（最新）靛青绿试验.pdf

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1、吲哚菁绿（Indocyanine green，ICG）摄取释放实验实验采用 ICG摄取释放实验检测hESCs来源的肝细胞的清除和排泄功能，具体实验步骤如下：1.用 DMSO 配制 100mg/ml 的 ICG储液；2.弃去原培养基，用新的培养基IV 稀释 ICG 至工作浓度为 1mg/ml，加入待测细胞中，37、5%CO2 孵育 60min；3.弃去含有 ICG的培养基，用 PBS洗两次；4.显微镜下观察细胞对ICG的摄取情况，拍照；5.细胞中加入新的培养基IV，37、5%CO2 条件下培养 6h；6.显微镜下观察细胞释放ICG情况，拍照记录。靛青绿试验ICG-001 ICG-001 拮抗 W

2、nt/-catenin/TCF介导的转录，并特异性结合到启动子结合蛋白（CBP)，IC50 为 3 M，但不能结合到相关的转录共激活因子p300 上。肝脏是人体重要的排泄器官之一，许多内源性物质如胆汁酸、胆红素、胆固醇等，以及外源性物质，如药物、毒物、染料等，在肝内进行适当代谢后，可经肝细胞排泄至胆汁。肝细胞损害时，上述物质的排泄功能减退。据此，可外源性地给予人工合成色素，测定肝脏清除及排泄能力，作为肝功能试验项目之一。别名吲哚氰蓝绿试验；ICG分类血液生化检查 色素测定原理静注靛青绿（ICG）后即迅速与白蛋白结合而运转，在通过肝脏时，90%以上被肝细胞所摄取，再以原形排至胆汁中，随胆汁排泄。

3、肝功能障碍时，ICGR增加，静脉快速注入ICG kg，15min 后从对侧静脉采血测定ICGR。也可用 ICG 清除率检查仪RK-1000，通过指端传感器测定之。化验取材血液化验方法色素测定试剂（1）靛青绿注射液：常用Diagnogreen（日本产、商品名），每支25mg，用水稀释成5ml。（2）生理盐水（3）脱色剂：次氯酸钠（NaOCl），用蒸馏水稀释2 倍。（4）ICG 标准液（10ml/L）：取 Diagnogreen（5mg/ml）1ml，加蒸馏水稀释到500ml。操作方法（1）按体重计算注射用量，即kg。Diatnogreen注射液，每支25mg，加注射用水稀释5ml 从一侧肘静脉注

4、射。（2）准确记录时间，15mim 时从对侧肘静脉取血4ml 左右，分离血清，注意不可溶血。（3）取血清 1ml 加生理盐水2ml 混合，805nm波长，以蒸馏水调零，读取吸光度为A1。然后加脱色剂1 滴，混合后立即比色，读取吸光度为A2。A1-A2 为血清 ICG的吸光度，查标准曲线得出ICG 的浓度。附注：（1）采用时间要准确，采血后应及时分离血清。ICG 具有感光性，应避免光照，及时测定，6h 可影响结果。（2）对肥胖、水肿、腹水患者，应按标准体重计算ICG 用量，否则易偏大。（3）从理论上推测，成人每千克体重相当于50ml 循环血浆量，故按kg ICG 注入，在注射零时血浆中ICG浓度

5、为 50ml，即 10mg/L。算 ICG 滞留率时以此为准。（4）ICG 在蛋白质溶液中稳定性好，在做ICG 标准曲线时加入适量血清，以增加显色的稳定性，并得到和血清一致的结果。正常值15min 中 ICGR为 010%，每增加 5 岁，滞留率可增加%。血中清除率（K）：；最大清除率（Rmax）：kg/min。临床意义在各种肝胆疾病早期，血中ICGR增加。慢性肝炎ICGR多在 15%20%之间，活动性者更高，肝硬化时可达35%。肝炎的病变程度与其病期及黄疸程度有关，在恢复期本试验能较早地恢复正常。脂肪肝本试验多为正常。如改变 ICG 的负荷量，算出最大消除率（ICGRmax），有助于潜在性肝

6、硬化的诊断。肝癌时ICGR取决于是否肝纤维化，无肝纤维化者ICGR正常。因此本试验用于判断肝癌患者有无肝纤维化存在。ICGR 增高还见于慢性家族性非溶血性黄疸（Rotor 综合征）、总胆管阻塞、恶性肿瘤引起的梗阻性黄疸等。本试验与BSP试验阳性率相似。此外，还可用来测定肝血流量等。明显升高：体质性ICG 排泄异常症、肝硬化、特发性门脉高压症、肝肿瘤、Rotor 综合征（先天性非溶血性黄疸直接胆红素增高型）。轻度升高：急性肝炎、慢性肝炎（持续性、活动性）。Rmax（最大清除率）明显降低：肝硬化、特发性门脉高压症。Rmax 一般降低：慢性肝炎。由肘静脉快速注入靛青绿（Kg）立即计时，15min 后从对侧肘静脉采血，快速送检。