病原生物学-教程-ppt课件第十二章--分枝杆菌属和棒状杆菌属.ppt

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1、第十二章第十二章 分枝杆菌属和棒状杆菌属分枝杆菌属和棒状杆菌属 病原生物学病原生物学学习目标1.掌握掌握：结核杆菌的生物学特性、致病物核杆菌的生物学特性、致病物质与所与所致疾病，免疫性，致疾病，免疫性，结核菌素核菌素试验原理、方法、原理、方法、结果及意果及意义，特异性防治；掌握白喉的特异性，特异性防治；掌握白喉的特异性防治。防治。2.熟悉熟悉：白喉杆菌生物学特性、外毒素的致病机白喉杆菌生物学特性、外毒素的致病机制及微生物学制及微生物学检查。3.了解了解：麻麻风杆菌的形杆菌的形态染色和致病性；了解染色和致病性；了解军团菌的主要生物学特性和致病性。菌的主要生物学特性和致病性。第一第一节 结核分枝杆

2、菌核分枝杆菌v分枝杆菌属（分枝杆菌属（Mycobacterium）是一群生）是一群生长缓慢、慢、专性需氧的性需氧的细菌，因其有分枝生菌，因其有分枝生长的的趋势而得名而得名。v分枝分枝杆菌一般不易着色，但可通杆菌一般不易着色，但可通过提高染液提高染液浓度、加度、加温和延温和延长染色染色时间促使促使细菌着色。一旦着色后，能抵菌着色。一旦着色后，能抵御御盐酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌(acid-fast bacilli)。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌v结核分枝杆菌（核分枝杆菌（Mtuberculosis）简称称结核杆菌核杆菌(tubercle bacilli)，是，

3、是结核病的病原菌核病的病原菌。v卡介苗卡介苗(BCG)和和现代抗代抗结核核疗法法问世以后，一度受到世以后，一度受到了控制，但由于治了控制，但由于治疗的不的不规范、耐范、耐药菌株的出菌株的出现、高、高危人群的流危人群的流动以及移民以及移民问题等各种因素的影响，等各种因素的影响，结核核病的病的发病率有明病率有明显上升上升趋势。v据据WHO估估计，每年有，每年有900万新万新发病例，病例，约300万人万人死于死于结核病。而艾滋病携核病。而艾滋病携带者中者中1/3以上患者死于以上患者死于结核核。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌一、生物学性状一、生物学性状（一）形一）形态与染色与染色 结核核分分枝枝杆

4、杆菌菌细长略略带弯弯曲曲，约l 4m0.4m。呈呈单个个或或分分枝枝状状排排列，常聚集成列，常聚集成团。无鞭毛，不形成芽胞，有微。无鞭毛，不形成芽胞，有微荚膜膜。在在陈旧旧的的病病灶灶和和培培养养物物中中，形形态常常不不典典型型，可可呈呈颗粒粒状状、串串珠珠状状、短棒状等短棒状等。由由于于细胞胞壁壁结构构中中大大量量脂脂质的的存存在在，一一般般染染料料难以以渗渗入入，故故一一般般不不选择革革兰染色，常采用染色，常采用齐-尼尼(Ziehl-Neelsen，ZN)抗酸染色法抗酸染色法。涂涂片片用用5%石石炭炭酸酸复复红加加温温染染色色后后可可着着色色。一一旦旦着着色色后后，能能抵抵抗抗3%盐酸酸酒

5、酒精精脱脱色色。若若再再加加用用美美蓝复复染染，分分枝枝杆杆菌菌呈呈红色色，其其他他细菌菌则染成染成蓝色。色。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌（二）培养特性（二）培养特性 结核核分枝杆菌分枝杆菌为专性需氧菌，性需氧菌，营养要求养要求较高，最适生高，最适生长温度温度37。初初次次分分离离需需营养养丰丰富富的的培培养养基基，常常用用Lowenstein-Jensen培培养养基基，内内含含蛋蛋黄黄、马铃薯薯、甘甘油油等等物物质，可可提提供供其其合合成成细胞胞壁壁脂脂质成成分分；胆胆盐、孔雀、孔雀绿可抑制可抑制杂菌生菌生长。细胞胞壁壁中中的的脂脂质成成分分影影响响了了营养养物物质的的吸吸收收及及代代

6、谢产物物的的排排出出，导致致细菌菌缓慢慢生生长，在在培培养养基基中中分分裂裂1代代需需1820小小时，生生长24周周才才出出现肉肉眼眼可可见的的菌菌落落，菌菌落落表表面面粗粗糙糙干干燥燥呈呈颗粒粒、结节或或花花菜菜状状，乳白色或米黄色，不透明乳白色或米黄色，不透明。在在液体培养基中形成粗糙液体培养基中形成粗糙皱褶菌膜浮于液面。褶菌膜浮于液面。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌（三）抵抗力（三）抵抗力 结核核分枝杆菌抵抗力相分枝杆菌抵抗力相对较强，与其，与其细胞壁中脂胞壁中脂质含量含量较高有关高有关。脂脂质可防止菌体水分的可防止菌体水分的丢失，使失，使细菌能在干燥的痰中存活菌能在干燥的痰中存活6

7、个月个月。结核核分分枝枝杆杆菌菌对酸酸、碱碱、结晶晶紫紫、孔孔雀雀绿等等物物质抵抵抗抗力力较强，常常用用于于处理理杂菌菌污染的染的标本本。对脂溶脂溶剂、温度、紫外、温度、紫外线敏感，紫外敏感，紫外线照射照射24 h即被即被杀死死。结核核分分枝枝杆杆菌菌在在液液体体中中煮煮沸沸或或626315分分钟即即被被杀死死，故故采采用用巴氏消毒法消毒牛奶。巴氏消毒法消毒牛奶。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌（四）（四）变异性异性 结核核分枝杆菌可分枝杆菌可发生形生形态、菌落、毒力、免疫原性和耐、菌落、毒力、免疫原性和耐药性等性等变异异。在在青青霉霉素素、溶溶菌菌酶等等抗抗生生素素作作用用下下，结核核分分

8、枝枝杆杆菌菌可可失失去去细胞胞壁壁结构构而而变为L型型细菌菌。1908年年Calmette和和Guerin将将有有毒毒的的牛牛分分枝枝杆杆菌菌培培养养于于含含胆胆汁汁、甘甘油油、马铃薯薯的的培培养养基基中中，经230次次传代代，历时13年年，使使其其毒毒力力发生生变异异，成成为对人人无无致致病病性性，而而仍仍保保持持良良好好免免疫疫原原性性的的疫疫苗苗株株，称称为卡卡介介苗苗（Bacille Calmette-Guerin,BCG）。结核核分分枝枝杆杆菌菌对异异烟烟肼、链霉霉素素、利利福福平平等等抗抗结核核药物物可可发生生耐耐药性性变异，目前异，目前临床上已出床上已出现对多种抗多种抗结核核药同

9、同时耐耐药的多重耐的多重耐药株。株。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌二二、致病性与免疫性、致病性与免疫性结核分枝杆菌不核分枝杆菌不产生外毒素和内毒素，其致病与菌体生外毒素和内毒素，其致病与菌体成分引成分引发机体的超敏反机体的超敏反应有关，病程呈慢性，伴有肉有关，病程呈慢性，伴有肉芽芽肿。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌（一）致病物（一）致病物质1.脂脂质 为菌菌细胞胞壁壁的的主主要要组分分，是是主主要要毒毒力力因因子子，与与细菌菌的的致致病病性性密切相关密切相关。脂脂质多与糖多与糖类或蛋白或蛋白质结合，形成糖脂或合，形成糖脂或肽糖脂糖脂。结核核分分枝枝杆杆菌菌的的脂脂肪肪酸酸均均具具有有抑

10、抑制制蛋蛋白白酶的的功功能能，使使坏坏死死组织不能不能彻底溶解而成底溶解而成为干酪干酪样物物质。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌1.脂脂质 脂脂质主要成分有主要成分有：硫硫酸酸脑苷苷脂脂：存存在在于于有有毒毒株株细胞胞壁壁上上，可可抑抑制制吞吞噬噬细胞胞中中吞吞噬噬体体与与溶溶酶体体的融合，使的融合，使细菌能在吞噬菌能在吞噬细胞中胞中长期存活期存活；索索状状因因子子(cord factor)：为6，6-双双分分枝枝菌菌酸酸海海藻藻糖糖，是是分分枝枝菌菌酸酸和和海海藻藻糖糖结合合的的一一种种糖糖脂脂，存存在在于于细胞胞壁壁的的表表面面，在在液液体体培培养养基基中中能能使使细菌菌相相互互粘粘连，

11、呈呈绳索索样生生长，故故而而得得名名。索索状状因因子子与与细菌菌的的致致病病力力相相关关，能能够抑抑制制白白细胞胞的的游游走走和和促促进肉肉芽芽肿的的形形成成。索索状状因因子子是是一一种种免免疫疫原原，能能刺刺激激机机体体产生保生保护性免疫性免疫；磷脂磷脂(phospholipids)：能刺激：能刺激单核核细胞增生，引起胞增生，引起结核核结节形成形成；蜡蜡质D(wax D):是是一一种种肽糖糖脂脂与与分分枝枝菌菌酸酸的的复复合合物物，能能够辅助助菌菌体体蛋蛋白白引引发型超敏反型超敏反应，具有佐，具有佐剂作用。作用。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌（一）致病物（一）致病物质2.蛋白蛋白质 结核

12、核分枝杆菌具有多种蛋白分枝杆菌具有多种蛋白质。结核菌素是其中的主要成分，核菌素是其中的主要成分，结核菌素与蜡核菌素与蜡质D结合，可激合，可激发机体机体产生生型超敏反型超敏反应，但，但产生的生的抗体没有保抗体没有保护作用。作用。3.多糖多糖 结核分枝杆菌含多种糖核分枝杆菌含多种糖类。多糖能。多糖能诱导超敏反超敏反应，患者血清中可，患者血清中可出出现抗多糖抗体，但多糖与致病的关系尚不清楚。抗多糖抗体，但多糖与致病的关系尚不清楚。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌（二）所致疾病（二）所致疾病结核分枝杆菌的致病作用可能与核分枝杆菌的致病作用可能与细菌在菌在组织细胞内胞内顽强增殖增殖引起炎症反引起炎症反

13、应，以及，以及诱导机体机体发生生迟发型超敏反型超敏反应性性损伤有有关关。结核核分枝杆菌可通分枝杆菌可通过呼吸道、消化道或破呼吸道、消化道或破损的皮肤黏膜的皮肤黏膜进入入机体，侵犯多种机体，侵犯多种组织器官，引起相器官，引起相应器官的器官的结核病，以核病，以肺肺结核核最最为常常见。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌肺部感染肺部感染通通过飞沫或沫或尘埃，埃，结核分枝杆菌核分枝杆菌经呼吸道极易呼吸道极易进入肺泡，故入肺泡，故肺部感染最肺部感染最为多多见。肺肺结核核可分可分为原原发感染和原感染和原发后感染后感染。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌原原发感染感染 多多见于儿童于儿童。少数少数活菌活菌经呼

14、吸道呼吸道进入肺泡，被吞噬入肺泡，被吞噬细胞吞噬，由于菌体胞吞噬，由于菌体细胞壁的胞壁的脂脂质成分能成分能够抑制吞噬溶抑制吞噬溶酶体的形成，使得体的形成，使得细菌不被菌不被杀死而在吞噬死而在吞噬细胞内胞内继续繁殖，破坏吞噬繁殖，破坏吞噬细胞，胞，释放放细菌引起肺泡的炎症；也可菌引起肺泡的炎症；也可经淋巴管到达肺淋巴管到达肺门淋巴淋巴结引起肺引起肺门淋巴淋巴结的炎症的炎症。多数多数感染者由于机体逐感染者由于机体逐渐产生生细胞免疫，使病灶胞免疫，使病灶钙化或化或纤维化，但化，但病灶内可能有一定量的病灶内可能有一定量的结核分枝杆菌核分枝杆菌长期潜伏，如果机体的抵抗力期潜伏，如果机体的抵抗力较弱，免疫

15、反弱，免疫反应差，差，细菌可菌可经血液、淋巴血液、淋巴结播散至全身而引起全身播散至全身而引起全身粟粒粟粒样结核核。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌原原发后感染后感染 主要主要发生于成人生于成人。大多大多为内源性感染，极少由外源性感染引起内源性感染，极少由外源性感染引起。因因机体已机体已产生生对结核分枝杆菌的特异性核分枝杆菌的特异性细胞免疫，故病灶比胞免疫，故病灶比较局限，多局限，多为增生增生样病病变而形成慢性肉芽而形成慢性肉芽肿（结核核结节），），最最终发生干酪生干酪样坏死，坏死，经纤维化而愈合化而愈合。原原发后后感染常感染常发生于肺尖部以及含氧生于肺尖部以及含氧较丰富的部位。丰富的部位。第

16、一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌肺外感染肺外感染部分部分结核患者体内的核患者体内的结核分枝杆菌可核分枝杆菌可经血液、淋巴液血液、淋巴液扩散侵入肺散侵入肺外外组织器官，引起相器官，引起相应的的脏器器结核，如核，如脑、肾、骨、生殖器官等、骨、生殖器官等结核。核。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌（三）免疫性（三）免疫性 对结核核分分枝枝杆杆菌菌的的免免疫疫主主要要表表现为感感染染局局限限化化、抑抑制制细菌菌繁繁殖殖、阻阻止止细菌菌扩散散。结核核分分枝枝杆杆菌菌为胞胞内内菌菌，以以细胞胞免免疫疫为主主，但但常常伴伴有有超超敏敏反反应的的发生生。实验表明表明结核分枝杆菌中不同的成分可刺激机体核分枝杆菌

17、中不同的成分可刺激机体产生不同的反生不同的反应。机机体体对结核核分分枝枝杆杆菌菌的的免免疫疫是是一一种种有有菌菌免免疫疫，或或称称传染染免免疫疫，体体内内有有菌菌存存在在时，机机体体对结核核分分枝枝杆杆菌菌的的再再次次感感染染有有一一定定的的免免疫疫力力，一一旦体内旦体内结核分枝杆菌被完全消核分枝杆菌被完全消灭，机体的免疫力也随之消失。，机体的免疫力也随之消失。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌三、三、结核菌素核菌素试验1.原理和方法原理和方法 结核核菌菌素素试验是是通通过检测机机体体对结核核菌菌素素的的超超敏敏反反应来来了了解解机机体体对结核分枝杆菌的核分枝杆菌的细胞免疫水平胞免疫水平。结核

18、菌素核菌素试剂有有两种两种:一一种种为旧旧结核核菌菌素素(OT)，即即将将结核核分分枝枝杆杆菌菌在在液液体体培培养养基基中中培培养养6周周后后加加热浓缩过滤制制成成，主主要要为结核核杆杆菌菌蛋蛋白白质，1:2000稀稀释后注射于前臂皮内后注射于前臂皮内。另另一一种种为纯蛋蛋白白衍衍生生物物(PPD)，是是OT经三三氯醋醋酸酸沉沉淀淀后后的的纯化化物，一般用物，一般用5U PPD注射于前臂皮内。注射于前臂皮内。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌 2.结果分析果分析 注注射射后后4872小小时观察察注注射射部部位位红肿硬硬结程程度度，若若红肿硬硬结为515mm为阳阳性性，表表明明机机体体曾曾经感感

19、染染过或或接接种种过疫疫苗苗，有有一一定定的的免免疫疫力力，但但并并不表示不表示发病病；大于大于15mm为强阳性，可能有活阳性，可能有活动性感染，需要做性感染，需要做进一步一步检查；小小于于5mm为阴阴性性，阴阴性性反反应表表明明未未感感染染过结核核分分枝枝杆杆菌菌，但但应考考虑如如下下的的假假阴阴性性反反应：原原发感感染染早早期期，机机体体尚尚未未产生生免免疫疫应答答；严重重结核核病病或或麻麻疹疹等等传染染病病导致致细胞胞免免疫疫功功能能暂时低低下下者者；老老年年人人、极极度度虚虚弱弱或或严重重营养养不不良良者者；肿瘤瘤患患者者、器器官官移移植植患患者者等等使使用用免免疫疫抑抑制制剂者以及艾

20、滋病患者。者以及艾滋病患者。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌 3.应用用 结核菌素核菌素试验可用于可用于选择卡介苗接种卡介苗接种对象及象及测定免疫效果定免疫效果；用于用于婴幼儿幼儿结核病的核病的诊断断；进行行结核病的流行病学核病的流行病学调查及及测定定肿瘤患者的瘤患者的细胞免疫功能。胞免疫功能。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌 四、微生物学四、微生物学检查当当结核病的症状和体征不典型核病的症状和体征不典型时，必，必须依靠依靠实验室室检查来帮助来帮助诊断，根据可能的感染部位断，根据可能的感染部位选取相取相应的的标本，如肺本，如肺结核采取咳痰核采取咳痰（最好取早晨第一次咳痰）；（最好取早晨第一

21、次咳痰）；肾或膀胱或膀胱结核以无菌核以无菌导尿或取中段尿或取中段尿液；尿液；结核性核性脑膜炎取膜炎取脑脊液。脊液。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌（一）直接涂片（一）直接涂片镜检 标本本直接涂片，用直接涂片，用齐-尼抗酸染色法染色后尼抗酸染色法染色后镜检，如找到抗酸杆，如找到抗酸杆菌可菌可报告告“找到抗酸杆菌找到抗酸杆菌”。标本中含有本中含有105/ml以上个以上个结核分枝杆核分枝杆菌菌镜检才能才能检出，故出，故镜检阳性患者具有阳性患者具有较强的的传染性。染性。（二）（二）浓缩集菌集菌 可可提高提高镜检的阳性率。将痰液的阳性率。将痰液标本用本用4%NaOH或或3%HC1或或6%H2SO4处理

22、以去除其中的粘稠成分，然后离心沉淀，使理以去除其中的粘稠成分，然后离心沉淀，使细菌菌浓缩，再取沉淀物涂片染色。再取沉淀物涂片染色。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌（三）分离培养（三）分离培养 标本本处理理后后接接种种于于相相应的的培培养养基基，能能提提高高检出出的的阳阳性性率率，但但费时较长，一一般般24周周长出出肉肉眼眼可可见的的菌菌落落，如如果果在在常常规时间尚尚未未见菌落生菌落生长，培养需要延，培养需要延续至至68周方可明确周方可明确为培养阴性。培养阴性。（四）快速（四）快速诊断断 应用用PCR直直接接从从临床床标本本检测结核核分分枝枝杆杆菌菌DNA，敏敏感感性性在在55%90%，特特

23、异异性性达达99%以以上上；如如标本本涂涂片片染染色色镜检为阳阳性性，PCR的的 敏敏 感感 性性 达达 最最 高高。亦亦 可可 用用 酶 免免 疫疫 测 定定(enzyme immunoassay，EIA)检测结核核分分枝枝杆杆菌菌抗抗原原或或抗抗体体，但但敏敏感感性性和特异性均比其他方法低，和特异性均比其他方法低，仅用于常用于常规初步初步诊断。断。第一第一节 结核分枝杆菌核分枝杆菌五、防治原五、防治原则广泛广泛接种卡介苗能大大地降低接种卡介苗能大大地降低结核病的核病的发病率。新生儿可直病率。新生儿可直接接种，接接种，约80%可可获得保得保护力。其他人群可根据力。其他人群可根据结核菌素核菌素

24、试验，阴性者，阴性者给予接种。予接种。结核病治核病治疗的的药物有异烟物有异烟肼、链霉素、霉素、对氨基水氨基水杨酸酸钠、利、利福平、乙胺丁醇等。福平、乙胺丁醇等。结核分枝杆菌核分枝杆菌较易易产生耐生耐药性，治性，治疗时应规范使用抗范使用抗结核核药物，以减少耐物，以减少耐药性的性的产生。生。第二第二节 麻麻风分枝杆菌分枝杆菌v麻麻风分分枝枝杆杆菌菌（Mycobacterium.leprae）是是麻麻风病的病原菌病的病原菌。v麻麻风是是一一种种慢慢性性传染染病病，主主要要侵侵犯犯皮皮肤肤、黏黏膜膜、外外周周神神经组织。世世界界各各地地均均有有流流行行，目目前前全全球球至至少少有有1000万以上病例。

25、万以上病例。第二第二节 麻麻风分枝杆菌分枝杆菌一、生物学性状一、生物学性状麻麻风分分枝枝杆杆菌菌的的形形态、染染色色与与结核核分分枝枝杆杆菌菌相相似似。细长，略略带弯弯曲曲，常呈束状排列常呈束状排列。麻麻风分分枝枝杆杆菌菌是是一一种种典典型型的的胞胞内内寄寄生生菌菌，患患者者渗渗出出物物标本本涂涂片片中中可可见大大量量麻麻风分分枝枝杆杆菌菌存存在在于于细胞胞内内，这种种细胞胞胞胞质呈呈泡泡沫沫状状，称称为泡沫泡沫细胞胞(foam cell)，这对区区别结核分枝杆菌有重要意核分枝杆菌有重要意义。麻麻风杆菌人工培养尚未成功，南美的犰狳是最理想的杆菌人工培养尚未成功，南美的犰狳是最理想的实验动物物。

26、小小鼠足鼠足垫内注射麻内注射麻风杆菌并降低足杆菌并降低足垫的温度，可有麻的温度，可有麻风杆菌繁殖杆菌繁殖。目前目前，动物物试验是研究其致病性及是研究其致病性及筛选药物的重要手段。物的重要手段。第二第二节 麻麻风分枝杆菌分枝杆菌二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性麻麻风分枝杆菌只侵犯人，没有分枝杆菌只侵犯人，没有动物宿主，可通物宿主，可通过皮肤接触皮肤接触传播，也可通播，也可通过飞沫沫经呼吸道呼吸道传播，或因密切接触患者而播，或因密切接触患者而感染感染。麻麻风病病的潜伏期很的潜伏期很长，发病病较慢，病程慢，病程长。临床上可分床上可分结核核样型麻型麻风和瘤型麻和瘤型麻风两大两大类。第二第二节 麻麻

27、风分枝杆菌分枝杆菌二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性结核核样型麻型麻风主要侵犯面部皮肤和外周神主要侵犯面部皮肤和外周神经，病，病变与与迟发型型超敏反超敏反应有关有关。表表现为皮肤皮肤红肿、浸、浸润、局部、局部发热；受累神；受累神经粗大、有触痛。粗大、有触痛。随病程不同，病随病程不同，病变组织可可见淋巴淋巴细胞、上皮胞、上皮样细胞、多核巨胞、多核巨细胞浸胞浸润，病，病变处细胞内不易胞内不易查出麻出麻风分枝杆菌，分枝杆菌，传染性小，染性小，机体机体细胞免疫功能正常，疾病呈自限胞免疫功能正常，疾病呈自限稳定型定型。第二第二节 麻麻风分枝杆菌分枝杆菌二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性瘤型麻瘤型麻风

28、主要侵犯皮肤、黏膜，随病程的主要侵犯皮肤、黏膜，随病程的发展可侵犯内展可侵犯内脏和神和神经系系统，病，病变处可可查出大量麻出大量麻风分枝杆菌，分枝杆菌，传染性染性强，机体，机体细胞免胞免疫功能低下但体液免疫功能正常，体内疫功能低下但体液免疫功能正常，体内产生大量自身抗体，与受生大量自身抗体，与受损组织释放的自身抗原放的自身抗原结合成免疫复合物沉淀于皮肤黏膜下，形合成免疫复合物沉淀于皮肤黏膜下，形成麻成麻风结节(leproma)，面部，面部结节融合融合则呈呈狮面状，是典型的病面状，是典型的病征。征。第二第二节 麻麻风分枝杆菌分枝杆菌三、微生物学三、微生物学检查患患者者鼻鼻黏黏膜膜或或皮皮肤肤病病

29、变处取取材材涂涂片片作作抗抗酸酸染染色色，检出出抗抗酸酸杆杆菌及麻菌及麻风细胞有胞有诊断意断意义。麻麻风菌菌素素试验原原理理与与结核核菌菌素素试验相相同同，但但因因与与结核核分分枝枝杆杆菌菌有有交交叉叉反反应，对临床床诊断断帮帮助助不不大大，主主要要用用于于麻麻风的的分分型型和了解和了解预后后。第二第二节 麻麻风分枝杆菌分枝杆菌三、微生物学三、微生物学检查因因麻麻风分分枝枝杆杆菌菌不不能能大大规模模人人工工培培养养制制成成疫疫苗苗，故故目目前前尚尚无无特特异异性性预防防方方法法，主主要要依依靠靠早早期期发现，早早期期隔隔离离，早早期期治治疗，治治疗所所用用药物物主主要要是是砜类、利利福福平平等

30、等，多多种种药物物联合合用用药，以以降降低低产生生耐耐药性。性。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌白白喉喉棒棒状状杆杆菌菌（Cdiphtheriae）是是棒棒状状杆杆菌菌属属（Corynebacterium）中中致致病病性性最最强的的一一种种，经呼呼吸吸道道传播，引起白喉播，引起白喉(diphtheria)。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌一一、生物学性状、生物学性状（一）形一）形态与染色与染色 菌菌体体细长、略略带弯弯曲曲，一一端端或或两两端端常常膨膨大大呈呈棒棒状状，故故名名棒棒状状杆菌杆菌。常常分散排列成分散排列成V形、形、L形、形、Y形或形或栅栏状状。无无荚膜、无鞭毛、无菌毛，不

31、形成芽胞膜、无鞭毛、无菌毛，不形成芽胞。革革兰染染色色阳阳性性，用用美美蓝、Albert或或奈奈瑟瑟染染色色后后，在在菌菌体体末末端端（两两端端或或一一端端）可可见着着色色较深深的的异异染染颗粒粒，颗粒粒的的主主要要成成分分是是核核糖糖核核酸酸和和多多偏偏磷磷酸酸盐，对本本菌菌具具有有鉴定定意意义。细菌菌衰衰老老时异染异染颗粒可消失。粒可消失。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌（二）培养特性与生化反（二）培养特性与生化反应 需需氧或兼性氧或兼性厌氧氧。本本菌菌营养养要要求求较高高，最最适适温温度度为35 37，最最适适pH为7.0 7.6，在在含含有有凝凝固固血血清清的的吕氏氏培培养养基基(

32、Leoffler medium)上上生生长迅迅速速，12 18小小时后后即即可可形形成成细小小、湿湿润、灰灰白白色色、圆形形隆起的菌落，隆起的菌落，镜检菌体形菌体形态典型、异染典型、异染颗粒明粒明显。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌（二）培养特性与生化反（二）培养特性与生化反应 本本菌能分解葡萄糖和麦芽糖菌能分解葡萄糖和麦芽糖产酸，有的菌株能分解淀粉和糖原酸，有的菌株能分解淀粉和糖原。在在含含有有0.03%0.04%亚碲碲酸酸钾(K2TeO2.3H2O)血血琼脂脂平平板板上上培培养养时，可将可将亚碲酸碲酸钾还原原为元素碲，使菌落呈黑色元素碲，使菌落呈黑色。根根据据菌菌落落的的形形态、对亚碲

33、碲酸酸钾的的还原原能能力力以以及及生生化化反反应，可可将将本本菌菌分分为3种种类型：重型、型：重型、轻型和中型和中间型型。重型重型菌落大，灰色，不溶血，能分解淀粉菌落大，灰色，不溶血，能分解淀粉；轻型型菌落小，黑色，能溶血，不分解淀粉菌落小，黑色，能溶血，不分解淀粉；中中间型型菌落中央黑色、菌落中央黑色、边缘灰色、不溶血、不分解淀粉灰色、不溶血、不分解淀粉。3种种类型均致病，但型型均致病，但型别与疾病的与疾病的轻重无明重无明显关系。我国以关系。我国以轻型多型多见。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌（三）（三）变异异 本本菌的形菌的形态、菌落及毒力均可、菌落及毒力均可变异异。当当无毒的白喉棒状

34、杆菌携无毒的白喉棒状杆菌携带棒状杆菌噬菌体棒状杆菌噬菌体时成成为溶原性溶原性细菌菌时，即可，即可产生白喉毒素，并生白喉毒素，并遗传下去。下去。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌（四）抵抗力（四）抵抗力 本本菌菌对寒寒冷冷、干干燥燥和和日日光光的的抵抵抗抗力力较强，在在衣衣物物、儿儿童童玩玩具具等等物物品品中中可可生生存存数数日日至至数数周周，在在干干燥燥的的假假膜膜中中可可生生存存3个个月月以以上上。对湿湿热抵抵抗抗力力较弱弱，1001分分钟，或或5810分分钟便便可可死死亡亡。对一一般般消消毒毒剂敏敏感感，1%石石炭炭酸酸1分分钟或或3%来来苏儿儿10分分钟可可杀死死。对青青霉霉素素及及多

35、多数数广广谱抗抗生生素素敏敏感感，但但对磺磺胺胺、卡卡那那霉霉素素、庆大霉素不敏感。大霉素不敏感。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌二二、致病性与免疫性、致病性与免疫性（一）致病物一）致病物质1.白喉毒素白喉毒素(diphtheria toxin)是是一种毒性一种毒性强、抗原性、抗原性强的的蛋白蛋白质。白白喉喉毒毒素素分分子子量量为62103，由由A和和B两两个个肽链经二二硫硫键连接接组成，成，经胰胰酶处理后二者可理后二者可解离。解离。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌1.白喉毒素白喉毒素(diphtheria toxin)A链分分子子量量为24103，性性质稳定定，耐耐高高热，耐耐蛋蛋白

36、白酶的的作作用用。A链是毒性是毒性单位，其作用是抑制易感位，其作用是抑制易感细胞蛋白胞蛋白质的合成的合成。B链分分子子量量为38103，性性质不不稳定定，在在上上述述条条件件下下可可被被迅迅速速破破坏坏。B链是是结合合单位位，本本身身无无毒毒性性，其其作作用用是是与与易易感感细胞胞受体受体结合，合，协助助A链进入入细胞内胞内。白白喉喉毒毒素素A链在在易易感感细胞胞内内可可促促使使辅酶I上上的的腺腺苷苷二二磷磷酸酸核核糖糖与与延延伸伸因因子子2（EF-2）结合合，使使EF-2失失活活，导致致蛋蛋白白质合合成成阻断，引起阻断，引起组织坏死和病坏死和病变。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌2.索状

37、因子索状因子(cord factor)是是细菌表面的一种毒性糖脂，即海藻糖菌表面的一种毒性糖脂，即海藻糖-6-6双分枝菌酸。索双分枝菌酸。索状因子能破坏哺乳状因子能破坏哺乳动物物细胞中的胞中的线粒体，影响粒体，影响细胞呼吸与磷胞呼吸与磷酸化。酸化。3.K抗原抗原 是是细胞壁外面的一种不耐胞壁外面的一种不耐热糖蛋白，具有抗吞噬作用。糖蛋白，具有抗吞噬作用。K抗原抗原有利于白喉棒状杆菌在黏膜表面的定植。有利于白喉棒状杆菌在黏膜表面的定植。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌（二）所致疾病（二）所致疾病人人对白喉棒状杆菌普遍易感，尤以儿童最易感白喉棒状杆菌普遍易感，尤以儿童最易感。此此菌菌最最常常侵

38、侵犯犯的的部部位位是是咽咽喉喉、气气管管和和鼻鼻腔腔黏黏膜膜，偶偶尔也也可可侵侵犯犯眼眼结膜、阴道等黏膜，甚至皮肤膜、阴道等黏膜，甚至皮肤创口，故口，故传染源是患者和染源是患者和带菌者菌者。白白喉喉棒棒状状杆杆菌菌存存在在于于患患者者或或带菌菌者者鼻鼻咽咽腔腔内内，经飞沫沫或或污染染物物品品传播播。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌（二）所致疾病（二）所致疾病细菌菌侵侵入入机机体体后后，在在鼻鼻咽咽黏黏膜膜上上繁繁殖殖并并产生生外外毒毒素素，经27天天潜潜伏伏期期后后，感感染染局局部部在在细菌菌及及毒毒素素的的作作用用下下，渗渗出出的的纤维素素、白白细胞胞及及坏死的坏死的组织凝固在一起，形成

39、灰白色膜，即凝固在一起，形成灰白色膜，即假膜。假膜。假假膜膜与与黏黏膜膜下下组织紧密密粘粘连。鼻鼻、咽咽、喉喉、气气管管黏黏膜膜水水肿及及假假膜膜脱脱落可使呼吸道阻塞，甚至引起窒息死亡落可使呼吸道阻塞，甚至引起窒息死亡。细菌菌一一般般不不入入血血，只只是是外外毒毒素素入入血血（毒毒血血症症），并并与与易易感感组织细胞胞如如心心肌肌细胞胞、肾上上腺腺组织、外外周周神神经等等结合合，引引起起心心肌肌炎炎、肾上上腺腺功功能能障障碍碍、血血压下下降降、软腭腭麻麻痹痹、声声嘶嘶、吞吞咽咽困困难等等临床床症症状状和和体体征。征。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌（三）免疫性三）免疫性 在在白喉病后、白喉

40、病后、隐性感染及性感染及经预防接种均可防接种均可获得特异性免疫力得特异性免疫力。白喉白喉的免疫力主要依靠白喉抗毒素的免疫力主要依靠白喉抗毒素对毒素的中和作用毒素的中和作用。抗抗毒毒素素与与白白喉喉毒毒素素结合合后后，可可阻阻止止B链与与易易感感细胞胞结合合，结果果使使A链不能不能进入入细胞内胞内发挥毒性作用毒性作用。新新生生儿儿经由由胎胎盘从从母母体体获得得抗抗毒毒素素，以以后后这种种被被动免免疫疫逐逐渐消消失失，至至1周周岁时几乎全部易感几乎全部易感。由由于于近近年年计划划免免疫疫对婴幼幼儿儿及及学学龄前前儿儿童童普普遍遍进行行疫疫苗苗接接种种，白白喉喉的的发病率已大幅度降低。病率已大幅度降

41、低。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌三、微生物学三、微生物学检查法法包括病原菌的分离和毒力包括病原菌的分离和毒力鉴定。定。（一）病原菌的分离（一）病原菌的分离鉴定定1.标本本 用用鼻咽拭子从患者的鼻咽病鼻咽拭子从患者的鼻咽病变部位假膜及其部位假膜及其边缘取材。取材。2.涂片涂片镜检 将将棉棉拭拭子子直直接接涂涂片片，用用革革兰、美美蓝或或Albert染染色色后后镜检，如如有有典典型型形形态的的白白喉棒状杆菌，喉棒状杆菌，结合合临床可初步做出床可初步做出诊断，以便及断，以便及时治治疗。3.分离培养分离培养 将将标本本接接种种于于吕氏氏血血清清斜斜面面培培养养基基，孵孵育育612小小时后后，取

42、取培培养养物物作作涂涂片片镜检，检出出率率比比直直接接涂涂片片高高，有有助助于于快快速速诊断断。延延长培培养养至至18小小时，可可见灰灰白色小菌落，可白色小菌落，可进一步作生化反一步作生化反应和毒力和毒力鉴定。定。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌四、防治原四、防治原则（一（一）人工主）人工主动免疫免疫 注射注射白喉白喉类毒素是毒素是预防白喉的重要措施，可防白喉的重要措施，可显著地降低白喉著地降低白喉的的发病率和死亡率病率和死亡率。我国我国目前目前应用白喉用白喉类毒素、百日咳死菌苗、破毒素、百日咳死菌苗、破伤风类毒素混毒素混合制合制剂(白百破三白百破三联疫苗，疫苗，DPT)进行人工主行人工主

43、动免疫，效果免疫，效果较好好。第三第三节 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌四、防治原四、防治原则（二）人工被二）人工被动免疫免疫 对密切接触白喉患者的儿童需肌内注射密切接触白喉患者的儿童需肌内注射10002000U白喉抗白喉抗毒素毒素进行行紧急急预防，同防，同时应注射白喉注射白喉类毒素延毒素延长免疫力免疫力。对白喉患者要早期、足量注射白喉抗毒素治白喉患者要早期、足量注射白喉抗毒素治疗。对白喉患者白喉患者还应进行隔离，并行隔离，并应用青霉素、用青霉素、红霉素等霉素等进行抗行抗菌治菌治疗。第四第四节 嗜肺嗜肺军团菌菌v军团菌（菌（Legionella）是）是军团病的病原菌病的病原菌。v自自1976年在美国

44、年在美国费城城举行的退伍行的退伍军人会人会议上首次被上首次被发现，截止，截止1991年，已年，已发现军团菌有菌有39个种及个种及3个个亚种，种，61个血清型。个血清型。对人有致病性的主要人有致病性的主要为嗜肺嗜肺军团菌（菌（Lpneumophila）。v军团病病在世界各地均有流行，在我国也有散在世界各地均有流行，在我国也有散发或暴或暴发流行。流行。第四第四节 嗜肺嗜肺军团菌菌一一、生物学性状、生物学性状（一）形一）形态与染色与染色 革革兰阴阴性性杆杆菌菌，在在感感染染组织中中呈呈球球杆杆状状，人人工工培培养养后后呈呈多多形形态性性。有有端生或端生或侧生鞭毛，有菌毛和微生鞭毛，有菌毛和微荚膜，无

45、芽胞膜，无芽胞。用用常常规染染色色不不易易着着色色，用用Dieterle镀银法法被被染染成成黑黑褐褐色色，经Giemsa染色呈染色呈红色色。第四第四节 嗜肺嗜肺军团菌菌一一、生物学性状、生物学性状（二）培养特性二）培养特性 为专性需氧菌。在性需氧菌。在2.5%5%CO2环境中生境中生长良好良好。最最适生适生长温度温度为35，最适，最适pH为6.4 7.2。营养养要要求求较高高，在在含含半半胱胱氨氨酸酸和和铁的的培培养养基基上上生生长良良好好，在在活活性性炭炭酵酵母母浸浸出出液液琼脂脂培培养养基基(BCYE)中中，35天天形形成成l2mm、灰灰白色、湿白色、湿润、有光、有光泽的的圆形突起菌落，并

46、有特殊臭味形突起菌落，并有特殊臭味。在在富有富有L-酪氨酸酪氨酸-苯丙氨酸苯丙氨酸琼脂平板上能脂平板上能产生棕色水溶性色素生棕色水溶性色素。不不发酵酵糖糖类，-内内酰胺胺酶阳阳性性，氧氧化化酶与与过氧氧化化氢酶试验阳阳性性，能分解尿酸能分解尿酸盐。第四第四节 嗜肺嗜肺军团菌菌一一、生物学性状、生物学性状（三）抗原三）抗原组成成 有有菌菌体体抗抗原原(O)和和鞭鞭毛毛抗抗原原(H)，根根据据O抗抗原原将将本本菌菌分分为15个个血血清清型，在我国以型，在我国以1型和型和6型常型常见。（四）抵抗力四）抵抗力 在在自自然然界界可可长期期存存活活，污水水中中可可存存活活1年年以以上上，在在自自来来水水中

47、中可可存存活活约1 年年。对酸酸有有较强抵抵抗抗力力，但但对一一些些化化学学消消毒毒剂较敏敏感感，1%来来苏儿儿处理数分理数分钟即可即可杀死死军团菌。菌。第四第四节 嗜肺嗜肺军团菌菌 二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性（一）致病物一）致病物质 嗜嗜肺肺军团菌的微菌的微荚膜、菌毛、毒素和多种膜、菌毛、毒素和多种酶类可能是致病因可能是致病因子子。感染感染始于下呼吸道，病菌被肺泡巨噬始于下呼吸道，病菌被肺泡巨噬细胞吞噬，但能通胞吞噬，但能通过产生吞噬生吞噬细胞活化抑制因子如磷酸胞活化抑制因子如磷酸酶、核酸、核酸酶等抑制溶等抑制溶酶体与体与吞噬体的融合，使吞噬体的融合，使细菌不被菌不被杀死而在死而在

48、细胞内生胞内生长繁殖，繁殖，导致致细胞死亡并胞死亡并释放子代菌，使更多的放子代菌，使更多的细胞受染。胞受染。第四第四节 嗜肺嗜肺军团菌菌（二）所致疾病（二）所致疾病 军团病病流流行行于于夏夏秋秋季季，其其他他季季节也也有有散散发病病例例，主主要要通通过气气溶胶溶胶传播，播，经呼吸道吸入而感染呼吸道吸入而感染。常常见的的感感染染来来源源为污染染的的空空调和和供供水水系系统，未未发现有有人人与与人人之之间的直接的直接传播播。中中老老年年、吸吸烟烟者者、慢慢性性疾疾病病患患者者及及接接受受免免疫疫抑抑制制剂治治疗者者易易感染感染。第四第四节 嗜肺嗜肺军团菌菌（二）所致疾病（二）所致疾病 军团病病有流

49、感有流感样型、肺炎型和肺外感染三种型、肺炎型和肺外感染三种临床床类型型。流流感感样型型又又称称庞提提阿阿克克热(Pan-tiac fever)（因因首首先先在在美美国国密密执安安州州的的庞提提阿阿克克市市发现），临床床症症状状较轻，表表现为发热、头痛痛、肌痛等，肌痛等，X线未未见有肺炎征象，有肺炎征象，预后良好后良好。肺肺炎炎型型表表现为急急性性发热、寒寒战、干干咳咳、头痛痛、全全身身症症状状明明显，有有时伴伴有有中中枢枢神神经症症状状，并并可可发展展为呼呼吸吸衰衰竭竭，胸胸透透肺肺部部可可有有点点状状和和结节状浸状浸润病灶，死亡率病灶，死亡率15%。肺肺外外感感染染型型为继发性性感感染染，是

50、是重重症症军团病病发生生菌菌血血症症时细菌菌可可播播散至全身多部位，主要波及的器官有散至全身多部位，主要波及的器官有脑、肝、脾、肝、脾、肾等。等。第四第四节 嗜肺嗜肺军团菌菌（三）免疫性三）免疫性 军团菌是菌是细胞内寄生菌，故胞内寄生菌，故细胞免疫在抗感染中起主要作胞免疫在抗感染中起主要作用用。感染感染后后产生的特异性抗体可通生的特异性抗体可通过其其调理作用而促理作用而促进吞噬，吞噬，但不能加但不能加强细胞内的胞内的杀菌作用。菌作用。第四第四节 嗜肺嗜肺军团菌菌 三、微生物学三、微生物学检查标本本可取痰液、肺活可取痰液、肺活检组织、肺灌洗液、胸腔、肺灌洗液、胸腔积液或血液液或血液。涂涂片片后后