实验室生物安全培训.ppt

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1、实验室生物安全培训n中华人民共和国卫生行业标准（WS 233-2002）微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 General biosafety standard for microbiological and biomedical laboratories n20021203发布发布20030801实施实施范围 n本标准规定了微生物和生物医学实验室生物安全防护的基本原则、实验室的分级、各级实验室的基本要求。本标准为最低要求。n本标准适用于疾病预防控制机构、医疗保健、科研机构。定义1实验室生物安全防护 nbiosafety protection for laboratoriesn实验室工作人

2、员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护设置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境有受其污染。定义2微生物危害评估nhazard assessment for microbesn对实验微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所进行的评估。定义3气溶胶naerosol n悬浮于气体介质中粒径一般为0.001m1000m的固体、液体微小粒子形成的胶溶状态分散体系。定义4生物安全柜nbiosafety cabinetn处理危险性微生物时所用的箱形空气净化安全装置。定义5 I级生物安全柜nclass

3、 biosafety cabinetn至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部为操作窗口，外部空气由操作窗口吸进，而不可能由操作窗口逸出。工作状态时保证工作人员不受侵害，但不保证实验对象不受污染。定义6 II级生物安全柜nclass biosafety cabinet n至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。工作时正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部操作窗口。外部空气由操作窗口吸进，而不可能由操作窗口逸出。工作状态下遵守操作规程时既保证工作人员不受侵害，也保证实验对象不受污染。定义7I

4、II级生物安全柜nclass III biosafety cabinetn至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气，正面上部为观察窗，下部为手套箱式操作口。箱内对外界保持负压可确保人体与柜内物品完全隔绝。定义8物理抑制设备nphysical containment devicen用物理或机械方法防止致病微生物逸出的设备定义9高效空气过滤器nHEPA(high efficiency particulate air)filter n在额定风量下，对粒径大于等于0.3m的粒子捕集效率在99.97%以上及气流阻力在245Pa以下的空气过滤器。定义10相对

5、压强nrelative pressuren绝对压强减去大气压强之值。定义11窗口期n病毒感染人体后但尚未产生抗体前的一段时间，在此期间病毒在人体内大量复制，抗体检测呈阴性。实验室生物安全防护的基本原则 n安全设备和个体防护 n实验室设计与建造的特殊要求 n安全操作规程 n致病微生物及其毒素在实验室之间的传递 n管理制度 n微生物危害评估总则n1.实验室生物安全防护的内容包括安全设备、个体防护装置和措施，实验室的特殊设计和建设要求，严格的管理制度和标准化的操作程序及规程。2.应将每一特定实验室从立项、建设到使用维护的全过程中有关生物安全防护综合措施的内容编入实验室的生物安全手册中。必须设有专职的

6、生物安全负责人。3.生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为四个生物安全防护级别。安全设备和个体防护n安全设备和个体防护是确保实验室工作人员与致病微生物及其毒素直接接触的一级屏障。n1.生物安全柜是最重要的安全设备，形成最主要的防护屏障。实验室应按要求分别配备、级生物安全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作，除实际上不可实施外，都必须在生物安全柜内进行。不得用超净工作台代替生物安全柜。安全设备和个体防护n2.必要时实验室应配备其他安全设备，如设置配有排风净化装置的排气罩等，或采用其他不使致病微生物逸出确保安全的设备。n3.实验室所配备的离心机应在生物安全柜或本标准2中

7、所指的其他安全设备中使用，否则必须使用安全密封的专用离心杯。n4.必须给实验室工作人员配备必要的个体防护用品。实验室设计与建造的特殊要求n包括:n实验室的选址、平面布置、围护结构、通风空调、安全装置及特殊设备等设计与建造的特殊要求。安全操作规程n1.本标准针对不同等级的生物安全防护实验室所规定的安全操作规程，包括标准的安全操作规程和特殊的安全操作规程，必须在实验室的生物安全手册中明列并加以执行。n2.针对不同的微生物及其毒素应补充规定相应的特殊安全操作规程，也应在各实验室的生物安全手册中明列并加以执行。致病微生物及其毒素在实验室之间的传递n致病微生物及其毒素在实验室之间的传递必须严格按照国家现

8、行有关管理办法执行。管理制度 n实验室基本管理 n实验室特殊管理实验室基本管理n1 实验室内的布置和准入 a）在主实验室应合理设置清洁区、半污染区和污染区；b）非实验有关人员和物品不得进入实验室；c）在实验室内不得进食和饮水，或者进行其他与实验无关的活动；d）实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室主任的批准。实验室基本管理n2.实验室工作人员的资格和培训 a）实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立进行工作前还需在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作；b）实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室

9、安全教育，自愿从事实验室工作；c）实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度、规定和操作规程。d）三级和四级生物安全防护实验室的工作人员在开始工作前必须留本底血清进行有关检测，以后定期复检。如有疫苗必须进行免疫注射。实验室特殊管理n为避免和处理源于不安全操作引起的意外事故，必须严格执行以下原则：n1.针对可能的的危险因素，设计保证安全的工作程序。2.事前进行有效的培训和摸拟训练。3.对于意外事故要能够提供包括紧急救助或专业性保健治疗的措施，足以应付紧急情况。实验室特殊管理n4.实验室事故处理：工作人员在操作过程中发生意外，如针刺和切伤、皮肤污染、感染性标本溅及体表和口鼻眼内、衣物污染、污染试验台

10、面等均视为安全事故。应视事故类型等不同情况，立即进行紧急处理。具体措施必须形成书面文件并严格遵守执行。在紧急处理的同时必须向有关专家和领导汇报，并详细记录事故经过和损伤的具体部位和程度等，由专家评估是否需要进行预防性治疗。n5 应填写正式的事故登记表，并按规定报告给国家相应级别的卫生主管部门。微生物危害评估 n当建设使用传染性或有潜在传染性材料的实验室前，必须进行微生物危害评估。应依据传染性微生物致病能力的程度、传播途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实验对象的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防和治疗方法等诸因素进行微生物危害评估。微生物危害评估n1.通过微生物危害评估确定对象

11、微生物应在哪一级的生物安全防护实验室中进行操作。n2.根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制度和紧急事故处理办法，必须形成书面文件并严格遵守执行。实验室的分类、分级n分类：一般生物安全防护实验室(不使用实验脊椎动物和昆虫)和实验脊椎动物生物安全防护实验室。n分级：每类生物安全防护实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度各分为四级。各级实验室的生物安全防护要求依次为：一级最低，四级最高。实验室的适用范围n适用范围：n一般生物安全防护实验室n实验脊椎动物生物安全防护实验室一般生物安全防护实验室-1、2 n1.一级生物安全防护实验室：n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健

12、康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。n2.二级生物安全防护实验室：n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。一般生物安全防护实验室-3n3.三级生物安全防护实验室 n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。n艾滋病病毒的研究(血清学实验除外)应在三级生物安全防护实验室中进行。一般生物安全防护实验室-4n4.四级生物安全防护实验室 n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径

13、不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。与上述情况类似的不明微生物，也必须在四级生物安全防护实验室中进行。待有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理。实验脊椎动物生物安全防护实验室n其适用微生物范围与同级的一般生物安全防护实验室相同。一级生物安全防护实验室的基本要求 1.安全设备和个体防护 1.1 一般无须使用生物安全柜等专用安全设备。1.2 工作人员在实验时应穿工作服，戴防护眼镜。1.3 工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套。一级生物安全防护实验室的基本要求n2 实验室设计和建造的特殊要求 2.1 每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。2.

14、2 实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙，不得铺设地毯。2.3 实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热。2.4 实验室中的家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持生物废弃物容器的台(架)。2.5 实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗。二级生物安全防护实验室的基本要求 1.安全设备和个体防护 1.1 可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜(II级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备1.2 处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物安全柜(II级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。上述材料的离心操作如果使用密封的离心机

15、转子或安全离心杯，且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材料，则可在实验室中进行。二级生物安全防护实验室的基本要求n1.3 当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备)。1.4 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出，更不能携带回家。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。1.5 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完

16、全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。二级生物安全防护实验室的基本要求2.实验室设计和建造的特殊要求 2.1 生物安全防护二级实验室必须满足本标准一级生物安全防护实验室中实验室设计和建造的特殊要求各款的要求。2.2 应设置实施各种消毒方法的设施，如高压灭菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理。2.3 应设置洗眼装置。2.4 实验室门宜带锁、可自动关闭。2.5 实验室出口应有发光指示标志。2.6 实验室宜有不少于每小时34次的通风换气次数。三级生物安全防护实验室的基本要求n1.安全设备和个体防护 1.1 实验室中必须安装级或级以上生物安全柜。1.2 所有涉及感染性材料的操作应在生物安

17、全柜中进行。当这类操作不得不在生物安全柜外进行时，必须采用个体防护与使用物理抑制设备的综合防护措施。1.3 在进行感染性组织培养、有可能产生感染性气溶胶的操作时，必须使用个体防护设备。三级生物安全防护实验室的基本要求n1.4 当不能安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置。1.5 工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室(或缓冲间)穿着背开式工作服或其他防护服。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。1.6 工作时必须戴手套(两副为宜)。一次性手套必须先消毒后丢弃。1.7 在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且

18、易于取用。可配备应急药品。三级生物安全防护实验室的基本要求n2.实验室设计和建造的特殊要求n2.1选址 三级生物安全防护实验室可与其他用途房屋设在一栋建筑物中，但必须自成一区。该区通过隔离门与公共走廊或公共部位相隔。2.2平面布局na)三级生物安全防护实验室的核心区包括实验间及与之相连的缓冲间。b)缓冲间形成进入实验间的通道。必须设两道连锁门，当其中一道门打开时，另一道门自动处于关闭状态。如使用电动连锁装置，断电时两道门均必须处于可打开状态。在缓冲间可进行二次更衣。c)当实验室的通风系统不设自动控制装置时，缓冲间面积不宜过大，不宜超过实验间面积的八分之一。d)级或级生物安全柜的安装位置应远离实

19、验间入口，避开工作人员频繁走动的区域，且有利于形成气流由“清洁”区域流向“污染”区域的气流流型。2.3围护结构na)实验室(含缓冲间)围护结构内表面必须光滑耐腐蚀、防水，以易于消毒清洁。所有缝隙必须加以可靠密封。b)实验室内所有的门均可自动关闭。c)除观察窗外，不得设置任何窗户。观察窗必须为密封结构，所用玻璃为不碎玻璃。d)地面应无渗漏，光洁但不滑。不得使用地砖和水磨石等有缝隙地面。e)天花板、地板、墙间的交角均为圆弧形且可靠密封，施工时应防止昆虫和老鼠钻进墙脚。2.4通风空调na)必须安装独立的通风空调系统以控制实验室气流方向和压强梯度。该系统必须确保实验室使用时，室内空气除通过排风管道经高

20、效过滤排出外，不得从实验室的其他部位或缝隙排向室外；同时确保实验室内的气流由“清洁”区域流向“污染”区域。进风口和排风口的布局应使实验区内的死空间降低到最小程度。b)通风空调系统为直排系统，不得采用部分回风系统。2.4通风空调nc)环境参数：相对于实验室外部，实验室内部保持负压。实验间的相对压强以30Pa40Pa为宜，缓冲间的相对压强以15Pa20Pa为宜。实验室内的温、湿度以控制在人体舒适范围为宜，或根据工艺要求而定。实验室内的空气洁净度以GB 500732001洁净厂房设计规范中所定义的七级至八级为宜。实验室人工照明应均匀，不眩目，照度不低于500lx。2.4通风空调nd)为确保实验室内的

21、气流由“清洁”区域流向“污染”区域，实验室内不应使用双侧均匀分布的排风口布局。不应采用上送上排的通风设计。由生物安全柜排出的经内部高效过滤的空气可通过系统的排风管直接排至大气，也可送入建筑物的排风系统。应确保生物安全柜与排风系统的压力平衡。e)实验室的进风应经初、中、高效三级过滤。2.4通风空调nf)实验室的排风必须经高效过滤或加其他方法处理后，以不低于12ms的速度直接向空中排放。该排风口应远离系统进风口位置。处理后的排风也可排入建筑物的排风管道，但不得被送回到该建筑物的任何部位。g)进风和排风高效过滤器必须安装在实验室设在围护结构上的风口里，以避免污染风管。h)实验室的通风系统中，在进风和

22、排风总管处应安装气密型调节阀门，必要时可完全关闭以进行室内化学熏蒸消毒。2.4通风空调ni）实验室的通风系统中所使用的所有部件均必须为气密型。所使用的高效过滤器不得为木框架。j）应安装风机启动自动联锁装置，确保实验室启动时先开排风机后开送风机。关闭时先关送风机后关排风机。nk)不得在实验室内安装分体空调器。2.5安全装置及特殊设备 na)必须在主实验室内设置级或级生物安全柜。其安装位置应满足d)中的要求。b)连续流离心机或其他可能产生气溶胶的设备应置于物理抑制设备之中，该装置应能将其可能产生的气溶胶经高效过滤器过滤后排出。在实验室内所必须设置的所有其他排风装置(通风橱、排气罩等)的排风均必须经

23、过高效过滤器过滤后方可排出。其室内布置应有利于形成气流由“清洁”区域流向“污染”区域的气流流型。2.5安全装置及特殊设备nc)实验室中必须设置不产生蒸汽的高压灭菌锅或其他消毒装置。d)实验间与外部应设置传递窗。传递窗双门不得同时打开，传递窗内应设物理消毒装置。感染性材料必须放置在密闭容器中方可通过传递窗传递。e）必须在实验室入口处的显著位置设置压力显示报警装置，显示实验间和缓冲间的负压状况。当负压指示偏离预设区间必须能通过声、光等手段向实验室内外的人员发出警报.可在该装置上增加送、排风高效过滤器气流阻力的显示。2.5安全装置及特殊设备n f）实验室启动工作期间不能停电。应采用双路供电电源。如难

24、以实现，则应安装停电时可自动切换的后备电源或不间断电源，对关键设备(生物安全柜、通风橱、排气罩以及照明等)供电。g)可在缓冲间设洗手池：洗手池的供水截门必须为脚踏、肘动或自动开关。洗手池如设在主实验室，下水道必须与建筑物的下水管线分离，且有明显标志。下水必须经过消毒处理。洗手池仅供洗手用，不得向内倾倒任何感染性材料。供水管必须安装防回流装置。不得在实验室内安设地漏。2.6其他na)实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热。b)实验室中的家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台(架)。家具和设备的边角和突出部位应光滑、无毛刺，以圆弧形为宜。c)所需真空泵应

25、放在实验室内。真空管线必须装置在线高效过滤器。d)压缩空气等钢瓶应放在实验室外。穿过围护结构的管道与围护结构之间必须用不收缩的密封材料加以密封。气体管线必须装置在线高效过滤器和防回流装置。2.6其他ne)实验室中应设置洗眼装置。f)实验室出口应有发光指示标志。g)实验室内外必须设置通讯系统。h)实验室内的实验记录等资料应通过传真机发送至实验室外。四级生物安全防护实验室n四级生物安全防护实验室分为：安全柜型实验室和穿着正压服型实验室。在安全柜型实验室中，所有微生物的操作均在级生物安全柜中进行。在穿着正压服型实验室中，工作人员必须穿着特殊的正压服式保护服装。1.安全设备和个体防护n1.1 在实验室

26、中所有感染性材料的操作都必须在级生物安全柜中进行。如果工作人员穿着整体的由生命维持系统供气的正压工作服，则相关操作可在级生物安全柜中进行。1.2 所有工作人员进入实验室时都必须换上全套实验室服装，包括内衣、内裤、衬衣或连衫裤、鞋和手套等。所有这些实验室保护服在淋浴和离开实验室前均必须在更衣室内脱下。2.安全柜型实验室设计和建造的特殊要求n2.1 选址。实验室应建造在独立的建筑物内或实验室建筑物内独立的区域。2.2 平面布局na)实验室核心区域由安放有级生物安全柜的房间(安全柜室)和进入通道组成。进入通道至少有三个部分，依次为外更衣室、淋浴室和内更衣室。任何相邻的门之间都有自动连锁装置，防止两个

27、相邻的门被同时打开。对于不能从更衣室携带进出安全柜室的材料、物品和器材，应在安全柜室墙上设置具有双门结构的高压灭菌锅，并有浸泡消毒槽、熏蒸室或带有消毒装置的通风传递窗，以便进行传递或消毒。必须设置带气闸室的紧急出口通道。2.2 平面布局n b)安全柜室四周可设置缓冲区，为环形走廊或缓冲房间，属核心区域的一部分。缓冲区建设要求同三级生物安全防护实验室。2.3围护结构na)安全柜房间和内侧更衣室的墙壁、地板、天花板等内部应形成密封的内壳。地板应整体密封，墙角成圆弧形。房间的内表面应防水、耐腐蚀。结构内所有的缝隙都应密封。尽量减小安全柜室和内更衣室门周围的缝隙并可密封以利消毒。安全柜室地板上所有的下

28、水管都直接通往液体消毒系统，下水道口和其他服务管线安装高效过滤器并防止害虫进入。2.3围护结构nb）进入实验室的门可自动关闭，可以上锁。所有在实验室内外传递物品的设备都必须为双开门结构，两门之间也必须有自动连锁装置。c)任何窗户都要求防破碎并密封。d)在实验室的墙洞上安装用于对级生物安全柜和安全柜室传递出来的物品进行消毒的双开门高压灭菌锅。其外门在实验室外开启。缝隙必须良好密封。2.4通风空调 na)必须安装精心设计建造的直排式通风系统。该系统进风和排风设计应确保定向的气流由最小危险区流向最大潜在危险区。进风口和排风口的布局应使实验区内的死空间降低到最小程度。b)必须监测相邻区域的压差和气流流

29、向，并安装报警器。在外更衣室的入口处安装压强仪表盘，显示和监测实验室内各区的压强或压差和进风、排风的风量。2.4通风空调nc)必须设计安装通风系统的自动控制和警报装置以确保实验室内不出现正压并保持各房间压强和压差正常。级生物安全柜的排风必须直接与排风管道相连。排风管道必须单独设置，不得与建筑物排风系统相连。2.4通风空调nd)环境参数：安全柜室必须保持负压程度最高，其相对压强不得高于60Pa；安全柜室、内更衣室、淋浴室和外更衣室的相对压强依次增高，相邻房间之间应有压差，保持在10Pa15 Pa之间。核心区域的空气洁净度以七级至八级为宜。实验室人工照明应均匀，不眩目，照度不低于500 1x。2.

30、4通风空调ne)进风为三级过滤系统，最后一级必须经讨高效过滤器过滤。f)来自整个核心区域的排风必须连续经过两个高效过滤器处理。排风口应远离实验室区和进风口。g)进风和排风高效过滤器必须安装在实验室各房间设在围护结构上的风口里，以避免污染风管。高效过滤器风口结构必须在更换高效过滤器之前实现就地消毒。或采用可在气密袋中进行更换的过滤器结构，以后再对高效过滤器进行消毒或焚烧。每台高效过滤器安装前后都必须进行检测，运行后每年也必须进行一次检测。2.5安全装置及特殊设备 na)安全柜室必须设置级生物安全柜。b)高压灭菌锅的门必须自动控制，只有在灭菌循环完成后，其外门方可开启。c）必须提供双开门的液体浸泡

31、槽、熏蒸消毒室或用于消毒的通风气闸室，对来自级生物安全柜和安全柜室的不能高压消毒的物品进行消毒，使其安全进出。2.5安全装置及特殊设备nd)如果有中央真空管线系统，不应在安全柜室以外的空间使用。在线的高效过滤器尽可能接近每个使用点或截门处。滤器应易于现场消毒或更换。其他通往安全柜室的气、液管线要求安装保护装置以防止回流。2.5安全装置及特殊设备ne)自内更衣室(含卫生间)，安全柜室水池下水、地漏以及高压消毒室和其他来源流出的液体在排往下水道之前，必需经过消毒，最好用加热消毒法。地漏必须有充满对被实验传染性物质有效的化学消毒剂的水封，它们直接通往消毒系统。下水道口和其他服务管线均应安装高效过滤器

32、。自淋浴室和外更衣室、厕所排出的液体可以不经过任何处理直接排到下水道中。对液体废弃物的消毒效果必须经过证实。2.5安全装置及特殊设备nf)必须为实验室的核心区(安全柜室、内更衣室、淋浴室和外更衣室)的通风系统、警报器、照明、进出控制和生物安全柜设置可以自动启动的紧急电源。2.6其他 na)工作台表面应无缝或为密封的表面。应不透水，耐腐蚀、耐热。b)实验室的家具应简单，为开放结构，且牢固。实验台、安全柜和其他设备之间留有空间以便能够清理和消毒。椅子和其它设施表面应铺上非纤维材料使之容易消毒。家具和设备的边角和突出部位应光滑、无毛刺，以圆弧形为宜。2.6其他nc)在安全柜室。内外更衣室近门处安装非

33、手动操作的或自动洗手池。d)实验室与外部必须设有通讯系统，宜设闭路电视系统。e)实验室内的实验记录等资料必须通过传真机发送至实验室外。3.穿着正压服型实验室设计和建造的特殊要求 n 3.1选址：实验室应建造在独立的建筑物内或实验室建筑物内独立的区域。3.2平面布局 na)实验室核心区域由安放有级生物安全柜的房间(主实验室)和进入通道组成。进入通道包括更衣区和消毒区。更衣区依次为外更衣室、淋浴室和内更衣室，消毒区为化学淋浴室，工作人员离开主实验室时首先经过化学淋浴消毒正压防护服表面。核心区任何相邻的门之间都有自动连锁装置，防止两个相邻的门被同时打开。对于不能从更衣室携带进出主实验室的材料、物品和

34、器材，应在主实验室墙上设置具有双门结构的高压灭菌锅、浸泡消毒槽、熏蒸室或带有消毒装置的通风传递窗，以便进行传递或消毒。必须设置带气闸室的紧急出口通道。3.2平面布局nb)安全柜室四周可设置缓冲区，为环形走廊或缓冲房间，属核心区域的一部分。缓冲区建设要求同三级生物安全防护实验室。3.3安全装置及特殊设备 n同三级生物安全防护实验室3.4 通风空调na)实验区必须保持负压程度最高，其相对压强不得高于80Pa；实验区、化学消毒淋浴室、内更衣室、淋浴室和外更衣室的相对压强依次增高，相邻房间之间保持10Pa15Pa的压差。核心区域的空气洁净度以七级至八级为宜。b)除上述条款外，其他与本标准6.4.2.4

35、中各款的要求相同。3.5 安全装置及特殊设备na)主实验室必须设置至少为级的生物安全柜。b)进入主实验室的工作人员必须穿着正压防护服，由高效过滤器提供保护的生命支持系统供给呼吸用气。生命支持系统包括提供超量呼吸气体的正压供气装置，报警器和紧急支援气罐。工作服内气压相对周围环境为持续正压。必须为生命支持系统设置自动启动的紧急电源。c)除上述条款外，其他与安全柜型实验室安全装置及特殊设备中各款的要求相同。3.6 其他n与安全柜型实验室“其他”中各款的要求相同。实验脊椎动物生物安全防护实验室 n1.在设计实验脊椎动物生物安全防护实验室时必须同时满足本标准中相应级别生物安全防护实验室和GBl49252

36、001实验动物 环境及设施中的要求。2.在设计实验脊椎动物生物安全防护实验室时必须充分考虑动物活动本身产生的危险(如产生气溶胶，撕咬抓挠对人的危害等)，并在安全操作规程、安全设备和个体防护、实验室设计建设方面采取必要措施。3.使用实验脊椎动物的生物安全防护实验室必须与一般动物繁殖设施实施物理隔离。实验脊椎动物生物安全防护实验室n4.三级实验脊椎动物生物安全防护实验室中的动物必须置于带有净化通风装置的负压箱笼系统内。5.四级实验脊椎动物生物安全防护实验室中的动物，在安全柜型实验室中必须置于级生物安全柜中；在穿着正压服型实验室中，工作人员必须穿着正压服，动物则必须置于带有净化通风装置的负压箱笼系统

37、内。生物危险标志的使用 n1.在二级以上的生物安全防护实验室的入口明显位置处必须贴有生物危险标志，并标明级别。2.所有盛装传染性物质的容器表面明显位置处必须贴有生物危险标准，并按所在生物安全防护实验室的级别标明相同的级别。一级生物安全防护实验室安全操作规程n1.禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入。2.接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。3.禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。4.以移液器吸取液体，禁止口吸。一级生物安全防护实验室安全操作规程n5.制定尖锐器具的安全操作规程。6.按照实验室安全规程操作，降低溅

38、出和气溶胶的产生。7.每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒。8.所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活，如高压灭活。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭容器内。9.制定有效的防鼠防虫措施。二级生物安全防护实验室安全操作规程n常规微生物操作规程中的安全操作要点 n1.同一级生物安全防护实验室安全操作规程1-9。n2.实验室入口处须贴上生物危险标志,内部显著位置须贴上有关的生物危险信息,包括使用传染性材料的名称,负责人姓名和电话号码。二级生物安全防护实验室特殊的安全操作规程n1.进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫

39、抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室或动物房内工作。n2.实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、需要的免疫、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。3.工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。二级生物安全防护实验室特殊的安全操作规程n4.并根据需要定期收集血清样本，应有检测报告，如有问题及时处理。n5.将生物安全程序纳入标准操作规范或生物安全手册，由实验室负责人专门保管，工作人员在进入实验室之前要阅读规范并按照规范要求操作。6.工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最

40、新的培训。7.严格遵守下列规定，防止利器损伤：二级生物安全防护实验室特殊的安全操作规程n7.1 除特殊情况(肠道外注射和静脉切开等)外，禁止在实验室使用针、注射器及其他利器。尽可能使用塑料器材代替玻璃器材。7.2 尽可能应用一次性注射器，用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽、从注射器取下，禁止用手直接操作。用过的针头必须直接放人防穿透的容器中。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒。7.3 尽可能使用无针注射器和其他安全装置。7.4 禁止用手处理破碎的玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须消毒。二级生物安全防护实验室特殊的安全操作规程n8.培

41、养基、组织、体液及其他具有潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒灭菌。9.实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒。10.人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。11.禁止将无关动物带入实验室。三级生物安全防护实验室 n常规微生物操作规程中的安全操作要点 与二级生物安全防护实验室的要求相同。三级生物安全防护实验室 特殊的安全操作规程 n1 实验室的门必须关上。2 进入实验室的工作人员必须经实验室负责人同意，禁止干扰正在操作或辅助的工作人员。禁止免疫耐受和正在使用免疫抑制剂的工作人员进入实验室；禁止临时有病或有皮肤破损者在实验室工作；禁止未成年人进入

42、实验室。3 实验室入口处必须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、需要的免疫、实验室负责人或其他相关负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。三级生物安全防护实验室 特殊的安全操作规程n4 建立严格的实验室规章制度，有关人员进入实验室时必须明确进入和离开实验室的程序。建立出入登记册制度。5 工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙肝疫苗、卡介苗)，并定期进行检查。6 收集工作人员和其它风险人群的基本血清留底，以后根据需要定期收集血清样本，应有检测报告，如有问题及时处理。三级生物安全防护实验室 特殊的安全操作规程n7 将生物安全程序纳入实验室标准操作规范或生物安全手册，向

43、所有工作人员提供生物安全手册。告知工作人员实验室的特殊危险，工作人员要阅读并按照规范的要求操作。n8 实验室及其辅助工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受最新的培训。三级生物安全防护实验室 特殊的安全操作规程n9 在进入实验室之前，实验室负责人有责任向所有工作人员提供标准微生物学操作规范和技术，仪器操作规范。并由专家提供特殊培训。10 实验所需物品必须经传递窗送入。11 严格遵守下列规定，防止利器损伤：11.1 除肠道外注射和静脉切开等特殊情况，严禁在实验室使用针、注射器及其他利器。尽可能用塑料器材取代玻璃器材。三级生物安全防护实验室 特殊的安全操

44、作规程n11.2 注射和吸取感染性液体时必须用一次性注射器，用过的针头禁止折弯、折断、剪断、重新盖上帽、从注射器取下，禁止用手直接操作。应将其放在不锈钢容器中。非一次性利器必须放到厚壁容器中，运到特定区域消毒，最终进行高压消毒。11.3 尽可能使用无针注射器和其他安全装置，装有污染的针、利器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须进行高压灭菌。禁止用手处理破碎的玻璃器具。三级生物安全防护实验室 特殊的安全操作规程n12 禁止在开放的实验台上和容器内进行感染性物质的操作，应在生物安全柜或其他物理设备中进行。生物安全柜内的工作台表面用适当的消毒剂清理。n13 培养基、组织、体液及其他废弃物必须放在防漏的容器中储存及运输。14 感染性实验结束后，尤其在感染性物质溢出和溅出后，应由专业人员或经过正规培训的人员进行消毒和清理。实验室中必须备有溢出物处理程序的文件。三级生物安全防护实验室 特殊的安全操作规程n15 污染的设备在运出维修前必须消毒。所有废弃物或物品，在丢弃或重新使用前必须消毒。16 建立实验室事故和暴露的报告系统。感染性物质溢出及暴露事故发生后，必须及时消毒处理，并向实验室负责人汇报，并记录事故过程和处理经过。17 禁止将无关动植物带入实验室。