高级中学生物选修1课本答案汇总.doc

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1、 专题专题 1 传统发酵技术的应用传统发酵技术的应用 课题课题 1 果酒和果醋的制作果酒和果醋的制作 一、果酒的制作是否成功一、果酒的制作是否成功 发酵后取样,通过嗅味和品尝进行初步鉴定。此外,还可用显微镜观察酵母菌,并用重发酵后取样,通过嗅味和品尝进行初步鉴定。此外,还可用显微镜观察酵母菌,并用重 铬酸钾检验酒精的存在。如果实验结果不理想,请学生分析失败原因,然后重新制作。铬酸钾检验酒精的存在。如果实验结果不理想,请学生分析失败原因,然后重新制作。 二、果醋的制作是否成功二、果醋的制作是否成功 首先通过观察菌膜的形成、嗅味和品尝进行初步鉴定,再通过检测和比较醋酸发酵前后首先通过观察菌膜的形成

2、、嗅味和品尝进行初步鉴定,再通过检测和比较醋酸发酵前后 的的 pH 作进一步的鉴定。此外,还可以通过在显微镜下观察发酵液中是否有醋酸菌,并作进一步的鉴定。此外,还可以通过在显微镜下观察发酵液中是否有醋酸菌,并 统计其数量作进一步鉴定。统计其数量作进一步鉴定。 三、旁栏思考题三、旁栏思考题 1.你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗?为什么?你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗?为什么? 答:应该先冲洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染答:应该先冲洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染 的机会。的机会。 2.你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染?你

3、认为应该从哪些方面防止发酵液被污染? 提示:需要从发酵制作的过程进行全面的考虑。例如,榨汁机、发酵装置要清洗干净;提示:需要从发酵制作的过程进行全面的考虑。例如,榨汁机、发酵装置要清洗干净; 每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。 3.制葡萄酒时,为什么要将温度控制在制葡萄酒时,为什么要将温度控制在 1825 ?制葡萄醋时,为什么要将温度控制在?制葡萄醋时,为什么要将温度控制在 3035 ? 答:温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。答:温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。20 左右最适合酵母菌繁殖。因此需要将温左右最适合酵母菌繁殖。因此需要将温 度

4、控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为度控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为 3035 ,因此要,因此要 将温度控制在将温度控制在 3035 。 4.制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气?制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气? 答:醋酸菌是好氧菌,在将酒精变为醋酸时需要氧的参与,因此要适时向发酵液中充气。答:醋酸菌是好氧菌,在将酒精变为醋酸时需要氧的参与,因此要适时向发酵液中充气。四、资料发酵装置的设计讨论题四、资料发酵装置的设计讨论题 请分析此装置中的充气口、排气口和出料口分别有哪些作用。为什么排气口要通过一个请分析此装置中的充气口、排气口和出料口分

5、别有哪些作用。为什么排气口要通过一个 长而弯曲的胶管与瓶身连接?结合果酒、果醋的制作原理,你认为应该如何使用这个发长而弯曲的胶管与瓶身连接?结合果酒、果醋的制作原理,你认为应该如何使用这个发 酵装置?酵装置? 答:充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的;排气口是在酒精发酵时用来排出答:充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的;排气口是在酒精发酵时用来排出 CO2 的;出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的的;出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的 是防止空气中微生物的污染,其作用类似巴斯德的鹅颈瓶。使用该装置制酒时,应该关是防止

6、空气中微生物的污染,其作用类似巴斯德的鹅颈瓶。使用该装置制酒时,应该关 闭充气口;制醋时,应将充气口连接气泵,输入氧气。闭充气口;制醋时,应将充气口连接气泵,输入氧气。 五、练习五、练习 2.提示:大规模生产时需要进行更为全面周详的考虑,如原料的来源与选择、菌种的培提示:大规模生产时需要进行更为全面周详的考虑,如原料的来源与选择、菌种的培 育与选择、发酵的设备、发酵条件的自动化控制,以及如何严格控制杂菌污染;等等。育与选择、发酵的设备、发酵条件的自动化控制,以及如何严格控制杂菌污染;等等。 此外,无论是葡萄酒或葡萄醋,实验时所检测的发酵液,并非商品意义上的产品。在实此外,无论是葡萄酒或葡萄醋,

7、实验时所检测的发酵液,并非商品意义上的产品。在实 际生产中还需沉淀过滤、灭菌装瓶等获得成品酒或醋。葡萄酒还需在一定设施和条件下际生产中还需沉淀过滤、灭菌装瓶等获得成品酒或醋。葡萄酒还需在一定设施和条件下 (如橡木桶和地窖)进行后续发酵,以获得特定的风味和色泽。(如橡木桶和地窖)进行后续发酵,以获得特定的风味和色泽。 课题课题 2 腐乳的制作腐乳的制作 一、是否完成腐乳的制作一、是否完成腐乳的制作 学生是否完成腐乳的制作依据是:能够合理地选择实验材料与用具;前期发酵后豆腐的学生是否完成腐乳的制作依据是:能够合理地选择实验材料与用具;前期发酵后豆腐的 表面长有菌丝,后期发酵制作基本没有杂菌的污染。

8、表面长有菌丝,后期发酵制作基本没有杂菌的污染。 二、腐乳质量的评价二、腐乳质量的评价 制作成功的腐乳应该具有以下特点:色泽基本一致、味道鲜美、咸淡适口、无异味、块制作成功的腐乳应该具有以下特点:色泽基本一致、味道鲜美、咸淡适口、无异味、块 形整齐、厚薄均匀、质地细腻、无杂质。形整齐、厚薄均匀、质地细腻、无杂质。 三、答案和提示三、答案和提示 (一)旁栏思考题(一)旁栏思考题 1.你能利用所学的生物学知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事?你能利用所学的生物学知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事? 答:豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝,在豆腐中还有匍匐菌答:豆腐上生长的白毛是毛霉的白色

9、菌丝。严格地说是直立菌丝,在豆腐中还有匍匐菌 丝。丝。 2.王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来? 答:盐能防止杂菌污染,避免豆腐腐败。答:盐能防止杂菌污染,避免豆腐腐败。 3.我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳? 答:含水量为答:含水量为 70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形。左右的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形。 4.吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的“皮皮”。这层。这层“皮皮”是怎样形成的呢?它是怎样形成的呢?它

10、 对人体有害吗?它的作用是什么?对人体有害吗?它的作用是什么? 答:答:“皮皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝),它能形成腐乳的是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝),它能形成腐乳的“体体” ,使腐乳成形。,使腐乳成形。“皮皮”对人体无害。对人体无害。 (二)练习(二)练习 1.答:越接近瓶口,杂菌污染的可能性越大,因此要随着豆腐层的加高增加盐的用量,答:越接近瓶口,杂菌污染的可能性越大,因此要随着豆腐层的加高增加盐的用量, 在接近瓶口的表面,盐要铺厚一些,以有效防止杂菌污染。在接近瓶口的表面,盐要铺厚一些,以有效防止杂菌污染。 课题课题 3 制作泡菜制作泡菜 一、泡菜腌

11、制的质量如何一、泡菜腌制的质量如何 可以根据泡菜的色泽和风味进行初步的评定,还可以在显微镜下观察乳酸菌形态,比较可以根据泡菜的色泽和风味进行初步的评定,还可以在显微镜下观察乳酸菌形态,比较 不同时期泡菜坛中乳酸菌的含量。不同时期泡菜坛中乳酸菌的含量。 二、是否进行了及时细致的观察与记录二、是否进行了及时细致的观察与记录 在实验进行过程中,应及时对泡菜中亚硝酸盐含量进行鉴定,比较不同时期亚硝酸盐含在实验进行过程中,应及时对泡菜中亚硝酸盐含量进行鉴定,比较不同时期亚硝酸盐含 量的变化及其对泡菜质量的影响。量的变化及其对泡菜质量的影响。 三、旁栏思考题三、旁栏思考题 1.为什么含有抗生素的牛奶不能发

12、酵成酸奶?为什么含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶? 答:酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用。抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因答:酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用。抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因 此含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。此含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。 2.为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜? 答:有些蔬菜,如小白菜和萝卜等,含有丰富的硝酸盐。当这些蔬菜放置过久发生变质答:有些蔬菜,如小白菜和萝卜等,含有丰富的硝酸盐。当这些蔬菜放置过久发生变质 (发黄、腐烂)或者煮熟后存放太久时,蔬菜中

13、的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,(发黄、腐烂)或者煮熟后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐, 危害人体健康。危害人体健康。 3.为什么泡菜坛内有时会长一层白膜?你认为这层白膜是怎么形成的?为什么泡菜坛内有时会长一层白膜?你认为这层白膜是怎么形成的? 答:形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,答:形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富, 其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌繁殖。其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌繁殖。 四、练习四、练习 2.答:果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精发酵,果醋的制作利用的是醋酸菌将

14、酒精答:果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精发酵,果醋的制作利用的是醋酸菌将酒精 转变为醋酸的代谢,腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶类,泡菜的制作利转变为醋酸的代谢,腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶类,泡菜的制作利 用的是乳酸菌的乳酸发酵。用的是乳酸菌的乳酸发酵。 传统发酵技术都巧妙地利用了天然菌种,都为特定的菌种提供了良好的生存条件,最终传统发酵技术都巧妙地利用了天然菌种,都为特定的菌种提供了良好的生存条件,最终 的发酵产物不是单一的组分,而是成分复杂的混合物。的发酵产物不是单一的组分,而是成分复杂的混合物。 专题专题 2 微生物的培养与应用微生物的培养与应用 课题课题 1

15、 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 一、培养基的制作是否合格一、培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温如果未接种的培养基在恒温箱中保温 12 d 后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的, 否则需要重新制备。否则需要重新制备。 二、接种操作是否符合无菌要求二、接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点, 则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无则说明接种操作是符合要求的

16、;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无 菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。 三、是否进行了及时细致的观察与记录三、是否进行了及时细致的观察与记录 培养培养 12 h 与与 24 h 后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时观察记录的同学会发现后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时观察记录的同学会发现 这一点,并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态这一点,并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态 度与习惯。度与习惯。 四、答案和提示四、答案和提示 (一)旁栏思考题(一)旁

17、栏思考题 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手实验操作者的双手 答:(答:(1)、()、(2)需要灭菌

18、;()需要灭菌;(3)需要消毒。)需要消毒。 (二)倒平板操作的讨论(二)倒平板操作的讨论 1.培养基灭菌后,需要冷却到培养基灭菌后,需要冷却到 50 左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养 基的温度?基的温度? 提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就 可以进行倒平板了。可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。答:通过灼烧灭菌,防

19、止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒 置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造 成污染。成污染。 4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能 用来培养微生物吗?为什

20、么?用来培养微生物吗?为什么? 答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板 培养微生物。培养微生物。 (三)平板划线操作的讨论(三)平板划线操作的讨论 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然 需要灼烧接种环吗?为什么?需要灼烧接种环吗?为什么? 答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的

21、微生物污染培养物;每次 划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时, 接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时 菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残 留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。 2.在灼烧接种环之后,为什么

22、要等其冷却后再进行划线?在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线? 答:以免接种环温度太高,杀死菌种。答:以免接种环温度太高,杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线? 答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始, 能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌 落

23、。落。 (四)涂布平板操作的讨论(四)涂布平板操作的讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求, 想一想,第想一想,第 2 步应如何进行无菌操作?步应如何进行无菌操作? 提示:应从操作的各个细节保证提示:应从操作的各个细节保证“无菌无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管 头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围;等等。头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围;等等。 (五)练习(五)练习 1.提示:可以从微生物生长需要哪些

24、条件的角度来思考。例如,微生物的生长需要水、提示:可以从微生物生长需要哪些条件的角度来思考。例如,微生物的生长需要水、 空气、适宜的温度,食品保存可以通过保持干燥、真空的条件,以及冷藏等方法来阻止空气、适宜的温度,食品保存可以通过保持干燥、真空的条件,以及冷藏等方法来阻止 微生物的生长。微生物的生长。 2.提示:可以从这三种培养技术的原理、操作步骤等方面分别进行总结归纳。例如,这提示:可以从这三种培养技术的原理、操作步骤等方面分别进行总结归纳。例如,这 三种培养技术都需要为培养物提供充足的营养,但无土栽培技术的操作并不需要保证无三种培养技术都需要为培养物提供充足的营养,但无土栽培技术的操作并不

25、需要保证无 菌的条件,而其他两种技术都要求严格的无菌条件。菌的条件,而其他两种技术都要求严格的无菌条件。 课题课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、筛选菌株一、筛选菌株 微生物的选择培养,是指利用培养基的组成使适宜生长的特定微生物得到较快繁殖的技微生物的选择培养,是指利用培养基的组成使适宜生长的特定微生物得到较快繁殖的技 术,也称为微生物的术,也称为微生物的“选择培养选择培养”。在本课题提供的选择培养基的配方中,尿素是培养。在本课题提供的选择培养基的配方中,尿素是培养 基中的惟一氮源,因此,原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。但实际上,微基中的惟一

26、氮源,因此,原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。但实际上,微 生物的培养是一个非常复杂的问题,有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁生物的培养是一个非常复杂的问题,有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁 殖,因此能够在选择培养基上生长的微生物不一定是所需要的微生物,还需要进一步的殖,因此能够在选择培养基上生长的微生物不一定是所需要的微生物,还需要进一步的 验证。验证。 二、统计菌落数目二、统计菌落数目 统计菌落数目的理论依据是:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,统计菌落数目的理论依据是:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落, 来源于样品稀释液中的一

27、个活菌。因此,恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。来源于样品稀释液中的一个活菌。因此,恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。 为了保证结果准确,通常将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上,培养后再选择菌落数为了保证结果准确,通常将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上,培养后再选择菌落数 在在 30300 的平板进行计数。的平板进行计数。 三、设置对照三、设置对照 A 同学的结果与其他同学不同,可能的解释有两种。一是由于土样不同,二是由于培养同学的结果与其他同学不同,可能的解释有两种。一是由于土样不同,二是由于培养 基污染或操作失误。究竟是哪个原因,可以通过实验来证明。实验方案有两种。一种方基污染

28、或操作失误。究竟是哪个原因,可以通过实验来证明。实验方案有两种。一种方 案是可以由其他同学用与案是可以由其他同学用与 A 同学一样的土样进行实验,如果结果与同学一样的土样进行实验,如果结果与 A 同学一致,则证同学一致,则证 明明 A 无误;如果结果不同,则证明无误;如果结果不同,则证明 A 同学存在操作失误或培养基的配制有问题。另一同学存在操作失误或培养基的配制有问题。另一 种方案是将种方案是将 A 同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明 培养基是否受到污染。通过这个事例可以看出,实验结果要有说服力,对

29、照的设置是必培养基是否受到污染。通过这个事例可以看出,实验结果要有说服力,对照的设置是必 不可少的。不可少的。 四四.课题成果评价课题成果评价 (一)培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落(一)培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落 对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养基对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养基 的菌落数目明显大于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些菌落。的菌落数目明显大于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些菌落。 (二)样品的稀释操作是否成功(二)样品的稀释操作是

30、否成功 如果得到了如果得到了 2 个或个或 2 个以上菌落数目在个以上菌落数目在 30300 的平板,则说明稀释操作比较成功,并的平板,则说明稀释操作比较成功,并 能够进行菌落的计数。能够进行菌落的计数。 五、五、.练习练习 2.提示:反刍动物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤提示:反刍动物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤 胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了 需要准备选择培养基外,还应参照厌氧菌的培养方法进行实验设计需要准备

31、选择培养基外,还应参照厌氧菌的培养方法进行实验设计. 课题课题 3 分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离 一、培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落:对照的培养基在培养过程一、培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落:对照的培养基在培养过程 中没有菌落生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落,则说明可能获中没有菌落生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落,则说明可能获 得了分解纤维素的微生物。得了分解纤维素的微生物。 二、分离的结果是否一致:由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量,因二、分离的结果是否一致:由于在土壤中细菌的数量远

32、远高于真菌和放线菌的数量,因 此最容易分离得到的是细菌。但由于所取土样的环境不同,学生也可能得到真菌和放线此最容易分离得到的是细菌。但由于所取土样的环境不同,学生也可能得到真菌和放线 菌等不同的分离结果。菌等不同的分离结果。 三、旁栏思考题三、旁栏思考题 1.1.本实验的流程与课题本实验的流程与课题 2 2 中的实验流程有哪些异同?中的实验流程有哪些异同? 答:本实验流程与课题答:本实验流程与课题 2 2 的流程的区别如下。课题的流程的区别如下。课题 2 2 是将土样制成的菌悬液直接涂布在是将土样制成的菌悬液直接涂布在 以尿素为惟一氮源的选择性培养基上,直接分离得到菌落。本课题通过选择培养,使

33、纤以尿素为惟一氮源的选择性培养基上,直接分离得到菌落。本课题通过选择培养,使纤 维素分解菌得到增殖后,再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。维素分解菌得到增殖后,再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。 2.2.为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌?为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌? 答:由于生物与环境的相互依存关系,在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含量相答:由于生物与环境的相互依存关系,在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含量相 对提高,因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。对提高,因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 3.

34、3.将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深?将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深? 答:将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,实际上是人工设置纤维素分解菌生答:将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,实际上是人工设置纤维素分解菌生 存的适宜环境。一般应将纸埋于深约存的适宜环境。一般应将纸埋于深约 1010 cmcm 左右腐殖土壤中。左右腐殖土壤中。 4.4.想一想,这两种方法各有哪些优点与不足?你打算选用哪一种方法?两种刚果红染色想一想,这两种方法各有哪些优点与不足?你打算选用哪一种方法?两种刚果红染色 法的比较法的比较 方法一是传统的方法,缺点是操作繁

35、琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;其优方法一是传统的方法,缺点是操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;其优 点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便,点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便, 不存在菌落混杂问题,缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使不存在菌落混杂问题,缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使 能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈 较为模糊,因为培

36、养基中纤维素占主要地位,因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。较为模糊,因为培养基中纤维素占主要地位,因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。 方法二的另一缺点是:有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降方法二的另一缺点是:有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降 解刚果红形成明显的透明圈,与纤维素分解菌不易区分。解刚果红形成明显的透明圈,与纤维素分解菌不易区分。 5.5.为什么选择培养能够为什么选择培养能够“浓缩浓缩”所需的微生物?所需的微生物? 答:在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,答:在选择培养的条件下,可以使那些能够适

37、应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖, 而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩浓缩”的作用。的作用。 四、练习四、练习 2.2.答:流程图表示如下。答:流程图表示如下。 土壤取样土壤取样选择培养(此步是否需要,应根据样品中目的菌株数量的多少来确定)选择培养(此步是否需要,应根据样品中目的菌株数量的多少来确定)梯梯 度稀释度稀释将菌悬液涂布到有特定选择作用的培养基上将菌悬液涂布到有特定选择作用的培养基上挑选单菌落挑选单菌落发酵培养发酵培养 专题专题 3 3 植物的组织培养技术植物的组织培养技术 课题课题 1 1 菊

38、花的组织培养菊花的组织培养 一、无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键一、无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键 植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培养所利用的植植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培养所利用的植 物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高,对无菌操作的要求非常严格。如物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高,对无菌操作的要求非常严格。如 果不小心引起污染,将可能造成培养工作的前功尽弃。果不小心引起污染,将可能造成培养工作的前功尽弃。 无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。对培养材料进行无菌

39、技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。对培养材料进行 表面灭菌时,一方面要考虑药剂的消毒效果;另一方面还要考虑植物材料的耐受能力。表面灭菌时,一方面要考虑药剂的消毒效果;另一方面还要考虑植物材料的耐受能力。 不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。 二、妥善处理被污染的培养物二、妥善处理被污染的培养物 即使对于有经验的操作人员,操作后出现培养物被污染的情况也常有。一般情况下,细即使对于有经验的操作人员,操作后出现培养物被污染的情况也常有。一般情况下,细 菌污染可能是由接种人员造成的,如未戴口罩,接种时说话,或手及器械消毒不

40、严等。菌污染可能是由接种人员造成的,如未戴口罩,接种时说话,或手及器械消毒不严等。 真菌污染可能是植物材料灭菌不当。需要特别注意的是,一旦发现培养材料被污染,特真菌污染可能是植物材料灭菌不当。需要特别注意的是,一旦发现培养材料被污染,特 别是真菌性污染,一定不要打开培养瓶。应先将所有被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽别是真菌性污染,一定不要打开培养瓶。应先将所有被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽 锅内进行高压蒸汽灭菌,然后再打开培养瓶,进行清洗。锅内进行高压蒸汽灭菌,然后再打开培养瓶,进行清洗。 三、有毒药品的用后处理三、有毒药品的用后处理 外植体灭菌用过的有毒药品要妥善处理(如氯化汞等),以免引起环

41、境污染。一般应收外植体灭菌用过的有毒药品要妥善处理(如氯化汞等),以免引起环境污染。一般应收 集后统一交给有关专业部门处理。集后统一交给有关专业部门处理。 四、课题成果评价四、课题成果评价 (一)对接种操作中污染情况的分析(一)对接种操作中污染情况的分析 接种接种 3 34 4 d d 后,在接种操作中被杂菌污染的培养物会表现出被污染的现象。请学生适后,在接种操作中被杂菌污染的培养物会表现出被污染的现象。请学生适 时统计污染率,分析接种操作是否符合无菌要求。时统计污染率,分析接种操作是否符合无菌要求。 (二)是否完成了对植物组织的脱分化和再分化(二)是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 观察实

42、验结果,看看是否培养出了愈伤组织,记录多长时间长出愈伤组织。统计更换培观察实验结果,看看是否培养出了愈伤组织,记录多长时间长出愈伤组织。统计更换培 养基后愈伤组织进一步分化成根和芽的比例和时间。养基后愈伤组织进一步分化成根和芽的比例和时间。 (三)是否进行了统计、对照与记录(三)是否进行了统计、对照与记录 做好统计和对照,填好结果记录表,培养严谨的科学态度。从实验的第一步开始就要做做好统计和对照,填好结果记录表,培养严谨的科学态度。从实验的第一步开始就要做 好实验记录,可以分组配制不同培养基,如诱导愈伤或直接分化丛芽的培养基,然后做好实验记录,可以分组配制不同培养基,如诱导愈伤或直接分化丛芽的

43、培养基,然后做 不同配方的比较。不同配方的比较。 (四)生根苗的移栽是否合格(四)生根苗的移栽是否合格 生根苗移栽技术的关键是既要充分清洗根系表面的培养基,又不能伤及根系。一般使用生根苗移栽技术的关键是既要充分清洗根系表面的培养基,又不能伤及根系。一般使用 无土栽培的办法。培养基质要提前消毒,可以向培养基质喷洒质量分数为无土栽培的办法。培养基质要提前消毒,可以向培养基质喷洒质量分数为 5%5%的高锰酸钾,的高锰酸钾, 并用塑料薄膜覆盖并用塑料薄膜覆盖 1212 h h。掀开塑料薄膜后。掀开塑料薄膜后 2424 h h 才能移栽。新移栽的组培苗要在温室过才能移栽。新移栽的组培苗要在温室过 渡几天

44、,等壮苗后再定植大田或进行盆栽。统计自己移栽的成活率,看看移栽是否合格。渡几天,等壮苗后再定植大田或进行盆栽。统计自己移栽的成活率,看看移栽是否合格。五、答案和提示五、答案和提示 (一)旁栏思考题(一)旁栏思考题 1.1.你能说出各种营养物质的作用吗?同专题你能说出各种营养物质的作用吗?同专题 2 2 中微生物培养基的配方相比,中微生物培养基的配方相比,MSMS 培养基的培养基的 配方有哪些明显的不同?配方有哪些明显的不同? 答:微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够答:微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够 维持细胞的渗透压

45、;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途维持细胞的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途 径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的 培养不同,培养不同,MSMS 培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元 素和微量元素两大类。素和微量元素两大类。 2.2.你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗?你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗? 答:可以生分组,

46、做不同的材料或配方,最后分别汇报成果。但每种材料或配方至少要答:可以生分组,做不同的材料或配方,最后分别汇报成果。但每种材料或配方至少要 做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接 种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。 (二)练习(二)练习 1.1.答:植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。用于答:植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。

47、用于 植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而 培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。 2.2.答:外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状答:外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状 况好,容易诱导脱分化和再分化。况好,容易诱导脱分化和再分化。 课题课题 2 2 月季的花药培养月季的花药培养 一、接种是否成功一

48、、接种是否成功 如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体,花药培养的第一步就成功了。要适时转如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体,花药培养的第一步就成功了。要适时转 换培养基,以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。换培养基,以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。 二、答案和提示二、答案和提示 (一)旁栏思考题(一)旁栏思考题为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难? 答:花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。答:花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。 (二)练习(二)练习 1.1.答:答:F2F2 代紫色甜玉

49、米的基因型组成可能为代紫色甜玉米的基因型组成可能为 AasusuAasusu 或或 AAsusuAAsusu。如果运用常规育种方法,。如果运用常规育种方法, 将将 F2F2 代中的紫色甜玉米与白色甜玉米(代中的紫色甜玉米与白色甜玉米(aasusuaasusu)进行测交,可以选择出基因型为)进行测交,可以选择出基因型为 AAsusuAAsusu 纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐,耗时也较长,需要至少三年的选种和育纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐,耗时也较长,需要至少三年的选种和育 种时间。如果利用花药培养的技术,在种时间。如果利用花药培养的技术,在 F1F1 代产生的花粉中就可能有代产生的花粉中就可能有 AsuAsu 的组合,再将的组合,再将 花粉植株进行染色体加倍,就可以直接得到紫色甜玉米的纯合体(花粉植株进行染色体加倍,就可以直接得到紫色甜玉米的纯合体(AAsusuAAsusu)。这种方法)。这种方法 可以大大缩短育种周期。可以大大缩短育种周期。 2.2.答:植物组织培养技术与花药培养技术的相同之处是:培养基配制方法、无菌技术及答:植物组织培养技术与花药培养技术的

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