实验八核糖核酸的组分鉴定(精品).ppt

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1、实验实验 八八 核糖核酸的组分鉴定核糖核酸的组分鉴定一、实验目的一、实验目的1.掌握核糖核酸组分鉴定的原理。2.学会鉴定核糖核酸组分的方法。核糖核酸的组成成分主要包括核糖、磷酸和碱基核糖、磷酸和碱基。5533RNA含量为干菌体的2.67%10.0%，二、实验原理二、实验原理2.2.在碱性环境下，嘌呤碱能与银离子反应形成沉淀，但此处碱在碱性环境下，嘌呤碱能与银离子反应形成沉淀，但此处碱性环境不能用一般的强碱，否则强碱会与银离子反应产生性环境不能用一般的强碱，否则强碱会与银离子反应产生沉淀而干扰结果判定。沉淀而干扰结果判定。3 3.核糖核酸与浓盐酸共热时，会发生降解，形成的核糖继而转核糖核酸与浓盐

2、酸共热时，会发生降解，形成的核糖继而转变成糠醛，后者可与变成糠醛，后者可与3 3，5-5-二羟基甲苯（地衣酚）反应，在二羟基甲苯（地衣酚）反应，在FeFe3+3+或或CuCu2+2+催化下，生成绿色复合物。催化下，生成绿色复合物。4.4.磷酸组分可与定磷试剂在酸性环境中反应，生成蓝色物质。磷酸组分可与定磷试剂在酸性环境中反应，生成蓝色物质。因此，可以根据以上性质，设计实验对各组分进行鉴定。因此，可以根据以上性质，设计实验对各组分进行鉴定。（1）1.5M硫酸硫酸；（2）0.1mol/L硝酸银溶液硝酸银溶液；（3）1mol/L浓氨水浓氨水；（4）三氯化铁三氯化铁-浓盐酸溶液浓盐酸溶液：（5）地衣酚

3、地衣酚-乙醇溶液乙醇溶液：（6）定磷试剂定磷试剂：17%的硫酸，10%的抗坏血酸和2.5%的钼酸铵。三、三、试剂试剂1 1.取取100mg100mg实验七中提取的酵母实验七中提取的酵母RNARNA，加入，加入1.5M H1.5M H2 2SOSO4 4溶液溶液5mL5mL，在沸水浴中加热，在沸水浴中加热10-2010-20分钟，使核酸充分分钟，使核酸充分水解后，用于对各组分的鉴定。水解后，用于对各组分的鉴定。2.2.磷酸组分鉴定：取水解液磷酸组分鉴定：取水解液1mL1mL，加入干净的试管中，加入干净的试管中，再加入等体积的新配制的定磷试剂再加入等体积的新配制的定磷试剂1mL1mL，混匀后，混匀

4、后，在在4545左右的水浴中加热左右的水浴中加热15-30min15-30min，观察颜色变化。，观察颜色变化。四、四、实验步骤实验步骤3.3.嘌呤碱的鉴定：取水解液嘌呤碱的鉴定：取水解液1mL1mL，加入干净的试管中，加入干净的试管中，加入过量的浓氨水，再加入加入过量的浓氨水，再加入1mL1mL的的0.1M0.1M的硝酸银溶液，的硝酸银溶液，观察沉淀的生成。观察沉淀的生成。4.4.核糖的鉴定：取水解液核糖的鉴定：取水解液1mL1mL，加入干净的试管中，加入干净的试管中，再加入再加入2mL2mL三氯化铁三氯化铁-浓盐酸溶液和浓盐酸溶液和0.2mL0.2mL苔黑酚苔黑酚-乙乙醇溶液，放置在沸水浴中加热醇溶液，放置在沸水浴中加热10-30min10-30min，观察颜色，观察颜色变化。变化。