黄酮类天然产物课件.ppt

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1、黄酮类天然产物黄酮类天然产物1第1页，此课件共66页哦二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应 一、黄酮类化合物的概述一、黄酮类化合物的概述三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第五章第五章 黄酮类化合物黄酮类化合物第2页，此课件共66页哦 黄酮类化合物多具有颜色，在植物体内大部分与糖黄酮类化合物多具有颜色，在植物体内大部分与糖结合成甙，一部分以游离形式存在。结合成甙，一部分以游离形式存在。1.基本结构和分类基本结构和分类 以以前前，黄黄酮酮类类化化合合物物主主要要是是指指基基本本母母核核2-苯苯基基色色原原

2、酮酮类类化化合合物物，现现在在则则是是泛泛指指两两个个苯苯环环（A-与与B-环环）通通过过中央三碳链相互联结而成的一系列化合物。中央三碳链相互联结而成的一系列化合物。一、一、概述概述第3页，此课件共66页哦 一、一、概述概述第4页，此课件共66页哦 重要的天然黄酮类化合物分类如下所示：黄酮类 黄酮醇 一、一、概述概述第5页，此课件共66页哦 二氢黄酮类二氢黄酮醇类 花色素类 一、一、概述概述第6页，此课件共66页哦 黄烷-3,4-二醇类 双苯吡酮类(酮类)黄烷-3-醇类一、一、概述概述第7页，此课件共66页哦 异黄酮类 二氢异黄酮类 查耳酮类 一、一、概述概述第8页，此课件共66页哦 二氢查耳

3、酮类 橙酮类 高异黄酮类 一、一、概述概述第9页，此课件共66页哦 黄黄酮酮类类化化合合物物广广泛泛分分布布于于植植物物界界中中，而而且且生生理理活活性性多多种种多多样样，引引起起了了国国内内外外的的广广泛泛重重视视，研研究究进进展展很很快快。仅仅截截止止到到1974年年为为止止，国国内内外外已已发发表表的的黄黄酮酮类类化化合合物物共共1674个个（主主要要是是天天然然黄黄酮酮类类，也也有有少少部部分分为为合合成成品品，其其中中甙甙元元902个个，甙甙722个个），并并以以黄黄酮酮醇醇类类最最为为常常见见，约约占占总总数数的的三三分分之之一一，其其次次为为黄黄酮酮类类，占占总总数数的的四四分分

4、之之一一以以上上，其其余余则则较较少少见见。至至于于双双黄黄酮酮类类多多局局限限分分布布于于裸裸子子植植物物，尤尤其其松松柏柏纲纲，银银杏杏纲纲和和凤凤尾尾纲纲等等植植物物中中。至至1980年年，黄黄酮酮类类化化合合物物总总数数已已达达到到2721个个。至至1993年年，黄黄酮酮类化合物总数已达到类化合物总数已达到4000多个。目前，已超多个。目前，已超8000个。个。一、一、概述概述第10页，此课件共66页哦 一、一、概述概述第11页，此课件共66页哦 少数黄酮类化合物结构较为复杂，如水飞蓟素(silybin)为黄酮木脂体类化合物。一、一、概述概述第12页，此课件共66页哦 榕碱及异榕碱则为

5、生物碱型黄酮。一、一、概述概述第13页，此课件共66页哦 天天然然黄黄酮酮甙甙类类化化合合物物，由由于于糖糖的的种种类类、数数量量、联联接接位位置置及及联联接接方方式式不不同同，可可以以组组成成各各种种各各样样的的黄黄酮酮甙甙类：类：单糖类：单糖类：D-葡葡萄萄糖糖、D-半半乳乳糖糖、D-木木糖糖、L-鼠鼠李李糖糖、L-阿阿拉拉伯伯糖及糖及D-葡萄糖醛酸等。葡萄糖醛酸等。双糖类：双糖类：槐糖、龙胆二糖、芸香糖、新橙皮糖、刺槐二糖等。槐糖、龙胆二糖、芸香糖、新橙皮糖、刺槐二糖等。一、一、概述概述第14页，此课件共66页哦叁糖类：叁糖类：龙胆三糖、槐三糖。龙胆三糖、槐三糖。酰化糖类：酰化糖类：2-

6、2酰葡萄糖、咖啡酰基葡萄糖等。酰葡萄糖、咖啡酰基葡萄糖等。黄黄酮酮甙甙中中糖糖的的联联接接位位置置与与甙甙元元的的结结构构类类型型有有关关。如如黄黄酮酮醇醇类类常常形形成成3-，7-，3-，4，-单单糖糖甙甙，或或3，7-，3，4-及及7，4-双糖链甙等。双糖链甙等。一、一、概述概述第15页，此课件共66页哦 天天然然黄黄酮酮类类C-糖糖甙甙如如葛葛根根黄黄素素、葛葛根根黄黄素素木木糖糖甙甙等，为中药葛根中的扩冠有效成分等，为中药葛根中的扩冠有效成分。一、一、概述概述第16页，此课件共66页哦 葛根素：葛根素：R1R2R4R5H，R3Glc3-OH-葛根素：葛根素：R1R2R5H，R3Glc,

7、R4=OH大豆苷大豆苷：R1R3R4R5H，R2Glc大豆苷元大豆苷元：R1R3R4R5R2H芒果苷：芒果苷：R1R2R3R4H，R5Me一、一、概述概述第17页，此课件共66页哦1.性状 黄黄酮酮类类化化合合物物多多为为晶晶状状固固体体，少少数数（如如黄黄酮酮甙甙类类）为无定形粉末。为无定形粉末。2.旋光性 甙甙元元中中，二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮醇醇、黄黄烷烷及及黄黄烷烷醇醇具具有有手手性性碳碳，具具旋旋光光性性，其其余余黄黄酮酮类类无无旋旋光光性性。甙甙类类结结构中含糖的部分结构，故均有旋光性，且多为左旋。构中含糖的部分结构，故均有旋光性，且多为左旋。二、黄酮类化合物的性质与颜色

8、反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应第18页，此课件共66页哦二氢黄酮类二氢黄酮类二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类 黄烷黄烷-3,4-3,4-二醇类二醇类二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应第19页，此课件共66页哦 黄烷-3-醇类二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应第20页，此课件共66页哦3.颜色颜色 黄黄黄黄酮酮酮酮的的的的色色色色原原原原酮酮酮酮部部部部分分分分无无无无色色色色，在在在在2-2-2-2-位位位位上上上上引引引引入入入入苯苯苯苯环环环环后后后后，即即即即形形形形成成成成交交交交叉叉叉叉共共共共轭轭轭轭体体体体系系系系，使使使

9、使共共共共轭轭轭轭链链链链延延延延长长长长，因因因因而而而而呈呈呈呈现现现现出出出出颜颜颜颜色色色色。黄黄黄黄酮酮酮酮、黄黄黄黄酮酮酮酮醇醇醇醇及及及及其其其其甙甙甙甙类类类类多多多多显显显显灰灰灰灰黄黄黄黄 黄黄黄黄色色色色，查查查查耳耳耳耳酮酮酮酮为为为为黄黄黄黄 橙橙橙橙黄黄黄黄色色色色，异异异异黄黄黄黄酮酮酮酮类类类类显显显显微微微微黄黄黄黄色色色色，二二二二氢氢氢氢黄黄黄黄酮酮酮酮、二二二二氢黄酮醇不显色。氢黄酮醇不显色。氢黄酮醇不显色。氢黄酮醇不显色。在在在在上上上上述述述述黄黄黄黄酮酮酮酮、黄黄黄黄酮酮酮酮醇醇醇醇分分分分子子子子中中中中，尤尤尤尤其其其其在在在在7-7-7-7-

10、倍倍倍倍及及及及4 4 4 4-位位位位引引引引入入入入OHOHOHOH及及及及OCH3OCH3OCH3OCH3等等等等供供供供电电电电基基基基后后后后，化化化化合合合合物物物物的的的的颜颜颜颜色色色色加加加加深深深深，但但但但在在在在其其其其它它它它位位位位置置置置引引引引入入入入OHOHOHOH、OCH3OCH3OCH3OCH3等等等等供供供供电电电电基影响较小。基影响较小。基影响较小。基影响较小。花花花花色色色色甙甙甙甙及及及及其其其其甙甙甙甙元元元元的的的的颜颜颜颜色色色色随随随随pHpH不不不不同同同同而而而而改改改改变变变变，一一一一般般般般显显显显红红红红色色色色(pHpH 7

11、7 )、紫色紫色紫色紫色(pH8.5pH8.5)、蓝色、蓝色、蓝色、蓝色(pHpH 8.58.5)等颜色。等颜色。等颜色。等颜色。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应第21页，此课件共66页哦 二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应第22页，此课件共66页哦 4.溶解度 一一般般来来说说，游游离离甙甙元元难难溶溶或或不不溶溶于于水水，易易溶溶于于甲甲醇醇、乙乙醇醇、醋醋酸酸乙乙酯酯、乙乙醚醚等等有有机机溶溶剂剂及及稀稀碱碱液液中中。花花色色甙甙元元（花花青青素素）类类以以离离子子形形式式存存在在，水水溶溶度度较较大大。黄黄酮类甙元分子中羟基

12、数越多，水中的溶解度越大。酮类甙元分子中羟基数越多，水中的溶解度越大。黄黄酮酮甙甙类类，水水溶溶性性比比相相应应甙甙元元为为大大；糖糖链链越越长长，则则水水溶溶度度越越大大，一一般般易易溶溶于于水水、甲甲醇醇、乙乙醇醇等等强强极极性性溶溶剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应第23页，此课件共66页哦 5.酸碱性酸碱性酸性酸性 黄黄酮酮类类化化合合物物因因分分子子中中多多含含有有游游离离酚酚羟羟基基，故故显显酸酸性性，可可溶溶于于碱碱性性溶溶液液中中。酸酸性性强强弱弱顺顺序序依依次次为

13、为：7 7，4 4-二二OH OH 7-7-或或4 4-OH-OH 一一般般酚酚OH OH 5-OH 5-OH。此此性性质质可用于提取、分离及鉴定工作可用于提取、分离及鉴定工作。碱性碱性 黄黄酮酮类类化化合合物物分分子子中中-吡吡喃喃酮酮环环上上的的1-1-位位氧氧原原子子，因因有有未未共共用用的的电电子子对对，故故表表现现微微弱弱的的碱碱性性，可可与与强强无无机机酸酸，如如浓浓硫硫酸酸、盐盐酸酸等等生生成成（金金羊羊）盐盐，但但生生成成的的（金羊）（金羊）盐不稳定，加水可分解。盐不稳定，加水可分解。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应第24页，此课件共66页哦6.

14、显色反应显色反应1 1）盐酸盐酸盐酸盐酸-镁粉（或锌粉）反应镁粉（或锌粉）反应镁粉（或锌粉）反应镁粉（或锌粉）反应 多多多多数数数数黄黄黄黄酮酮酮酮、黄黄黄黄酮酮酮酮醇醇醇醇、二二二二氢氢氢氢黄黄黄黄酮酮酮酮及及及及二二二二氢氢氢氢黄黄黄黄酮酮酮酮醇醇醇醇类类类类化化化化合合合合物物物物显显显显橙橙橙橙红红红红 紫紫紫紫红红红红色色色色，少数显紫少数显紫少数显紫少数显紫 蓝色。蓝色。蓝色。蓝色。查耳酮、橙酮、儿茶素类不显色。异黄酮类一般不显色。查耳酮、橙酮、儿茶素类不显色。异黄酮类一般不显色。查耳酮、橙酮、儿茶素类不显色。异黄酮类一般不显色。查耳酮、橙酮、儿茶素类不显色。异黄酮类一般不显色。2

15、 2）四氢硼钠（钾）反应四氢硼钠（钾）反应四氢硼钠（钾）反应四氢硼钠（钾）反应 NaBHNaBH4 4是是是是对对对对二二二二氢氢氢氢黄黄黄黄酮酮酮酮类类类类化化化化合合合合物物物物专专专专属属属属性性性性较较较较高高高高的的的的一一一一种种种种还还还还原原原原剂剂剂剂。与与与与二二二二氢黄酮类化合物产生红氢黄酮类化合物产生红氢黄酮类化合物产生红氢黄酮类化合物产生红 紫色。紫色。紫色。紫色。其它黄酮类化合物均不显色。其它黄酮类化合物均不显色。其它黄酮类化合物均不显色。其它黄酮类化合物均不显色。3 3）铝盐铝盐铝盐铝盐 生生生生成成成成的的的的络络络络合合合合物物物物多多多多为为为为黄黄黄黄色色

16、色色（maxmax=415nm=415nm），并并并并有有有有荧荧荧荧光光光光，可可可可用用用用于于于于定定定定性性性性及及及及定量分析。常用试剂为定量分析。常用试剂为定量分析。常用试剂为定量分析。常用试剂为1%1%1%1%三氯化铝或硝酸铝溶液。三氯化铝或硝酸铝溶液。三氯化铝或硝酸铝溶液。三氯化铝或硝酸铝溶液。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应第25页，此课件共66页哦 4）铅盐铅盐 常常用用1%醋醋酸酸铅铅及及碱碱式式醋醋酸酸铅铅水水溶溶液液，碱碱式式醋醋酸酸铅铅反应能力更强，可生成黄反应能力更强，可生成黄红色沉淀。红色沉淀。5）锆盐锆盐 多多用用2%二二氯氯氧

17、氧化化锆锆（ZrOCl2）甲甲醇醇溶溶液液。黄黄酮酮类类化化合合物物分分子子中中有有游游离离的的3-或或5-OH存存在在时时，均均可可反反应应生生成成黄色的锆络合物。黄色的锆络合物。3-OH，4-酮酮基基络络合合物物的的稳稳定定性性 5-OH，4-酮酮基基络络合合物物（仅仅二二氢氢黄黄酮酮醇醇除除外外）。当当反反应应液液中中接接着着加加入入枸枸橼橼酸酸后后，5-羟羟基基黄黄酮酮的的黄黄色色溶溶液液显显著著褪褪色色，而而3-羟羟基基黄酮溶液仍呈鲜黄色（锆黄酮溶液仍呈鲜黄色（锆枸橼酸反应）枸橼酸反应）。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应第26页，此课件共66页哦 6）

18、镁盐镁盐 二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮醇醇类类与与醋醋酸酸镁镁的的甲甲醇醇溶溶液液，加加热热可可显显天天蓝蓝色色荧荧光光，若若具具有有C5-OHC5-OH，色色泽泽更更为为明明显显。而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显黄而黄酮、黄酮醇及异黄酮类等则显黄橙黄橙黄褐色。褐色。7）氯化锶（氯化锶（SrCl2）在在氨氨性性甲甲醇醇溶溶液液中中，可可与与分分子子中中具具有有邻邻二二酚酚羟羟基基结构的黄酮类化合物生成绿色结构的黄酮类化合物生成绿色 棕色乃至黑色沉淀。棕色乃至黑色沉淀。8）三氯化铁反应三氯化铁反应 多多数数黄黄酮酮类类化化合合物物因因分分子子中中含含有有游游离离酚酚羟羟基基，与与三三氯氯化化

19、铁铁水水溶溶液液或或醇醇溶溶液液可可产产生生正正反反应应，呈呈现现颜颜色色；当含有氢键缔合的酚羟基时，颜色更明显。当含有氢键缔合的酚羟基时，颜色更明显。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应第27页，此课件共66页哦 9）硼酸显色反应硼酸显色反应 在在无无机机酸酸或或有有机机酸酸存存在在条条件件下下，5-羟羟基基黄黄酮酮及及2-羟羟基查耳酮可与硼酸反应，呈亮黄色。基查耳酮可与硼酸反应，呈亮黄色。10）碱性试剂显色反应碱性试剂显色反应 在在日日光光及及紫紫外外光光下下，通通过过纸纸斑斑反反应应，观观察察样样品品用用氨氨蒸蒸气气和和其其他他碱碱性性试试剂剂处处理理后后的的

20、色色变变深深的的情情况况。当当分分子子中中有有邻邻二二酚酚羟羟基基取取代代或或3,4-二二羟羟基基取取代代时时，在在碱碱液液中中很快氧化，最后生成绿棕色沉淀。很快氧化，最后生成绿棕色沉淀。二、黄酮类化合物的性质与颜色反应二、黄酮类化合物的性质与颜色反应第28页，此课件共66页哦 1.提取提取 黄黄酮酮甙甙类类以以及及极极性性稍稍大大的的甙甙元元（如如羟羟基基黄黄酮酮等等），一一般般可可用用丙丙酮酮、醋醋酸酸乙乙酯酯、乙乙醇醇提提取取。一一些些多多糖糖甙甙类类可可用用沸沸水水提提取取。在在提提取取花花青青素素类类化化合合物物时时，可可加加入入少少量酸（量酸（0.1%盐酸，应当慎用，避免发生水解）

21、。盐酸，应当慎用，避免发生水解）。大大多多数数黄黄酮酮甙甙元元宜宜用用用用氯氯仿仿、乙乙醚醚、醋醋酸酸乙乙酯酯等等中中极极性性溶溶剂剂提提取取，而而对对多多甲甲氧氧基基黄黄酮酮类类游游离离甙甙元元，甚甚至可用苯等低极性溶剂进行提取。至可用苯等低极性溶剂进行提取。三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第29页，此课件共66页哦 对得到的粗提物可进行下列精制处理，常用方法有：对得到的粗提物可进行下列精制处理，常用方法有：对得到的粗提物可进行下列精制处理，常用方法有：对得到的粗提物可进行下列精制处理，常用方法有：（1 1）溶剂萃取法溶剂萃取法溶剂萃取法溶剂萃取法 利利利利用用用用黄

22、黄黄黄酮酮酮酮类类类类化化化化合合合合物物物物与与与与混混混混入入入入的的的的杂杂杂杂质质质质极极极极性性性性不不不不同同同同，选选选选用用用用不不不不同同同同溶溶溶溶剂剂剂剂进进进进行行行行地地地地萃萃萃萃取取取取可可可可达达达达到到到到精精精精制制制制纯纯纯纯化化化化目目目目的的的的。例例例例如如如如植植植植物物物物叶叶叶叶子子子子的的的的醇醇醇醇浸浸浸浸液液液液，可可可可用用用用石石石石油油油油醚醚醚醚处处处处理理理理，以以以以便便便便除除除除去去去去叶叶叶叶绿绿绿绿素素素素、胡胡胡胡萝萝萝萝卜卜卜卜素素素素等等等等脂脂脂脂溶溶溶溶性性性性色色色色素素素素。而而而而某某某某些些些些药药药

23、药料料料料水水水水溶溶溶溶液液液液则则则则可可可可加加加加入入入入多多多多倍倍倍倍量浓醇，以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。量浓醇，以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。量浓醇，以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。量浓醇，以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。有有有有时时时时溶溶溶溶剂剂剂剂萃萃萃萃取取取取过过过过程程程程也也也也可可可可以以以以用用用用逆逆逆逆流流流流分分分分配配配配法法法法连连连连续续续续进进进进行行行行。常常常常用用用用的的的的溶溶溶溶剂剂剂剂系系系系统统统统有：水有：水有：水有：水-醋酸乙酯，正丁醇醋酸乙酯，正丁醇醋酸乙酯，正丁醇醋酸乙酯，正丁醇-石油醚等。石油醚

24、等。石油醚等。石油醚等。溶溶溶溶剂剂剂剂萃萃萃萃取取取取过过过过程程程程在在在在除除除除去去去去杂杂杂杂质质质质的的的的同同同同时时时时，往往往往往往往往还还还还可可可可以以以以收收收收到到到到分分分分离离离离甙甙甙甙和和和和甙甙甙甙元元元元或或或或极极极极性性性性甙甙甙甙元元元元与非极性甙元的效果与非极性甙元的效果与非极性甙元的效果与非极性甙元的效果。三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第30页，此课件共66页哦（2）碱提取酸沉淀法）碱提取酸沉淀法 黄黄黄黄酮酮酮酮甙甙甙甙类类类类虽虽虽虽有有有有一一一一定定定定极极极极性性性性，可可可可溶溶溶溶于于于于水水水水，但但但但

25、却却却却难难难难溶溶溶溶于于于于酸酸酸酸性性性性水水水水，易易易易溶溶溶溶于于于于碱碱碱碱性性性性水水水水，故故故故可可可可用用用用碱碱碱碱性性性性水水水水提提提提取取取取，再再再再于于于于碱碱碱碱水水水水提提提提取取取取液液液液中中中中加加加加入入入入酸酸酸酸，黄黄黄黄酮酮酮酮甙甙甙甙类类类类即即即即可可可可沉沉沉沉淀淀淀淀析析析析出出出出。此此此此法法法法简简简简便便便便易易易易行行行行，如如如如芦芦芦芦丁丁丁丁、橙橙橙橙皮皮皮皮甙甙甙甙、黄黄黄黄芩芩芩芩甙甙甙甙的的的的提提提提取取取取都都都都应应应应用用用用了了了了这这这这个个个个方法。方法。方法。方法。在用碱酸法进行提取纯化时，应当注

26、意所用碱液浓度不宜过高，以免在在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓度不宜过高，以免在在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓度不宜过高，以免在在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加热进破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以强碱性下，尤其加热进破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以强碱性下，尤其加热进破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以强碱性下，尤其加热进破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成（金羊）盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。免生成（金羊）盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降

27、低产品收率。免生成（金羊）盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。免生成（金羊）盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如花、果类药材，当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如花、果类药材，当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如花、果类药材，当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如花、果类药材，宜用宜用宜用宜用石灰乳或石灰水石灰乳或石灰水石灰乳或石灰水石灰乳或石灰水代替其它碱性水溶液进行提取，以使上述含羟代替其它碱性水溶液进行提取，以使上述含羟代替其它碱性水溶液进行提取，以使上述含羟代替其它碱性水溶液进行提取，以使

28、上述含羟基的杂质生成钙盐沉淀，不致溶出。这也有利于黄酮类化合物的纯基的杂质生成钙盐沉淀，不致溶出。这也有利于黄酮类化合物的纯基的杂质生成钙盐沉淀，不致溶出。这也有利于黄酮类化合物的纯基的杂质生成钙盐沉淀，不致溶出。这也有利于黄酮类化合物的纯化处理。化处理。化处理。化处理。三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第31页，此课件共66页哦 以从槐米中提取芦丁为例说明该法的操作过程。槐槐米米（槐槐树树花花蕾蕾）加加约约6倍倍量量水水，煮煮沸沸，在在搅搅拌拌下下缓缓缓缓加加入入石石灰灰乳乳至至pH89，在在此此pH条条件件下下微微沸沸2030分分钟钟，趁趁热热油油滤滤，残残渣渣同同上

29、上再再加加4倍倍水水煎煎1次次，乘乘热热抽抽滤滤。合合并并滤滤液液在在6070下下，用用浓浓盐盐酸酸调调至至pH为为5，搅搅匀匀，静静置置24小小时时，抽抽滤滤。沉沉淀淀物物水水洗洗至至中中性性，60干干燥燥得得芦芦丁丁粗粗品品，于水中重结晶，于水中重结晶，7080干燥得干燥得芦丁纯品芦丁纯品。三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第32页，此课件共66页哦 （3）碳粉吸附法）碳粉吸附法 主主要要适适于于甙甙类类的的精精制制工工作作。通通常常，在在植植物物的的甲甲醇醇粗粗提提取取物物中中，分分次次加加入入活活性性炭炭，搅搅拌拌，静静置置，直直至至定定性性检检查查上上清清液液无

30、无黄黄酮酮反反应应时时为为止止。过过滤滤，收收集集吸吸甙甙炭炭末末，依依次次用用沸沸甲甲醇醇、沸沸水水、7%酚酚/水水、15%酚酚/醇醇溶溶液液进进行行洗洗脱脱，各各部部分分洗洗脱脱液液进进行行定定性性检检查查（或用（或用PPC鉴定）。鉴定）。三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第33页，此课件共66页哦2.分离分离 现将较常用的方法介绍如下：现将较常用的方法介绍如下：（1）柱层析法）柱层析法 分分离离黄黄酮酮类类化化合合物物常常用用的的吸吸附附剂剂或或载载体体有有硅硅胶胶、聚聚酰酰胺胺及及纤纤维维素素粉粉等等。此此外外，也也有有用用氧氧化化铝铝、氧氧化化镁镁及及硅藻土等。

31、硅藻土等。1）硅硅胶胶柱柱层层析析：此此法法应应用用范范围围最最广广，主主要要适适于于分分离离异异黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮醇醇及及高高度度甲甲基基化化（或或乙乙酰酰化化）的的黄黄酮酮及及黄黄酮酮醇醇类类。少少数数情情况况下下，在在加加水水去去活活化化后后也也可可用用于于分分离离极极性性较较大大的的化化合合物物，如如多多羟羟基基黄黄酮醇及其甙类等。酮醇及其甙类等。三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第34页，此课件共66页哦2）聚聚酰酰胺胺柱柱层层析析：对对分分离离黄黄酮酮类类化化合合物物来来说说，聚聚酰酰胺胺是是较较为为理理想想的的吸吸附附剂剂。其其吸吸

32、附附强强度度主主要要取取决决于于黄黄酮酮类类化化合合物物分分子子中中羟羟基基的的数数目目与与位位置置及及溶溶剂剂与与黄黄酮酮类类化化合合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。聚聚酰酰胺胺柱柱层层析析可可用用于于分分离离各各种种类类型型的的黄黄酮酮类类化化合合物物，包包括括甙甙及及甙甙元元、查查耳耳酮酮与与二二氢氢黄黄酮酮等等黄黄酮酮类类化化合合物物从从聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律：聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律：甙元相同，洗脱先后顺序一般是：甙元相同，洗脱先后顺序一般是：参糖甙参糖甙 双糖甙双糖甙 单糖甙单糖甙 甙元甙元 母核上增加羟基，洗脱速度即相

33、应减缓母核上增加羟基，洗脱速度即相应减缓 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第35页，此课件共66页哦 不同类型黄酮化合物，先后流出顺序一般是：不同类型黄酮化合物，先后流出顺序一般是：异黄异黄 酮酮 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 黄酮黄酮 黄酮醇黄酮醇 分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强，故查耳分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强，故查耳 酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱。上述规律也适酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱。上述规律也适 用于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。用于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。3）葡聚糖疑胶柱层析葡聚糖疑胶柱层析 对对于于黄黄酮酮类类化化合合物物的的分

34、分离离，主主要要用用两两种种型型号号的的凝凝胶胶：葡聚糖葡聚糖-G型及型及葡聚糖葡聚糖-LH-20型。型。三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第36页，此课件共66页哦葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是：葡聚糖凝胶分离黄酮类化合物的机理是：分分离离游游离离黄黄酮酮时时，主主要要靠靠吸吸附附作作用用。凝凝胶胶对对黄黄酮酮类类化化合合物物的的吸吸附附程程度度取取决决于于游游离离酚酚羟羟基基的的数数目目。但但分分离离黄黄酮酮甙甙时时，则则分分子子筛筛的的属属性性起起主主导导作作用用。在在洗洗脱脱时时，黄黄酮酮甙类大体上是按分子量由大到小的顺序流出柱体，甙类大体上是按分子量由大到小

35、的顺序流出柱体，葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：葡聚糖凝胶柱层析中常用的洗脱剂有：碱性水溶液（如碱性水溶液（如0.1mol/L NH4OH）、含盐水溶液）、含盐水溶液 (0.5mol/L NaCl等等)。醇及含水醇，如甲醇，甲醇醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水（不同比例）、水（不同比例）、t-丁醇丁醇-甲醇甲醇(3:1)、乙醇等。、乙醇等。其它溶剂：如含水丙酮、甲醇其它溶剂：如含水丙酮、甲醇-氯仿等。氯仿等。三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第37页，此课件共66页哦 （2）梯度）梯度pH萃取法萃取法 梯梯度度pH萃萃取取法法适适合合于于酸酸性性强强弱弱不不同同的的黄黄酮酮

36、甙甙元元的的分分离离。根根据据黄黄酮酮类类甙甙元元酚酚羟羟基基数数目目及及位位置置不不同同其其酸酸性性强强弱弱也也不不同同的的性性质质，可可以以将将混混合合物物溶溶于于有有机机溶溶剂剂（如如乙乙醚醚）后后，依依 次次 用用 5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH及及4%NaOH水溶液萃取，来达到分离目的。水溶液萃取，来达到分离目的。酸性：酸性：7 7，4 4 -二二二二OH OH 7-7-或或或或4 4 -OH -OH 一般一般一般一般OH OH 5-OH 5-OH（溶于）：（溶于）：（溶于）：（溶于）：5%NaHCO5%NaHCO3 3 5%Na 5%Na2 2COCO3 3

37、0.2%NaOH 4%NaOH0.2%NaOH 4%NaOH液液液液 三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第38页，此课件共66页哦（3）根据分子中某些特定官能团进行分离）根据分子中某些特定官能团进行分离 在在黄黄酮酮类类成成分分的的混混合合物物中中，具具有有邻邻二二酚酚羟羟基基成成分分与与无无此此结结构构的的成成分分，可可用用铅铅盐盐法法分分离离。有有邻邻二二酚酚羟羟基基的的成成分分可可被被醋醋酸酸铅铅沉沉淀淀，不不具具有有邻邻二二酚酚羟羟基基的的成成分分可可被碱式醋酸铅沉淀，达到分离的目的。被碱式醋酸铅沉淀，达到分离的目的。与与黄黄酮酮类类成成分分混混存存的的其其它它杂

38、杂质质，如如分分子子中中有有羧羧基基（如如树树胶胶、粘粘液液、果果胶胶、有有机机酸酸、蛋蛋白白质质、氨氨基基酸酸等等）或或邻邻二二酚酚羟羟基基（如如鞣鞣质质等等）时时，也也可可为为醋醋酸酸铅铅沉沉淀淀达达到去杂目的。到去杂目的。三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第39页，此课件共66页哦 具具黄黄酮酮类类化化合合物物与与铅铅盐盐生生成成的的沉沉淀淀，滤滤集集后后按按常常法法悬悬在在浮浮在在乙乙醇醇中中，通通入入H2S进进行行复复分分解解，滤滤除除硫硫化化铅铅沉沉淀淀，滤滤液液中中可可得得到到黄黄酮酮类类化化合合物物。但但初初生生态态的的PbS沉沉淀淀具具有有较较高高的的吸

39、吸附附性性，因因此此现现多多不不主主张张用用H2S脱脱铅铅，而而用用硫硫酸酸盐盐或或磷磷酸酸盐盐，或或用用阳阳离离子子交交换换树树脂脂脱脱铅铅。有有邻邻二二酚酚羟羟基基的的黄黄酮酮可可与与硼硼酸酸络络合合，生生成成物物易易溶溶于于水水，借借此此也可与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。也可与不具上述结构的黄酮类化合物相互分离。在在实实际际工工作作中中，常常将将上上述述柱柱层层析析法法与与各各种种经经典典方方法相互配合应用，以达到较好的分离效果。法相互配合应用，以达到较好的分离效果。三、黄酮类化合物的提取与分离三、黄酮类化合物的提取与分离第40页，此课件共66页哦 1.黄酮类化合物在甲醇中的黄酮

40、类化合物在甲醇中的UV谱特征谱特征 溶剂：溶剂：MeOH四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第41页，此课件共66页哦1.黄酮类化合物在甲醇中的黄酮类化合物在甲醇中的UV谱特征谱特征1、MeOH+NaOMe:带带I 红移红移40-60nm2、NaOAc（熔融）（熔融）:带带I 红移红移40-65nm 强度下降强度下降四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第42页，此课件共66页哦1.黄酮类化合物在甲醇中的黄酮类化合物在甲醇中的UV谱特征谱特征NaOAc（未熔融）（未熔融）:带带红移红移5-20nm四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第43页，此课件共66页哦AlCl3/H

41、Cl 谱图谱图AlCl3：无邻二酚羟基。：无邻二酚羟基。AlCl3/HCl 谱图谱图AlCl3：B环环有邻二酚羟基：有邻二酚羟基：带带I 紫移紫移30-40nm四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第44页，此课件共66页哦AlCl3/HCl 谱图谱图AlCl3：无邻二酚羟基。：无邻二酚羟基。AlCl3/HCl 谱图谱图AlCl3：A环和环和B环环有邻二酚羟基：有邻二酚羟基：带带I 紫移紫移 50-65nm四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第45页，此课件共66页哦AlCl3/HCl 谱图谱图MeOH：无：无3OH或或5OHAlCl3/HCl 谱图谱图MeOH：可能有：可能有3

42、OH或或5OH（1）带带I 红移红移35-55nm,可能只有可能只有5OH（2）带带I 红移红移60nm,可能只有可能只有3OH四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第46页，此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱(DMSO-d6)特征特征5OH：12 ppm7OH：11 ppm3OH：10 ppm四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第47页，此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 A环上的芳氢：环上的芳氢：6H:5.7-6.9(d,J=2.5)8H:5.7-6.9(d,J=2.5)四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第48页，

43、此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 黄酮醇黄酮醇 A环上的芳氢：环上的芳氢：5-H：7.98.2（d,J=9.0）6-H：6.77.1（dd,J=9.0,2.5）8-H：6.77.0（d,J=2.5）四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第49页，此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱二氢黄酮醇二氢黄酮醇 A环上的芳氢：环上的芳氢：5-H：7.77.9（d,J=9.0）6-H：6.46.5（dd,J=9.0,2.5）8-H：6.36.4（d,J=2.5）四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第50页，此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄

44、酮类化合物1H-NMR谱谱 B环环上的芳氢（上的芳氢（H-3,5 较为高场）：较为高场）：H-3,5：6.57.1（d,J8.5）H-2,6：6.57.9（d,J8.5）四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第51页，此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱B环环上的芳氢：上的芳氢：H-5：6.77.1（d,J8.5）H-2：7.27.9（d,J2.5）H-6：7.27.9（dd,J8.5,2.5）四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第52页，此课件共66页哦H-2（异黄酮）（异黄酮）:7.67.8(1H,s);8.58.7(1H,s,DMSO-d6)2.黄酮

45、类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 C环环上的氢：上的氢：H-3（黄酮）（黄酮）:6.3(1H,s)四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第53页，此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 C环环上的氢（二氢黄酮）：上的氢（二氢黄酮）：H-2:5.22(1H,dd,J=11.5,5.0)H-3:2.80(1H,dd,J=17.0,11.5)(1H,dd,J=17.0,5.0)四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第54页，此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 C环环上的氢（二氢黄酮醇）：上的氢（二氢黄酮醇）：化合物化合物 H-2 H-3

46、二氢黄酮醇二氢黄酮醇 4.80-5.00 d(11.0)4.10-4.30 d(11.0)二氢黄酮醇二氢黄酮醇3-O-糖苷糖苷 5.00-5.60 d(11.0)4.30-4.60 d(11.0)四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第55页，此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 C环环上的氢（上的氢（查耳酮查耳酮）：）：H-：6.50-6.70(1H,d,J=17.0)H-：7.30-7.70(1H,d,J=17.0)四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第56页，此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 C环环上的氢（上的氢（橙酮橙酮

47、）：）：苄氢苄氢:6.50-6.70(1H,s)6.37-6.94(1H,s,DMSO-d6)四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第57页，此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱 化合物化合物 糖上的糖上的H-1黄酮醇黄酮醇3-O-葡萄糖苷葡萄糖苷5.70-6.00黄酮醇黄酮醇7-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 4.80-5.20黄酮醇黄酮醇4-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 黄酮醇黄酮醇5-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 黄酮醇黄酮醇6及及8-C-糖苷糖苷黄酮醇黄酮醇3-O-鼠李糖苷鼠李糖苷 5.00-5.10二氢黄酮醇二氢黄酮醇3-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 4.10-4.30二氢黄酮醇二氢黄酮

48、醇3-O-鼠李糖苷鼠李糖苷 4.00-4.20糖糖上上的的氢氢四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第58页，此课件共66页哦2.黄酮类化合物黄酮类化合物1H-NMR谱谱苯环上其他取代基的氢苯环上其他取代基的氢：取代基取代基 甲基甲基 2.04-2.45(3H,s)乙酰氧基乙酰氧基 2.30-2.45(3H,s)甲氧基甲氧基 3.45-4.10(3H,s)四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第59页，此课件共66页哦3.黄酮类化合物黄酮类化合物13C-NMR谱谱四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第60页，此课件共66页哦3.黄酮类化合物黄酮类化合物13C-NMR谱谱苷化

49、位置苷化位置 C-1(糖糖)7或或2,3,4 100.0-102.55-O-葡萄糖苷葡萄糖苷104.37-O-鼠李糖苷鼠李糖苷 99.0（1）糖上苷化位移和）糖上苷化位移和C-1信号信号苷化位移（酚性苷中）苷化位移（酚性苷中）4.0+6.0（C-1）四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第61页，此课件共66页哦3.黄酮类化合物黄酮类化合物13C-NMR谱谱 苷元糖苷化后，直接与糖相连的苷元糖苷化后，直接与糖相连的C-1向高向高场位移场位移，而，而邻、对位的邻、对位的C则向低场位移则向低场位移（2）苷元的苷化位移）苷元的苷化位移四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第62页，此课件

50、共66页哦4.黄酮类化合物黄酮类化合物MS谱谱途径途径I：途径途径II：四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第63页，此课件共66页哦5.黄酮类化合物黄酮类化合物碱熔降解碱熔降解四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱第64页，此课件共66页哦 提取分离示例提取分离示例1.某植物药材某植物药材含有以下化合物含有以下化合物,用用分离流程示意图分离流程示意图表表示过程提取示过程提取,分离。请判断各化合物在分离流程示意分离。请判断各化合物在分离流程示意图中的位置图中的位置(也就是将每个化合物的也就是将每个化合物的英文代号英文代号与分离与分离流程示意图上的流程示意图上的阿拉伯数字阿拉伯数字