食品微生物检验习题参考答案.doc

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1、好风光好风光恢复供货才 食品微生物检验习题参考答案1、答:1干热灭菌法将包扎好的玻璃器皿摆入电热烘箱中,相互间要留有一定的空隙,以便空气流通。关紧箱门,翻开排气孔,接上电源。待箱内空气排出到一定程度时,关闭上排气孔,加热至灭菌温度后,固定温度进行灭菌:160165保持2小时。2小时后切断电源。待烘箱内温度自然降温冷却到60以下后,再开门取出玻璃器皿,防止由于温度突然下降而引起玻璃器皿碎裂。2高压蒸汽灭菌法 关好排水阀门,放入纯洁水或蒸馏水至标度。注意水量一定要加足,否那么容易造成事故。将须要灭菌的器材、培养基等装入灭菌锅中,加盖密封。旋紧螺旋时,先将每个螺旋旋转到一定程度不要太紧,然后再旋紧相

2、对的两个螺旋,以到达平衡旋紧,否那么易造成漏气,达不到彻底灭菌的目的。通电加温,翻开排气活门,排尽锅内的空气。通常当压力表指针升至5磅MPa时,翻开排气活门放气,待压力表指针降至零点一小段时间后,再关闭活门。即活门冲出的全部是蒸汽时那么表示彻底,此时可关闭排气活门,如果过早关闭活门,排气不彻底,也达不到彻底灭菌的目的。MPa 或15磅MPa时或15磅时,锅内温度相当于120121MPa 或15磅压力保持2030分钟,即能到达完全灭菌的目的,然后停止加温。当到达所需温度时开始计时,并在此温度下保持所需的时间。降温:自然降温或翻开活门排汽降温。稍微翻开一点排气活门,使锅内蒸汽缓慢排除,然后逐渐开大

3、活门,气压徐徐下降,注意勿使排气过快,否那么会使锅内的培养基沸腾而冲脱或沾染棉花塞,但排气太慢又使培养基在锅内,受高温处理时间过长,对培养基也是不利的。一般从排气到翻开锅盖以10分钟左右为好。当锅内蒸汽完全排尽时即压力表指针降到零时,要立即翻开锅盖。取出灭菌物品:当锅内温度下降到60左右时器材或培养基。如培养基需制备固体斜面培养基时,那么应趁热将试管斜放在桌上,上面盖上报纸以免落灰尘,冷却后便可收起。最后将高压灭菌器内的剩余水排出。观察灭菌效果。把灭菌培养基放入25温箱中,培养48小时观察灭菌效果。 48小时后不见杂菌生出,便证明培养基已到达灭菌目的,可以使用。2、答:菌落总数是指食品经过处理

4、,在一定条件下培养后,所得1g或1ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。3、答:因为营养琼脂温度假设温度高于461,容易将验样中的菌烫死;假设温度低于461,那么营养琼脂会凝固,影响培养效果。4、答:革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是: 1涂片固定。 2草酸铵结晶紫染1分钟。 3自来水冲洗。 4加碘液覆盖涂面染3分钟。 5水洗,用吸

5、水纸吸去水分。 6加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。 7蕃红梁色液稀染10秒钟后,自来水冲洗。枯燥,镜检。 染色的结果,革兰氏正反响菌体都呈紫色,负反响菌体都呈红色。5、答:因为乳糖胆盐发酵管中的成分有溴甲酚紫,中性时呈蓝紫色,酸性时呈黄色,如果颜色不变呈蓝紫色,说明无产酸的大肠菌群;如果颜色变黄色,说明可能出现能分解乳糖产酸的大肠菌群;胆盐可以抑制其它细菌生长繁殖;看杜氏小管中是否有气体,判断是否为分解乳糖产酸产气的大肠菌群。6、答:检验的稀释 乳糖发酵试验 证实证验EC肉汤发酵 伊红美蓝培养基 革兰氏染色 结果评定7、答:食品中沙门氏菌的检验方法有五个根本步骤:

6、1前增菌;2选择性增菌;3选择性平板别离沙门氏菌;4生化试验,鉴定到属;5血清学分型鉴定。8、答:三糖铁琼脂斜面培养基含有1葡萄糖作为发酵基质,且以酚红作为酸碱指示剂,如培养基由橘红转为黄色,表示有糖类发酵。测试时使用接种针先穿刺至底部,而后于斜面作划线接种,经培养18-24小时后,依情况判断糖类之发酵情形。可能为沙门氏菌的反响结果为: 1斜面碱性红色-底部呈黑色产气或不产气产气时会造成琼脂裂开:表示仅葡萄糖发酵。因微生物优先分解葡萄糖产酸,使培养基变黄,但因葡萄糖含量低,于斜面产生之微量酸立即氧化而呈碱性反响,同时培养基中的蛋白质也随之利用而产碱,所以斜面外表为红色;三糖铁琼脂培养基中亦含有

7、硫代硫酸钠作为产生硫化氢之基质,且含硫酸亚铁作为检测此无色产物之指示剂,经接种培养后,假设微生物有硫化氢产生,会与亚铁离子作用生成不溶性硫化亚铁之沉淀,进而使培养基变黑。9、答:食品中志贺氏菌的检验方法有五个根本步骤:1增菌培养;2别离培养;3初步生化试验;4血清学分型;5进一步生化试验。10、答:志贺氏菌在三糖铁琼脂上生长的现象:1斜面产碱仍为红色或粉红色;2底层产酸不产气,变黄色;3不产H2S,不出现黑色。志贺氏菌在葡萄糖半固体培养基上生长的现象:沿线生长,无动力。出现这些现象的原因是:志贺氏菌的生化反响特点是乳糖、蔗糖不发酵,葡萄糖产酸不产气(福氏志贺氏菌6型可产生少量气体),无动力。1

8、1、答:1葡萄糖铵:阳性者斜面上有正常大小的菌落生长,阴性者不生长或生长极微小的菌落。2西蒙氏柠檬酸盐:阳性者斜面上菌落生长,培养基由绿色转为蓝色,阴性者不生长。3赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶:阳性者为紫色,阴性者为黄色。4pH7.2尿素:阳性者为红色,阴性者为黄色。5KCN:浑浊为阳性,澄清为阴性。6水杨苷和七叶苷:阳性者产气。12、答:金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血平板上呈金黄色,有时也为白色,大而突出、圆形、不透明、外表光滑,周围有溶血圈。在B-P琼脂平板上菌落呈圆形,外表光滑、凸起、湿润,直径23 mm。灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色非白色的边缘,周围绕以不透明圈 沉淀,其外常有一清晰带。当用

9、接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。 13、答:吸取1:4新鲜兔血浆0.5 mL,放入小试管中,再参加培养24 h的金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤培养物0.5 mL振荡摇匀,置 361温箱或水浴内,每半小时观察一次,观察6 h,如呈现凝固,即将试管倒置或 倾斜时,呈现凝块者,被认为阳性结果。同时以阳性和阴性葡萄球菌株及肉汤作为对照。14、答:1形态与染色a、呈球形或卵圆形,直径0.5um-1um 链状排列长短不一。b、革兰氏染色阳性,衰老培养物常成阴性。c、无芽孢、无鞭毛、多数无夹膜 。2培养特性a、多数为需氧或兼性厌氧,少数为微需氧或专性厌氧。b、对营养要求高,普通培养基不能良好生长,需加血清液、腹

10、水等。c、最适温度37。d、在液体培养基中,溶血菌株,呈絮状或颗粒状沉淀生长上清下浊;不溶血菌球,均匀浑浊生长,如粪链菌。,针尖大小,菌落周围出现溶血环。(3)生化特性a、均分解葡萄糖产酸。b、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。c、能使牛奶产酸而不凝固,不液化明胶、不分解菊糖肺炎球菌分解葡萄糖。d、A群菌对杆菌肽敏感。15、答:1链激酶试验 吸取草酸钾血浆0.2mL,加0.8mL灭菌生理盐水,混匀,再参加链球菌18-24h361肉浸液肉汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL,混匀,置于361水浴10min,血浆混合物自行凝固,观察凝块重新完全溶解的时间,完全溶解为阳性,如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照,用的链激酶阳性的菌株做阳性对照。2杆菌肽敏感试验将分纯的乙型溶血性链球菌接种血平板,在划线处贴附杆菌肽纸片,36,18h,出现抑菌带为阳性,可推测为乙型溶血性链球菌。

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