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1、关于实验六血细胞计数及血涂片制作第1页,讲稿共28张,创作于星期日血细胞计数1熟悉并清洗计数板和盖玻片2稀释血液:血样采集:兔耳缘静脉采血 血样抗凝:肝素钠抗凝 血样稀释:如下第2页,讲稿共28张,创作于星期日实验操作 红细胞稀释液:生理盐水 白细胞稀释液:冰醋酸(盐酸)红细胞计数:0.9%NaCl 1.99mL+0.01mL血,稀释200倍 白细胞计数:1%HCL 0.38mL+0.02mL 血,稀释20倍3充池:(混匀,从中间取)4静置计数板 2min5计数 6计数原则:数上不数下、数左不数右7.计算:红细胞数/L=N*50*106*200=N*1010 白细胞数/L=N/4*10*20*
2、106=N*5*107第3页,讲稿共28张,创作于星期日血细胞计数计数板血细胞计数计数板第4页,讲稿共28张,创作于星期日第5页,讲稿共28张,创作于星期日第6页,讲稿共28张,创作于星期日第7页,讲稿共28张,创作于星期日第8页,讲稿共28张,创作于星期日第9页,讲稿共28张,创作于星期日第10页,讲稿共28张,创作于星期日1.保证计数板和盖玻片清洁;以防影响计数结果的准确性。2.一次完成充池,如充池过少、过多、有气泡或出现任何碎片,应拭净计数板及盖玻片后重新操作。3.充池后平放计数板,不能移动盖玻片。4.计数板中细胞如果严重分布不均,应重新充池计数。5.凡压线的细胞应按照数上不数下、数左不
3、数右的原则,避免漏数或重复计数。注意事项第11页,讲稿共28张,创作于星期日第12页,讲稿共28张,创作于星期日血液涂片的制备血液涂片的制备1 1、每份样本制作、每份样本制作3 3张血涂片。要求所用玻片清洁、干燥、无尘,大小为张血涂片。要求所用玻片清洁、干燥、无尘,大小为25 25 mm75mmmm75mm,厚度为,厚度为0.80.81.2mm1.2mm。并有明确标记。如果样本中白细胞数量少时,。并有明确标记。如果样本中白细胞数量少时,需要制备更多血涂片(如需要制备更多血涂片(如6 6张)。张)。2 2、使用、使用EDTAEDTAK2K2抗凝血液样本时,应在采集后抗凝血液样本时,应在采集后4
4、4小时内制备血涂片。在制片前,小时内制备血涂片。在制片前,样本应充分混匀。注意,样本不能冷藏。样本应充分混匀。注意,样本不能冷藏。3 3、用楔形技术制备血涂片。在玻片近一端、用楔形技术制备血涂片。在玻片近一端1/31/3处,加一滴(约处,加一滴(约0.05ml0.05ml)充分混匀的血液,握住另一张较狭窄的、边缘光滑的推片,以充分混匀的血液,握住另一张较狭窄的、边缘光滑的推片,以30304545角使血滴角使血滴沿推片迅速散开,快速、平稳地推动推片至玻片的另一端。沿推片迅速散开,快速、平稳地推动推片至玻片的另一端。4 4、在、在1 1小时内,用染液染色;或在小时内,用染液染色;或在1 1小时内,
5、用无水甲醇(含水量小时内,用无水甲醇(含水量3%3%)固定后染)固定后染色。色。第13页,讲稿共28张,创作于星期日推片技巧推片技巧 推推片片倾倾斜斜451,推推成成血血膜膜长长度度2535mm,宽宽度度1820mm,血血膜膜四四周周留留有有空空隙隙区区,血血膜膜终终尾尾离离玻玻片片终终端端至至少少10mm,血血膜膜均均匀匀,薄薄如如蝉蝉翼翼,尾尾端端形形如如弧弧状状,迅迅速速扇扇(摇摇)干干,血血膜膜具具有有头头、体体、尾尾不不同同厚厚薄薄区区域域。此此外外,涂涂片片时时,还还要要考考虑虑患患者者的的血血液液状状态态,如如贫贫血血程程度度、血血液液粘粘稠稠度度、WBC或或有有核核细细胞胞多多
6、少少等等因因素素,调调整整推推片片技技巧巧。第14页,讲稿共28张,创作于星期日第15页,讲稿共28张,创作于星期日第16页,讲稿共28张,创作于星期日第17页,讲稿共28张,创作于星期日血膜至玻片边缘约5mm血膜至玻片一端约为总长1/3血涂片头部,涂片厚血涂片体部的检查区域血涂片尾部,涂片太薄第18页,讲稿共28张,创作于星期日第19页,讲稿共28张,创作于星期日染色步骤染色步骤取新鲜血液涂片,晾干;取新鲜血液涂片,晾干;加刘加刘A A溶液(覆盖血涂片为宜),染色溶液(覆盖血涂片为宜),染色30s30s;加刘加刘B B溶液于溶液于A A液上(约为液上(约为A A的的2 2倍),以洗耳倍),以洗耳球吹出微风,使液面产生涟漪,染色球吹出微风,使液面产生涟漪,染色30s-30s-1min1min;水洗,干燥,镜检;水洗,干燥,镜检;第20页,讲稿共28张,创作于星期日第21页,讲稿共28张,创作于星期日第22页,讲稿共28张,创作于星期日第23页,讲稿共28张,创作于星期日第24页,讲稿共28张,创作于星期日第25页,讲稿共28张,创作于星期日第26页,讲稿共28张,创作于星期日第27页,讲稿共28张,创作于星期日4/2/2023感谢大家观看第28页,讲稿共28张,创作于星期日