组织培养植株再生途径.docx

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1、组织培养植株再生途径 摘要：目的：探讨药用植物萱草的组织培育技术。为工厂育苗供应科学依据。方法：以萱草的幼嫩花梗为外植体，采纳MS培育基，附加不同的植物激素进行试验。结果：愈伤组织诱导的最佳培育基配方是MS+6-BA1.0mgL+NAA 0.1 mgL，不定芽诱导的最佳培育基配方是MS+6-BA 1.0 mgL+NAA 0.1 mgL，不定根诱导的最佳培育基配方是1/2MS+IBA 0.1 mgL+NAA 0.1 mgL。结9k：以幼嫩花梗为外植体。通过诱导愈伤组织途径可以达到快速繁殖的目的。 关键词：萱草；组织培育；植株再生 中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1673-77

2、17(2007)12-2552-02 萱草Hemerocallis fulva L.系百合科(Liliaeea)多年生草本植物，以根及根茎入药，为我国传统中药“萱草根(Ra-dix Hemerocallis)”，具有清热凉血、利尿通淋的功效，用于治疗水肿、小便不利、淋浊、带下、黄痘、便血、崩漏等症。近年来探讨表明萱草根中含有多种蒽醌类和二氢呋喃-内酰铵类化合物，这些成分具有抗菌、抗癌、杀虫等生物活性。 萱草不仅具有药用价值，还具有蔬菜食用和花卉欣赏价值。其花经过加工后是享有盛名的“黄花菜”、“金针菜”，养分丰富，且具有保健益寿之功。而其欣赏价值体现在萱草花秀美俊美、雅而不俗、人见人爱，令人高兴

3、，解忧忘愁，是“中国的母亲花”、“忘忧草”。以往报道的萱草组织培育的文章，是基于欣赏花卉品种的快速繁殖技术的试验探讨，而在药用和食用方面缺乏思索和实践。因此，作者借鉴这些探讨成果，对药用植物萱草开展了组织培育技术方面前期试验工作，期望为进一步探讨其药材质量以及开发中药功能保健类蔬菜奠定基础。 1.材料与方法 1.1材料供试植物材料采自北方国家级林木种苗示范基地栽培的生长健壮、无病虫害的带花萱草植株，经首都医科高校中医药学院中药资源学教研室刘长利博士鉴定为H.fulva，外植体为萱草的幼嫩花梗。 1.2方法无菌外植体的获得：将外植体先用毛刷蘸洗涤剂洗净，再用流水冲洗干净。在无菌条件下用75的酒精

4、消毒30s，再用0.1的HgCl溶液浸泡5min，最终用无菌水冲洗68次，在无菌条件下切成11.5cm长的小段进行接种。培育条件：培育条件为MS培育基，附加0.6琼脂，pH5.8。培育室温度为(252，光照12hd，光照度为20001x。 2.结果与分析 2.1激素对愈伤组织诱导的影响将萱草幼嫩花梗分别接种于含有不同激素配比的16号培育基(蔗糖浓度为3)中。培育30天后统计各处理愈伤组织诱导状况。结果见表1和图1。 由表1可以看出，植物激素浓度越高越简单诱导出愈伤组织，但当细胞分裂素与生长素浓度达到1：0.05时，愈伤组织色浅不易分化芽，而且玻璃化严峻；当细胞分裂素与生长素比例小时，愈伤组织分

5、化率也降低，试验结果表明诱导愈伤组织的最佳培育基配方是MS+6-BA 1.0 mgL+NAA 0.1mgL，所诱导出的愈伤组织黄绿色，且表面有突起的芽点。 2.2激素对不定芽分化与继代增殖的影响将诱导出的愈伤组织转接到含有不同激素配比的47号培育基(蔗糖浓度为3)中，培育1个周期后视察其生长状况，结果见表2和图2。 由表2可见，细胞分裂素6BA浓度在01.0mgL之间均能诱导出不定芽(图2所示)，随着其浓度的增高，诱导出的芽数增加，苗子相应变细弱。探讨结果表明：随着继代次数的增加，较高浓度的细胞分裂素6-BA，简单引起玻璃化，苗子不健壮。在生产过程中随着继代次数的增加应逐步降低细胞分裂素的浓度

6、，直至为零。 2.3激素对不定根诱导培育的影响经过一段时间的继代培育后，将丛生芽切分成带小量愈伤的单株转到含有不同激素配比的810号培育基(蔗糖浓度为2)中。半月后视察其生根状况，结果见表3和图3。 由表3可见，萱草组培苗生根较简单。试验结果表明：诱导不定根培育的最佳培育基配方是1/2MS+NAA 0.1mgL+IBA 1.0mgL。经过810天后起先长出乳白色星状根(如图3所示)，至15天时，生根率最高可达99.5。 2.4组培苗的移栽 当组培苗根长至1cm时，将培育瓶放在自然光照下炼苗35天后，打开瓶盖再炼苗35天，轻轻取出组培苗，洗净培育基后，移栽到经0.1KMnO溶液消毒过的基质中，保持肯定的温度和湿度，驯化成活率可达95以上，2周后待长出新叶即可移栽到苗圃，移栽成活率可达100。 3.探讨 萱草一般采纳分蘖方式进行增殖，1株萱草每年仅可繁殖45株，难以适应市场商品化生产的要求。本文通过对萱草的组织培育和植株再生的试验探讨，建立了以萱草幼嫩花梗为外植体、诱导愈伤组织、不定芽分化、生根培育及炼苗移栽的技术体系，该技术取材简单，消毒简便，移栽成活率高，是加快繁殖速度的有效途径，为工厂化育苗供应了科学的试验依据，为进一步探讨其药用成分含量、开发中药功能保健类蔬菜奠定了基础。