皿时，应使比色皿的透明面朝向光源，且方向一致。附表一:发酵工程与生物制药省级重点实验室课题研究申请书姓 名专 业指导教师起止时间课题名称：研究内容及方法：拟用设备：主要耗材和设备：申请者及导师签名：年 月 日实验室负责人意见：年 月 日研究生课题研究中期小结实验室考核结果:姓名专业年级指导教师课题名称已经完成实验内容：文章发表情况：个人小结：年 月 日年月日附表二:研究生课题完成小结姓名专业指导教师实验结论：年 月 日设备使用情况：验收人签字：年 月 日建议：年 月 日附表三:发酵工程与生物制药省级重点实验室部分药品无机药品：硝