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1、课题 3分解纤维素的微生物的分离纤维素和纤维素酶1纤维素多糖纤维素是_类物质,广泛存在于自然界,如棉花、木材、作物秸秆等富含纤维素。2纤维素酶复合C1 酶葡萄糖(1)纤维素酶是一种_酶。(2)三种组分:_、CX 酶和葡萄糖苷酶。(3)作用结果:最终将纤维素分解成_。纤维素分解菌的筛选1方法:_染色法。刚果红2原理红色透明圈(1)刚果红是一种染料,可与纤维素形成_复合物。(2)纤维素被分解后,刚果红纤维素的复合物无法形成,在纤维素分解菌周围形成_。3实验步骤(1)土壤取样:选择富含纤维素的环境。(2)选择培养目的:增加纤维素分解菌的浓度,确保能够从样品中分离到所需要的微生物。葡萄糖操作方法:将土
2、样加入装有 30 mL 选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在_上,在一定温度下振荡培养 12 d,直至培养液变_,也可重复选择培养。(3)进一步鉴定实验:发酵产生纤维素酶的实验。测定方法:对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_进行定量的测定。摇床混浊纤维素和纤维素酶1纤维素与淀粉比较纤维素与淀粉都是由葡萄糖组成的,但组成两者的葡萄糖的连接方式不同,因而使两者的形态完全不同。(1)纤维素是由葡萄糖分子按1,4 糖苷键连接而成的,淀粉是由葡萄糖分子按1,4 糖苷键连接而成的。(2)人类以淀粉为主要能量来源,但完全不能消化纤维素,而反刍动物和大量的微生物则主要以纤维素为能量来源。原因:在反刍动物的瘤
3、胃中生活着大量的可以分解纤维素的微生物。2纤维素酶(1)纤维素酶的催化原理纤维素酶中的 C1 酶、CX 酶使纤维素分解成纤维二糖,接着葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡萄糖。正是在这三种酶的协同作用下,纤维素最终被水解成葡萄糖,为微生物的生长提供营养,同样,也可以为人类所利用。(2)纤维素酶可以作为禽兽饲料添加剂。其作用机制在于,它可以打破植物细胞壁,使胞内原生质体暴露出来,由内源酶进一步降解,所以除了细胞壁被降解供能外,还提高了胞内物质的消化率,从而有效地提高饲料的有效能值。纤维素分解菌的筛选分离1两种刚果红染色法的比较(1)方法一:先培养微生物,再加入刚果红优点:显示出的颜色反应,基本上是纤维素
4、分解菌的作用。缺点:操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂。(2)方法二:在倒平板时就加入刚果红优点:操作简便,不存在菌落混杂的问题。缺点A由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊,因为培养基中纤维素占主要地位,因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。B有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红所形成的明显透明圈,与纤维素分解菌不易区分。2纤维素分解菌筛选的原理图 223分解纤维素的微生物的分离图 23其中当纤维素分解菌的浓度足够时,选择培养这一步可以省略。土壤中分解尿素的细
5、菌的分离与计数和分离分解纤维素的微生物的实验流程都要经过土壤取样、梯度稀释、涂布、分离。前者需要分离、计数,只能用选择培养基;后者先经过选择培养基以增加纤维素分解菌的浓度,然后梯度稀释,涂布到鉴别培养基上,最后挑选菌落。纤维素与纤维素酶【例 1】纤维素酶可以将下列哪种物质分解()A牛肉片C滤纸条B鱼片D塑料条【名师点拨】:纤维素酶只能分解含纤维素的物质。滤纸条的主要成分是纤维素,所以可以将滤纸条分解。【答案】:C【配对练习 1】微生物体内能够分解纤维素成纤维二糖的是()AC1 酶和 CX 酶BC1 酶、葡萄糖苷酶CCX 酶、葡萄糖苷酶D葡萄糖苷酶解析:葡萄糖苷酶是将纤维二糖分解成葡萄糖。答案:A纤维素分解菌的筛选分离【例 2】在加入刚果红纤维素的培养基中出现透明圈的菌落是()A分解尿素的细菌C分解纤维素的细菌B硝化细菌D乳酸菌【名师点拨】:分解纤维素的细菌将纤维素分解后,刚果红纤维素的复合物就无法形成,培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。【答案】:C【配对练习 2】刚果红染色时,加入刚果红可在()制备培养基时培养基上长出菌落时AC梯度稀释时 倒平板时 涂布时BDC