新生儿筛查试验室技术规范学习教案.pptx

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1、会计学1新生儿筛查试验室技术规范新生儿筛查试验室技术规范第一页，共41页。新生儿疾病新生儿疾病(jbng)筛查筛查实验室检测技术规范实验室检测技术规范 n n本规范适用于承担新生儿苯丙酮尿症和先天性甲状腺功能减低症等本规范适用于承担新生儿苯丙酮尿症和先天性甲状腺功能减低症等遗传代谢性、先天性内分泌疾病实验室检测的医疗保健机构。遗传代谢性、先天性内分泌疾病实验室检测的医疗保健机构。n n一、基本要求一、基本要求 n n（一）机构要求（一）机构要求 n n1 1、取得医疗机构执业许可证的医疗保健机构。、取得医疗机构执业许可证的医疗保健机构。n n2 2、获得省、自治区、直辖市卫生行政部门审查批准、

2、取得母婴、获得省、自治区、直辖市卫生行政部门审查批准、取得母婴保健技术保健技术(jsh)(jsh)服务执业许可证的医疗保健机构。服务执业许可证的医疗保健机构。n n3 3、年筛查量达、年筛查量达3 3万人以上。万人以上。第1页/共41页第二页，共41页。n n（二）人员要求（二）人员要求（二）人员要求（二）人员要求 n n1 1、业务负责人：全日制医学及相关学校本科以上学、业务负责人：全日制医学及相关学校本科以上学、业务负责人：全日制医学及相关学校本科以上学、业务负责人：全日制医学及相关学校本科以上学历，高级职称，具有儿科或临床检验历，高级职称，具有儿科或临床检验历，高级职称，具有儿科或临床检

3、验历，高级职称，具有儿科或临床检验1010年以上工作经年以上工作经年以上工作经年以上工作经验，从事新生儿疾病筛查工作验，从事新生儿疾病筛查工作验，从事新生儿疾病筛查工作验，从事新生儿疾病筛查工作5 5年以上，并熟悉或掌年以上，并熟悉或掌年以上，并熟悉或掌年以上，并熟悉或掌握新生儿疾病筛查网络运作和管理。握新生儿疾病筛查网络运作和管理。握新生儿疾病筛查网络运作和管理。握新生儿疾病筛查网络运作和管理。n n2 2、实验室技术人员：中专以上学历，从事检验工作、实验室技术人员：中专以上学历，从事检验工作、实验室技术人员：中专以上学历，从事检验工作、实验室技术人员：中专以上学历，从事检验工作两年以上，具

4、有技师或以上职称，接受过新生儿疾病两年以上，具有技师或以上职称，接受过新生儿疾病两年以上，具有技师或以上职称，接受过新生儿疾病两年以上，具有技师或以上职称，接受过新生儿疾病筛查相关实验室知识和技能培训，包括筛查相关实验室知识和技能培训，包括筛查相关实验室知识和技能培训，包括筛查相关实验室知识和技能培训，包括(boku)(boku)：n n（1 1）新生儿疾病筛查的目的、原则、方法及网络运）新生儿疾病筛查的目的、原则、方法及网络运）新生儿疾病筛查的目的、原则、方法及网络运）新生儿疾病筛查的目的、原则、方法及网络运行；行；行；行；n n（2 2）滤纸干血片采集、保存、处理的相关知识；）滤纸干血片采

5、集、保存、处理的相关知识；）滤纸干血片采集、保存、处理的相关知识；）滤纸干血片采集、保存、处理的相关知识；n n（3 3）标记免疫检测技术的基本知识和技能操作；）标记免疫检测技术的基本知识和技能操作；）标记免疫检测技术的基本知识和技能操作；）标记免疫检测技术的基本知识和技能操作；n n（4 4）新生儿疾病筛查结果的定量和定性判断；）新生儿疾病筛查结果的定量和定性判断；）新生儿疾病筛查结果的定量和定性判断；）新生儿疾病筛查结果的定量和定性判断；n n（5 5）实验室质量控制的基本技能；）实验室质量控制的基本技能；）实验室质量控制的基本技能；）实验室质量控制的基本技能；n n（6 6）消毒隔离技术

6、。）消毒隔离技术。）消毒隔离技术。）消毒隔离技术。n n3 3、文案人员：熟练掌握计算机操作（文字处理及统、文案人员：熟练掌握计算机操作（文字处理及统、文案人员：熟练掌握计算机操作（文字处理及统、文案人员：熟练掌握计算机操作（文字处理及统计）技术且有档案管理的工作经验。计）技术且有档案管理的工作经验。计）技术且有档案管理的工作经验。计）技术且有档案管理的工作经验。第2页/共41页第三页，共41页。（三）设备要求（三）设备要求（三）设备要求（三）设备要求(yoqi)(yoqi)（另附图）（另附图）（另附图）（另附图）第3页/共41页第四页，共41页。第4页/共41页第五页，共41页。（四）房屋要

7、求（四）房屋要求（四）房屋要求（四）房屋要求 1 1、实验室用房、实验室用房、实验室用房、实验室用房2 2间，共计使用面积至少间，共计使用面积至少间，共计使用面积至少间，共计使用面积至少4040平方米以上平方米以上平方米以上平方米以上(yshng)(yshng)；2 2、综合用房、综合用房、综合用房、综合用房1 1间，至少间，至少间，至少间，至少1515平方米以上平方米以上平方米以上平方米以上(yshng)(yshng)，用于滤纸，用于滤纸，用于滤纸，用于滤纸干血片的验收、计算机录入和资料登记保存；干血片的验收、计算机录入和资料登记保存；干血片的验收、计算机录入和资料登记保存；干血片的验收、计

8、算机录入和资料登记保存；3 3、血片储藏室或冰库一间，用于滤纸干血片的长期保存。、血片储藏室或冰库一间，用于滤纸干血片的长期保存。、血片储藏室或冰库一间，用于滤纸干血片的长期保存。、血片储藏室或冰库一间，用于滤纸干血片的长期保存。第5页/共41页第六页，共41页。n n二、实施原则及职责二、实施原则及职责二、实施原则及职责二、实施原则及职责 n n1 1、收到标本应在、收到标本应在、收到标本应在、收到标本应在2424小时内登记，不符合要求的标本应小时内登记，不符合要求的标本应小时内登记，不符合要求的标本应小时内登记，不符合要求的标本应立即退回重新采集；立即退回重新采集；立即退回重新采集；立即退

9、回重新采集；n n2 2、采用国家、采用国家、采用国家、采用国家(guji)(guji)推荐的实验方法进行滤纸干血片推荐的实验方法进行滤纸干血片推荐的实验方法进行滤纸干血片推荐的实验方法进行滤纸干血片检测；检测；检测；检测；n n3 3、必须参加全国新生儿疾病筛查实验室间能力验证计、必须参加全国新生儿疾病筛查实验室间能力验证计、必须参加全国新生儿疾病筛查实验室间能力验证计、必须参加全国新生儿疾病筛查实验室间能力验证计划，及时上报测定结果，并对回报结果进行分析；划，及时上报测定结果，并对回报结果进行分析；划，及时上报测定结果，并对回报结果进行分析；划，及时上报测定结果，并对回报结果进行分析；第6

10、页/共41页第七页，共41页。n n4 4、统计分析筛查技术服务的有关信息，包括筛查量、确诊阳、统计分析筛查技术服务的有关信息，包括筛查量、确诊阳性数和治疗数，定期向省、市卫生行政部门报告；性数和治疗数，定期向省、市卫生行政部门报告；n n5 5、发现漏检病例，需寻找原因，立即向卫生行政部门报告；、发现漏检病例，需寻找原因，立即向卫生行政部门报告；n n6 6、提供可疑阳性病例的确诊和阳性病人治疗转诊联系服务；、提供可疑阳性病例的确诊和阳性病人治疗转诊联系服务；n n7 7、必须建立以下实验室规章制度、必须建立以下实验室规章制度(u zhn zh d)(u zhn zh d)：n n（1 1）

11、人员分工责任制度；）人员分工责任制度；n n（2 2）各种技术操作常规；）各种技术操作常规；n n（3 3）质量控制管理制度；）质量控制管理制度；n n（4 4）仪器管理及校准制度；）仪器管理及校准制度；n n（5 5）试剂材料管理制度；）试剂材料管理制度；n n（6 6）标本登记保存制度；）标本登记保存制度；n n（7 7）消毒隔离制度。）消毒隔离制度。第7页/共41页第八页，共41页。n n8 8、实验室检测结果登记和资料保存，包括：、实验室检测结果登记和资料保存，包括：n n（1 1）不符合要求退回的血片标本的信息，应注明原因及）不符合要求退回的血片标本的信息，应注明原因及日期。日期。n

12、 n（2 2）每次检测结果的原始资料，包括标准曲线、质控结）每次检测结果的原始资料，包括标准曲线、质控结果、筛查结果。果、筛查结果。n n（3 3）有关质量控制资料，包括室内质控图、实验室间能）有关质量控制资料，包括室内质控图、实验室间能力比对检验结果反馈、失控原因、纠正方法等。力比对检验结果反馈、失控原因、纠正方法等。n n（4 4）可疑阳性追踪随访）可疑阳性追踪随访(su fn)(su fn)记录。记录。第8页/共41页第九页，共41页。n n三、检测方法三、检测方法 n n采用国家推荐的实验方法和批准的标准试剂采用国家推荐的实验方法和批准的标准试剂盒。对于盒。对于2次实验结果均大于阳性切

13、值的，次实验结果均大于阳性切值的，需追踪确诊。需追踪确诊。n n（一）苯丙酮尿症（一）苯丙酮尿症 n n1、以苯丙氨酸（、以苯丙氨酸（Phe）作为筛查指标；）作为筛查指标；n n2、Phe浓度浓度(nngd)阳性切值根据实验室阳性切值根据实验室及试剂盒而定，一般大于及试剂盒而定，一般大于120mol/L（大于（大于2mg/dl）；）；n n3、推荐方法为细菌抑制法、定量酶法和荧、推荐方法为细菌抑制法、定量酶法和荧光分析法。光分析法。第9页/共41页第十页，共41页。n n（二）先天性甲状腺功能减低症（二）先天性甲状腺功能减低症 n n1、以促甲状腺素（、以促甲状腺素（TSH）作为筛查指标；）作

14、为筛查指标；n n2、TSH浓度的阳性浓度的阳性(yngxng)切值根据实切值根据实验室及试剂盒而定，一般为验室及试剂盒而定，一般为10IU/ml-20IU/ml间；间；n n3、推荐方法为酶联免疫吸附法（、推荐方法为酶联免疫吸附法（ELISA）、）、酶免疫荧光分析法（酶免疫荧光分析法（EFIA）和时间分辨免）和时间分辨免疫荧光分析法（疫荧光分析法（Tr-FIA）。）。第10页/共41页第十一页，共41页。n n四、质量控制四、质量控制 n n1、检测机构须在接到标本、检测机构须在接到标本5个个工作日内进行检测，并出具可工作日内进行检测，并出具可疑阳性报告。疑阳性报告。n n2、每月向血片采集

15、机构反馈实、每月向血片采集机构反馈实验室检测结果。验室检测结果。n n3、定期参加全国新生儿疾病筛、定期参加全国新生儿疾病筛查实验室间能力比对检验，成查实验室间能力比对检验，成绩合格。绩合格。n n4、滤纸干血片标本必须保存在、滤纸干血片标本必须保存在2-8条件下至少条件下至少(zhsho)5年，年，以备复查。以备复查。n n5、备有完整的实验室检测信息、备有完整的实验室检测信息资料，存档保留至少资料，存档保留至少(zhsho)10年。年。n n6、结合卫生部指定质量控制中、结合卫生部指定质量控制中心定期公布的各种试剂灵敏度心定期公布的各种试剂灵敏度和特异性的标准，对实验室的和特异性的标准，对

16、实验室的筛查方法和结果进行评估和调筛查方法和结果进行评估和调整。整。第11页/共41页第十二页，共41页。标记免疫检测技术标记免疫检测技术标记免疫检测技术标记免疫检测技术(jsh)(jsh)的基本知识和技能操作的基本知识和技能操作的基本知识和技能操作的基本知识和技能操作方法学的发展方法学的发展(fzhn)(fzhn)：第12页/共41页第十三页，共41页。时间分辨时间分辨时间分辨时间分辨(fnbin)(fnbin)荧光免疫分析技术荧光免疫分析技术荧光免疫分析技术荧光免疫分析技术原理：原理：原理：原理：时间分辨荧光免疫分析（时间分辨荧光免疫分析（时间分辨荧光免疫分析（时间分辨荧光免疫分析（tim

17、e-resolved fluoroim-munoassay,TrFIA)time-resolved fluoroim-munoassay,TrFIA)是用三价稀土离子及其螯合物作为示踪物，代替荧光物质、同位素、酶是用三价稀土离子及其螯合物作为示踪物，代替荧光物质、同位素、酶是用三价稀土离子及其螯合物作为示踪物，代替荧光物质、同位素、酶是用三价稀土离子及其螯合物作为示踪物，代替荧光物质、同位素、酶和化学发光物质，标记蛋白质、多肽、激素、抗体、核酸探针或生物活和化学发光物质，标记蛋白质、多肽、激素、抗体、核酸探针或生物活和化学发光物质，标记蛋白质、多肽、激素、抗体、核酸探针或生物活和化学发光物质，

18、标记蛋白质、多肽、激素、抗体、核酸探针或生物活性细胞。当反应体系发生后，如抗原抗体免疫反应，靶细胞和效应细胞性细胞。当反应体系发生后，如抗原抗体免疫反应，靶细胞和效应细胞性细胞。当反应体系发生后，如抗原抗体免疫反应，靶细胞和效应细胞性细胞。当反应体系发生后，如抗原抗体免疫反应，靶细胞和效应细胞的杀伤反应等发生后，的杀伤反应等发生后，的杀伤反应等发生后，的杀伤反应等发生后，核酸探针杂交反应，用时间分辨荧光仪，测定最核酸探针杂交反应，用时间分辨荧光仪，测定最核酸探针杂交反应，用时间分辨荧光仪，测定最核酸探针杂交反应，用时间分辨荧光仪，测定最后产物的荧光强度。根据荧光强度和相对荧光强度比值，判断反应

19、体系后产物的荧光强度。根据荧光强度和相对荧光强度比值，判断反应体系后产物的荧光强度。根据荧光强度和相对荧光强度比值，判断反应体系后产物的荧光强度。根据荧光强度和相对荧光强度比值，判断反应体系中分析物的浓度，达到定量分析的目的中分析物的浓度，达到定量分析的目的中分析物的浓度，达到定量分析的目的中分析物的浓度，达到定量分析的目的(md)(md)。固相抗体固相抗体固相抗体固相抗体+待测抗原待测抗原待测抗原待测抗原 固相抗体固相抗体固相抗体固相抗体-抗原结合物抗原结合物抗原结合物抗原结合物+标记抗体（标记抗体（标记抗体（标记抗体（Eu3+Eu3+等）等）等）等）固相抗体固相抗体固相抗体固相抗体-抗原抗

20、原抗原抗原-（EuEu）标记抗体）标记抗体）标记抗体）标记抗体+增强液增强液增强液增强液 测量荧光强度测量荧光强度测量荧光强度测量荧光强度 双位点抗体夹心法原理双位点抗体夹心法原理双位点抗体夹心法原理双位点抗体夹心法原理第13页/共41页第十四页，共41页。特点：特点：特点：特点：1 1、灵敏度高、特异性强、操作简便，不用放射性物质而用镧系元素作标记物，因此具有、灵敏度高、特异性强、操作简便，不用放射性物质而用镧系元素作标记物，因此具有、灵敏度高、特异性强、操作简便，不用放射性物质而用镧系元素作标记物，因此具有、灵敏度高、特异性强、操作简便，不用放射性物质而用镧系元素作标记物，因此具有无放射性

21、污染、标记物制备简便、标记物稳定、便于长期保存、实验重复性好、分析无放射性污染、标记物制备简便、标记物稳定、便于长期保存、实验重复性好、分析无放射性污染、标记物制备简便、标记物稳定、便于长期保存、实验重复性好、分析无放射性污染、标记物制备简便、标记物稳定、便于长期保存、实验重复性好、分析速度快（速度快（速度快（速度快（1 1份份份份/S/S）、样品用量少以及标准曲线量程宽等优点。）、样品用量少以及标准曲线量程宽等优点。）、样品用量少以及标准曲线量程宽等优点。）、样品用量少以及标准曲线量程宽等优点。2 2、镧系元素有、镧系元素有、镧系元素有、镧系元素有1515种，属于三价元素。在紫外光的激发下可

22、发射离子荧光的元素有钐种，属于三价元素。在紫外光的激发下可发射离子荧光的元素有钐种，属于三价元素。在紫外光的激发下可发射离子荧光的元素有钐种，属于三价元素。在紫外光的激发下可发射离子荧光的元素有钐（Sm)Sm)，铕，铕，铕，铕(Eu)(Eu)，镝，镝，镝，镝(Dy)(Dy)，铽，铽，铽，铽(Tb)(Tb)。在。在。在。在TrFIATrFIA中中中中Eu3+Eu3+的应用最为广泛，而的应用最为广泛，而的应用最为广泛，而的应用最为广泛，而Sm3+Sm3+可作为可作为可作为可作为第二种选择以进行双标技术。第二种选择以进行双标技术。第二种选择以进行双标技术。第二种选择以进行双标技术。Eu3+Eu3+的

23、复合物以的复合物以的复合物以的复合物以310350nm310350nm激发光激发，在增强剂的激发光激发，在增强剂的激发光激发，在增强剂的激发光激发，在增强剂的作用下，其最高荧光发射峰可达作用下，其最高荧光发射峰可达作用下，其最高荧光发射峰可达作用下，其最高荧光发射峰可达590613nm590613nm，荧光衰变时间也长达，荧光衰变时间也长达，荧光衰变时间也长达，荧光衰变时间也长达501000us501000us；而蛋；而蛋；而蛋；而蛋白质的自然本底荧光约白质的自然本底荧光约白质的自然本底荧光约白质的自然本底荧光约110ns110ns，两者的差异如此之大，因此可利用时间迟缓装置延迟，两者的差异如

24、此之大，因此可利用时间迟缓装置延迟，两者的差异如此之大，因此可利用时间迟缓装置延迟，两者的差异如此之大，因此可利用时间迟缓装置延迟测量测量测量测量(cling)(cling)时间，待短半衰期的自然本底荧光完全衰变后测量时间，待短半衰期的自然本底荧光完全衰变后测量时间，待短半衰期的自然本底荧光完全衰变后测量时间，待短半衰期的自然本底荧光完全衰变后测量(cling)(cling)，所测得，所测得，所测得，所测得信号就完全是镧系元素的信号，从而消除了非特异干扰的影响，提高了测定的灵敏度。信号就完全是镧系元素的信号，从而消除了非特异干扰的影响，提高了测定的灵敏度。信号就完全是镧系元素的信号，从而消除了

25、非特异干扰的影响，提高了测定的灵敏度。信号就完全是镧系元素的信号，从而消除了非特异干扰的影响，提高了测定的灵敏度。第14页/共41页第十五页，共41页。3 3 3 3、标记物为具有独特、标记物为具有独特、标记物为具有独特、标记物为具有独特(dt)(dt)(dt)(dt)荧光特性的稀土金属荧光特性的稀土金属荧光特性的稀土金属荧光特性的稀土金属-镧系元素镧系元素镧系元素镧系元素n n镧系元素共有镧系元素共有1515种，应用在时间分辨荧光免疫技术中有四种种，应用在时间分辨荧光免疫技术中有四种n n钐（钐（Sm)Sm)，铕，铕(Eu)(Eu)，镝，镝(Dy)(Dy)，锝，锝(Te)(Te)n n镧系元

26、素荧光重要特点镧系元素荧光重要特点(tdin)(tdin)：n n极长的荧光衰退时间极长的荧光衰退时间n n铕：铕：730000ns730000ns，钐：钐：50000 ns50000 ns，一般荧光物质：，一般荧光物质：10ns10nsn n200nm200nm的的StokesStokes位移位移n n铕：激发光铕：激发光340nm340nm，发射光，发射光613nm613nmn n荧光素的荧光素的StokesStokes位移为位移为28nm28nmn n狭窄的发射峰狭窄的发射峰n n解离解离-增强技术可使其荧光性提高增强技术可使其荧光性提高100100万倍万倍第15页/共41页第十六页，共

27、41页。通过时间延迟，将特异性荧光(ynggung)与非特异性荧光(ynggung)分辨开来，使本底达到0利用镧系元素的荧光特点，激发后以固定时间检测荧光，在此时间之前(zhqin)，非特异性荧光已完全衰减为0第16页/共41页第十七页，共41页。通过波长分辨，将特异性荧光(ynggung)与非特异性荧光(ynggung)分辨开来，零本底的又一保障发射光与激发光波长间巨大的斯托克斯位移是镧系元素荧光的重要(zhngyo)特征之一第17页/共41页第十八页，共41页。新生儿疾病新生儿疾病新生儿疾病新生儿疾病(jbng)(jbng)筛查结果的定量和定性判断筛查结果的定量和定性判断筛查结果的定量和定

28、性判断筛查结果的定量和定性判断预计值和结果说明预计值和结果说明:1 1、阴阳、阴阳(yn yn)(yn yn)性的测定以临界值为基础。临界值用来区分推断阴性和推断阳性结性的测定以临界值为基础。临界值用来区分推断阴性和推断阳性结果。疑似区间用来反映测试的模糊范围。试验结果会随采血时婴儿的年龄和其他条果。疑似区间用来反映测试的模糊范围。试验结果会随采血时婴儿的年龄和其他条件而变化。请注意试剂盒给出的数值（临界值）只应作为参考，每个实验室都有必件而变化。请注意试剂盒给出的数值（临界值）只应作为参考，每个实验室都有必要建立自己的参考范围和临界值。要建立自己的参考范围和临界值。苯丙酮尿症的定量和定性苯丙

29、酮尿症的定量和定性(试剂盒提供试剂盒提供)预计值、结果 血液中的PKU mg/dl umol/L推断阴性（正常）2.13.0182第18页/共41页第十九页，共41页。促甲状腺激素的定量促甲状腺激素的定量(dngling)(dngling)和定性（和定性（*针对针对TSHTSH阴阳性而不是阴阳性而不是CH)CH)预计值、结果uU/mL全血uU/mL血清推断阴性（正常）91840第19页/共41页第二十页，共41页。2 2、结果、结果、结果、结果(ji gu)(ji gu)处理与反馈处理与反馈处理与反馈处理与反馈1.超出预设的截断值(切值）即视为初筛阳性，实验室应对原血片复查。2.对于两次实验结

30、果(ji gu)均为阳性的，应立即电话召回患儿重新采样或做确诊实验。第20页/共41页第二十一页，共41页。新生儿疾病筛查中心消毒隔离新生儿疾病筛查中心消毒隔离新生儿疾病筛查中心消毒隔离新生儿疾病筛查中心消毒隔离(gl)(gl)制度制度制度制度n n工作人员上班应衣帽整洁，不佩带耳环、戒指等首饰，工作人员上班应衣帽整洁，不佩带耳环、戒指等首饰，不画浓装，穿工作服不得进食堂、厕所不画浓装，穿工作服不得进食堂、厕所(c su)(c su)及走出单及走出单位大门。位大门。n n诊治、护理、实验操作前后均应洗手，无菌操作时要严诊治、护理、实验操作前后均应洗手，无菌操作时要严格遵守无菌操作规程。格遵守无

31、菌操作规程。n n工作用房应定时通风换气，空气消毒，坚持每天一次小工作用房应定时通风换气，空气消毒，坚持每天一次小扫除、每周一次大扫除的卫生制度。扫除、每周一次大扫除的卫生制度。n n病人使用的注射器、采血针等，严格实行一人一针一管病人使用的注射器、采血针等，严格实行一人一针一管一用一消毒制度，最好使用一次性用品。一用一消毒制度，最好使用一次性用品。n n使用消毒液时，应注意消毒液浓度和有效时间，严禁使使用消毒液时，应注意消毒液浓度和有效时间，严禁使用不合浓度要求或失效的消毒液。用不合浓度要求或失效的消毒液。第21页/共41页第二十二页，共41页。档案管理档案管理档案管理档案管理实验室检测结果

32、和资料保存完整，内容包括实验室检测结果和资料保存完整，内容包括(boku)(boku)：1 1、不符合要求退回的血片标本信息，应注明原因及日期、不符合要求退回的血片标本信息，应注明原因及日期2 2、每次检测结果的原始资料，包括、每次检测结果的原始资料，包括(boku)(boku)标准曲线、质控结果，筛查标准曲线、质控结果，筛查结果。结果。3 3、有关质量控制的资料，包括、有关质量控制的资料，包括(boku)(boku)室内质控图，实验室间质量评价室内质控图，实验室间质量评价结果反馈、失控原因、纠正方法等结果反馈、失控原因、纠正方法等若为电子版本，则需备份。若为电子版本，则需备份。第22页/共4

33、1页第二十三页，共41页。筛查实验室的职责(zhz)l筛查实验结果是发现阳性患儿的唯一指征，因此筛查实验室的质量(zhling)保障是整个质控环节的重中之重。l新生儿疾病筛查实验室需要检验样本的质量(zhling)、进行实验操作、分析 实验结果、保证结果准确以及对样本进行储存管理，工作环节众多且容易出现差错。l需要一套规范且实用的工作制度，来保证实验室的正常运作。第23页/共41页第二十四页，共41页。l l新生儿疾病筛查实验室检测技术规范新生儿疾病筛查实验室检测技术规范l l医疗机构临床实验室管理办法医疗机构临床实验室管理办法l l临床实验室定量测定室内临床实验室定量测定室内(sh ni)(

34、sh ni)质量控制工质量控制工作指南作指南l l医学实验室质量和能力认可准则医学实验室质量和能力认可准则 （ISO15189ISO15189）新生儿筛查实验室需遵循(zn xn)的法规第24页/共41页第二十五页，共41页。筛查实验(shyn)管理 实验(shyn)室设备、试剂l主要设备（加样器、时间分辨荧光分析仪、洗板仪）应有专人负责，建立使用、维护、维修等 SOP 程序文件及记录；l设备应标明使用状态（正常使用、维修、停用等）。l维修和维护的设备必须经校准、检定（验证）或检测满足要求后方能再次投入使用l维护中发现问题，实验室应检查和评估由于上述缺陷对以前(yqin)所进行的检测工作的影响

35、l加样器、温度计、时间分辨荧光分析仪等应有实验室内校准程序，并有明显的标识表明其校准状态。如有国家法定计量的（如天平、压力表、加样器等）应按规定送标准计量局检定。l打孔器应确保所打血斑圆整无毛边，如发现室内质控异常或发生毛边应及时更换。第25页/共41页第二十六页，共41页。筛查实验管理(gunl)实验室设备、试剂l应保存时间分辨荧光分析仪、加样器、洗板仪等设备的档案，档案内容应包括：l设备的名称l制造商名称、型号、序号或其它唯一性标识；l接收日期和启用日期;l目前放置地点；l接收时的状态(zhungti)（例如全新的、经改装的）；l仪器使用说明书的复印件；l校准和/或检定（验证）的日期和结果

36、以及下次校准和/或检定（验证）的日期；l迄今所进行的维护和今后维护计划的细节；损坏、故障、改装或修理的历史第26页/共41页第二十七页，共41页。筛查实验管理 实验室设备(shbi)、试剂试剂选择和使用：筛查实验室应当按照卫生部规定的临床检验项目和临床检验方法开展临床检验工作.不得使用卫生部公布的停止临床应用的临床检验项目和临床检验方法开展筛查工作。选择试剂需有国家SFDA产品注册证，应从有正式经营体外诊断试剂资格并有良好售后服务能力公司采购。筛查实验室所采用的试剂和设备应进行方法学评价后方能使用，指标包括分析性能（如分析灵敏度、测定准确性、精密度、稳定性、抗干扰性、检测范围等），临床性能（如

37、临床灵敏度、临床特异性、阳性预测值等），并有质量保证措施。试剂必须在经过匹配验证(ynzhng)的设备上使用。试剂标准量值具有可溯源性，以增加实验结果的可比性和一致性。应建立试剂请购、登记入库、领发、保管、清点盘存、报废等程序。做好试剂的质量管理和记录，建立登记本。每逢重大节假日前，进行大检查，清理过期试剂。第27页/共41页第二十八页，共41页。筛查实验(shyn)管理 实验(shyn)室设备、试剂临床性能(xngnng)评价：筛查阳性率=A+BA+B+C+DAA+C临床灵敏度（检出率）临床特异性阳性预测值（OAPR）DB+DAA+B=临床确诊临床确诊临床确诊临床确诊患儿患儿患儿患儿正常正常

38、正常正常试试试试剂剂剂剂检检检检测测测测阳性阳性阳性阳性AB阴性阴性阴性阴性CD第28页/共41页第二十九页，共41页。筛查实验管理(gunl)实验室设备、试剂分析性能评价：分析灵敏度：按试剂盒说明书操作规程进行测定，对最低标准品点重复测定30次，按均值2SD进行估算分析特异性：选取有干扰可能(knng)的因素（如TSH试剂盒应分别选用HCG、FSH、LH等）高浓度的样本进行评价准确性：选取具有溯源性标准物质或质控品重复测量20次以上，其均值应与靶值接近精密度：对近似截断值浓度样本按试剂盒说明书操作规程进行测定，同时应考虑批内和批间的差异稳定性试验：将试剂盒放置37温度下1周后，再评价其分析灵

39、敏度、分析特异性、准确性和精密度。检测范围：选择高浓度临床样本进行倍比稀释，检测结果不应出现HOOK效应。第29页/共41页第三十页，共41页。分析前质量分析前质量(zhling)(zhling)控制控制分析中质量分析中质量(zhling)(zhling)控制控制分析分析(fnx)(fnx)后质量控后质量控制制样本采集样本采集样本储运样本储运样本内部转接样本内部转接样本接收与验收样本接收与验收实验操作实验操作质控管理质控管理结果反馈结果反馈实验室质量控制 业务流程质控要点第30页/共41页第三十一页，共41页。分析前质量分析前质量分析前质量分析前质量(zhling)(zhling)(zhlin

40、g)(zhling)控制控制控制控制1.1.人员人员(rnyun)(rnyun)1.1.采血培训，信息填写培训采血培训，信息填写培训 2.2.人员人员(rnyun)(rnyun)的资质能力的资质能力 2.2.产前教育产前教育 1.1.父母教育材料的准备父母教育材料的准备/分发分发 2.2.专业人员专业人员(rnyun)(rnyun)教育材料的准备教育材料的准备/分发分发 3.3.筛查过程筛查过程 1.1.标本采集标本采集 2.2.标本储运标本储运 3.3.标本接收标本接收 、验收和转接签字、验收和转接签字4.4.实验室安全实验室安全 1.1.员工培训员工培训 2.2.安全计划安全计划 32新生

41、儿疾病(jbng)筛查血片采集技术规范第31页/共41页第三十二页，共41页。分析中质量分析中质量分析中质量分析中质量(zhling)(zhling)(zhling)(zhling)控制控制控制控制1.1.检测过程检测过程 1.1.程序文件程序文件 2.2.检测过程记录检测过程记录2.2.实验室仪器实验室仪器 1.1.仪器仪器 sop sop 2.2.仪器操作记录仪器操作记录 3.3.实验室用品实验室用品/试剂试剂 1.1.试剂的批号试剂的批号(p ho)(p ho)、效期、效期 、存储等、存储等并记录并记录 2.2.质量优劣质量优劣4.4.工作环境（温度、湿度、空调、飞尘、用工作环境（温度、

42、湿度、空调、飞尘、用电等）电等）33新生儿疾病(jbng)筛查实验室检测技术规范第32页/共41页第三十三页，共41页。实验(shyn)前准备样本(yngbn)打孔上机检测(jin c)实验操作实验数据与质控分析实验报告分析中质量控制流程管理第33页/共41页第三十四页，共41页。筛查实验管理 分析中质量(zhling)控制实验操作：严格按实验项目SOP进行操作对实验操作过程中的关键步骤进行详细记录，如配液量、孵育时间、温度等实验操作过程中发生的错误要及时上报质量负责人，由负责人决定下面(xi mian)步骤，并进行记录。实验过程中发生的不正常现象，如颜色异常、洗脱不下等问题要及时记录，为事后

43、分析实验结果提供参考上机检测：操作仪器时严格按SOP进行，发现异常及时上报检测完毕后做好实验结果文件的标记，以防数据处理错误第34页/共41页第三十五页，共41页。分析(fnx)中质量控制 数据及质控分析(fnx)质控目的：用质控品来监视和分析过程保证(bozhng)每个样本的测定结果的稳定性、可靠性质控品必须与筛查标本必须在同样条件进行检测，至少包括两个不同浓度水平（高值、低值）。质控手段：室间质评系统误差准确度室内质控随机误差精密度 室内质控是实验室质量控制工作的基础，提高常规测定工作的批间、批内标本检测结果的一致性。第35页/共41页第三十六页，共41页。分析中质量控制(kngzh)数据

44、及质控分析 质控图（control chart）对过程质量加以测定、记录，从而进行评估并监查过程是否处于控制状态的一种统计方法设计(shj)的图，图上有中心线、上控制界限和下控制界限，并有按时间顺序抽取的样本统计量值的描点序列。识别出意外的变异寻找原因解决问题实验数据的正态分布XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX2502602452402552352652652502602552451 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 20Run Number(or Time,Date)240235XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXX无法

45、预见无法预见难以预见难以预见第36页/共41页第三十七页，共41页。分析中质量控制(kngzh)数据及质控分析系统误差原因分析：样本采集及方法或试剂分配器（加样枪）不正确的调整实验区域不恰当温度/湿度水平试剂或校准物批号改变(gibin)使用、保存或运输过程中试剂变质使用、保存或运输过程中校准物变质使用、保存或运输过程中质控物变质控制物非正确处理（冰冻）在无霜冰箱中控制物不恰当的保存在实验系统中使用非试剂级别的水仪器滤光片轮脏或光源减弱仪器设备近来重新校准实验操作人员变换第37页/共41页第三十八页，共41页。分析后质量控制分析后质量控制分析后质量控制分析后质量控制 结果结果结果结果(ji g

46、u)(ji gu)(ji gu)(ji gu)处理与反馈处理与反馈处理与反馈处理与反馈1.超出预设的截断值即视为初筛阳性，实验室应对原血片复查(fch)。2.对于两次实验结果均为阳性的，应立即电话召回患儿重新采样或做确诊实验。新生儿疾病筛查随访(su fn)与管理技术规范新生儿疾病筛查治疗技术规范第38页/共41页第三十九页，共41页。卫生部临检中心卫生部临检中心卫生部临检中心卫生部临检中心-室间质量室间质量室间质量室间质量(zhling)(zhling)(zhling)(zhling)评价评价评价评价自自19981998年开始年开始(kish)(kish)目前，开展目前，开展Phe,TSHPhe,TSH项目项目一年三次一年三次 ，每次，每次5 5个不同浓度血片个不同浓度血片40第39页/共41页第四十页，共41页。谢谢(xi xie)！第40页/共41页第四十一页，共41页。