课题3　分解纤维素的微生物的分离 (4).ppt

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1、课题课题3 3 分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离基础知识基础知识-解决为什么的问题解决为什么的问题一、纤维素一、纤维素1 1、纤维素是地球上含量最丰富的、纤维素是地球上含量最丰富的多糖多糖类物质类物质2 2、植物每年产生的纤维素超过、植物每年产生的纤维素超过7070亿吨亿吨分布在植物的分布在植物的根、茎、叶根、茎、叶中中3 3、棉花棉花是自然界中纤维素含量是自然界中纤维素含量最高的天然产物最高的天然产物地球上每年产生这么多的纤维素，地球上每年产生这么多的纤维素，为什么没有被纤维素淹没？为什么没有被纤维素淹没？二、纤维素酶（二、纤维素酶（要记住要记住）纤维素酶是一种纤维素酶是一种

2、复合酶复合酶它至少包括三种组分，即它至少包括三种组分，即C C1 1酶、酶、C CX X酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶前两种酶使纤维素分解成纤维二糖前两种酶使纤维素分解成纤维二糖第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖纤维素纤维素葡萄糖葡萄糖C1酶酶 Cx酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶纤维二糖纤维二糖纤维素酶水解滤纸实验纤维素酶水解滤纸实验加入了纤维素酶加入了纤维素酶未加入纤维素酶未加入纤维素酶三、刚果红三、刚果红1 1、是一种、是一种染料染料2 2、它可以与纤维素形成、它可以与纤维素形成红色复合物红色复合物并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应四、纤

3、维素分解菌的筛选四、纤维素分解菌的筛选1 1、纤维素分解菌的筛选方法、纤维素分解菌的筛选方法2 2、纤维素分解菌的筛选方法的原理、纤维素分解菌的筛选方法的原理刚果红染色法刚果红染色法通过颜色反应直接对微生物进行筛选通过颜色反应直接对微生物进行筛选 当纤维素被纤维素酶分解后当纤维素被纤维素酶分解后刚果红刚果红-纤维素的红色复合物就无法形成纤维素的红色复合物就无法形成培养基中会出现以纤维素分解为中心的培养基中会出现以纤维素分解为中心的透明圈透明圈我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌1.1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是（下列关于纤维素酶的说法，

4、错误的是（）A.A.纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B.B.纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C.C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D.D.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖2.2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的（利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的（）A.A.刚果红能与纤维素形成红色复合物刚果红能与纤维素形成红色复合物 B.B.刚果红能与纤维二糖形成红色复合物刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C.C.刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物刚果红

5、不能与葡萄糖形成红色复合物D.D.若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌实验设计实验设计-解决怎么操作的问题解决怎么操作的问题1土壤取样土壤取样2选择培养选择培养3梯度稀释梯度稀释4将样品涂布到鉴别纤维素将样品涂布到鉴别纤维素 分解菌的培养基上分解菌的培养基上5挑选产生透明圈挑选产生透明圈 的菌落的菌落一、土壤取样一、土壤取样应选择应选择富含纤维素的环境富含纤维素的环境如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等也可将也可将滤纸滤纸埋在土壤中（埋在土壤中（10cm10cm）

6、一个月左右，这样会有能）一个月左右，这样会有能分解纤维素的微生物生长分解纤维素的微生物生长二、选择培养二、选择培养阅读资料二阅读资料二“选择培养基选择培养基”，回答问题，回答问题1 1、纤维素分解菌选择培养基属于、纤维素分解菌选择培养基属于_（固体、液体）培养基，（固体、液体）培养基，原因是原因是_。液体液体没有添加琼脂成分没有添加琼脂成分2 2、该培养基对微生物、该培养基对微生物_（具有，不具有）选择作用。（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是如果具有，其选择机制是 。以纤维素粉为唯一碳源，能分解以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖纤维素的微生物可以大量繁殖 具有

7、具有 选择培养的操作方法选择培养的操作方法将土样加入装有将土样加入装有30 mL30 mL选择培养基的锥形瓶中选择培养基的锥形瓶中将锥形瓶固定在将锥形瓶固定在摇床上摇床上，在一定温度下，在一定温度下震荡培养震荡培养1 12 2天天直至培养液变直至培养液变浑浊浑浊也可重复选择培养也可重复选择培养为什么选择培养为什么选择培养能够能够“浓缩浓缩”所需的微生物？所需的微生物？在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到条件的微

8、生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩浓缩”的作用的作用三、梯三、梯度稀度稀释（前面学过了）释（前面学过了）四、将四、将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上1 1、制备培养基：（学过了）、制备培养基：（学过了）2 2、涂布平板：、涂布平板：将稀释度为将稀释度为10104 410106 6的菌悬液各的菌悬液各0.1 mL0.1 mL涂布在涂布在 培养基上，培养基上，3030培养箱中倒置培养培养箱中倒置培养五、刚果红染色，挑选产生透明圈的菌落五、刚果红染色，挑选产生透明圈的菌落方法一方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应方法二方法二：在倒平板时就加入刚果红：在倒平板时就加入刚果红染色法染色法优点优点缺点缺点方法一方法一 方法二方法二 颜色反应基本上是颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用纤维素分解菌的作用操作繁琐，刚果红会操作繁琐，刚果红会使菌落之间发生混杂使菌落之间发生混杂操作简便，不存在菌操作简便，不存在菌落混杂问题落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈，有些微生生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显物能降解色素，形成明显的透明圈的透明圈