试验五叶绿体的分离与荧光观察.pptx

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1、一.实验目的1 通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理与方法；了解差速离心 Differential centrifugation特点与用途2 了解菠菜叶绿体的形态、分布与数量。第1页/共13页二实验原理采用差速离心分离细胞器；沉降顺序：核线粒体溶酶体与过氧化物酶体内质网与高基体核蛋白体；叶绿体具有荧光现象，可利用荧光显微镜观察。菠菜叶富含叶绿体，可采用徒手切片观察 其形态和分布；第2页/共13页Low speedHigh speedDifferential centrifugation第3页/共13页三、实验用品1器材离心机、研钵或组织捣碎机、显微镜、天平、离心管、纱布、烧杯、量

2、筒、滴管、载玻片、盖玻片2材料新鲜菠菜叶3试剂0.35mol/L氯化钠溶液 第4页/共13页四、实验方法（一）叶绿体的分离与观察1.取新嫩菠菜叶，洗净檫干、去梗，称30g，分批放入研钵。2.加入0.35mol/L氯化钠溶液，共150ml，研磨，制成匀浆；3.将匀浆用层纱布过滤于烧杯中；4.取滤液ml在1000r/min离心min，取上清；5.上清液3000r/min离心min去上清，沉淀即为叶绿体；6.加0.35mol/L氯化钠溶液悬浮沉淀；7.取叶绿体悬液滴于载玻片上，加盖片：8.普通光镜下观察；荧光显微镜下演示（二）菠菜叶徒手切片观察新嫩菠菜叶斜切面片，0.35mol/L氯化钠溶液滴；加盖片轻压：光镜下观察叶绿体在表皮细胞和保卫细胞中的分布；荧光显微镜下演示。第5页/共13页第6页/共13页第7页/共13页第8页/共13页第9页/共13页第10页/共13页第11页/共13页五实验结果与分析1简述：叶绿体的分离原理和方法；2 绘图：菠菜叶肉细胞的形态，显示叶绿体。第12页/共13页感谢您的观看！第13页/共13页