检验基础之尿液分析仪及其临床应用.doc

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1、尿液分析仪及其临床应用尿液分析仪及其临床应用（1）分类了解（2）检测原理掌握（3）尿液分析仪检测参数熟练掌握（4）临床应用及注意事项掌握（5）质量控制掌握1.尿液干化学分析仪（6）仪器维护与保养掌握（1）检测原理了解（2）检测参数了解2.尿有形成分分析仪（3）临床应用了解（1）尿干化学分析仪检查与显微镜检查掌握尿液分析仪及其临床应用3.方法学评价（2）尿沉渣分析仪检查与显微镜检查掌握尿液干化学分析仪尿液干化学分析仪（一）分类干化学试带操作方便，测定迅速，利用肉眼观察试带中颜色的变化与标准色板进行比较，得出相应数值，结果易受主观因素影响。尿液分析仪（又称尿干化学分析仪）的出现，给临床实验室尿液分

2、析带来了一个飞跃。随着高科技及计算机技术的高度发展和广泛应用，尿液分析已逐步由原来的半自动分析发展到全自动分析，检测项目由原来的单项分析发展到多项组合分析，尿液分析由此进人了一个崭新阶段。（二）检测原理1.尿液分析仪组成尿液分析仪通常由机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。2.尿液分析仪检测试带试带以滤纸为载体，将各种试剂成分浸渍后干燥，作为试剂层，再在表面覆盖一层纤维膜，作为反射层。尿液浸入试带后与试剂发生反应，产生颜色变化。多联试带是将多种检测项目的试剂块，按一定间隔、顺序固定在同一条带上的试带。使用多联试带，浸入一次尿液可同时测定多个项目。多联试带的基本结构采用了多层膜结构：第一层尼龙

3、膜起保护作用，防止大分子物质对反应的污染，保证试带的完整性；第二层绒制层，包括碘酸盐层和试剂层，碘酸盐层可破坏维生素 C 等干扰物质，试剂层与尿液所测定物质发生化学反应；第三层是固有试剂的吸水层，可使尿液均匀、快速地浸入，并能抑制尿液流到相邻反应区；最后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支持体。有些试带无碘酸盐层，但相应增加了 1 块检测维生素 C 的膜块，以进行某些项目的校正。不同型号的尿液分析仪使用其配套的专用试带，且测试项目试剂块的排列顺序是不相同的。通常情况下，试带上的试剂块要比测试项目多一个空白块，有的甚至多参考块又称固定块。空白块的目的是为了消空白块的目的是为了消除尿液本身的颜色在试剂

4、块上分布不均等所产生的测试误差，以提高测试准确性除尿液本身的颜色在试剂块上分布不均等所产生的测试误差，以提高测试准确性；固定块的目的是在测试过程中，使每次测定试剂块的位置准确，减低由此而引起的误差。3.尿液分析仪检测原理 试剂模块颜色深浅本质：光吸收和光反射相关。本质：光吸收和光反射相关。颜色越深，光吸收越大。颜色越深，光吸收越大。光反射越小，反射率越小，被测成分浓度越高光反射越小，反射率越小，被测成分浓度越高。式中：R，反射率；Tm，试剂膜块对测定波长的反射强度；Ts，试剂膜块对参考波长的反射强度；Cm，标准膜块对测定波长的反射强度；Cs，标准膜块对参考波长的反射强度。不同型号的尿液分析仪使

5、用其配套的专用试带，且测试项目试剂块的排列顺序是不相同的。通常情况下，试带上的试剂块要比测试项目多一个空白块，有的甚至多参考块又称固定块。空白块的目的是为了消除尿液本身的颜色在试剂块上分布不均等所产生的测试误差，以提高测试准确性；固定块的目的是在测试过程中，使每次测定试剂块的位置准确，减低由此而引起的误差。（三）检测参数8 项PRO BLD GLU KET NIT BIL URO pH 9 9 项项 8 8 项项+LEU+LEU1010 项项 9 9 项项+ + SGSG1111 项项 1010 项项+VitC+VitC尿试纸法的项目和反应原理项 目 代号 反应原理酸碱度 pH pH 指示剂蛋

6、白质PRO指示剂的蛋白质误差法葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶尿隐血BLDHb 类过氧化酶法胆红素 BIL偶氮反应法尿胆原 URO 醛反应法酮体 KET 亚硝基铁氰化钠法亚硝酸盐NIT亚硝酸盐还原法白细胞 LEU 白细胞酯酶法（粒细胞）比密 SG 多聚电解质离子解离法维生素 C VitC 还原法（四）临床应用1.酸碱度PH 的检测主要用于了解体内酸碱平衡情况，监测泌尿系统患者的临床用药情况，了解尿 pH 变化对试带上其他膜块区反应的干扰作用。检测时应使用新鲜尿液标本。标本放置过久，因尿液中细菌繁殖，分检测时应使用新鲜尿液标本。标本放置过久，因尿液中细菌繁殖，分解尿素产生氨，使尿液呈碱性；或尿液中解

7、尿素产生氨，使尿液呈碱性；或尿液中 C02C02 自然扩散造成的丢失，使自然扩散造成的丢失，使 pHpH 增高增高。检测时应严格按照使用说明书操作。试带在尿液中浸渍时间过长，有使尿 pH 减低的趋势，出现假阴性结果。2.比密主要用于了解尿液中固体物质的浓度，估计肾脏的浓缩功能。在出入量正常的情况下，比密增高表示尿液浓缩，比密减低则反映肾脏浓缩功能减退。须注意：尿液标本必须新鲜，不能含有强酸、强碱等物质。使用干化学尿比密测定时，变化范围为 pH6.27.0。当尿液当尿液 pH7.0pH7.0 时，造成结果偏低，应在干化学时，造成结果偏低，应在干化学测定结果的基础上增加测定结果的基础上增加 0.0

8、050.005，作为由于碱性尿损失的补偿。，作为由于碱性尿损失的补偿。干化学尿比密测定结果表达值的变化范围在 1.0001.030，间隔值较大（0.005），不能反映较小的比密变化。对于比密范围在 1.0001.004 的新生儿尿液，也不宜使用此法。尿液中蛋白或糖浓度增加将使比密结果增加；尿素大于 10g/L 或 pH 小于 6.5 时，致比密结果减低。3.尿糖尿糖检测主要用于内分泌性疾病如糖尿病及其他相关疾病的诊断与治疗监测等。（1）干化学尿糖检测原理是基于葡萄糖氧化酶的酶促反应，只与葡萄糖反应，特异性强；班氏法是基于铜还原的原理，尿液内所有还原糖（葡萄糖、乳糖、半乳糖等）和所有还原性物质（

9、如维生素 C 等）都起反应。用干化学法测定结果为阴性的标本，如用班氏法则可能呈现阳性结果。用干化学法测定结果为阴性的标本，如用班氏法则可能呈现阳性结果。（2）尿液在低葡萄糖浓度（14mmol/L）时，维生素维生素 C C 与试带中的试剂发生竞争性抑制反应，使干化与试带中的试剂发生竞争性抑制反应，使干化学法产生假阴性反应，而班氏法产生假阳性的结果。学法产生假阴性反应，而班氏法产生假阳性的结果。（3）尿液被过氧化物、次氯酸盐、强氧化性清洁剂污染可使尿糖呈现假阳性结果；尿液中含有 L-多巴、大量水杨酸盐、氟化钠、维生素 C 超过 500mg/L、尿酮体超过尿酮体超过 0.4g/L0.4g/L 或尿比

10、密过高，则将使尿糖呈现或尿比密过高，则将使尿糖呈现假阴性结果。假阴性结果。4.尿蛋白质主要用于肾脏疾病及相关疾病的诊断、治疗、预后等。（1）尿液的 pH：由于蛋白测定采用指示剂的蛋白质误差原理，因此，尿液的 pH 是影响测试结果的重要因素之一。当患者服用奎宁、奎宁丁、嘧啶等药物，或尿液中含有聚乙烯、吡咯酮、氯己定、磷酸盐、季铵盐消毒剂等时，引起尿液呈强碱性（引起尿液呈强碱性（pH9.0pH9.0），超过了试带的缓冲能力，使干化学法出现假阳性结果；），超过了试带的缓冲能力，使干化学法出现假阳性结果；当尿液当尿液 PH500mg/L）、亚硝酸盐、或含有盐酸苯偶氮吡啶代谢产物时，可使胆红素检测呈现假

11、阴性；尿液中含有吩噻嗪类或吩嗪类药物时，可使胆红素呈现假阳性。尿液中一些内源性物质如胆色素原、吲哚、胆红素等和一些药物如吩噻嗪类、维生素 K、磺胺药等，因颜色干扰，尿胆原检测时呈现假阳性；而亚硝酸盐、重氮药物、对氨基水杨酸则在尿胆原检测时呈现假阴性。正常人尿胆原排出量以下午 24 时达最高峰；为提高阳性检出率，可预先给患者服用碳酸氢钠以碱化尿液。7.尿隐血主要用于肾脏、泌尿道疾病及其他相关疾病的诊断、治疗。有助于血管内溶血性疾病的诊断。尿液中含有肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂或菌尿，可使干化学法尿隐血测定呈现假阳性结果；尿液中大量维尿液中大量维生素生素 C C 的存在（的存在（100mg/L1

12、00mg/L），可竞争性抑制反应，产生假阴性结果。），可竞争性抑制反应，产生假阴性结果。8.亚硝酸盐尿亚硝酸盐是用于尿路细菌感染的快速筛检试验是用于尿路细菌感染的快速筛检试验。尿亚硝酸盐试验是细菌感染的指标，阳性结果的产生取决于 3 个条件：尿液中的致病菌须含有硝酸盐还原酶。体内有适量硝酸盐的存在。尿液在膀胱内有足够的停留时间（4h）且排除药物等干扰因素。同时，如果试验阳性的 3 个条件不能满足，加之诸多因素可导致假阴性，因此，检测结果阴性并不能排除菌尿的可能。尿液中尿胆原、维生素 C、尿 pH 大于 6、尿量过多，都有可能造成亚硝酸盐假阴性结果。9.白细胞检测主要用于肾脏、泌尿道疾病的诊断、

13、治疗等主要用于肾脏、泌尿道疾病的诊断、治疗等。干化学法白细胞检测采用中性粒细胞酯酶法。中性粒细胞胞质中含有酯酶，而单核细胞、淋巴细胞胞质中则无酯酶而单核细胞、淋巴细胞胞质中则无酯酶，因此，干化学白细胞检测方测方法只对粒细胞敏感法只对粒细胞敏感。尿液标本污染甲醛、或高浓度胆红素、或使用某些药物如呋喃妥因时，干化学法呈现假阳性结果。尿液中含维生素尿液中含维生素 C C、或尿液中含有大剂量先锋霉素、或尿液中含有大剂量先锋霉素 IVIV、庆大霉素等药物、或尿蛋白大于、庆大霉素等药物、或尿蛋白大于5g/L5g/L 时，干化学法呈现假阴性结果时，干化学法呈现假阴性结果。10.维生素 C 干化学法：采用还原

14、法。尿液中维生素尿液中维生素 C C 含量的高低对血红蛋白、胆红素、葡萄糖及亚含量的高低对血红蛋白、胆红素、葡萄糖及亚硝酸盐可产生严重的负干扰，干扰的程度随维生素硝酸盐可产生严重的负干扰，干扰的程度随维生素 C C 浓度的增加而增加浓度的增加而增加。因此，维生素 C 检测的作用在于提示其他项目检测结果的准确性，防止假阴性的出现，使各项干化学检测结果更准确、更科学。尿有形成分分析仪（一）检测原理应用流式细胞术和电阻抗分析的原理：尿液中有形成分经荧光色素（如菲啶与羧花氰等）染料染色后，在鞘流液的作用下，形成单列、快速通过氩激光检测区，仪器检测荧光、散射光和电阻抗的变化。前向散射光强度（Fsc） ：

15、细胞大小前向散射光脉冲宽度（Fscw） ：细胞长度荧光强度（FI）：染色质强度前向荧光脉冲宽度（FLW） ：染色质长度电阻-电压：体积 脉冲信号数：细胞数当仪器在捕获了荧光强度（Fl）、前向荧光脉冲宽度（Flw）、前向散射光强度（Fsc）、前向散射光脉冲宽度（Fscw）、电阻抗信号后，综合识别和计算得到了相应细胞的大小、长度、体积和染色质长度等资料，并作出红细胞、白细胞、细菌、管型等的散点图及定量报告。（二）检测参数1.定量参数主要包括：红细胞（RBC/l）、白细胞（WBC/l）、上皮细胞（EC/l）、管型（CAST/l）、细菌（BACT/l）。2.标记参数主要包括：病理管型（Path.CAS

16、T）、小圆上皮细胞（SRC）、类酵母细胞（YLC）、结晶（XTAL）和精子（SPERM）。红细胞信息主要提示红细胞的均一性，仪器还提供白细胞平均前向散射强度（WBC-MFl）和电导率指标。（三）临床应用1.红细胞尿沉渣红细胞数量可帮助血尿有关疾病的诊断和鉴别诊断红细胞尿沉渣红细胞数量可帮助血尿有关疾病的诊断和鉴别诊断，如肾炎、膀胱炎、肾结核、肾结石等；通过动态观察这类患者尿红细胞数量的变化，可以确定患者的治疗效果和判断预后。2.白细胞与细菌尿沉渣白细胞数量可协助诊断和鉴别诊断泌尿系统的感染、膀胱炎、结核、肿瘤等疾白细胞与细菌尿沉渣白细胞数量可协助诊断和鉴别诊断泌尿系统的感染、膀胱炎、结核、肿瘤

17、等疾病病；动态观察患者尿白细胞数量的变化，有助于确定患者的治疗效果和预后有助于确定患者的治疗效果和预后。泌尿系感染时，患者尿液中除了有白细胞数量上的增高，常同时存在细菌。因此，白细胞、细菌组合检查对泌尿系感染的诊断有着重要意义。3.上皮细胞尿沉渣分析仪能给出上皮细胞的定量结果，并标记出是否含有小圆上皮细胞，但是由于仪器所标识的小圆上皮细胞是指细胞大小与白细胞相似或略大、形态较圆的上皮细胞，并不能准确区分肾小管上皮细胞、中层或底层移行上皮细胞，因此，当上皮细胞数量明显增多时，需用显微镜检查尿沉渣进行准确分类。4.管型正常尿液中，可见极少量的透明管型。管型对诊断肾脏实质性病变有重要价值管型对诊断肾

18、脏实质性病变有重要价值。由于管型的种类较多，且形态特点各不相同，仪器只能区分出透明管型和病理管型。因此，当仪器标明出现病理管型时，需进一步用显微镜检查尿沉渣进行准确分类。5.其他流式细胞术尿沉渣分析仪，还能标记类酵母细胞（YLC）、结晶（XTAL）和精子（SPERM）。结晶的种类较多，其分布区域可能与红细胞有所重叠，如尿酸盐，但因结晶的中心分布不稳定，仪器可据此将它与红细胞区分。当仪器提示有酵母细胞、精子细胞和结晶时，均应离心镜检。电导率反映尿中粒子的电荷，仅代表总粒子中带电荷的部分即电解质，与反映尿液中粒子总数量的尿渗量既有关系又有差别。如患者尿液电导率长期偏高，表明尿液中存在大量易形成结石

19、的电解质，应警惕发生结石的可能。方法学评价（一）尿干化学分析仪检查与显微镜检查1.尿干化学分析仪（1）主要优点：标本用量少（1020ml）；检测速度快、检测项目多，最快 10 余秒可完成 1 条多联试带 11 个项目的检测；检测准确性、重复性好；适用于大批量普查。（2）主要不足：不能替代对病理性尿标本的显微镜检查，特别是管形、结晶、上皮细胞、淋巴细胞、单核细胞等其他有形物质；尿蛋白试带以检测清蛋白为主，对球蛋白不敏感，故不适用于肾病患者尿蛋白试带以检测清蛋白为主，对球蛋白不敏感，故不适用于肾病患者；易受多种药物或其他外源性物质或人为因素等因素的干扰，引起检测结果的错误，出现假阳性或假阴性；多联

20、试带成本较昂贵、保存和使用要求高。2.尿液干化学分析仪与显微镜检查方法与传统显微镜检查是两种原理不同的检验技术，在临床上中可能出现化学法分析结果与镜检结果不相符的情形.（1）白细胞：分析仪法（分析仪法（+ +），镜检法（），镜检法（- -）：可能的解释为尿液在膀胱贮存时间过长或其他原因）：可能的解释为尿液在膀胱贮存时间过长或其他原因致使白细胞破坏，中性粒细胞酯酶释放到尿中所致。致使白细胞破坏，中性粒细胞酯酶释放到尿中所致。分析仪法（-），镜检法（+）：这种情形多发生在肾移植患者发生排异反应时，尿中以淋巴细胞为这种情形多发生在肾移植患者发生排异反应时，尿中以淋巴细胞为主，另外尿液中以单核细胞为主

21、时也会出现此结果主，另外尿液中以单核细胞为主时也会出现此结果，因干化学法检测的是尿中完整的及溶解的中性粒细胞，中性粒细胞，而与淋巴细胞及单核细胞不起反应而与淋巴细胞及单核细胞不起反应，此时，应以显微镜检查为准。（2）红细胞：分析仪法（+），镜检法（-）：这种情形可由于尿液中红细胞常被破坏而释放出血红蛋白，多发生于肾病患者，或某些患者尿液中含有对热不稳定酶、肌红蛋白或菌尿，引起红细胞干化学法测定结果的假阳性；将尿液煮沸冷却后再测试可以排除对热不稳定酶的影响。分析仪法（-），镜检法（+）：这种情形一般很少，但可发生在尿液中含有大量维生素C（100mg/L）或试带失效时；若使用尿十一联试带，可通过观

22、察维生素 C 的含量来加以判别。对于上述干化学法与显微镜镜检所出现的矛盾，要结合临床综合分析，动态观察，合理解析实验结果。【小 结】尿液分析仪及其临床应用尿液干化学分析仪1.多联试带多层膜，尼龙保护防污染碘酸试剂绒制层，碘酸破坏维 C 扰试剂物质化学应，吸水抑制相邻区塑料作为支持体2.颜色深浅与尿液物质浓度成正比空白块目的消除尿液本身的颜色在试剂块上分 布不均提高测试准确性3.8 项酸碱蛋白葡萄糖、酮体胆红素尿胆原红细胞血红蛋白隐血亚硝酸9 项=8 项+（LEU）；10 项=9 项+（SG） 11 项=10 项+（VitC）高浓度 VitC 使得葡萄糖、隐血、胆红素、亚硝酸盐、白细胞呈假阴性；

23、班氏假阳试带假阴续表尿有形成分分析仪1.定量参数主要包括：红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌2.标记参数主要包括：病理管型、小圆上皮细胞、类酵母细胞、结晶和精子方法学评价分析仪法（+），镜检法（-）：白细胞，尿液在膀胱时间过长使白细胞破坏，中性粒细胞酯酶释放到尿中所致；红细胞，由于尿液中红细胞常被破坏而释放出血红蛋白，多发生于肾病患者，尿中含有对热不稳定酶、肌红蛋白或菌尿。分析仪法（-），镜检法（+）：白细胞，肾移植排异反应，尿中以 L 为主，另外尿液中以 M 为主；红细胞，可发生在尿液中含有大量维生素 C（100mg/L）或试带失效。【习题】尿液干化学试带 11 项是在 10 项的基础上加

24、上A.白细胞酯酶B.比密C.维生素 CD.亚硝酸盐E.pH正确答案C答案解析尿液干化学试带 11 项是在 10 项的基础上加上维生素 C。尿试带法是检测尿中白细胞中哪类细胞的酯酶A.单核细胞B.中性粒细胞C.淋巴细胞D.嗜酸性粒细胞E.嗜碱性粒细胞正确答案B答案解析尿试带法是检测尿中白细胞中中性粒细胞的酯酶。维生素 C（抗坏血酸）可使下列哪一种测定产生假阳性A.酶法葡萄糖测定B.班氏法葡萄糖测定C.酶法胆固醇测定D.酶法三酰甘油测定E.JG 法测定血清胆红素正确答案B答案解析维生素 C（抗坏血酸）可使班氏法葡萄糖测定假阳性。下列不属于尿有形成分分析仪的定量参数是A.红细胞B.白细胞C.上皮细胞D.管型E.结晶正确答案E答案解析尿有形成分分析仪的定量参数包括：红细胞、白细胞、上皮细胞、管型和细菌。