高通量测序技术第二代测序技术.pdf

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1、高通量测序技术第二代测序技术 高通量测序技术第二代测序技术 高通量测序技术是对传统测序一次革命性的改变，一次对几十万到几百万条DNA 分子进行序列测定，因此在有些文献中称其为下一代测序技术(next generation sequencing)足见其划时代的改变，同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能，所以又被称为深度测序(deep sequencing)。自从 2005 年 454 Life Sciences公司(2007 年该公司被 Roche 正式收购)推出了 454 FLX焦磷酸测序平台(454 FLX pyrosequencing platform)以

2、来，曾推出过3730 xl DNA测序仪(3730 xl DNA Analyzer)的 Applied BioSystem(ABI)这家一直占据着测序市场最大份额的公司的领先地位就开始动摇了，因为他们的拳头产品毛细管阵列电泳测序仪系列(series capillary array electrophoresis sequencing machines)遇到了两个强有力的竞争对手，一个就是罗氏公司(Roche)的 454 测序仪(Roch GS FLX sequencer)，另一个就是2006 年美国 Illumina公司推出的Solexa 基因组分析平台(Genome Analyzer pla

3、tform)，为此，2007 年 ABI 公司推出了自主研发的SOLiD 测序仪(ABI SOLiD sequencer)。这三个测序平台即为目前高通量测序平台的代表。(见表一)公司名称 技术原理 技术开发者 商业模式 Apply Biosystems(ABI)基于磁珠的大规模并行克隆连接DNA 测序法 美国Agencourt私人基)上市公司:因组学公司(APG 销售设备和试剂获取利润 Illumina 合成测序法 英国 Solexa 公司首席科学家 David Bentley 上市公司:销售设备和试剂获取利润 Roche 大规模并行焦磷酸合成测序法 美国 454 Life Sciences

4、公司的创始人Jonathan Rothberg 上市公司:销售设备和试剂获取利润 Helicos 大规模并行单分子合成测序法 美国斯坦福大学生物工程学家 Stephen Quake 上市公司:2007 年 5 月首次公开募股(IPO)Complete Genomics DNA 纳米阵列与组合探针锚定连接测序法 美国 Complete Genomics 公司首席科学家 radoje drmanac 私人公司:投资额为 4650 万美元 表一:主流测序平台一览 这些平台共同的特点是极高的测序通量，相对于传统测序的 96 道毛细管测序，高通量测序一次实验可以读取 40 万到 400 万条序列。读取长

5、度根据平台不同从 25bp 到 450bp，不同的测序平台在一次实验中，可以读取 1G 到 14G 不等的碱基数，这样庞大的测序能力是传统测序仪所不能比拟的。尽管如此，在这项新的划时代的测序技术刚出现的时候，科学界对这项新技术却并不热衷。许多习惯用桑格技术的科学家怀疑新技术的准确度、阅读能力、成本消费、实用性。代理 Sanger 型测序硬件的经销商害怕其投资失败而首先提出了这些怀疑。图一:在芯片上进行的测序:Illumina 测序平台 然而大多数人却忽略了一个事实，即桑格技术的普及最初也遇到同样的阻碍。桑格技术刚开发出来时，阅读能力很难超过 25bp，即使在 Fred Sanger 双脱氧终止

6、法发明后也只达到 80bp，如今却达到了 750bp;而新发展的合成测序技术，应用焦磷酸测序方法，其阅读能力最初只有 100bp，推向市场 16 个月后增加至 250bp，随着技术的不断完善，目前已达到了 400bp，很快就接近桑格技术目前的水平。除了阅读能力外，能否以有限的成本用一台仪器产生足够数量的序列标记也是另一个需要改善的重要问题。这个问题已经被 Roche 公司解决了，应用他们的系统，仅花费阅读 35bp 或者更小片段的成本就能产生比 35bp 多 10 倍的序列标记。图二:GS FLX 高通量测序方法原理示意图 一、高通量测序的应用 高通量测序可以帮助研究者跨过文库构建这一实验步骤

7、，避免了亚克隆过程中引入的偏差。依靠后期强大的生物信息学分析能力，对照一个参比基因组(reference genome)高通量测序技术可以非常轻松完成基因组重测序(re-sequence)，2007 年 van Orsouw 等人结合改进的 AFLP 技术和 454 测序技术对玉米基因组进行了重测序，该重测序实验发现的超过 75%的 SNP 位点能够用 SNPWave技术验证，提供了一条对复杂基因组特别是含有高度重复序列的植物基因组进行多态性分析的技术路线。2008 年 Hillier 对线虫 CB4858 品系进行 Solexa 重测序，寻找线虫基因组中的 SNP 位点和单位点的缺失或扩增。

8、但是也应该看到，由于高通量测序读取长度的限制，使其在对未知基因组进行从头测序(novo sequencing)的应用受到限制，这部分工作仍然需要传统测序(读取长度达到 850 碱基)的协助。但是这并不影响高通量测序技术在全基因组 mRNA 表达谱，microRNA 表达谱，ChIP-chip 以及 DNA 甲基化等方面的应用。2008 年 Mortazavi 等人对小鼠的大脑、肝脏和骨骼肌进行了 RNA 深度测序，这项工作展示了深度测序在转录组研究上的两大进展，表达计数和序列分析。对测得的每条序列进行计数获得每个特定转录本的表达量，是一种数码化的表达谱检测，能检测到丰度非常低的转录本。分析测得

9、的序列，有大于 90%的数据显示落在已知的外显子中，而那些在已知序列之外的信息通过数据分析展示的是从未被报道过的 RNA 剪切形式，3端非翻译区，变动的启动子区域以及潜在的小 RNA 前体，发现至少有 3500 个基因拥有不止一种剪切形式。而这些信息无论使用芯片技术还是 SAGE 文库测序都是无法被发现的。高通量测序另一个被广泛应用的领域是小分子 RNA 或非编码 RNA(ncRNA)研究。测序方法能轻易的解决芯片技术在检测小分子时遇到的技术难题(短序列，高度同源)，而且小分子 RNA 的短序列正好配合了高通量测序的长度，使得数据“不浪费”，同时测序方法还能在实验中发现新的小分子 RNA。在衣

10、藻、斑马鱼、果蝇、线虫、人和黑猩猩中都已经成功地找到了新的 小分子 RNA。在线虫中获得了 40 万个序列，通过分析发现了 18 个新的小 RNA分子和一类全新的小分子 RNA。在 DNA蛋白质相互作用的研究上，染色质免疫沉淀深度测序(ChIP-seq)实验也展示了其非常大的潜力。染色质免疫沉淀以后的 DNA 直接进行测序，对比 ref seq 可以直接获得蛋白与 DNA 结合的位点信息，相比 ChIP-chip，ChIP-seq 可以检测更小的结合区段、未知的结合位点、结合位点内的突变情况和蛋白亲合力较低的区段。图 三:Independent Flow Cells(SoLidTM Syste

11、m)二、高通量测序的前景 目前，大多分析家都无法相信新一代测序技术能完全取代目前的芯片测序技术。不过，有些分析家也的确认为芯片测序技术正面临着挑战，他们认为到了2012 年新一代的测序技术将会带来高达 2。15 亿美元的产值。2006 年，整个芯片测序市场大概价值 8 亿美元，其中 65%的市场份额都是有关基因表达谱分析产品的，剩下 35%的市场份额则由基因型分析芯片占据。不过美国哈佛大学(Harvard University)遗传学教授 George Church 认为，这部分市场也会受到新一代测序技术的冲击。重测序芯片(resequencing arrays)、单核苷酸多态性分析芯片以及基

12、因拷贝数目变异分析芯(copy number variant array)市场也会受到影响。也有分析家不赞同这个观点，他们认为即使新一代测序技术很便宜，还是有不少人会选择传统的测序仪的。新一代测序技术相对传统芯片测序技术的优势，最终还得依靠广告和市场营销手段的推广才能获得大众的认可。去年夏天，由 Frost&Sullivan 公司对学术科研机构和私人研究团体进行的一项调查研究结果表明，在实际应用领域，例如进行表达谱分析时，人们还是倾向于选择传统的芯片产品，而并非青睐新一代的测序产品。新一代测序仪推广困难可能由其价格昂贵导致。平均采购一台新一代测序仪大约要花费 50 万美元，除非该实验室测序的工

13、作量非常大，否则是不会考虑购买的。即使像 Polonator 这样的新一代测序仪也需要花费 15 万美元左右，这笔费用对于一个小实验室来说是无法承受的。这时，只需要 150 美元一块的芯片就非常有竞争力了。以基因芯片产品享誉业界的美国 Affymetrix 公司市场部副总裁 Jay Kaufman 认为，新一代测序技术对于芯片市场来说的确会带来一定的冲击，不过要完全取代表达谱分析芯片还需要一定的时间。但是，基因芯片也有其自身的缺点，就在于它是一个“封闭系统”，它只能检测人们已知序列的特征(或有限的变异)。而高通量测序的强项，就在于它是一个“开放系统”，它的发现能力和寻找新的信息的能力，从本质上

14、高于芯片技术。研究者可以充分享受这两个平台的比较优势，在获取新信息的基础上，利用芯片的强项，即对已知信息的高通量、低成本(相对)的检测能力，对大量样品进行快速检测，短时间内获得有大量有效的数据。作为两个高通量的基因组学研究技术，在应用的某些方面存在重叠和竞争，但是在更多方面是优势互补，两种方法联合使用，将解决以前的单种技术难以解决的问题。三、结语 新一代测序已显示出巨大的潜力。也正是因为科学的不断进步，在给测序技术提出新要求的时候，也给这项技术带来了新的增长点:2008 年 4 月 Helico BioScience 公司的 Timothy 等人在 Science 上报道了他们开发的真正的单分

15、子测序技术，也被称为第三代测序技术，并利用该技术对一个M13 病毒基因组进行重测序。这项技术之所以被称为真正的单分子测序，是因为它完全跨过了上述 3 种高通量测序依赖的基于 PCR 扩增的信号放大过程，真正达到了读取单个荧光分子的能力，向 1000 美元测定一个人类基因组的目标迈出了一大步。教你如何用 WORD 文档(2012-06-27 192246)转载?标签:杂谈 1.问:WORD 里边怎样设置每页不同的页眉,如何使不同的章节显示的页眉不同,答:分节，每节可以设置不同的页眉。文件页面设置版式页眉和页脚首页不同。2.问:请问 word 中怎样让每一章用不同的页眉,怎么我现在只能用一个页眉，

16、一改就全部改了,答:在插入分隔符里，选插入分节符，可以选连续的那个，然后下一页改页眉前，按一下“同前”钮，再做的改动就不影响前面的了。简言之，分节符使得它们独立了。这个工具栏上的“同前”按钮就显示在工具栏上，不过是图标的形式，把光标移到上面就显示出”同前“两个字来。3.问:如何合并两个 WORD 文档，不同的页眉需要先写两个文件，然后合并，如何做,答:页眉设置中，选择奇偶页不同与前不同等选项。4.问:WORD 编辑页眉设置，如何实现奇偶页不同 比如:单页浙江大学学位论文，这一个容易设;双页:(每章标题)，这一个有什么技巧啊,答:插入节分隔符，与前节设置相同去掉，再设置奇偶页不同。5.问:怎样使

17、 WORD 文档只有第一页没有页眉，页脚,答:页面设置,页眉和页脚，选首页不同，然后选中首页页眉中的小箭头，格式,边框和底纹，选择无，这个只要在“视图”“页眉页脚”，其中的页面设置里，不要整个文档，就可以看到一个“同前”的标志，不选，前后的设置情况就不同了。6.问:如何从第三页起设置页眉,答:在第二页末插入分节符，在第三页的页眉格式中去掉同前节，如果第一、二页还有页眉，把它设置成正文就可以了?在新建文档中，菜单视图页脚插入页码页码格式起始页码为 0，确定;?菜单 首页不同，确定;?将光标放到第一页末，菜单文件页面设置文件页面设置版式 版式首页不同应用于插入点之后，确定。第 2 步与第三步差别在

18、于第 2 步应用于整篇文档，第 3 步应用于插入点之后。这样，做两次首页不同以后，页码从第三页开始从 1 编号，完成。7.问:WORD 页眉自动出现一根直线，请问怎么处理,答:格式从“页眉”改为“清除格式”，就在“格式”快捷工具栏最左边;选中页眉文字和箭头，格式,边框和底纹,设置选无。8.问:页眉一般是-，上面写上题目或者其它，想做的是把这根线变为双线，WORD 中修改页眉的那根线怎么改成双线的 答:按以下步骤操作去做:?选中页眉的文字，包括最后面的箭头?格式,边框和底纹?选线性为双线的?在预览里，点击左下小方块，预览的图形会出现双线?确定?上面和下面自己可以设置，点击在预览周围的四个小方块，

19、页眉线就可以在不同的位置。9.问:Word 中的脚注如何删除,把正文相应的符号删除，内容可以删除，但最后那个格式还在，应该怎么办,答:步骤如下:1、切换到普通视图，菜单中“视图”“脚注”，这时最下方出现了尾注的编辑栏。2、在尾注的下拉菜单中选择“尾注分隔符”，这时那条短横线出现了，选中它，删除。3、再在下拉菜单中选择“尾注延续分隔符”，这是那条长横线出现了，选中它，删除。4、切换回到页面视图。尾注和脚注应该都是一样的。10.问:Word 里面有没有自动断词得功能常常有得单词太长了，如果能设置下自动断词就好了 答:在工具语言断字自动断字，勾上，word 还是很强大的。11.问:如何将 word

20、文档里的繁体字改为简化字,答:工具语言中文简繁转换。12.问:怎样微调 WORD 表格线,WORD 表格上下竖线不能对齐，用鼠标拖动其中一条线，可是一拖就跑老远，想微调表格竖线让上下对齐，请问该怎么办,答:选定上下两个单元格，然后指定其宽度就可以对齐了，再怎么拉都行pressAlt，打开绘图，其中有个调整坐标线，单击，将其中水平间距与垂直间距都调到最小值即可。打开绘图，然后在左下脚的绘图网格里设置，把水平和垂直间距设置得最小。13.问:怎样微调 word 表格线,我的 word 表格上下竖线不能对齐，用鼠标拖动其中一条线，可是一拖就跑老远，我想微调表格竖线让上下对齐，请问该怎么办,答:可以如下

21、操作:?按住 ctl 键还是 shift，你 have a try?double click the line,try it)?打开绘图，设置一下网格(在左下角)。使水平和垂直都为最小，试一把,?press Alt 14.问:怎么把 word 文档里已经有的分页符去掉,答:先在工具 选项 视图 格式标记，选中全部，然后就能够看到分页符，delete 就 ok 了。15.问:Word 中下标的大小可以改的吗 答:格式字体 16.问:Word 里怎么自动生成目录啊 索引和目录 答:用“格式样式和格式”编辑文章中的小标题，然后插入-17.问:Word 的文档结构图能否整个复制 论文要写目录了，不想再

22、照着文档结构图输入一遍，有办法复制粘贴过来吗,答:可以自动生成的，插入索引目录。18.问:做目录的时候有什么办法时右边的页码对齐,比如:1.1 标题.11.2 标题.2 答:画表格，然后把页码都放到一个格子里靠右或居中，然后让表格的线条消隐就可以了，打印出来就很整齐。19.问:怎样在 word 中将所有大写字母转为小写,比如一句全大写的转为全小写的答:格式-更改大小写-小写 20.问:在存盘的时候，出现了问题，症状如下:磁盘已满或打开文件过多，不能保存，另开新窗口重存也不管用。如何解决,答:把 word 文档全选，然后复制，然后关掉 word，电脑提示你粘贴板上有东西，要不要用于别的程序，选是

23、，然后，再重 新打开 word，然后粘贴，然后，保存。21.问:WORD 中的表格一复制粘贴到 PPT 中就散掉了，怎么把 WORD 里面的表格原样粘贴到 PPT 中,答:1)比较好的方法是:先把表格单独存为一 WORD 文件，然后插入,对象，选由文件创建，然后选中上面的 WORD 文件，确定;2)还可以先把表格 copy 到 excel 中，然后 copy 到)复制粘贴，但是 PPT 中，这个也是比较好的办法;3)可以先做成文本框，再粘贴过去;4 在 PPT 中不能粘在文本框里面;5)拷屏，做成图片，再弄到 PPT 里面。22.问:有没有办法将 PPT 的文字拷入 WORD 里面,答:另存就

24、可以了。只要以.rtf 格式另存即可 23.问:word 中图片的分栏如何处理,假如有:1 2 图 3 4 这样的结构，我想实现:1 3 图(要横跨两栏)2 4 但是，试了半天总是:1 2 图 3 4 怎么办呀,help 答:设置图片格式版式高级文字环绕环绕方式选上下型图片位置对齐方式选居中度量依据选页面，要先改文字环绕，然后才能改图片位置 24.问:用 word 写东西时字距老是变动，有时候自动隔得很开，有时候进入下一行的时侯，上一行的字距又自动变大了，这是为什么,怎么纠正啊,答:是因为自动对齐的功能，格式段落对齐方式可以选。还有允许断字的功能如果 check 上，就不会出现你说的情况了。2

25、5.问:在使用 WORD 的样式之后，如标题 1、标题 2 之类的，在这些样式前面总会出现一个黑黑的方块，虽然打印的时候看不到，但看着总是不舒服，有没有办法让它不要显示呢,答:“视图”,“显示段落标志”，把前面的勾去掉。其实这个很有用，可以便于知道哪个是标题段落 26.问:文章第一页下面要写作者联系方式等。通常格式是一条短划线，下面是联系方式，基金支持等。这样的格式怎么做出来,就是注明页脚吗,答:插入脚注和尾注 27.问:文字双栏，而有一张图片特别大，想通栏显示，应该怎么操作,答:可以选择的内容，按双栏排。选择其他内容，按单栏排。28.问:Word 里面如何不显示回车换行符,答:把视图-显示段

26、落标记的勾去掉或工具-选项-视图-段落标记 29.问:有没有方法把 WORD 里的软回车一下子替换掉,识别出来的文字全带着软回车，能把他们一次全删掉吗,答:查找，替换，按 CTRL+H;软回车好象是l，在特殊字符里有 30.问:在 WORD 里的框框里怎么打勾,答:画个文本框，文本框里写一个钩，然后拖过去;或者先在 WORD 里插入符号“?”，然后选中“?”，到-格式-中文版式-带圈字符-选“?”31.问:还是不行，这样拷过去的框框字体是 windings 的，而原来的是宋体的，两者有很大的区别。答:根据模板新建专业型传真，里面有框，双击后打勾，copy 就 ok 32.问:Word 中怎么在

27、一个英文字母上打对号,答:透明方式插入图片对象，内容是一个?33.问:WORD 里怎么显示修订文档的状态,文档修订后，改后标记很多，但是在菜单里没有“显示修订最终状态”等，怎么调出来,答:工具,自定义,命令,类别(工具),命令(修订),把“修订”等拖到工具栏上 34.问:怎样把许多分开的 word 文档合并成一个文档。我的论文是按照章节分开写的，但现在图书馆要提交电子版的学位论文，是一个文档的，我找了很多选项但好象不能合并，选择插入文件功能，可以加入内容，但文档中的页眉却插不进去，有谁有高见,答:acrobat6 可以直接把多个文档打印成一个 pdf 文档。可以提交 pdf 格式的论文，先一个

28、一个 word 文档转换为 pdf 格式的，然后在 pdf 文档菜单的文件菜单中，选上作为 pdf 格式打开，追加上就可。35.问:Word 里面要写方程式怎么办啊,答:插入,对象,公式编辑器 equation，如果没有公式编辑器 Equation，要自己从光盘中安装，或者安装 Mathtype 公式编辑器按右键把它拖出来,插入,命令,自定义,工具应该是倒过来 36.问:想在 WORD 里面表示矩阵，怎样才能画出那个很大的矩阵括号,答:装公式编辑器 mathtype 好了:)37.问:Word 的公式编辑器怎么安装,答:工具,自定义,插入,公式编辑器，把它拖到工具条上即可;或者安装 OFFIC

29、E 后，再 次安装，选增加功能吧，会有提示的 38.问:Word2000 下调用公式编辑器的快捷键 答:点击菜单工具-自定义，点击对话框下方键盘，在类别里选择插入，在命令里选择InsertEquation，指定你的快捷方式 39.问:WORD 中出现公式的行往往要比只有文字的行来得宽，如何把这些行改的跟只有文字的行一样宽,答:段落行距设为固定值即可。这样会有一个问题，比如设置为 18 磅，有些公式符号(特别是有下标的)不能全部显示打印稿可以显示。怎么解决这个问题,这个如何解决还需要考虑。40.问:我的文档就是公式多，应该怎么办,答:公式多的时候，最好的消除这个问题的办法就是每打几个公式就要存盘

30、，如果连续打太多，就会出现这个问题。出现问题的时候:?选中所有内容，ctrl，C?把 WORD 所有文档关闭。?最关键:出现一条信息，务必选择“是”?重新打开 WORD 编辑器，?ctrl，V，粘贴?ctrl，S，存盘 41.问:怎样在 word 里面的公式编辑器中输入空格,答:ctrl+shift+space 42.问:如何使 word 中公式全都小一号,一个一个选实在麻烦 答:在 Mathtype 公式编辑器中:首先，在 Mathtype 中的菜单 Size 中选 define,定义所需的字号大小;再次，在 Mathtype 中的菜单 preferences 中的 equation pre

31、ference 的 save to file 存贮所定义的字号文件;返回 word 中:在 Mathtype菜单中选 Format equation1)在 MathType preference file 中，选你刚才所定义的文件;2)在 Range 中，选 Whole document。最后，选 OK，即 OK 了。43.问:如何将 WORD 中的公式编缉拉到外面 答:工具,自定义,命令,插入,右边找公式编辑器，往上脱 44.问:怎样可以去掉 word 里面公式，或是图片上方总是出现的灰色的横条啊,以前没有的，不知道怎么跑出来了，看着怪晕糊的。答:工具,选项-视图-域底纹，选不显示，或选取时

32、显示，就可以了 45.问:整个论文用一个 WORD 文档，太大，不好编辑，一个地方有增删，后面那么长一个文档版面分布会变得乱七八糟，特别是图表之类的东东。想让每章的偶数页自动显示自己的章号和题目，WORD 里这个能够自动实现吗,答:不要整个论文放一个 WORD 文档，一章一个，然后每章就可以奇偶分开处理了 46.问:论文按照章节写的，想把它们合并成一个文件，并保持原有的文件格式。采用了在文件末尾插入分节符的方法，但插入后有些文件的部分格式发生了变化，请问如何解决,答:用主控文档的方法比较好，在大纲模式里设置的;采取插入文件的方式，格式有些变化 47.问:WORD 里边怎么样显示行号,答:在页面

33、设置那里，板式选项，最下面有个行号选项 48.问:Word 里面怎么插入半个空格,答:先在 word 的工具栏上，点中双箭头那个纽，就可以看到原先看不到的空格，然后再编辑一下这个空格的大小，比如小五或小四什么的。49.问:只要一回车，或是改变光标位置的任何操作，都会使上一行的)变成,，有人遇到过这个问题么,答:是不是设置了自动替换啊，符号里的自动替换看看吧 50.问:WORD 有没有可以按单词的首字母进行排序,就是从 A-Z 进行排 答:表格中的内容可以按照拼音排序，弄到 excel 里，排序，再回来 51.问:怎么在 word 里面打 R2 答:先打 R2，然后用鼠标选中 2,同时按 Ctr

34、l，“shift”和+52.问:Word 中发现空格都是小圆点，是怎么回事情,每输入一个空格就出现一个小圆点，怎么把它消除掉啊,这个空格会打印出来吗,答:不会打印出来，如果想不显示:工具,选项,视图格式标记中前面的勾去掉即可 53.问:word 如何使两个表格能排在一起,我做的表格每一个都比较小，但是表格数比较多，我想两个表格排成一行，请问该怎么做,答:试试在局部分栏，每个分栏中一个表格。54.问:为什么换机器打开 WORD 文档排版变了,在一台机器上排好板的 WORD 文档换在另一台机器打开就变了,页码都不对了，怪哉。答:是默认的页面设置不一样吧，或者版本不同 55.问:Word 里面插入表

35、格的问题，同一表格前后两行被分在了不同的页上，想他们在同一页怎么做,答:转换成图文框可能更容易排版一点，或者加个文本框 56.问:怎么在 word 里画坐标图在 word 里有了坐标图，文字却加不加去怎么办 答:作图时直接将文字加上去;word 中的绘图工具条，文字环绕里面寻找合适的方案，把图放在文字的底层 57.问:WORD 文件有密码，怎么办呢,答:找破解软件，比如advanced_office_2000_password_recovery_pro_v1.03，但不一定好用。58.问:怎么给 word 文档加密,答:打开文档，另存为工具常规选项打开、修改权限密码，保存 59.问:Word

36、文件怎么转化为 postscript 文件,答:先转化为 pdf，然后打印到文件，通过 distiller 生成 ps。60.问:Word 无法识别 origin 中的汉字怎么办,用 origin 做的图形中有汉字，copy 到 word 中就成了问号，因此我不得不先用 export 把图形变为 jpg 文件才能解决这个问题，有没有方便的解决办法,答:ORIGIN 里面的字体改成宋体或者仿宋 61.问:请教怎么把 Origin 中的图表拷贝到 Word,答:点 origin 的 Edit 菜单里的 copy page 到 word 里粘贴就行了 62.问:把 origin 的图复制粘贴到 wo

37、rd，总有一大块的空白，这个空白有什么工具可以去掉吗,还有就是用 word 自带的图表工具画图时，也是有一大块空白去不掉，这个可以解决吗,答:右键选择图片工具栏，点裁减 63.问:插入的图片为什么老是处于页面的顶端，想拖下来放到其他地方，却又自动跑到顶端去，就是拖不下来，请问该如何处理 答:改变图片的属性，就可以了。64.问:如何保证一幅图像固定在某一段的后面，另一段的前面，而不会因为前面段落的删减而位置改变,答:右键点击图片,设置对象格式版式嵌入型 65.问:如何把在 WORD 里面图形工具画的图转化为 jpg,答:另存为 html 格式，然后在 html 文件对应的文件夹里找 66.问:请

38、问什么格式的图片插入 word 最清晰,手头持有 png 和 tif 格式，复制粘贴到 word 中模糊一片，请问转换成什么图片格式用于 word 最清晰,什么方法(插入图片来自文件还是直接复制粘贴)对清晰度有否影响,答:emf，eps 等矢量图最清晰，不会因为缩放损失分辨率，而 jpeg，bmp 等点阵图就不行了。67.问:在 WORD 中如何让图片的左、上、下边都是文本,答:在分栏的数量为 1 的情况下实现。图片选中后右键，设置图片格式-版式-四周型就可以了 68.问:jpg 文件插入 word 文件以后怎么让文件变小,jpg 格式图片插到 word文件以后文件变的巨大，有什么方法可以让它

39、小一点,最好能一张软盘放的下。答:两个方法:?用 photoshop 改变图片的分辨率，当然要看得清楚，然后插入word?word 有强大的压缩功能，把文档另存为比如:temp.doc，看看是不是小了很多。69.问:Matlab 仿真图片大家一般怎么弄到 word 里面的相对横轴和纵轴修改一下的说 答:一般都是在 Matlab 里面把所有的直接修改好了，然后再保存的时候用 jpg 格式，在 word 中间导入就好了 70.问:如何向 WORD 中的图片添加文本,想在图片上输入一些说明文字 答:插入文本框，将版式设成“悬浮”在 WORD 的绘图工具里面有个自选图形，找到你要的括号，直接在页面上画

40、就可以了。可以移动，大小也可以改。然后把他挪到文字边上，即可。一个小窍门就是用 CTRL+箭头可以进行微调。如果你觉得经常需要对这些文字编辑，怕图形错位的话，可以将需要的文字打在一个文本框里，记得将文本框设置成透明无色的(这样就看不见文本框了)，然后将文本框和你的括号(或其他符号)组合成一个图形，就万无一失了 71.问:AUTOCAD 的图拷贝到 WORD 下如何处理 答:有几种办法:一是可以在 WORD 中进行 CAD 编辑的方法:将 CAD 的背景设为白色，然后将 CAD 窗口缩小，到你想复制的图形的大小，正好可以容纳就可以了，否则 WORD 里面有很 大的空白，然后，拷贝，选中所有的图形

41、中的线条，右键。到 WORD 中粘贴。二是，先转为 wmf 文件，具体先将窗口缩小，如上，然后，按 emport，选中线条，存储。WORD 中，插入，图形，来自,文件，找到文件就可以插入了。72.问:文章用 WORD 打开时，原有的公式全是红叉，以及 WORD 中图变成 red cross(红叉)怎么办,答:基本上没有办法挽救回来了，只能重新插一遍图。据微软的技术支持所说，红叉是由于资源不够引起的。也就是说，如果你所编辑的文档过大，可能因为资源问题导致图片无法调入，从而显示红叉。可是实际情况是，有时候所编辑的文档并不大，可是还是出现红叉。这就可能是因为你设置了快速保存，在选项菜单中可以找到。这

42、是由 WORD 的文档结构所决定的。当你设置为快速保存时，每次保存的时候只是把你改动过的部分添加到文档尾部，并不重写文档本身，以达到快速的目的。所以，你会看到一个本来并不长的文档的实际大小可能有好几兆。当取消了快速保存后，文档长度将大大减小。还有一个减小红叉出现可能性的办法是把图片的属性中的浮动去掉。这样可能在编辑的时候有一定的困难，但是对于避免红叉的出现确实很灵。再说一句，一旦红叉出现了，应该是没有办法恢复的，只有再重新贴图。73.问:如果 Word 突然定在那里了怎么办,答:重新打开会回复，或者在 word 自身的 templates 里面找到近期文件，重写的不用太多。74.问:如何解决

43、word 说磁盘已满不让保存的问题,答:有时候，当要保存一个文件时，Word 会弹出一个对话框说是磁盘空间已满，无法保存文件，可实际上磁盘上空间还很大。这是非常令人恼火的一件事情。这一信息最常见的原因是 Temp 文件夹已经达到了一个文件夹中可以包含的最多文件数的上限。这时的解决方法很简单:在【资源管理器】中右击安装有 Windows 系统的磁盘，在出现的快捷菜单中单击【属性】，将出现【属性】对话框，从【常规】选项卡中选择【磁盘清理】按钮，此时将出现【磁盘清理】对话框。执行磁盘清理完毕以后，Windows 会弹出一个新的对话框。在【要删除的文件】框中选中【临时文件】选项，然后选择【确定】。Wi

44、ndows 将删除临时文件。要人工删除临时文件，进入临时文件夹，删除任何旧的临时文件(临时文件以波浪号开始，以(tmp 扩展名结束)，返回 Word，再次试着保存文件。如果此时还不能正确保存文档，可以采取以下的方法，步骤如下:(l)按 Ctrl，A 选定整个文档。(2)按 Ctrl，C 将整个文档复制到内存中。(3)关闭 Word 程序。此时系统会提示:您将大量文本放在了剪贴板中，是否希望在退出 Word 后这些文本仍可用于其他程序,。(4)选择【是】按钮。(5)重新打开 Word 程序。(6)按 Ctrl，V，将复制下来的文本粘贴到新文件中。注意:在删除临时文件时，可能会出现一个对话框，提示不能删除正在使用的文件。这是因为 Windows 运行的时候，需要不断地用到一些临时文件。因而，在人工删除临时文件时，试着在开始时只删除几个文件，然后对桌面上的回收站进行清空。否则可能无法删除所有选择的文件。