《检验技术》PPT课件.ppt

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1、脱落细胞检验基本技术脱落细胞检验基本技术 主要内容主要内容 一、标本采集一、标本采集二、涂片制作二、涂片制作三、标本固定三、标本固定 四、标本浓缩技术四、标本浓缩技术 五、染色技术五、染色技术六、涂片观察及报告方式六、涂片观察及报告方式七、细胞病理学检查的质量控制七、细胞病理学检查的质量控制返回返回一、标本采集一、标本采集标本采集的方法有标本采集的方法有 ：（一）脱落细胞标本（一）脱落细胞标本（二）刮擦细胞标本（二）刮擦细胞标本（三）穿刺细胞标本（三）穿刺细胞标本返回返回（一）脱落细胞标本（一）脱落细胞标本 细胞标本脱落自上皮表面：细胞标本脱落自上皮表面：咳出：如痰液。咳出：如痰液。排泄、导尿

2、或膀胱镜：如尿液。排泄、导尿或膀胱镜：如尿液。挤压：如乳头分泌挤压：如乳头分泌物等。物等。适用范围见表。适用范围见表。主要特点有：主要特点有：宜从临床病变器官获取标本。宜从临床病变器官获取标本。标本内常含大量各种不同来源、不同类型的细胞。标本内常含大量各种不同来源、不同类型的细胞。细胞成分保存较差。细胞成分保存较差。标本内可含有炎症细胞、巨噬标本内可含有炎症细胞、巨噬细胞、微生物和外源性污染物。细胞、微生物和外源性污染物。能进行多次采样。能进行多次采样。返回返回 脱落细胞适用范围脱落细胞适用范围靶器官靶器官操作方法操作方法主要用途主要用途次要用途次要用途女性生殖道女性生殖道吸取法吸取法获获得阴

3、道涂片，用得阴道涂片，用乙醇固定乙醇固定阴道、子阴道、子宫颈宫颈、子、子宫宫内膜内膜癌前病癌前病变变和癌的和癌的诊诊断。断。识别识别感染性因子，如感染性因子，如细细菌、病毒、霉菌或菌、病毒、霉菌或寄生虫寄生虫呼吸道呼吸道新新鲜鲜或采集于固定液中痰或采集于固定液中痰液，制成涂片。液，制成涂片。原位癌和肺癌的原位癌和肺癌的诊诊断断同上。同上。泌尿道泌尿道同上及离心涂片同上及离心涂片原位癌和高度癌原位癌和高度癌肿肿的的诊诊断断 识别识别病毒性感染和病毒性感染和药药物影响物影响积积 液液同上及同上及细细胞胞块块转转移性移性肿肿瘤和原瘤和原发发性性间间皮皮瘤瘤诊诊断断其其 他他（CSF）采集于固定液中采

4、集于固定液中标标本，本，细细胞离心法制片胞离心法制片炎症和炎症和转转移性移性肿肿瘤瘤鉴别诊鉴别诊断断识别识别感染性因子，如感染性因子，如病毒和霉菌病毒和霉菌返回返回（二）刮擦细胞标本（二）刮擦细胞标本 指通过物理作用刮擦取得的细胞标本，包括：指通过物理作用刮擦取得的细胞标本，包括：刷取：刷取：如气管、子宫颈。如气管、子宫颈。刮取：如乳头、皮肤、子宫颈。刮取：如乳头、皮肤、子宫颈。灌洗：灌洗：用等渗生理盐水溶液冲洗所得液体，如支气管。用等渗生理盐水溶液冲洗所得液体，如支气管。其适用范围其适用范围见表见表。主要特点有：。主要特点有：能直接从病变器官表面采样，如子宫颈和支气管。能直接从病变器官表面采

5、样，如子宫颈和支气管。使用纤维支气管镜能直接从器官内部获取标本。使用纤维支气管镜能直接从器官内部获取标本。细胞成分保存良好，但在结果解释时，不能采用与脱落细胞成分保存良好，但在结果解释时，不能采用与脱落细胞相同的标准。细胞相同的标准。能获得上皮细胞下的病变标本。能获得上皮细胞下的病变标本。返回返回刮擦细胞适用范围刮擦细胞适用范围 靶器官靶器官操作方法操作方法 主要用途主要用途次要用途次要用途子子宫颈宫颈、阴道、阴道、外阴、子外阴、子宫宫内膜内膜刷取或刮取法刷取或刮取法获获得得标标本。涂片立即用本。涂片立即用乙醇固定乙醇固定癌前病癌前病变变、早期癌、早期癌肿肿和癌和癌肿肿诊诊断和断和鉴别诊鉴别诊

6、断断其他器官或女性生殖道其其他器官或女性生殖道其他部位他部位肿肿瘤的瘤的诊诊断，断，识别识别感染性因子感染性因子腹水和冲洗液腹水和冲洗液液体液体标标本采集于固本采集于固定液中定液中卵巢、卵巢、输输卵管、子卵管、子宫宫内膜或内膜或宫颈宫颈癌的残存或复癌的残存或复发发的的诊诊断断呼吸道呼吸道支气管灌洗和支气支气管灌洗和支气管肺泡灌洗管肺泡灌洗癌前病癌前病变变、肺癌和感染、肺癌和感染鉴别鉴别诊诊断断识别识别感染性因子，慢性支感染性因子，慢性支气管、肺病气管、肺病变变的化学和免的化学和免疫学分析疫学分析泌尿道泌尿道尿液和膀胱冲洗液尿液和膀胱冲洗液（新（新鲜鲜或固定后）或固定后）原位癌和相关病原位癌和相

7、关病变鉴别诊变鉴别诊断断治治疗监测疗监测，流式，流式细细胞胞术术或或影像分析影像分析术术作作DNA分析分析食道食道刷取或球囊法制片刷取或球囊法制片癌前病癌前病变变、早期癌或治、早期癌或治疗疗后后复复发发的的鉴别诊鉴别诊断断胃胃刷取制片，罕用球刷取制片，罕用球囊法囊法癌前病癌前病变变、早期癌或治、早期癌或治疗疗后后复复发发的的鉴别诊鉴别诊断断结肠结肠刷取制片刷取制片溃疡溃疡性性结肠结肠炎的炎的监测监测胆道和胰腺胆道和胰腺吸取胰腺液体，刷吸取胰腺液体，刷取制片取制片胆道癌和胰腺癌胆道癌和胰腺癌诊诊断断返回返回（三）穿刺细胞标本（三）穿刺细胞标本 放射影像技术有助于对小而深、移动且难以触摸的病变部位

8、放射影像技术有助于对小而深、移动且难以触摸的病变部位定位。通过穿刺吸取或非吸取法，从充满液体的器官或实体性定位。通过穿刺吸取或非吸取法，从充满液体的器官或实体性器官中获得细胞标本，（器官中获得细胞标本，（图图）主要特点有：主要特点有：方法简捷、费用低、创伤小、并发症少、禁忌证少，经皮方法简捷、费用低、创伤小、并发症少、禁忌证少，经皮肤穿刺术无需麻醉，易为病人接受，尤适用于门诊。肤穿刺术无需麻醉，易为病人接受，尤适用于门诊。局限性：局限性：对结缔组织、透明变性、血管性病变、大量坏死物、对结缔组织、透明变性、血管性病变、大量坏死物、囊性变或出血性病变等，可能采样不足。囊性变或出血性病变等，可能采样

9、不足。返回返回穿刺细胞标本图穿刺细胞标本图返回返回二、涂片制作二、涂片制作1.推片法（推片法（图图）适用于较稀薄的液体标本，如尿液、浆膜腔积液。适用于较稀薄的液体标本，如尿液、浆膜腔积液。低速离心或自然沉淀后，取沉淀物推片。低速离心或自然沉淀后，取沉淀物推片。2.涂抹法涂抹法 适用于较粘稠的标本，如食管和宫颈粘液及痰液。适用于较粘稠的标本，如食管和宫颈粘液及痰液。用竹签将标本顺向涂抹，不宜重复。用竹签将标本顺向涂抹，不宜重复。3.喷射法喷射法 用配有细针头的注射器将标本均匀地喷射在玻片用配有细针头的注射器将标本均匀地喷射在玻片上。适用于各种细针吸取的液体标本。上。适用于各种细针吸取的液体标本。

10、4.印片法印片法 将小块病变组织轻轻在玻片上印按一下后拿开此将小块病变组织轻轻在玻片上印按一下后拿开此法为活体组织检查的辅助方法。法为活体组织检查的辅助方法。返回返回推片法图推片法图返回返回三、标本固定三、标本固定 固定的目的：固定的目的：维自然状态，防自溶和腐败；能沉淀和凝固维自然状态，防自溶和腐败；能沉淀和凝固蛋白质并能破坏细胞内的溶酶体蛋白质并能破坏细胞内的溶酶体.1.常用的固定剂常用的固定剂 乙醚乙醇固定液乙醚乙醇固定液：渗透性强，固定效果好，适用于：渗透性强，固定效果好，适用于H-E染色和巴氏染色。染色和巴氏染色。95%95%的乙醇固定液的乙醇固定液：适用于大规模防癌普查。制备简单，

11、但：适用于大规模防癌普查。制备简单，但渗透能力差。渗透能力差。2.固定的方法固定的方法3.固定时间固定时间返回返回2.2.固定的方法固定的方法带湿固定：带湿固定：适用粘稠的标本适用粘稠的标本.如痰片、宫颈刮如痰片、宫颈刮片及食管刷片等。特点为结构清晰，染色鲜艳。片及食管刷片等。特点为结构清晰，染色鲜艳。干燥固定：干燥固定：适用于较稀薄的标本，如尿液。适用于较稀薄的标本，如尿液。返回返回3.3.固定时间固定时间 一般为一般为1530min。粘稠标本如痰液、宫颈。粘稠标本如痰液、宫颈刷片等，固定时间要适当延长；稀薄标本，如尿刷片等，固定时间要适当延长；稀薄标本，如尿液等，固定时间可酌情缩短。液等，

12、固定时间可酌情缩短。返回返回四、标本浓缩技术四、标本浓缩技术 1离心法和细胞离心法离心法和细胞离心法 离心法适用于大量液体标本，如浆液性积离心法适用于大量液体标本，如浆液性积液、尿液或生理盐水灌洗液等。细胞离心法适用于少量液体、中液、尿液或生理盐水灌洗液等。细胞离心法适用于少量液体、中等量细胞的标本，是将细胞直接离心到载玻片上，等量细胞的标本，是将细胞直接离心到载玻片上，2滤膜过滤法（滤膜过滤法（membrane filtration）适用于大量液体、少量细适用于大量液体、少量细胞的标本，胞的标本，3细胞块法细胞块法 适用于大多数悬液标本，是将标本中细胞聚集成团，适用于大多数悬液标本，是将标本

13、中细胞聚集成团，形成与传统组织块类似的细胞块，可制作细胞块切片，形成与传统组织块类似的细胞块，可制作细胞块切片，4液基细胞学（液基细胞学（liquid based cytology，LBC）技术技术 .返回返回4 4液基细胞学（液基细胞学（LBCLBC）技术）技术 是将刷取或灌洗法采集的标本，放在特殊的运送液或保是将刷取或灌洗法采集的标本，放在特殊的运送液或保存液中，制成细胞悬液，经过进一步处理，除去血液、蛋白存液中，制成细胞悬液，经过进一步处理，除去血液、蛋白和炎性渗出物，制成分布均匀的薄片。和炎性渗出物，制成分布均匀的薄片。其优点是：其优点是：涂片上细胞分布均匀、分布范围小、背景清晰。涂片

14、上细胞分布均匀、分布范围小、背景清晰。标本筛查简便、快速。标本筛查简便、快速。能提高诊断灵敏度和特异度。能提高诊断灵敏度和特异度。能显著降低标本的不满意率。能显著降低标本的不满意率。能用于原位杂交和免疫细胞化学染色。能用于原位杂交和免疫细胞化学染色。LBC技术是对传技术是对传统标本处理方法的有效补充，统标本处理方法的有效补充，但对某些非妇科标本，因但对某些非妇科标本，因LBC涂片缺乏背景成分，会影响涂片缺乏背景成分，会影响细胞学诊断。细胞学诊断。返回返回五、染色技术五、染色技术1.1.巴氏染色巴氏染色 多色性，色彩鲜艳多样；透明性、细胞核的结多色性，色彩鲜艳多样；透明性、细胞核的结构清晰，细胞

15、质的颗粒分明。评价：操作繁琐，染色效果好。构清晰，细胞质的颗粒分明。评价：操作繁琐，染色效果好。2.苏木精苏木精-伊红染色（伊红染色（H-E染色）染色）涂片染色的透明性好涂片染色的透明性好，细胞核和细胞质颜色分明，但，细胞核和细胞质颜色分明，但不适合观察阴道涂片对雌激素水平测定，优点是操作简单，不适合观察阴道涂片对雌激素水平测定，优点是操作简单，试剂易配制试剂易配制3.瑞瑞吉氏染色吉氏染色 适合血片、淋巴穿刺液、胸腹水涂片适合血片、淋巴穿刺液、胸腹水涂片 返回返回六、涂片观察及报告方式六、涂片观察及报告方式（一）涂片观察方法（一）涂片观察方法 1.核对涂片编号，了解送检申请单上资料。核对涂片编

16、号，了解送检申请单上资料。2.在低倍镜下观察。在低倍镜下观察。3.将玻片自左到右、自上到下按顺序移动，全将玻片自左到右、自上到下按顺序移动，全面、仔细地观察整个涂片的每一部分。如发现异常面、仔细地观察整个涂片的每一部分。如发现异常细胞，应作标记，以利复查。细胞，应作标记，以利复查。（二）报告方式（二）报告方式返回返回（二）报告方式（二）报告方式 1.直接法直接法:特异性细胞学特征特异性细胞学特征 2.分级法分级法 三级分类法三级分类法 四级分类法四级分类法 五级分类法五级分类法返回返回三级分类法三级分类法级级 阴性。阴性。正常细胞或一般炎症变性细胞。正常细胞或一般炎症变性细胞。级级 可疑。可疑

17、。核异质细胞。核异质细胞。级级 阳性。阳性。典型的癌细胞。典型的癌细胞。返回返回四级分类法四级分类法级级 阴性。阴性。级级 核异质。核异质。少量轻度核异质细胞，炎症变性所致。少量轻度核异质细胞，炎症变性所致。级级 可疑。可疑。重度核异质细胞，基本符合癌细胞标准。但重度核异质细胞，基本符合癌细胞标准。但由于数量过少或形态不典型，不能排除癌前病变的可能性。由于数量过少或形态不典型，不能排除癌前病变的可能性。级级 阳性。涂片中可见到典型的癌细胞。阳性。涂片中可见到典型的癌细胞。返回返回五级分类法五级分类法级级 正常细胞和一般炎症变性细胞正常细胞和一般炎症变性细胞级级 有少量轻度核异质细胞，但无恶性倾向。有少量轻度核异质细胞，但无恶性倾向。级级 有较多的重度核异质细胞，但不能肯定为恶性。有较多的重度核异质细胞，但不能肯定为恶性。级级 有大量重度核异质细胞，提示为恶性肿瘤，但缺乏有大量重度核异质细胞，提示为恶性肿瘤，但缺乏特异性癌细胞。特异性癌细胞。级级 可见典型的癌细胞。可见典型的癌细胞。返回返回七、脱落细胞检验应用评价o优点：1.安全简便 2.准确快速 3.应用广泛o局限性：1.有一定的误诊率 2.难定位 3.分型困难八.脱落细胞质量控制标本采集 制片过程 阅片诊断 理论学习 复查会诊 定期随访