细胞融合学习.pptx

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1、第七章：细胞重组与细胞融合视频视频1 1第1页/共17页第七章：细胞重组与细胞融合但科学家表示，人类与动物杂交的研究会对艾滋病治疗研究，人类对癌症的免疫性研究，以及人体可换器官的研究等都能提供帮助。第2页/共17页细胞生物学特点细胞生物学特点：前沿性；综合性：多学科交叉；争议性：伦理道德；应用性：工程类课程的特点，即重在产品和技术。第一章 细胞工程简介 回顾第3页/共17页第三部分：细胞融合细胞融合细胞融合 使用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。细胞融合不仅能产生同种细胞融合，也能产生种间细胞的融合，因此在创造新细胞、培育新品种方面意义重大。第4页/共17页第三部分：细胞融

2、合1)1)亲本来源亲本来源 a)a)同核体同核体 基因型相同的细胞融合而成的融合细胞。b)b)异核体异核体 来自不同基因型的融合细胞。2)2)融合效果融合效果 a)对称融合对称融合 两个完整细胞间的融合。b)不对称融合不对称融合 利用物理或化学方法使亲本的核或细胞质失活后再与另外一个完整的细胞进行融合。第5页/共17页第三部分：细胞融合细胞质融合过程：细胞质融合过程：I.两原生质体或细胞相互靠近；II.。第6页/共17页第三部分：细胞融合第7页/共17页第三部分：细胞融合合核细胞合核细胞 含有多个核的异核细胞合并后形成的单核细胞。细胞核的合并发生在有丝分裂过程中。嵌合细胞嵌合细胞 融合细胞没有

3、发生细胞核的融合，仅发生了细胞质的融合。嵌合细胞极易发生分离，失去原来的杂合性状。第8页/共17页第三部分：细胞融合酶解处理酶解处理 纤维素酶、果胶酶原生质体纯化原生质体纯化 （网筛过滤）第9页/共17页第三部分：细胞融合2 2、细胞融合方法、细胞融合方法生物法生物法化学法化学法 PEG融合技术物理法物理法 电融合技术第10页/共17页第三部分：细胞融合生物法生物法病毒诱导细胞融合主要是由于病毒与宿主细胞膜直接融合。1962年，日本冈田善雄发现仙台病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合成多核细胞。1965年，英国哈里斯等进一步证实灭活的病毒在适当条件下可以诱发动物细胞融合。第11页/共17页第三部分：细

4、胞融合诱导细胞融合病毒：仙台病毒仙台病毒、疱疹病毒、牛痘病毒、副黏液病毒等。条件条件：适当pH值、有足够量的Ca2+。缺点：缺点：1)操作繁琐；2)一旦灭活不充分，病毒可能感染操作者与亲本细胞。第12页/共17页第三部分：细胞融合病毒诱导细胞融合的步骤病毒诱导细胞融合的步骤：I.使足够量的病毒颗粒附着在细胞膜上起搭桥作用，使细胞聚集在一起；II.通过病毒与原生质体或细胞膜的作用使2个细胞膜间相互融合，胞质相互渗透。黏结部位质膜被破坏，不同细胞间形成通道，细胞质流通并融合，病毒也随之进入细胞质；III.两个细胞合并形成融合细胞，再生细胞壁；IV.筛选融合细胞。第13页/共17页第三部分：细胞融合第14页/共17页第三部分：细胞融合化学法化学法采用化学诱导剂促使细胞融合。化学诱导剂化学诱导剂：NaNO3、高pH的高浓度Ca2+、PEG、溶菌酶、明胶、抗体、植物凝集素刀豆蛋白A、聚乙烯醇等。诱导原理诱导原理：细胞膜电荷平衡被打破。第15页/共17页第16页/共17页感谢您的观看！第17页/共17页