PCV最新版.pdf

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1、PCV 一、病原学特征 PCV 是迄今已知最小病毒之一。直径 1720 nm，呈 20 面体对称结构，沉降系数 52 S，CsCL 浮密度 1.37 g/cm3。该病毒不具血凝性，对环境抵抗力较强，56 不能将其灭活，72 能存活 1530 min，可抵抗 pH3.0 的环境，经氯仿作用不失活，对苯酚、季胺类化合物、氢氧化钠和氧化剂等较敏感。病毒无囊膜，由衣壳蛋白和 DNA 基因组构成。基因组是一条共价结合形成的闭合环状单股负链 DNA，全长 1767 bp 或 1768 bp，分子量 8102 u。含有 11 个开放阅读框，ORF1-ORF11，大部分阅读框都有部分重叠，从而可以充分利用有限

2、的遗传物质。ORF1 和 ORF2 是其中最大的个阅读框。ORF1 位于正链上，负责编码病毒复制相关的蛋白(Rep)；ORF2 位于负链，主要编码病毒的结构蛋白(Cap)。在所有 PCV 中，Rep 均相对保守，PCV1 与 PCV2 相比较，Rep 蛋白氨基酸序列同源性达 86%，这也是 2 种血清型 PCV 病毒产生抗原交*反应的主要原因所在。Cap 由病毒感染细胞后，在各种宿主酶的参与下产生，与病毒的免疫有关。Truong 等利用免疫相关性 B 细胞表位，借助 ELISA 方法确定了 Cap 上的 3 个抗原表位，分别位于 65-87a a,113-139a a 和 193-207a a

3、 处，这 3 处对于 Cap 蛋白是特异的，为建立特异检测 PCV2 的血清学方法奠定了基础。二、流行病学 PCV2可造成断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、母猪繁殖障碍、断奶猪和育肥猪呼吸道疾病、猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、幼龄仔猪的先天性震颤等疾病。猪群发病率可达 50%以上，死亡率可能因发病率、猪场大小、管理方式和感染不同病毒株而有很大的差异，一般介于 5%70%之间。这其中，二次感染扮演极重要的角色。由于 PCV2 感染造成免疫抑制，使猪群抵抗能力下降，容易感染其他疾病。其中，最容易继发感染发生的是副猪嗜血杆菌病，又被称为 PCV2 的影子病。临床上，相当一部分 PCV2 感染猪

4、出现胸膜炎、心包炎、腹膜炎和关节炎。这些病变，不是猪 PMWS 的病理变化，而是副猪嗜血杆菌继发感染引起的多发性浆膜炎和关节炎。邓绍基经过长年观察，发现该病以混合感染居多，一般至少混合感染 23 种病原，严重的 46 种。主要有 HCV、RRSV、SIV、胸膜肺炎放线杆菌、链球菌、副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌、猪附红细胞体和猪弓形体。从国内相关文献的统计来看，与 PCV2 混合感染报道得最多的是猪瘟，依次是附红细胞体、蓝耳病、链球菌病、副猪嗜血杆菌病、伪狂犬病、细小病毒感染和气喘病。根据我们的临床体会，认为与 PCV2相关性最强，并且目前正在对猪场造成重大损失的疾病，主要是副猪嗜血杆菌、链球菌、附红

5、细胞体和喘气病。三、临床症状和病理变化 1.临床症状 PMWS 主要发生于 512 周龄断奶仔猪，临床表现为慢性消瘦、皮肤苍白、呼吸困难、厌食、精神沉郁、被毛粗乱，出现以咳嗽、喷嚏、呼吸加快及以呼吸困难为特征的呼吸器官障碍，10%20%猪皮肤和可视黏膜可见黄疸，猪群死亡率增加，有的还表现腹泻和中枢神经症状。PDNS 主要发生在断奶后育肥猪，1216 周龄多发。全身或部分皮肤有炎性分泌物渗出，形成点状或斑状丘疹。严重者出现跛行、发热、厌食以及体重减轻。临床上，全身性淋巴结肿大，最具一致性，每头 PCV2 感染猪都能观察到。以腹股沟淋巴结肿大最明显，严重者大如鸡卵。此外，我们在防治PCV2的过程中

6、，还观察到PCV2感染猪特有的睡姿异常症状。这种症状从发病初期到后期都能观察到，病猪前后肢着地，顶住腹部，身体扭曲，头部垂地，精神极度萎靡，状极痛苦。这种异常的睡姿，估计与胃溃疡引起胃部疼痛有关。2.病理变化 特征性病变为淋巴结、肝、脾、扁桃体、胸腺、派氏结出现肉芽肿性炎症，巨噬细胞和多核巨细胞的胞浆中经常会出现大量具有多样性的嗜碱性或两性葡萄球状包涵体。潘必星，蔡崇仁等，都曾观察到 PCV2 感染猪胃溃疡病变。虽然有学者认为，消化道溃疡可能与 PCV2 无关，但根据我们观察认为，胃溃疡病变，是除淋巴结肿大外，PCV2 感染猪另一个最具一致性的病变。几乎 100%的 PCV2 感染猪，都有这种

7、病理变化。这种病理变化，可能是 PCV2 感染猪睡姿异常、拉黄水、血便、以及全身性皮肤苍白的直接原因。肺部病变，是 PCV2 感染猪常见症状。但表现不一致，以间质性肺炎和增生性坏死性肺炎(PNP)为主。支气管和细支气管区常出现很多病灶，并可扩展到开放的气管层，出现纤维素性支气管炎和细支气管肺炎，肺泡间隔淋巴细胞和浆细胞数量减少，单核细胞和巨噬细胞渗入，使肺泡间隔明显增厚，很多肺泡内含有大量坏死碎片充满肥大细胞，使肺泡粘连。肾脏病理变化不常见，肉眼偶见白斑肾。间质性肾炎和肾盂炎，炎症周围出现纤维素性增生区。PCV2 肠炎，是临床较易忽视，且常被误诊为增生性肠炎的一种病变。猪群环境变化，气温骤变、

8、下雨、雷暴，以致饲料中添加药物剂量的改变，都可能使腹泻骤然增多。药物控制有一定疗效，但停药710 d 左右，又重暴发。PCV2 复制造成的淋巴衰竭，是该病毒直接或间接病理作用的表现，这种组织学变化，可能对肠道抗菌防卫功能有危害作用，因而可能使猪容易发生继发细菌感染。PCV2 肠炎的确诊，必须符合 3 个标准：1)腹泻；2)在集合淋巴结中有特征性组织学病变，而在淋巴结中则无；3)这些病变中存在 PCV2。3 个标准中，任何单独一个都不具有诊断意义。腹泻以及肉芽肿性肠炎和结肠炎的存在、组织学病变中存在丰富的 PCV2 DNA，这些现象，即为 PCV2 肠炎的提示。四、致病机理 很多学者认为单纯的

9、PCV2 感染并不致病。我国学者唐宁等做过有关 PCV2 攻毒试验，6 头 28 日龄健康，PCV2、PPV、PRV、PRRSV 及JFV 均呈阴性的杜洛克一长自杂交猪，经鼻腔接种 PCV2 病毒 5 mL，结果均复制不到典型的 PMWS 症状，仅有轻微的组织学病理变化。2007年 56 月，在珠海某猪场 PCV2 流行期间，我们曾试图用典型 PCV2 发病猪病料（主要是间质性肺炎肺脏）感染健康 猪，复制典型病料制作自家组织苗。连续 3 批共 15 头猪（每批 5 头），每头接种经组织破碎机破碎和生理盐水稀释的病猪典型间质性肺炎病料（每 300 g 病料稀释到 1000 mL）20 mL，均复

10、制不到间质性肺炎病变。该试验第 1批攻毒病料经阿奇星除菌（20 mL/1 000 mL）和血虫净除附红细胞体（1 g/1 000 mL）处理，攻毒猪无典型病变；第 2 和第 3 批的攻毒病料不经杀菌和除附红细胞体处理，直接用生理盐水稀释，先后经肌肉注射和滴鼻 2 种途径接种，仍然复制不到典型病变。1.病毒在机体内的复制和增殖 PCV2 病毒在细胞静止和激活期不能复制，病毒 DNA 复制需依靠细胞有丝分裂 S 期表达的蛋白。体内新细胞 DNA 合成，是 PCV2 合成的唯一条件，组织细胞的增殖提供了 PCV2 复制及扩散的最佳条件。PCV2 的这一病原学特征，可以很好地解释为什么 PCV2 的直

11、接致病力不强，以致很多学者认为 PCV2 不直接致病。由于 PCV2 病原复制需要严格的条件，如果被感染组织或器官细胞处于相对静止状态，细胞有丝分裂慢，不能为 PCV2 大量复制提供 S 期表达的蛋白，因而 PCV2感染猪处于不发病状态。但是，当外界应激因素存在时，机体免疫机能亢奋，免疫细胞有丝分裂加快，S 期表达的大量蛋白，为 PCV2 新 DNA 合成提供了有利条件，足以使 PCV2 直接致病，并可能对猪场造成巨大危害。PMWS 和 PDNS，是 PCV2 这一特征的典型体现。这 2 种症状，都可以归结为应激性疾病，PMWS 源于仔猪断奶的持续性应激，PDNS 则往往与突发性应激因素有关。

12、在 PCV2 感染严重的猪场，当气温突然升高，或头天晚上一场暴雨，经常都可以观察到次日 PDNS 骤然增多的现象。这种 PDNS，与人医上的湿疹非常相似。两者都是突然发病，全身性皮疹。据此推测：PDNS 的发病机理，应类似于湿疹。湿疹属一种变态反应，源于应激状态下血液组胺浓度的升高。PDNS 的发病条件，符合湿疹的发病条件应激；同时，由于 PCV2 对免疫器官的破坏，机体抗应激能力差，容易发生变态反应。只要我们能对 PDNS 患猪血液组胺浓度进行测定，就可以验证这一机理。前面提到的 PCV2 感染猪胃溃疡病变，可能也与 PCV2 这一特征有关。由于 PCV2 感染猪抗应激能力弱，对外界应激敏感

13、。应激条件下，交感神经和肾上腺髓质兴奋，去甲肾上腺素和肾上腺素异常升高，胃肠分泌及蠕动紊乱，消化吸收功能障碍，从而导致胃溃疡。多种因素影响 PCV2 在机体内复制，包括：1）病原性因素：PRRS、PPV、MHyo、SIV、APP、衣原体、链球菌、多杀性巴氏杆菌等病原体存在，都可以促进 PCV2 在体内复制；2）免疫佐剂：弗氏不完全佐剂，甚至其他佐剂(水包油、Carbopol、氢氧化铝)，都能使 PCV2 在体内复制加快；3）营养性因素：亚油酸能抑制圆环病毒在体内的增殖，维生素 E 不足可以导致 PCV2 感染严重。2.病毒在体内的分布 Romeo 发现，在胎儿期，心肌、肝实质细胞和巨噬细胞存在

14、 PCV2抗原。随着妊娠期的发展，感染白细胞数随之增加，其中，心肌细胞中病毒含量最高，说明心肌细胞是 PCV2 的主要靶细胞，是其复制的主要场所。随着胚胎成熟，被感染的心肌细胞以及肝细胞逐渐减少。至产后，PCV2 主要分布于巨噬细胞中（包括心、肝、肺、脾、腹股沟淋巴结等组织）。王忠田等曾从河北某猪场断奶后发生 PMWS 典型症状，并确诊为PMWS 的仔猪中，选取患猪 6 头剖杀，无菌采集心、肺、肝、肾、脾、淋巴结等组织样品作 PCR 检验。结果心脏中的检出率为 2/6，肝脏检出率为 3/6，脾脏、淋巴结和肾脏检出率为 6/6，肺脏检出率为5/6，据此认为 PCV2 在脾、淋巴结和肾脏中最高，肺

15、脏次之，心、肝中的含量较少。3.免疫抑制 2001 年，Sega les 等首先发现：PMWS 感染猪外周血液中单核细胞增加，T 细胞(主要是 CD4+)和 B 细胞减少。2002 年，Da rwi ch 等发现 PCV2 感染猪的 B 细胞和 T 细胞(主要是 CD4+和 CD8+)数量比阴性对照猪显著降低，严重临床症状和病理变化的 PCV2 感染猪 B 淋巴细胞和 CD8+T 细胞的数量明显低于症状和病变较轻者。PMWS 猪与健康猪对比，PMWS 猪细胞因子 mRNA 表达量改变，IL-10 mRNA 量上升；胸腺明显萎缩，且在淋巴组织中都观察到显微病变，表明 PMWS 猪 T细胞免疫应答

16、受损。2004 年，Da rwich 等进一步发现，PCV2 阳性猪细胞的 IL28 产量明显下降，IFN-减少，说明 PCV2 能损害 Th1 免疫应答。这些结果均表明：PCV2 感染猪形成炎症反应能力受损和细胞因子合成下降，即 PCV2 感染猪淋巴细胞和巨噬细胞激活途径存在缺陷。临床上，PCV2 的免疫抑制，几乎每个 PCV2 感染猪场都可以观察到。PCV2 感染病猪免疫器官淋巴结和脾脏，已经遭到严重破坏，免疫功能低下甚至完全丧失，猪群一旦受到其他病原袭击，势必暴发性流行，一发而不可收拾。五、疫苗及防治措施 Cap 蛋白，具有很好的免疫原性，用 PCV2 实验感染猪，3 周后就可以在血清样

17、品中检测到抗这个蛋白的抗体。据此推测，PCV2 疫苗的研制，应不存在很大的障碍。但从 1997 年发现 PCV2 病毒至今，足足 10 年时间，国际上几大著名疫苗生产厂家，到最近才开始向市场推广疫苗，而且疫苗的临床免疫效果，仍然存在很大争议。我国学者杨汉春曾于 2004 年预测：在近期内开发和研制有效PCV2 疫苗有很大的难度。在国外，最早批准 PCV2 疫苗使用的国家，是加拿大。该国食品检验署曾于 2006 年 2 月向 Mer ial（加拿大）颁发了疫苗进口许可，但研究证明，这些实验性疫苗的免疫效果非常有限。然而，美国猪兽医协会最近却宣称：PCV2 疫苗研究已经取得重大进展。加拿大 77

18、家猪场比较了母猪接种(Mer ial)疫苗获得的免疫效果，在接种疫苗半年后，猪群总体平均死亡率下降了 7.4 个百分点（由 12.6%下降至 5.2%）。在另一家 1 300 头母猪规模的猪场，将保育仔猪分成 2 组，试验组接种勃林格 PCV2 疫苗，对照组接种不含疫苗的安抚剂。结果免疫组综合死亡率仅为 2.4%，比对照组下降了 7.1个百分点。美国利用富道 PCV2 疫苗进行系列试验，6 个试验场的平均死亡率，从接种前的 7.7%下降到接种后的 1.8%。加拿大魁北克省和安大略湖省进行了 PCV2 疫苗（英特威）接种试验，参试的 35 000余头仔猪，未免疫猪的总体死亡率为 9.3%，免疫猪

19、死亡率仅为 2.1%。在国内，到目前为止，虽然一直没有正式的 PCV2 疫苗可供使用，但养猪生产者早已在实践中总结出一套行之有效的方法，有效地预防和控制 PCV2。20062007 年的无名高热症，之所以小型散养户发病多，损失大，而规模化猪场发病少，损失小，其中一个重要原因，就是很多规模化猪场都使用了自家组织苗。邓绍基通过观察和统计 8 个猪场发现：应用自家组织苗配合药物对猪高热综合征进行防治，8 个场健康猪、假定健康猪、发病猪共计 3 334 头，有效 3 044 头，有效率 91.3%。刘军等经过观察一个暴发 PCV2 的猪场，假定健康的 800头仔猪、215 头母猪和 1 021 头育肥猪，在注射自家组织苗后，未再发生 PCV2 临床症状，全场猪生长良好。此外，周彦飞，吴胜莲，杨亮宇等，相继报道了他们防治 PCV2 的经验。普遍认为，采取 PCV2 典型的病变器官制成自家灭活苗，对于预防 PCV2，效果良好。自家组织苗预防 PCV2，已成为我国养猪业的一大趋势。然而，